Бумажная хроматография анализ хроматограмм

Это так называемая тонкослойная хроматография, получившая за последнее десятилетие широкое применение в химии и особенно Б биохимии благодаря значительно большей скорости выполнения анализа в сравнении с бумажной хроматографией. Вид хроматограммы и техника выполнения при этом аналогичны. Преимущество тонкослойной хроматографии перед бумажной, кроме значительно большей скорости анализа, состоит в значительно меньших размерах аппаратуры и Б возможности разделения примерно на порядок больших количеств смесей без существенного ухудшения качества разделения. Это преимущество позволяет применять тонкослойную хроматографию как препаративный метод выделения индивидуальных продуктов из сложной смеси в чистом виде с целью дальнейшего их исследования другими методами. [c.11]

Количественный анализ. В бумажной хроматографии расшифровку хроматограмм для количественного анализа осуществляют [c.113]

Хроматографический анализ органических веществ развивался попутно с хроматографией неорганических веществ. В 1935—1936 гг. появились первые сообщения об успешном применении метода Цвета в анализе синтетических красителей. Из жидкофазных вариантов хроматографии наиболее широкое применение в органической и биологической химии получила бумажная хроматография. Это тонкий микрометод, позволяющий разделять смеси нескольких десятков компонентов на полоске пористой бумаги, которая выполняет роль хроматографической колонки. Хроматограмма получается в виде пятен, которые имеют окраску, соответствующую природной окраске разделяемых компонентов смеси. При анализу бесцветных веществ пятна появляются на бумаге после опрыскивания ее подходящим реактивом. Например, при анализе аминокислотного состава белков после их гидролиза бумагу опрыски- [c.10]

Бумажная хроматография в сочетании с применением органических реактивов дает возможность провести качественный анализ сложных смесей катионов и анионов. На одной хроматограмме при помощи одного реактива можно обнаружить ряд веществ, так как для каждого вещества характерно не только соответствующее окрашивание, но и определенное место локализации на хроматограмме. [c.479]

В случае бумажной хроматографии, используемой главным образом для качественного анализа смесей органических веществ, полученную хроматограмму обрабатывают раствором реагента, образующего с исследуемыми веществами окрашенные соединения, В результате этого в том месте, где сосредоточилось вещество, появляется окрашенное пятно. [c.149]

Как уже указывалось (с. 37—43), хроматография позволяет проводить разделение и очистку веществ. Однако если хроматография осуществляется при строго определенных параметрах, то по хроматограмме можно определить, какие вещества входят в данную смесь и в каком количестве. Метод идентификации в этом случае зависит от вида хроматографии. Для распознавания веществ обычно используют тонкослойную или бумажную хроматографию, где критерием является величина / /, а также газовую или газо-жид-костную, где отдельные вещества, определяют по их времени удерживания, Трудность такого анализа заключается именно в создании определенных условий, поскольку и Rf, и время удерживания зависят от адсорбента, природы жидкой фазы, скорости газа-носителя, а также от способа нанесения жидкой фазы на твердый носитель. Именно поэтому для того чтобы идентификация определенного соединения по хроматограмме была достоверной, необходимо предварительно определить все условия хроматографирования и при анализе их точно воспроизводить. [c.92]

Для анализа малых количеств полиамида (порядка миллиграмма) применяется метод бумажной хроматографии [14]. Для нанесения пятна используют спиртовый раствор высушенных, очищенных от кислоты продуктов гидролиза. Определение на хроматограмме основных и кислотных составляющих выполняют с помощью трикетогидринденгидрата и метила красного соответственно. [c.247]

Сущность работы. Применение ультрафиолетовой люминесценции расширяет возможности качественного определения веществ методом бумажной хроматографии. Если компоненты разделенной смеси обладают способностью люминесцировать под действием ультрафиолетового облучения, проявление бумажной хроматограммы осуществляется при освещении высушенной после хроматографирования бумажной полоски ультрафиолетовым светом. Освещение производится ртутно-кварцевой лампой через специальный фильтр, задерживающий видимые лучи. По цвету люминесценции можно судить о природе веществ, подвергшихся хроматографированию. Этот метод нашел применение в анализе тяжелых нефтепродуктов и битумов. [c.273]

