Гликопротеины расщепление

ПЛАЗМИН, фермент класса гидро таз, катализирующий расщепление фибрина, в результате чего происходит разрушение тромбов П -гликопротеин (мот м ок 92 тыс), состоящий из двух полипептидных цепей, соединенных связью 8— 8 тяжелой (мол м ок 68 тыс ) и легкой (мол м ок 25 тыс), к рая содержит активный центр фермента, образованный остатками 8ег-740, Н13-602 и Азр-734 (букв обозначения см в ст Аминокислоты) В фибрине П гидро- [c.553]

ГЛИКОЛЯТЫ, соли и эфиры гликолевой к-ты. См. также Натрия гликолят, Натрия-цирконила гликолят. ГЛИКОПЕПТИДЫ, вещества, в к-рых к пептидной цепи из неск. аминокислот присоединены О- или N-гликозид-ными связями остатки моно- или олигосахаридов. Получ. при частичном расщеплении прир. гликопротеинов или синтетически. [c.137]

Некоторые препараты гликопротеинов групп крови, например, выделяемые из жидкости кисты яичника и из слизистой желудка лошади, разделяются на фракции — легко растворимую и трудно растворимую в воде. Последняя, по-видимому, состоит из гигантских молекул, в которых полипептидные цепи связаны дисульфидными мостиками. Расщепление их обычными методами дает растворимые гликопротеины. [c.179]

Метод периодатного окисления применяется для установления строения олигосахаридов, полисахаридов, гликопротеинов и гликопептидов. Преимуществом этого метода является то, что расщепление гликоль-ных группировок протекает количественно и анализ требует небольшого расхода вещества. [c.82]

Родопсин, по-видимому, является гликопротеином [86] и содержит остатки гексозамина и маннозы. Из смеси, полученной расщеплением родопсина пепсином, выделили гликопептид и установили аминокислотную последовательность этого фрагмента [c.181]

Нужно отметить, что теоретически возможно проверить на гомогенность любой препарат по его реакционной способности в качестве субстрата для фермента или да ке по отношению к химическим реагентам, но при этом существенно знать, что используемый реагент удаляет или изменяет строго определенную часть или части молекулы. Более того, это изменение должно легко обнаруживаться, а реагент и продукт расщепления (если он образуется) должны легко выделяться из реакционной смеси. Такие условия выполняются не часто, и обычно эту возможность пе удается реализовать. Но действие нейраминидазы на гликонротеины является примером того, когда это возможно. Обработанный ферментом гликопротеин можно проверять на гетерогенность любым способом, но электрофоретическое исследование является, вероятно, наиболее строгой проверкой. Еще одним интересным и уникальным случаем оценки гомогенности субстрата путем его обработки ферментом служит взаимодействие фибриногена с тромбином. [c.45]

Разбавленная щелочь была применена для расщепления гликопротеина подчелюстной железы быка (ПЖБ) (гидроокись бария, pH 10,5, 15 мин) [33]. [c.243]

Главным источником получения разнообразных О. служат р-ции частичного (химического или ферментативного) расщепления прир. полисахаридов, гликолипидов и гликопротеинов. Однако существует неск. групп О., встречающихся в природе в своб. состовшии. Группа сахарозы широко представлена в растениях, где выполняет роль легкомобили-з>емого энергетич. резерва. Кроме сахарозы в эту группу входят О., образовавшиеся путем гликозилирования молекулы сахарозы остатками D-фруктозы (Fru), D-глюкозы (Gl ) или D-галактозы (Gal), а также в результате последующего частичного гидролиза этих высших О. [c.378]

В клетках АКТГ синтезируется в составе общего для нескольких пептидов предшественника — проопиомеланокортина [597, 598]. Так как из этого гликопротеина действием протеаз кроме АКТГ и /3-липотропина образуются также эндорфины и меланоцитстимулирующий гормон, возникает проблема разграничения понятий прогормон , препрогормон и т. д. На стр. 243 схематически представлен процесс последовательного расщепления предшественника АКТГ и липотропина. [c.242]

Трансферрин — гликопротеин, который образует комплексы с железом и служит для перевода железа, содержащегося в тканях (особенно в печени) в резервной форме, в его метаболически активную форму в гемоглобине. Методами периодатного окисления, метилирования и расщепления гликозндазой [207] установлено, что олигосахаридные цепи трансферрина имеют структуру (53). [c.268]

В 1916 г. в опытах на животных было показано токсичное действие сырого яичного белка употребление печени или дрожжей снимало этот эффект. Фактор, предотвращающий развитие токсикоза, был назван витамином Н. Позже было установлено, что в дрожжевом экстракте печени и желтке куриного яйца содержится пищевой фактор, отличный от всех других известных к этому времени витаминов. Этот фактор стимулирует рост дрожжей и азотфиксирующих бактерий Rhizobium, в связи с чем он и получил название биотин (от греч. bios—жизнь), или коэнзим R. В 1940 г. было установлено, что все три названия (биотин, витамин Н и коэнзим R) относятся к одному и тому же химически индивидуальному соединению. Выделенное из сырого яичного белка вещество оказалось гликопротеином—белком основного характера, названным авидином этот белок обладает высоким сродством связывания с биотином с образованием нерастворимого в воде комплекса. Комплекс не подвергается расщеплению в пищеварительном тракте, поэтому биотин не всасывается, хотя и содержится в пищевых продуктах. [c.228]

Полисахариды, содержащие восстанавливающую группу, при действии щелочей могут подвергаться ступенчатому расщеплению, начиная с восстанавливающего моносахарида, причем скорость процесса определяется положением заместителя у этого моносахарида например, для гексоз она выше всего для 3-0-замещенного звена, 4-0- и 6-О-замещенные звенья расщепляются с большим трудом, а 2-О-замещенные моносахариды устойчивы к действию щелочей . Щелочное расщепление сравнительно редко применяется для установления строения полисахаридов, хотя в отдельных случаях может дать ценные сведения об их структуре. Примером служит действие щелочи на ламинарии , разрушающей целиком молекулы с восстанавливающими группами и не затрагивающей невосстанавливающие молекулы (гликозиды маннита). Другие агенты основного характера — сода, гидразин, гидроксиламин находят в последние годы применение для расщепления на фрагменты гликопротеинов (см. гл. 21). [c.513]

Для установления количественного состава входящих в гликопротеин моносахаридов и аминокислот биополимер подвергают полному кислотному гидролизу, и состав гидролизата определяют обычными методами количественного анализа. Пептидные связи устойчивее гликозидных по отношению к кислотам, поэтому для полного расщепления на мономеры гликопротеины приходится гидролизовать в более жестких условиях, чем обычные полисахариды (6 н. НС1, 100—ПО °С, 24 ч) . Нужно иметь в виду, что как сахара, так и аминокислоты могут частично распадаться в условиях кислотного гидролиза, причем в ряде случаев можно с помощью ХОЛОСТЫХ опытов внести соответствующие поправки при анализе. Специфической для гликопептидов побочной реакцией в условиях кислотного гидролиза является возможная конденсация сахаров с аминокислотами, приводящая к окрашенной сложной смеси различных веществ, в том числе простейших карбонильных соединений (так называемая реакция Майяоа). Например, по данным Готшалка , потеря аминокислот при кислотном гидролизе богатых сахарами гликопротеинов может составлять до 30 %. Количественное определение моносахаридов проводят с использованием хроматографии, спектрофотометрической и колориметрической техники (см. гл. 14). Для анализа аминокислот применяют обычно методы, хорошо известные из химии белка. Так, количественный анализ аминокислотного состава проводят в автоматических анализаторах или с помощью газо-жидкостной хроматографии . [c.567]

Значительно реже для выделения фрагментов, содержащих узловые гликопептидные связи, проводится ферментативное расщепление полисахаридных цепей, как, например, в случае гликопротеина клеточной стенки. [c.571]

Если проводить щелочной гидролиз гликопротеина без восстановления остатков непредельных аминокислот, то образующийся частично деградированный полимер, содержащий звенья аминоакриловой и аминокротоновой кислот, удается расщепить по месту этих звеньев действием брома или других реагентов . Это — первый случай избирательного расщепления пептидной цепи в гликопротеинах химическим путем, открывающий большие возможности при изучении их структуры. [c.572]

Периодатное окисление иногда применяют для удаления части моносахаридных остатков гликопротеина. Деградация по Смиту (см. стр. 499) широко используется для изучения мелких олигосахаридных и гликопептидных фрагментов, выделенных при частичной деградации гликопротеина. В некоторых случаях для деструкции гликопротеина применялось восстановительное расщепление под действием боргидрида лития. Считали, что выделение при этом соответствующих полиолов — продуктов восстановления концевых моносахаридов доказывает наличие в гликопротеине 0-ацилгликозидных связей . В настоящее время эти данные подвергаются сомнению , хотя аналогичная восстановительная деградация была успешно использована для расщепления ацилгликозидной связи в некоторых растительных гликозидах . [c.573]

В тейхоевых кислотах доказано наличие сложноэфирной связи (тип А) аланина с остатками рибита. В защитном антигене стафилококка обнаружена амидная связь остатков аланина через аминогруппу глюкозамина . Высказано предположение о наличии в гликопротеинах 0-ацилгликозид-ной связи, однако твердые доказательства существования такого типа связи еще отсутст вуют. Очевидно, в сложных по структуре гликопротеинах углеводные и пептидные части могут быть связаны и несколькими разными типами связей, о чем свидетельствует неполное расщепление всех гликопептидных связей под действием какого-либо одного реагента и образование смеси низкомолекулярных гликопептидов, содержащих связи разного типа при неспецифической деструкции исходного гликопротеина. [c.573]

Различные бактериальные штаммы продуцируют серологически различные токсины, но все они построены одинаковым образом [16] и образуются из неактивного предшественника (претоксина — белка с М 145 000) посредством протеолитиче-ского расщепления одной из пептидных связей. Получающиеся субъединичные пептиды с М 50 000 и 100 ООО связаны дисуль-фидной связью, восстановительное расщепление которой приводит к потере токсичности [17]. Токсин ботулизма связывается специфично с ганглиозидами, но не с цереброзидами или другими липидами. Прочность связывания возрастает с увеличением числа остатков сиаловых кислот в ганглиозиде (т. е. от Gmi к Gti). Возможно, что токсин может также реагировать с гликопротеинами. Токсин ботулизма in vitro селективно связывается с синаптосомами, а in vivo он блокирует химические синапсы посредством ингибирования пресинаптического высвобождения молекулы медиатора. [c.52]

ПРОТРОМБИН, гликопротеин плазмы крови. Мол. м. ок. 70 ООО. Белковая часть молекулы состоит из одной полипептидной цепи. Известна первичная структура для П. быка и человека. (582 аминокислотных остатка). На М-конце П. находится 10 остатков -у-карбоксиглутаминовой к-ты, необходимых для активации П. в тромбин. Синтез этих к-т осуществляется в печени карбоксилированием остатков глутаминовых к-т и регулируется витамином К. Содержание П. в плазме крови здорового человека 0,007—0,017%. ПРОФЕРМЕНТЫ (преферменты, зимогены), неактивные предшественники ферментов, образующиеся в ходе биосинтеза последних. Превращаются в ферменты а результате т. н. ограниченного протеолиза (расщепления обычно одной пептидной связи). Из П. синтезируются мн. протеолитич. ферменты, а также фосфолипазы. Биол. назначение П.— предотвращение преждеврем. проявления ферментативной активности внутри клеток и тканей, в к-рых осуществляется биосинтез ферментов. [c.485]

Регуляция синтеза мужских половых гормонов и мужских половых клеток. Лютропин стимулирует стероидогенез и продукцию тестостерона после связывания с рецепторами на плазматической мембране клеток Лейдига (аналогичные рецепторы найдены в яичниках на клетках желтого тела) по аденилатциклазному механизму. При этом стимулируется ферментативное расщепление боковой цепи холестерина (С2у С21). Аналогично действует кортикотропин в коре надпочечников. Тестостерон по механизмам обратной связи тормозит продукцию и освобождение гонадолиберинов. Регуляция сперматогенеза фоллитропин связывается с клетками Сертоли и усиливает синтез андрогенсвязывающего белка (это гликопротеин. [c.405]

Использование гелевых сред значительно повышает разрешающую силу электрофоретического анализа и позволяет нолучить полезную информацию на очень малых количествах материала. Однако некоторые гликопротеины, главным образом недеградированные эпителиальные гликопротеины с очень большими молекулами, не мигрируют в гелях сколько-нибудь заметным образом. Описан метод [36], состоящий в использовании очень разбавленных агаровых гелей, который позволяет избежать этих трудностей. Однако даже если размер молекул таков, что можно ожидать их проникновения в гель, концентрация раствора, который должен наноситься на стартовую полосу, так высока, что гликопротеин образует плотную молекулярную сетку и сам имеет гелеподобную структуру. При этих условиях образуется интенсивная полоса на старте, иногда сопровождающаяся диффузным хвостом , вытянутым в сторону анода. Тем не менее метод оказался полезным для изучения продуктов расщепления эпителиальных гликопротеинов и служит мощным инструментом исследования более низкомолекулярных и более компактных гликопротеинов. Обнаружение единственной [c.47]

Успешное применение любой из описанных многочисленных модификаций (см. стр. 136) метода анализа смесей аминокислот ионообменной хроматографией зависит главным образом от тщательного выполпепия экспериментальной процедуры. Подробности эксперимента описаны в оригинальных работах, и целесообразно посвятить определенное время отработке выбранного метода, прежде чем переходить к модификациям. Описание деталей выполнения анализа выходит за рамки этой главы, целью которой является обсуждение специальных проблем, возникающих ири аминокислотном анализе гликонротеинов, и связанных с ним структурных соображений. Многие из этих трудностей возникают не нри самом анализе, а в процессе первоначальной обработки гликопротеина, особенно при гидролизе. При расщеплении иолипептидпых цепей белка на аминокислоты появляется возможность для многих побочных реакций, включающих разложение аминокислот. [c.121]

Пэйнтер и Морган [9] показали, что растворимая в воде полистиролсульфокислота более эффективна для гидролиза полимеров, чем твердая смола. При гидролизе с одновременным диализом из инулина] и гликопротеина желудка были получены олигосахариды с хорошим выходом при этом не происходило заметного дезацетилирования ацетилгексозаминов. Большая часть продуктов расщепления белка оставалась в мешке для диализа следовательно, разрыв пептидных связей в мягких условиях протекал далеко не полностью. [c.122]

Прежде чем анализировать гидролизованный гликопротеин, обычно необходимо удалить избыток кислоты. Соляная кислота легко удаляется при упаривании, но надо избегать условий, в которых происходят потери аминокислот за счет реакции с продуктами расщепления углеводов. Упаривание нужно проводить быстрее и при возможно более низкой температуре. Необходимо также поддерживать в процессе упаривания достаточно кислую реакцию раствора во избежание реакции Майяра (см. стр. 105 и сл.), которая происходит в нейтральных или очень слабокислых средах. По-видимому, при упаривании соляной кислоты в вакууме pH гидролизатов не превышает 3, если не было добавлено щелочи. [c.135]

Эта реакция могла бы быть полезна при исследовании структуры гликопротеинов, если бы с ее помощью можно было разрушить пептидные, амидные и сложноэфирные связи, не затронув гликозидных связей. Однако предварительные исследования действия гидразина на гликопротеины, включая групповое вещество А из слизистой свиных желудков и хондроитинсульфат А, оказались неутешительными, так как обнаружилось глубокое расщепление углеводов [77]. При этом происходила полная потеря сиаловых кислот и частичная — гексозаминов, галактозы и фукозы. [c.136]

Применение одной из количественных модификаций нингидринового метода (см. стр. 144) к общему гидролизату представляет собой чувствительный метод определения белка, более строго обоснованный, чем вышеописанные методики. В применении к гликопротеинам нингидриновый метод нуждается в существенных поправках на аммиак (образующийся при расщеплении амидных групп, сиаловых кислот и гексозаминов) и гексозамины, которые тоже реагируют. Гидролизаты разных белков не дают с нингидрином идентичных интенсивностей окраски на единицу веса белка отчасти за счет различного веса остатков (и образования окраски) различных аминокислот, а также, что более существенно, за счет различного содержания в них имипокислот, практически не дающих окрашивания при длине волны 570 ммк, при которой производятся измерения (см. стр. 149). [c.151]

Щелочное расщепление, вероятно, может быть использовано в препаративных целях. Так, в тех гликопротеинах, в которых углевод-белковая связь легко расщепляется очень разбавленными щелочами, восстанавливающий олигосахарид может быть выделен и стабилизирован восстановлением в соответствующий спирт или гликозидировапием. С другой стороны, если используются гораздо более жесткие условия щелочной обработки, например такие, которые необходимы для расщепления ацилгликозиламинной связи, вероятно, в дополнение к тем реакциям, которые рассмотрены выше, происходит удаление ацетильных групп из остатков К-ацетилгексоз-аминов. [c.172]

Эти значения устойчивости чистых сахаров в горячих минеральных кислотах могут дать лишь весьма приближенное представление об их устойчивости в процессе гидролиза гликопротеинов, что объясняется несколькими причинами. Во-первых, происходит катализируемая кислотами реакция между свободными сахарами и такими аминокислотами, как триптофан, цистин, цистеин и метионин, ведущая к предпочтительному расщеплению этих аминокислот [8, 9] (см. также гл. 5). Однако имеется мало сведений о расщеплении в горячем кислом растворе сахаров в присутствии этих аминокислот известно, что цистеин повышает скорость деструкции маннозы [7, 10]. Некоторые поправки на исчезновение сахара можно ввести с помощью модельных экспериментов, в которых измеряют деструкцию, нагревая смеси, содержащие исследуемый сахар и аминокислоты, аналогичные тем, которые присутствуют в гидролизате изучаемого гликонротеина. Другим приемом является прибавление изотопно меченного сахара к гликопротеину перед гидролизом, выделение сахара или его производного и вычисление количества, присутствовавшего в гликопротеине, из данных изотопного разбавления [7]. Во-вторых, восстанавливающая группа моносахарида в условиях кислотного катализа может реагировать с первичной или даже со вторичными гидроксильными группами другой молекулы сахара, давая ди- или олигосахариды эта реакция называется кислотной реверсией [И, 12]. Такого рода бимолекулярные побочные реакции можно в значительной степени устранить, проводя гидролиз при низкой концентрации вещества. Однако таким способом нельзя избежать другого возмоншого источника ошибок. Сахар может предпочтительно освобождаться в виде переходного оксониевого или карбониевого иона, который, вероятно, будет легко взаимодействовать с реак- [c.196]

Одна из главных трудностей, связанных с тем, что различные сахара имеют разную восстанавливающую способность в щелочном растворе, объясняется, вероятно, протеканием побочных реакций, причем одна из таких реакций состоит в окислении соответствующей гликоновой кислоты, другая — в щелочном расщеплении сахара. Определенные затруднения обусловлены и тем фактом, что боковые цепи некоторых аминокислот, особенно триптофана, тирозина, цистина, цистеина и серина, проявляют восстанавливающие свойства [73]. Били и Жевон [74] показали, что восстанавливающая способность овомукоида уменьшается в результате протеолиза, и объяснили эти данные следующим образом. Восстанавливающая способность цистеина и серина обусловлена образованием под действием щелочи а, 3-ненасыщенных соединений, и реакция такого типа, так называемое ( -элиминирование, вероятно, легче происходит, когда эти аминокислоты связаны пептидными связями [75 — 77]. Однако Грэхем и сотр. [78] нашли, что гликопротеин подчелюстной железы овцы не проявляет восстанавливающей способности при действии о-динитробензола или реагента Бенедикта в контролируемых условиях. [c.205]

Другой метод расщепления чувствительных к щелочам связей в гликопротеинах состоит в действии гидроксиламина в мягких условиях. Грэхем и сотр. [34] обрабатывали этим реагентом гликопротеин из ПЖО (1 М NH20H, pH 12,2, 37°) и показали, что освобождающийся дисахарид выделяется почти количественно в виде относительно устойчивого оксима. [c.243]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология