Определение свободных карбоксильных групп

Гидролиз белков ЗМ /г-толуолсульфокислотой или АМ метан-сульфокислотой [7,8], содержащей 0,2% триптамина, в вакууме при 110°С, в течение 3 суток с хорощим выходом приводит к аминокислотам, включая триптофан, однако углеводы могут мешать. Триптофан можно определять также после щелочного гидролиза, но при этом разрушаются полностью аргинин, цист(е)ин, серин и треонин. Общее содержание амидов, обусловленное наличием аспарагина и глутамина, можно определить после гидролиза 10 М НС1 при 37°С в течение 10 суток и последующего анализа на аммиак с помощью микродиффузионной техники. Раздельное определение аспарагина и глутамина можно провести с помощью предварительной этерификации (метанол-уксусный ангидрид) свободных карбоксильных групп, последующего восстановления (борогидрид лития) образовавшихся сложноэфирных групп и определения аспарагиновой и глутаминовой кислоты после кислотного гидролиза соответственно в виде v-гидрокси-а-аминомасляной кислоты и б-гидрокси-а-аминовалериановой кислоты. Содержание аспарагина и глутамина получают путем вычитания этих величин из содержания аспарагиновой и глутаминовой кислот после полного гидролиза немодифицированного белка. Полный ферментативный гидролиз белков без деструкции аминокислот можно осуществить, используя смешанные конъюгаты Сефарозы с трипсином, химотрипсином, пролидазой и аминопептидазой М [9] [c.260]

Определение свободных карбоксильных групп [28] [c.239]

Важнейшим результатом этих исследований является установление, что каждый протеолитический фермент является специфичным для гидролиза пептидной связи определенной аминокислоты. Так, пепсин гидролизует исключительно пептидную связь аминного конца остатка фенилаланина или тирозина. Для этого необходимо также наличие свободной карбоксильной группы в боковой цепи соседней аминокислоты или 8Н-группы остатка цистеина. Действие пепсина ингибируется соседней МНа-группой. Так, пенсии гидролизует, например, карбобензилокси-Ъ-глутамил- Ь-тирозин [c.427]

Определение концевых групп заключается в идентификации аминокислотных остатков на концах пептидной цепи. Применяемая методика основана на том, что остатки на концах цепи отличаются по свойствам от всех остальных звеньев и друг от друга один (N-концевой остаток) содержит свободную аминогруппу, а другой (С-концевой остаток) — свободную карбоксильную группу в а-положении к пептидной связи. [c.1048]

Технические сложные эфиры могут содержать некоторое количество свободных кислот. Поэтому для правильного определения содержания сложного эфира взятую навеску вещества предварительно нейтрализуют щелочью, а затем определяют содержание сложного эфира, пользуясь свойствами функциональной, т. е. эфирной группы. Если в техническом продукте требуется точно определить и содержание сложного эфира, и содержание свободной кислоты, то титрование ведут ступенчато. Сначала оттитровывают свободную кислоту, а затем проводят реакцию омыления. При наличии в анализируемом веществе, кроме эфирной группы, еще карбоксильной (например, в ацетилсалициловой кислоте) предварительно нейтрализуют свободную карбоксильную группу, а с ней одновременно и присутствующую [c.250]

Свободные карбоксильные группы белков труднее поддаются определению, чем свободные аминогруппы. Один из приемов, предложенных для этой цели, заключается в превращении [c.36]

Синтез пептидов включает три главные стадии. На первой стадии химически блокируются все те аминогруппы и карбоксильные группы, которые не должны участвовать в реакции. Вторая стадия состоит в связывании свободных карбоксильных групп со свободными аминогруппами, т. е. в образовании пептидной связи. На третьей стадии осуш,ествляется удаление защитных групп. Если в реакции коиденсации участвуют такие аминокислоты, как цистеин, лизин и аспарагиновая кислота, которые содержат реакционноспособные боковые цени, то эти боковые цепи также нуждаются в химической защите. Блокирующие агенты, применяемые при синтезе пептидов, должны удовлетворять определенным требованиям 1) введение [c.51]

Как видно из формулы строения аскорбиновой кислоты, она является ненасыщенным соединением и не содержит свободной карбоксильной группы. Кислый характер этого соединения обусловлен наличием двух, способных к диссоциации с отщеплением водородных ионов енольных групп. На этой реакции основан метод определения аскорбиновой кислоты титрованием при помощи йода (который превращается при этом в Ш). Водородные атомы енольных групп весьма подвижны, что обусловливает кислотные свойства соединения при титровании аскорбиновая кислота ведет себя как одноосновная кислота, но в сильнощелочных растворах она образует трехзамещенную соль [c.652]

Определение числа омыления и эфирного числа. Число омыления, или коэффициент омыления, характеризуется числом миллиграммов едкого кали, необходимым для связывания свободных карбоксильных групп и омыления сложноэфирных групп, содержащихся в 1 г исследуемого вещества. Эфирное число — это количество мг КОН, необходимое для омыления 1 г сложного эфира. В сложных эфирах, не содержащих свободных карбоксильных групп, число омыления совпадает с эфирным числом. [c.88]

Все приведенные методы определения содержания карбоксильных групп могут быть использованы для определения только свободных карбоксильных групп. Однако часть карбоксильных групп в препарате окисленной целлюлозы может быть связана в результате взаимодействия с гидроксильными группами в виде лактонов. Лактоны могут образовываться при взаимодействии СООН-групп, находящихся как у Се, так и у С2 и Сз элементарного звена макромолекулы, с ОН-группами этого же элементарного звена. Скорость образования лактонов, например при сушке в слабощелочной среде окисленной целлюлозы, содержащей карбоксильные группы у Сб или у Сг и Сз, различна так же как и скорость их омыления. Лактонные группировки, образовавшиеся при наличии [c.229]

Для энзиматического определения С-концевых групп применяют карбоксипептидазу. Карбоксипептидаза расщепляет в белках только те пептидные связи, которые смежны со свободной -карбоксильной группой. Следовательно, при действии фермента на белок первой от полипептидной цепи отщепляется С-конце-вая аминокислота, затем начинает отщепляться следующая за ней и т. д. Таким образом, карбоксипептидаза осуществляет постепенное расщепление белка с С-конца. [c.76]

Определение по количеству углекислого газа, выделяющегося при нагревании с разбавленными кислотами. Все приведенные методы определения содержания карбоксильных групп могут быть использованы для определения только свободных карбоксильных групп. Однако, как уже указывалось (стр. 287), часть карбоксильных групп в препарате окисленной целлюлозы может быть связана, в результате взаимодействия с гидроксильными группами, в виде сложных эфиров или лактонов. [c.307]

Для того чтобы определить и связанные карбоксильные группы, необходимо предварительно разрушить эфирные связи путем непродолжительного кипячения с 1%-ным раствором кислоты. При определении содержания карбоксильных групп по выделению углекислого газа при кипячении с кислотами подобная обработка является излишней. По этому методу определяется общее количество карбоксильных групп в положении 6, как свободных, так и связанных в виде лактонов или эфиров. [c.308]

Определение числа омыления. Число омыления показывает наличие в 1 г вещества как свободных карбоксильных групп, так и карбоксильных групп, связанных сложноэфирными связями, и определяется в мг КОН. [c.174]

Как видно из приведенных данных, Мифуне и Исида не установили определенной зависимости между те.мпературой плавления полимера и содержанием в нем свободных карбоксильных групп. Таким образом, причиной снижения температуры плавления с наибольшей достоверностью можно считать конденсацию моноэтиленгликоля до диэтиленгликоля, а не термодеструктивные процессы. [c.85]

В полиэфирных смолах карбоксильные группы могут быть онцевыми и могут принадлежать свободным кислотам и оста-очным ангидридам карбоновых кислот. Вследствие этого тит-ювание спиртового или опиртобензольного раствора смолы пиртовым раствором щелочи приводит к неполному определе- ию кислотных групп, так как свободные ангидриды образуют ислые эфиры и определяются только наполовину. Для полно-о определения всех карбоксильных групп применяют водный аствор гидроксида калия вместо спиртового. [c.251]

Методы, основанные на декарбоксилировании. При определении содержания карбоксильных групп по количеству двуокиси углерода, выделяющейся при декарбоксилировании окисленной целлюлозы, находят общее количество карбоксильных групп у Се, как свободных, так и связанных в виде лактонов или эфиров. Метод основан на том, что глюкуроновая кислота, образующаяся при гидролизе препаратов окисленной целлюлозы, содержащих СООН-группы у Сб, кипящим 12%-ным раствором НС1, декарбоксили-руется в ксилозу, при дегидратации которой образуется фурфурол, количественно определяемый бромид-броматным методом [c.230]

Помимо заместителей — углеводородных радикалов — ароматизированные многокольчатые соединения, получаемые деструкцией ОМУ, содержат и функциональные группы. Из последних наиболее устойчива кислая гидроксидная группа, вследствие чего низшие и высшие фенолы всегда присутствуют в продуктах пиролиза или гидрогенолиза углей [1, 2, 8]. Карбоксильные, сложноэфирные, карбонильные, нефенольные гидроксидные группы гораздо менее стабильны, и поэтому более достоверные данные дает их прямое определение в ОМУ как химическими, так и спектральными методами. Методы их определения существенно усовершенствованы. Так, для определения гидроксидных групп в угле применяются прямое титрование, титрование с предварительной промывкой кислотой, ацетилирование, обработка грег-бутиламмонием и метилиоди-дом, а также спектральные методы. Их совместное применение позволяет разграничить [18] свободные карбоксильные группы, карбоксильные группы, замещенные металлами, гидроксидные группы нефенольного характера и нетитруемые (большей частью экранированные), причем полученные данные хорошо корреспондируют с ИК-спектрами. [c.88]

Полиэфиры, содержащие свободные карбоксильные группы, могут давать соли металлов, содержащие свободные концевые гидроксильные группы, реагировать с диизоцианатами, образуя полиуретаны, взаимодействовать с уксусным ангидридом [6, 381] и т. п. Многие из этих реакций протекают количественно и могут быть использованы для определения молекулярного веса полиэфира. Оригинальный метод определения молекулярного веса полиэфиров по концевым группам с применением меченых атомов был предложен Гофманом и Хобергом [446]. Эти исследователи использовали способность концевых гидроксиль ных групп полиэфиров количественно вступать в реакцию с /г-СНзСбН45 Ю2С1. Батцер и Ланг показали, что взаимодействие полиэфиров щавелевой кислоты с аммиаком, этиламином, анилином в спирте на холоду сопровождается образованием производных полиэфиров щавелевой кислоты — оксамида, К,М -диэтилоксамида и -дифенилоксамида [90]. [c.26]

Относительно легко удается установить, каким аминокислотам принадлежит свободная аминогруппа (Н-концевые аминокислоты) и каким — свободная карбоксильная группа (С-концевые аминокислоты). К-концевая аминокислота в белке, взаимодействуя при определенных условиях с динитрофторбензолом, дает довольно прочное соединение, которое не разрушается при гидролизе белка и выделяется в виде динитрофе-нилпроизводного этой аминокислоты, в то время как остальные аминокислоты выделяются при гидролизе в свободном виде (Сангер). Если при обработке динитрофторбензолом образуются динитрофеннлпроизводные нескольких аминокислот, то отсюда следует, что в данном белке имеется несколько различных полипептидных цепей, содержащих различные концевые аминокислоты. [c.40]

Из большого числа разнообразных протеолитических ферментов для определения стерической однородности пептидов чаще всего применяют лейцинаминопептидазу, карбоксипепти-дазы А и В, трипсин и химотрипсин. Лейцинаминопептидаза обладает способностью последовательно отщеплять остатки N-концевых аминокислот, причем для действия этого фермента наличие свободной карбоксильной группы не является обязательным. Карбоксипептидаза А, напротив, элиминирует амино- [c.402]

Студебекер [63] использовал для определения активного водорода метод Церевитинова. Для многих саж было получено очень хорошее соответствие с разностью между первой и второй точками перегиба на кривых титрования, отнесенной к фенольным гидроксильным группам (см. стр. 198). Это, по-видимому, странно, поскольку более сильные кислотные группы, оттитрованные до первой точки перегиба, вероятнее всего, представляют свободные карбоксильные группы кроме того, видимо, в этой области возможно и наличие лактонов. В свободной карбоксильной группе, как и в лактоне типа флуоресцеина, должен был бы присутствовать активный водород. Последний не должен содержаться в ангидриде карбоновой кислоты или в нормальном лактоне. Существование нормальных лактонов в окисленных углях было постулировано Гартеном и др. [44]. Однако проба Церевитинова оказалась практически неприменимой к пористым углям типа сахарного из-за очень медленного и неполного выделения метана. [c.210]

Подобные же затруднения возникают при определении числа свободных концевых карбоксильных групп. В этих случаях также необходимо отличать концевые с -карбоксильные группы от р-кар-боксильных групп аспарагиновой кислоты и г-карбоксильных групп глутаминовой кислоты (группы Б и Г в формуле на стр. 122). Значительная часть карбоксильных групп последних двух типов входит в состав амидных группировок СОЫНг (см. табл. 1). Остальная часть их, однако, находится в виде свободных карбоксильных групп и электрометрически титруется вместе с концевыми -карбоксильными группами. Попытки определить число концевых -карбоксильных групп путем вьиитания из общего числа карбоксильных групп, определяемого электрометрически, числа р- и у-карбоксильных групп, определенных отдельно, наталкиваются на затруднения. Эти затруднения связаны с тем, что число концевых -карбоксильных групп очень невелико по сравнению с общим числом карбоксильных групп поэтому даже небольшая ошибка в определении дикарбоновых кислот может повести к большим неточностям при установлении числа концевых -карбоксильных групп. Из сказанного ясно, что важный вопрос о том, является ли пептидная цепь разветвленной или нет, не может быть разрешен окончательно при помощи указанных прямых методов определения числа концевых групп. В связи с этим был предложен другой путь, а именно метка концевых групп при помощи каких-либо производных аминокислот и определение последних после гидролиза белка. Наибольшее затруд- [c.123]

Степень имидирования полиамидокислот оценивали [292] из данных по концентрации свободных карбоксильных групп, определенной титрованием, а также по количеству воды, выделяющейся при тепловой обработке при 300 °С. [c.505]

Ацетилирование-свободных аминогрупп инсулина не влияет на биологическую активность ацетилирование фенольной гидроксильной группы тирозиновых остатков приводит к обратимому снижению активности [757, 1907]. Этерификация свободных карбоксильных групп инсулина сопровождается инактивацией гормона, но после гидролиза сложноэфирных групп активность восстанавливается. В определенных условиях с формальдегидом реагируют только амино- и гуанидиногруппы инсулина при такой модификации молекулы инсулина гормональная активность сохраняется. Иодирование тирозиновых остатков приводит к обратимой инактивации [757, 1907]. [c.472]

Глицеридное строение жиров определяют частично при окислении двойных связей с последующим разделением методами жидкостной или газо-жидкостной хроматографии [43]. Жиры окисляют реактивом, состоящим из смеси перманганата с перйодатом, а продукты разделяют хроматографически на фракции, не содержащие свободных карбоксильных групп, содержащие одну свободную карбоксильную группу и содержащие две-три свободные карбоксильные группы, на 90-процентном этаноле на силикагеле. Полученные фракции элюируют скеллисольвом В, насыщенным 90-процентным этанолом, а затем диэтиловым эфиром. Для определения природы моно-и дикарбоновых кислот в различных фракциях проводят переэтерификацию-окисленных глицеридов смесью метанола с НС1 затем образовавшиеся мети-ловые эфиры разделяют методом ГЖХ на колонке размером 2400 X 4,7 мм с поли-(1,4-бутандиолсукцинатом), нанесенным на огнеупорный кирпич С-22 (60/80 меш), промытый кислотой (1 6), Температура колонки составляла 205°, а скорость потока гелия, измеренная на выходе,—40 мл мин. [c.572]

Чибнэлл и Рис [85] в предварительном сообщении описали новый метод определения амидных и свободных карбоксильных групп в белках. Инсулин, растворенный в 0,03 н. растворе НС1 в 85%-ном (по объему) этиловом спирте, обрабатывают на холоду избытком раствора диазометана в эфире. При этом этери-фицируются свободные у-карбоксильные группы остатков [c.298]

Определение молекулярного веса криоскопическим методом показало, что молекулярный вес окрашенного вещества (Б) не отличается от молекулярного веса, предполагаемого для бесцветного соединения (А), содержащего свободную альдегидную группу. Следовательно, при образовании окрашенного соединения не происходит полимеризации. Вместе с исчезновением альдегидной группы у вещества (А) образуется новое окрашенное вещество (Б). Поскольку окрашенное соединение (Б) легко образовывало медную соль при кипячении с углекислой медью, наличие свободной карбоксильной группы у вещества можно считать доказанным. С другой стороны, прямое титрование щелочью не удавалось, вещество обладало буферными свойствами, что исключает простое окисление альдегидной группы с образованием дикарбоновой кислоты. Кроме того, при подобном течении реакции оставалось бы необъяснимым происхождение окраски. Повидимому, в данном случае наиболее вероятно образование циклической группировки по метиленовой группе [c.1549]

При добавлении альдегидов гидразиды кислот выпадают в осадок, а оставшиеся аминокислоты могут быть идентифицированы. Очень ценным для определения С-кон-цевых групп является действие фермента карбоксипептидазы, специфически расщм-ляющей пептидную связь, наиболее близко расположенную к свободному карЙо-ксилу. Многократно действуя карбоксипептидазой, можно определить последовательность расположения ряда аминокислот, начиная с конца цепи со свободной карбоксильной группой [c.307]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология