Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Количественные определения, денситометрия

    Применение методов денситометрии, флуориметрии и спектро-фотометрии для количественного определения компонентов смесей различных органических соединений, разделенных тонкослойной хроматографией, хорошо освещено в обзорных работах [252, 263, 272, 276, 278]. [c.158]

    Количественные определения, денситометрия [c.37]

    Методика позволяет разделить белки саркоплазмы на пять фракций. Количественное определение белковых фракций проводят с помощью денситометра и последующего определения площади каждого пика планиметром (стр. 100). Количество белка каждой фракции выражают в процентах по отношению к общей площади (сумме площадей) всех пиков кривой и рассчитывают по уравнению [c.128]


    Аппаратура для бумажной хроматографии. Основными элементами аппаратуры для БХ являются хроматографические камеры или сосуды, стойки с лотками, пипетки для нанесения проб, приспособления для сушки и элюирования, пульверизаторы, лампы для облучения хроматограмм, приспособления для измерения / /, планиметры и денситометры для количественных определений. [c.353]

    После завершения разделения смеси полоски бумаги (фореграммы) проявляют в УФ-излучении или с помощью соответствующего реактива и зоны идентифицируют путем сравнения с форе-граммами свидетелей (чистых веществ). Количественное определение компонентов смеси проводят с помощью самопишущего денситометра или путем экстрагирования веществ из вырезанных зон с последующим спектрофотометрированием раствора (см. [c.231]

    В институте геохимии и аналитической химии им. В. И. Вернадского АН СССР проведен микрохимический анализ магнитной фракции космической пыли (масса 3— 10 мкг) с удачным использованием метода тонкослойной хроматографии для разделения компонентов и денситометрии для их количественного определения. Сорбентом служил очищенный надлежащим образом силикагель марки КСК в качестве подвижного растворителя использовали перегнанный ацетон или смесь 99 мл ацетона и 1 лсл 3 н. НС1. Средняя относительная ошибка при надежности 0,95 составляет для железа +22, никеля +15, кобальта +9%. Авторы этого исследования [1451 считают, что простота метода, быстрота выполнения, четкость разделения дают возможность рекомендовать его для проведения серийных анализов при изучении состава космической пыли. [c.187]

    Количественное определение аминокислот путем измерения интенсивности окраски пятен на хроматограмме денситометром. После определения концентрации аминокислоты визуальным методом проводят ее определение путем измерения интенсивности окраски пятен, полученных при хроматографировании растворов известных концентраций и растворов, концентрации которых неизвестны, с помощью денситометра (стр. 99). Из хроматограммы вырезают полоску с пятнами определенной аминокислоты и проводят измерение интенсивности ее окраски по всей длине. С помощью планиметра определяют площадь пиков для известных и неизвестных концентраций выбранной аминокислоты и строят калибровочный график, по которому определяют неизвестную концентрацию иС следуемой аминокислоты. [c.117]

    Количественное определение белков при электрофорезе в агаре. Процентное содержание полученных фракций можно определить фотоэлектрическим методом. Отделенная от стекла и высушенная агаровая пластинка достаточно прозрачна, поэтому ее без дополнительной обработки помещают между стеклянными пластинками денситометра и проводят измерение оптической плотности, как описано на стр. 63. [c.77]


    Особенно подробно изложены в книге вопросы теории и техники двух основных методов количественного определения веществ в зонах метода, предусматривающего элюирование, и методов прямого (без > отделения сорбента-носителя) определения веществ в зонах хроматограмм. Последние методы более чувствительны, менее трудоемки и поэтому весьма перспективны при анализе микро- и субмикроколичеств смесей. Рассмотрены три главных способа количественного определения веществ непосредственно на хроматограммах визуальное сравнение интенсивности окраски зон, измерение площади пятна и денситометрия. [c.6]

    Количественная хроматография на бумаге и в тонком слое весьма перспективна ввиду ее простоты и в принципе должна быть точным методом анализа, поскольку в идентичных условиях количество вещества в зоне всегда будет определяться количеством вещества, нанесенным в точку на линии старта. Кроме того, распределение в зоне должно быть постоянным, для того чтобы метод конечного измерения (по площади пятна, по показаниям денситометра или путем измерения оптической плотности после элюирования) обеспечивал количественное определение первоначально нанесенного вещества. Однако на практике исключительно трудно создать идентичные условия развития каждой хроматограммы. Цель настоящей работы — обсуждение факторов, вызывающих изменения в распределении вещества в зонах, и способов их преодоления. [c.9]

    Следует упомянуть и о четвертом способе количественного определения веществ в зонах, осуществляемом путем визуального сравнения интенсивности окраски зон с интенсивностью окраски зон на стандартных хроматограммах. До некоторой степени это приближенный метод, однако при оптимальных условиях, но-видимому, можно добиться точности 25%. Визуальную денситометрию можно использовать в со-метании с методом, основанным на измерении площади зоны. [c.42]

    Для определения разделенных соединений непосредственно на пластинке ее опрыскивают реагентом (см. раздел 10.3), который через некоторое время образует с определяемым соединением окрашенные или флуоресцирующие вещества, концентрации которых количественно определяют денситометром. Этот метод включает сканирование пятна (хроматограммы) в проходящем или отраженном свете, который затем попадает в фотоумножитель. Разность в интенсивности падающего и проходящего или отраженного света в виде электрического сигнала регистрируется на графике. Высота пика является мерой интенсивности пятна. Градуировочный график строят в координатах масса вещества — площадь пика, причем точность измерения площади пятна денситометром не менее 2—5% [2]. [c.195]

    Количественное определение анилина в воздухе производственных помещений методом тех с использованием денситометрии [ ] [c.291]

    Определение содержания фосфатидилхолина в десяти образцах фосфолипидов семян сои дало среднее значение 44,64 1,34%. Следовательно, получение результатов с таким небольшим разбросом дает возможность применять денситометрию при количественном определении веществ методом тонкослойной хроматографии. [c.41]

    Хроматографические методы анализа применяют в основном к экстрактам полимеров. Для разделения экстрактов широко используют все виды жидкостной хроматографии. Доминирующим хроматографическим методом определения стабилизаторов до настоящего времени остается тонкослойная хроматография (ТСХ), благодаря малой продолжительности анализа, высокой чувствительности метода, несложности оборудования и возможности одновременного анализа многих компонентов, которые могут быть разделены в одном хроматографическом процессе. Распространению метода способствовал промышленный выпуск готовых пластинок. Хотя основную ценность этот метод имеет для идентификации добавок, он позволяет получать и количественные результаты, причем не с меньшей точностью, чем другие хроматографические методы. Количественное определение можно проводить после снятия пятен с пластинки и экстракции их полярным растворителем или непосредственно на пластинке с использованием сканирующих денситометров. [c.245]

    Один из наиболе удобных и чувствительных методов количественного определения веществ в зонах хроматограмм — метод денситометрии. Он позволяет сравнительно просто определить наномолярные количества вещества с точностью 1—2°/о- Это прямое определение концентрации производного в зоне хроматограммы является одним из видов абсорбциометрии. Хроматограмму сканируют лучом или пятном монохроматического света и измеряют фотоэлектрическим методом долю отраженного бумагой или проходящего через [c.45]

    Перечисленные проявители можно использовать как для детекции стабилизаторов на пластинке, так и для количественного определения. Чтобы исключить неравномерность разбрызгивания проявителя, анализ проводят методом сравнения со стандартным раствором, замеряя оптическую плотность нанесенного на пластинку известного количества стандарта после экстракции его с пластинки или сканируя пятно стандарта денситометром. [c.248]


    Разработаны также методы количественного определения веществ в хроматографических пятнах непосредственно на пластинке. Для этих целей используются денситометры или флуориметры. [c.326]

    Для количественного определения углеводов, разделенных хроматографией на бумаге, используют различные методы. Количество моносахарида можно определить непосредственно на хроматограммах измерением денситометром [53] интенсивности окраски пятен, полученных при проявлении, например, анилинфталатом [54] или азотнокислым серебром [55]. Ошибка прямого измерения интенсивности окраски пятен достигает Ю—15%, поскольку окраска часто бывает нестабильной и в сильной степени зависит от условий обработки хроматограмм перед измерением. Однако из-за быстроты определения этот метод находит применение. [c.76]

    Количественная оценка 1,4-бенздиазепинов, извлеченных из биосубстратов и подвергнутых тонкослойной хроматографии, включает в себя различные по сложности и точности приемы хроматографию [2581, флуоресценцию [2711, спектрофотометрию, полярографию, спектрофлуориметрию и радиоиндикацию. Для уменьшения потерь при количественном определении бенздиазепинов используется денситометрия пятен непосредственно на пластинках [2891. [c.226]

    Основным требованием является полнота извлечения определяемых веществ со слоя сорбента, отсутствие потерь во время операции снятия. Последующее определение в элюате чаще всего делают спектрофотометрическим, хроматографическим или кулонометрическим методами. Непосредственное количественное определение вещества в пятне определяют денситометриче-ским методом с помощью денситометров, выпускаемых различными фирмами. [c.35]

    В анализе сложных смесей органических веществ широко используют тонкослойную матографшо. Количественное определение разделенных веществ проводят либо непосредственно на хроматограмме методами люминесценции и денситометрии, либо косвенно после элюирования пятна, содержащего анализируемое вещество, со слоя сорбента. [c.475]

    Метод тонкослойной хроматографии был открыт советскими исследователями Н. А. Измайловым и М. С. Шрайбер в 1938 г. и применен для разделения фармацевтических препаратов. Сначала он не привлек внимания исследователей, лишь спустя 20 лет к этому методу обратились вновь, и через три года он стал универсальным в биохимии. Такое быстрое и широкое распространение метода тонкослойной хроматографии можно объяснить следующими его достоинствами большой чувствительностью и вц-сокой эффективностью разделения, быстротой разделения, простым оборудованием, доступностью реактивов, легкостью элюирования разделяемых веществ, универсальностью обнаружения веществ путем обугливания их серной кислотой, а также возможностью количественного определения с помощью денситометра, [c.5]

    И наконец, перед исследователем встает проблема количественного определения вещества в конечных зонах. При этой операции, естественно, появляются новые возможные источники ошибок. Было решено применить уже полученную информацию к опробованию известных алкалоидов в растениях, используя для определения вещества в конечных зонах денситометрические методы (с учетом применения Хромоскана для денситометрии). [c.25]

    Денситометрические методы были применены к трем группам веществ, являющихся характерными представителями целого ряда веществ, весьма удобных для анализа таким способом. Первая группа — Соп1ит алкалоиды — представляет собой ненасыщенные соединения, поэтому даже при успешном элюировании малые количества их нельзя определить спектрометрически в ультрафиолетовой области. Для этих целей Ферберн и др. [16] разработали методику газовой хроматографии, но она оказалась недостаточно чувствительной. Вторую группу — алкалоиды опиума— можно проанализировать методом хроматографии на бумаге с количественным определением в зонах путем измерения площади зон [7]. Но хотя этот метод весьма надежен, он достаточно трудоемок. Для третьей группы — алкалоидов митрагины — Шеллард и Элам [17] предложили ТСХ-систему, в которой конечные зоны были красного цвета на белом фоне, что весьма удобно для денситометрии. Благодаря этой [c.25]

    Количественное определение в зонах путем измерения площади зон описан о в работе Ферберна [12]. При всей надежности результатов этот метод достаточно трудоемок. Шеллард и Элам для ряда веществ предложили ТСХ — систему, в которой конечные зоны были красного цвета на белом фоне, что весьма удобно для денситометрии [13]. Благодаря этой системе удалось применить разработанные принципы к хроматографии в тонком слое. [c.261]

    Для анализа сложных эфиров фталевой адипиновой, лимонной и себациновой кислот, вытяжек из поливинилхлоридных пленок разработан метод с применением тонкослойной хроматографии [76]. Разделение эфиров осуществляют на пластинках с тонким слоем силикагеля в виде метанольных растворов. В качестве подвижной фазы применено несколько растворителей — нитрометан, хлористый метилен, хлороформ, дихлорэтан, бензол и толуол. С целью идентификации рекомендована реакция Комаровского — орошение пластинок раствором rt-ди eтил-аминобензальдегида и серной кислотой с последующим нагреванием при 150 С. Количественное определение проводится по интенсивности окрашенных зон с помощью денситометра в отраженном свете. Минимально опрсделяе.чые количества эфиров варьируют от 1 до 15 мкг. [c.280]

    Сущность метода. Количественное определение с использованием ТСХ может быть выполнено аналитическим методом после количестйенного экстрагирования исследуемого вещества из снятого с пластины пятна, а также непосредстбенно на пластине при помощи денситометрии, спектрофотометрии или флуориметрии. Хотя по техническим причинам первый способ пока признан более точным, йесомнен-ным преимуществом второго является легкость и быстрота выполнения. [c.291]

    Ниже описывается метод количественного определения анилина на тонком слое силикагеля с использованием денситометрии после проявления пятен диа-затпрованием. В качестве денситометра используется установка, созданная па базе микроскопа, снабженного точечным зондом. [c.291]

    Хартел и Плеймикерс [112] использовали бумагу с четвертичными азотными группами для количественного определения цистеиновой кислоты в гидролизате белков. В восходящем методе хроматографии проявляли 0,34 М хлоруксусной кислотой. После проявления высушенную бумагу обрабатывали нингидрином для обнаружения красных пятен и с помощью денситометра определяли количество цистеиновой кислоты в пятне. По мнению авторов, ни одна из аминокислот, найденных в белке, не перекрывалась с цистеиновой кислотой. Точность метода была проверена авторами на шестнадцати определениях этой кислоты в гидролизате 1 г шерсти. Средние значения составили 1,25% при относительной средней ошибке 3%. [c.323]

    Работа посвящена изучению фосфолипидов методом тонкослойной хроматографии. Содержится подробное описание техники этого метода, включая рекомендации по оформлению хроматограмм. Количественное определение веществ проводится путем денситометрии. Кроме фосфолипидов описанный метод может быть применен для разделения и других классов веществ. Книга рассчитана на биохимиков, бкофизикоБ, физиологов растений и животных, специалистов сельского хозяйства и медицины, а также аспирантов и студентов. [c.4]

    В последнее время количественные определения пятен на тонкослойных пластинках проводят на денситометре (Keilehr, 1970 Шеллард, 1971). Денситометрическое определение пятен [c.39]

    Сложные эфиры гидролизовали концентрированной серной кислотой до высших спиртов с последующей их дегидратацией в ненасыщенные соединения, которые с -днметиламинобензаль-дегидом образуют окрашенные продукты реакции. Для этого пластинку опрыскивали 0,5 %-ным раствором п-диметиламинобензальдегида в смеси концентрированной серной кислоты с диэтиловым эфиром (1 1) и снова выдерживали в сушильном шкафу при 130—150 °С 5—10 мин. На сероватом фоне появлялись красно-бурые пятна пластификаторов. Количественное определение проводили по измерению площади пятен. При использовании денситометров погрешность определения снижается с 10 до 5%- Чувствительность такого проявителя по отношению к сложным эфирам 0,5—4 мкг. [c.257]

    Учитывая ослабление интереса к бумажной хроматографии, мы рассмотрим только чаще всего употребляемую, доступную или простую аппаратуру для БХ. Более полное описание различных видов аппаратуры можно найти в рекламной литературе и в специальных монографиях по БХ (см., например, [50], а также список литературы в гл. 13). За последнее десятилетие аппаратура и техника БХ почти не совершенствовались. Некоторая работа в этом направлении проведена только Бущем и Кроушоу [19], ее мы обсудим ниже. Список аппаратуры для БХ включает хроматографические камеры или сосуды, стойки с лотками, пипетки для нанесения проб, приспособления для сушки, пульверизаторы, чашки для обнаружения и пропитки, сосуды для элюента, сушильные шкафы, лампы для облучения хроматограмм, приспособления для измерения Rf, а также планиметры и денситометры для количественных определений, ко-лировальные машины и т. д. [c.62]

    Методы, используемые для количественного определения веществ в зонах, могут быть различными и зависят от природы анализируемых веществ элюирование (с последующим весовым, спектрофотометрическим, флуориметрическим, полярографическим, радиометрическим измерением), измерение площади пятна, денсито-метрирование. Считается, что наиболее точным является метод элюирования (ошибки 1 %), но для его осуществления необходимо сравнительно большое количество материала. Точность денситометри-ческих методов несколько ниже (1—2%), но для анализа требуется гораздо меньше материала. Определения по измерению площади зон дают среднюю точность 5—10%. [c.107]

    На результаты количественного определения, проведенного методом ТСХ, может влиять ряд факторов [1], а некоторые параметры оказывают влияние на результаты вне зависимости от метода определения— будь-то денситометрия, флуоримет-рия, экстракционный или какой-либо другой метод. Важный фактор и возможный источник больших ошибок — это способ нанесения пробы на тонкий слой. Одна из причин ошибок — втягивание пробы обратно в кончик иглы шприца [2—4] часть капли втягивается в иглу, и в результате после падения капли в ней остается различное количество пробы. Испарение растворителя приводит к концентрированию оставшегося раствора последующая капля смывает его, и в результате концентрация раствора существенно увеличивается. Ошибки, связанные с та-KHiM способом нанесения пробы, можно свести к минимуму, используя иглу по возможности с тонким кончиком и смазывая его силиконом [4]. Семюэльс [5] рекомендует изменить форму иглы микрошприца путем шлифовки обратной стороны, чтобы игла была направлена в центр, а не вбок. [c.327]

    Разработан ряд методов количественного определения, проводимого как in situ, так и после элюирования. Это отражательное сканирование [40, 41], определение площади пятна [42], денситометрия [42, 43], флуоресценция [44], радиоактивное сканирование [45], титрование после элюирования [46], каталитическая полярография [47], спектрофотометрия после элюирования [48] и хроматографирование методом ГХ после элюирования [49]. [c.428]


Смотреть страницы где упоминается термин Количественные определения, денситометрия: [c.35]    [c.49]    [c.266]    [c.38]    [c.168]    [c.353]    [c.445]    [c.483]    [c.563]   
Смотреть главы в:

Методическое руководство по тонкослойной хроматографии фосфолипидов -> Количественные определения, денситометрия




ПОИСК





Смотрите так же термины и статьи:

Денситометрия

Денситометры



© 2025 chem21.info Реклама на сайте