Бумажная хроматография, открытая в 1941 г. А. Мартином и Р. Синджем, является одним из вариантов ЖЖХ. Роль хроматографической колонки выполняет полоска пористой бумаги, неподвижной фазой служит вода, удерживаемая волокнами целлюлозы, а подвижной — органические растворители. Бумажная хроматография применяется при анализе смолистых веществ и асфальтенов. Полоску бумаги погружают в спиртобензольный раствор образца и оставляют на 12—14 ч, в течение которых на бумаге образуется хроматограмма, а растворитель улетучивается. При облучении бумаги ультрафиолетовым светом зона смол дает ярко-желтую люминесценцию, а асфальтены — темно-коричневую. [c.132]

Метод бумажной хроматографии широко используется в фармацевтическом анализе. Чаще всего его применяют для оценки доброкачественности лекарственных средств при испытании их на чистоту и обнаружение примесей. Разработаны методики, позволяющие определять подлинность и количественное содержание лекарственного вещества в препарате сравнением бумажных хроматограмм его и стандартного образца (целанид, препараты, содержащие индивидуальные аминокислоты и смеси аминокислот). [c.211]

Анализ основан на разделении компонентов полученного продукта методом восходящей бумажной хроматографии с последующим измерением скорости счета, даваемой пятнами полученной хроматограммы, на торцовом счетчике, соединенном с пересчетной установкой. [c.58]

Число носителей, пригодных для распределительной жидкостной хроматографии, крайне ограничено. Более или менее удовлетворительными качествами обладают такие носители, как особым образом приготовленный силикагель, очищенный крахмал, целлюлоза. Особое место в качестве носителя занимает фильтровальная бумага. Получение бумажных хроматограмм в распределительной хроматографии рассматривается как особый вид хроматографического анализа и носит название бумажной хроматографии. [c.310]

Бумажная хроматография в качественном анализе для разделения и обнаружения ионов имеет некоторые преимущества по сравнению с хроматографией на колонках и с капельным анализом, так как образующиеся зоны на бумаге, содержащие катионы, доступны для проявления каждого присутствующего иона в отдельности. Это обстоятельство дает возможность сделать некоторые реакции трудно обнаруживаемых ионов более эффективными. Так, например, реакция обнаружения РЬ -ионов в присутствии В1 -ионов раствором иодида калия из смеси катионов на колонке не удается из-за того, что образующийся иодид свинца и комплексная соль иодида висмута имеют одинаковый желтый цвет и маскируют друг друга. Однако на первичной бумажной хроматограмме эту же реакцию можно провести, касаясь капилляром с раствором иодида калия отдельно зон, содержащих ионы свинца и висмута. [c.83]

Бумажная хроматография в сочетании с применением органических реактивов дает возможность провести качественный анализ сложных смесей катионов и анионов. На одной хроматограмме при помощи одного реактива можно обнаружить ряд веществ. [c.412]

Метод обладает рядом преимуществ по сравнению с бумажной хроматографией, заключающихся в том, что эти тонкие пленки ускоряют процесс диффузии, четче определяют степень разделения компонентов и дают возможность проявлять соединения с применением более широкого ряда реагентов. Тонкий слой обычно изготовляют из силикагеля, окиси алюминия, кизельгура или различных типов целлюлозы. Стеклянные пластинки, обработанные таким образом, обеспечивают получение настолько хороших хроматограмм, что они пригодны для фотометрического и флуориметрического анализов. [c.265]

Бумажная хроматография в сочетании с применением органических реактивов позволяет провести качественный анализ сложных смесей катионов и анионов. Получаемые при этом хроматограммы представляют собой наглядные документы, характеризующие состав исследуемой смеси. На одной хроматограмме с помощью одного реактива можно обнаружить ряд веществ, так как для каждого вещества характерно не только соответствующее окрашивание, но и определенное место локализации на хроматограмме. [c.161]

Люминесцентный качественный анализ часто применяется в Сочетании с другими методами. Например, в хроматографическом методе разделения веществ широко используют люминесцентные реагенты. Наиболее часто прибегают к методу бумажной хроматографии, получая люминесцентное свечение веществ, непосредственно нанесенных на бумагу. В табл. 64 приведены примеры обнаружения некоторых катионов на бумажных хроматограммах с помощью люминесцентного метода анализа. [c.233]

Выбор методики анализа фракций определяется природой анализируемого материала причем выбрать методику анализа, а в некоторых случаях и испытать необходимо перед началом хроматографирования. Применяют физические, химические и биологические методики. Чаще всего измеряют показатель преломления. Пользуются также различными колориметрическими методами, а также тонкослойной или бумажной хроматографией и электрофорезом. Идеальным способом является детектирование радиоактивных изотопов. Измеряя pH и электропроводность отбираемых фракций, можно контролировать условия элюирования. Именно такой контроль позволяет воспроизводить условия градиентного элюирования. В ряде случаев очень полезно комбинировать несколько методов детектирования. Полезны также непрерывное автоматическое детектирование (с достаточно высокой чувствительностью) разделенных соединений и регистрация хроматограмм (см. разд. 8.6, 8.7). Результаты измерений записывают в виде кривой зависимости измеряемой величины от объема элюата или номера фракции. Исходя из распределения пиков на хроматограмме некоторые фракции можно объединить. При этом необходимо следить, чтобы объединялись совершенно чистые фракции, не содержащие примесей других компонентов, иначе потребуется повторное хроматографирование. Фракции, предназначенные для количественных анализов, хранят в темноте и на холоду с тем, чтобы не допустить нежелательных реакций. Фракции соединений, окисляющихся на воздухе или поглощающих диоксид углерода, следует хранить в герметически закрытых сосудах. [c.281]

В некоторых случаях техника бумажной хроматографии может быть значительно упрощена. Так, по С. Бурмистрову , при анализе парных смесей некоторых ароматических аминов можно достигнуть полного разделения компонентов, нанеся раствор смеси в виде тонкой черты на обработанную парами муравьиной или уксусной кислоты бумагу и проявляя хроматограмму несколькими каплями бензола. При последующей обработке хроматограммы растворами нитрита натрия и й-нафтола в центре хроматограммы появляется окрашенная полоска, соответствующая более адсорбируемому компоненту, а по краям — две полоски, соответствующие менее адсорбируемому компоненту [184—191]. [c.217]

Двухмерная бумажная хроматография по сравнению с одномерной более эффективна. Ее применяют при анализе наиболее сложных смесей, например аминокислот в белковых гидролизатах. Для этого каплю исследуемого раствора наносят в угол квадратного листа бумаги и хроматографируют сначала в одном направлении, а затем после просушивания процесс повторяют в другом растворителе, повернув хроматограмму на 90°. [c.37]

Качественный анализ хроматограмм аминокислот и пептидов. В бумажной хроматографии применяются следующие способы качественного анализа хроматограмм аминокислот и пептидов. [c.147]

Помимо качественного обнаружения разделяемых веществ на хроматограммах, метод бумажной хроматографии может быть использован и для количественных определений. Существуют две группы методов количественного бумажного хроматографического анализа методы, основанные на вымывании анализируемых веществ, и методы, не требующие удаления анализируемых веществ. [c.354]

Основная причина широкого распространения бумажной хроматографии (БХ) — ее простота. Бумажная хроматограмма является стабильным документом проведенного анализа, который можно хранить в картотеке. Хроматографируемые вещества фактически не изменяются и пригодны для дальнейших исследований. [c.69]

Автор впервые среди отечественных исследователей обратил внимание на большие возможности бумажной хроматографии [3, 120]. В ряде работ были подвергнуты анализу некоторые теоретические вопросы бумажной и тонкослойной хроматографии, в частности бумажная хроматография в свете общей теории динамики сорбции [121, 122], теория воспроизводимости и постоянства коэффициентов положения зон на бумажных хроматограммах [123], понятие хроматографического спектра [124], роль квазидиффузионных эффектов в бумажной и тонкослойной хроматографии [125]. [c.84]

Хроматографический анализ органических веществ развивался попутно с хроматографией неорганических веществ. В 1935— 1936 гг. появились первые сообщения об успешном применении метода Цвета в анализе синтетических красителей. Из жидкофазных вариантов хроматографии наиболее широкое применение в органической и биологической химии получила бумажная хроматография. Это тонкий микрометод, позволяющий разделять смеси нескольких десятков компонентов на полоске пористой бумаги, которая выполняет роль хроматографической колонки. Хроматограмма получается в виде пятен, окраска которых соответствует природной окраске разделяемых компонентов смеси. При анализе бесцветных веществ пятна проявляют, опрыскивая бумагу реактивом, образующим с разделяемыми компонентами окрашенные соединения. Например, при определении аминокислотного состава белков после их гидролиза бумагу опрыскивают раствором нин-гидрина, в результате чего на поверхности бумаги появляются пятна розового цвета, соответствующие индивидуальным аминокислотам (см. рис. 1.2). Если разделяемые бесцветные вещества обладают способностью к флуоресценции, бумагу облучают ультрафиолетовыми лучами (кварцевой или ртутной лампой) и тогда хроматограмма становится видимой. Этот случай можно наблюдать при разделении смеси антрахинонов, пятна которых в ультра- [c.9]

Большую серию экспериментальных исследований по анализу неорганических ионов методом тонкослойной хроматографии провел X. Зайлер [111]. Им выполнен анализ катионов, предварительно разделенных на группы, и анализ анионов. Он установил, что в условиях тонкослойной хроматографии неорганических ионов нельзя пользоваться величиной Rf для идентификации ионов, так как эта величина не является постоянной, как это имеет место в бумажной хроматографии. Величина Rf зависит не только от свойств носителя и состава подвижного раствора, но и от присутствия сопутствующих ионов. Поэтому X. Зайлер вынужден ограничиться только лишь указанием на постоянную последовательность высот поднятия ионов на тонкослойной хроматограмме, полученной по восходящему методу. При обработке хроматограмм можно точно идентифицировать отдельные ионы по известным реакциям обнаружения. [c.185]

Предложено проводить нейтронно-активационный анализ элементов после их разделения методом бумажной хроматографии [657]. Полученные хроматограммы облучают в течение 10 мин потоком нейтронов 10 н/см . с, выдерживают 5 мин после облучения и фиксируют распределение радиоактивности вдоль хроматограммы с помо-лцью -спектрометрии, авторадиографии или путем сканирования. Эта [c.149]

Метод хроматографии иа бумаге используют для предварительного отделения марганца от урана при анализе последнего [771, 1299, 1гОО]. Так, при определении марганца и других примесей (Ср, Ni, Со, Си, d, Mo, Fe, Na и Au) в уране, используемом в реакторах [13001, производят отделение урана на бумаге Шлейхер — Шюлль 20 43А с помощью безводного диэтилового эфира, содержащего 5 объемн.% HNOg. Участок хроматограммы, содержащий примеси, затем облучают и производят дальнейшее разделение прпмесей с помощью бумажной хроматографии восходящим способом, используя смесь этанола, НС1 и HjO (75 20 5). Активность измеряют на у-спектрометре с кристаллом NaJ(Tl) и 128-канальном анализаторе импульсов. Аналогичный метод используют при анализе горных пород [911, 912], В активационном анализе очень часто применяют метод экстракции как самый простой и быстрый метод выделения и отделения элементов. С помощью метода экстракции произведено, например, отделение и очистка Мп с последующим у-спектрометрическим определением его в алюминии, сталях [835], уране [1205], биологических объектах [182, 649, 904, 1306], нефти [904], органических материалах [1451], трихлорметил-силане [142] (см. табл. 16). Отделение и очистку марганца проводят методами хроматографии в сочетании с экстракцией при анализах солей цинка [1319], бора [175], галлия [175] и горных пород 11317, 1386]. [c.91]

Отделение 8Ь методами бумажной хроматографии часто сочетается с ее непосредственным качественным обнаружением па полученных хроматограммах (см. главу III), а также с количественным ее определением по площади окрашенных пятен, получаемых после обработки хроматограмм подходящими реагентами. Среди этих реагентов используются Н28, растворы Ре8 в соляной кислоте 467, 1168], растворы КТ [1419, 1589], дитизона в СНС1з [887, 1519, 1589], 12-молибдофосфорной кислоты [1455]. Для обнаружения 8Ь(У) на хроматограммах эффективным реагентом является смесь (1 1) 0,05%-ного раствора родамина С в 2—6 НС1 и 20%-пого раствора КВг [1337]. Интересным оказалось сочетание разделения методом бумажной хроматографии в активационном анализе с последующим определением злементов в зонах по их активности [922]. [c.114]

Бумажная хроматография находит применение при анализе смолистых и асфальтовых веществ. Перед проведением анализа фильтровальную бумагу обрабатывают в течение 6 ч спирто-бензольной смесью в аппарате Сокслета для удаления возможных люминесцирующих веществ. После этого полоски бумаги шириной 1 см и длиной 15—20 см погружают в 5 лл 0,001 %-ного раствора исследуемых веществ (например нефтяных смол) в спирто-бензольной смеси. В таком положении образцы оставляют на 12—14 ч, в течение которых на бумаге образуется хроматограмма, а растворитель улетучивается. Бумагу облучают ультрафиолетовым светом и фотографируют на цветную нленку. Подобным способом С. Р. Сергиенко, Ю. А. Бедов, М. П. Тетерина и др. [76] изучали смолистые вещества, выделенные из ромашкинской нефти. [c.61]

ТСХ). В некоторых применениях хроматографии в неорганическом анализе успешно нспользуют полярную подвижную фазу, в качестве которой может служить анализируемый водный раствор или водный элюент. В этом случае менее полярная жидкость, являющаяся неподвижной фазой, удерживается а неполярном (гидрофобном) носителе. Такой процесс типичен для хроматографии с обращенной фазой (известной также под названием экстракционной хроматографии). В распределительной хроматографии органический реагент может использоваться двумя различными способами либо для превращения разделяемых ионов в комплексные соединения, которые затем распределяются между двумя фазами, либо для обнаружения или определения in situ, т. е. непосредственно на бумажной или тонкослойной хроматограмме. Выбор реагента для inepBOiro из этих случаев опирается на соображения, изложенные в разделе, посвященном экстракции, а для второго случая он основывается яа тех же принципах, которые используются при проведении цветной или флуоресцентной пробы и (или) определения. [c.235]

Идентификация компонентов основана на том, что их положение на хроматограмме при данных условиях постоянно и может быть установлено предварительными опытами. Таким путем удалось идентифицировать не только все содержащиеся в природных смесях, белковых гидролизатах и т. д. известные аминокислоты, но и обнаружить ряд новых. Бумажная хроматография применена с успехом также к анализу сахаров, пуринов и пири-мвдинов, антибиотиков и т. д. Методика применима и для количественного микроанализа Для этого отдельные пятна экстрагируются, и экстракт анализ нруетч я колориметрическим или [c.219]

Своеобразна техника применения бумажной хроматографии к анализу антибиотиков [404]. Проявленную хроматограмму накладывают на стеклянную пластинку, покрытую питательным слоем, зараженным спорами бактерий. После необходимой экспозиции в термостате слой делается мутным от развившихся бактерий прозрачные зоны соответствуют разделившимся активным ко1мпонентам. [c.220]

Детектирование веществ на хроматограмме. Детектирование веществ, разделенных в тонком слое, проводят как реагентами, используемыми в бумажной хроматографии, так и специфическими, применение которых возможно только в условиях работы в тонком слое. К таковым следует отнести обработку концентрированной серной кислотой ее смесью с азотной и фосфорной кислотами путем опрыскивания пластинки и последующего нагревания в течение 10—15 минут при 80— 120°. Заслуживает внимания применение для этой цели 10% раствора H2SO4 с последующим нагреванием до 250° в течение 15—20 минут [172], так как при этом получают воспроизводимые результаты. Метод может быть использован для полуколичественного и количественного анализа. [c.43]

Бумажная хроматография неоценима при определении строения красителей. Ее главное назначение — идентификация продуктов деградации, например после восстановительного расщепления и гидролиза при помощи соляной кислоты. Кроме того, для определения строения красителя можно использовать результаты хроматографического анализа (аддитивные значения А- м). Идентифицированы при помощи БХ продукты расщепления красителей, извлеченных с текстильных волокон [120]. БХ применялась также для идентификации продуктов деградации красителей [14, 121]. Эти методы приспособлены для азокрасителей (комплексы с металлами, активные красители и азопигменты) [43, 5] метод идентификации продуктов деградации настолько усоверщенствован, что все реакции идентификации можно проводить после разделения продуктов деградации непосредственно на хроматограмме, т. е. устранен сложный процесс выделения продуктов, необходимый при анализе строения классическими методами. [c.97]

Из ряда методов бумажной хроматографии, используемых для определения в сточных водах и технических продуктах концентрации одноатомных фенолов, наилучшим в настоящее время нам представляется метод Гудечека. Преимущество его заключается в том, что потери от испарения ликвидируются при проявлении хроматограммы между двумя стеклянными пластинками. В этом методе растворителем является смесь циклогексана, хлороформа и этанола в отношении 27 3 0,6. Проявление производится реактивом Паули. Для разделения фенолов методом газовой хроматографии Янак с сотрудниками испытал ряд материалов, которые могли служить стационарной фазой. Наилучшим оказался апьезон Л. При его применении можно в течение весьма короткого вермени (15 мин.) провести анализ фенольной смеси и определить содержание в ней фенола, группы крезолов и группы ксиленолов. Для более тщательного разделения необходимо в качестве стационарной фазы применять эритрит или сорбит. [c.345]

Для подтверждения высказанных предположений были проведены необходимые анализы с применением метода бумажной хроматографии [1 ]. На рис. 3 представлены хроматограммы расплавов, полученных при окислении Р0С1з без продувки расплава воздухом (а), а также с последующей продувкой (б). [c.156]

Фалк и сотр. [71, 72] сообщили, что с помощью бумажной хроматографии в диоксане можно разделить метиловые эфиры уропорфирина I (11.6) и III (11.1). Однако этот вывод, основанный на том, что на хроматограмме обнаруживаются две четкие зоны, был опровергнут Богорадом и Марксом [73], которые с помощью радиоактивно меченных порфиринов показали, что в действительности каждая из этих зон содержит оба изомера уропорфирина. В результате дальнейших исследований, предпринятых в работах [74, 75], удалось найти такие условия бумажной хроматографии, которые позволяют оценивать относительное содержание уропорфиринов I и III в смеси, однако в силу чрезвычайной трудоемкости этот метод количественного анализа не нашел широкого применения и к настоящему времени вытеснен предложенным Боммером и др. [27] методом ВЭЖХ (разд. 11.3.1.1.3). [c.218]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология