Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Высокоэффективная жидкостная хроматография ВЖХ количественное определени

    Количественное определение. Проводят определение, как описано в дополнениях к тому 1 в разделе Высокоэффективная жидкостная хроматография , используя колонку высотой 10 см и внутренним диаметром 6 мм, заполненную частицами силикагеля по 5 мкм в диаметре, поверхность которых предварительно модифицирована химически связанными октадецилсилильными группами. [c.202]


    Анализ. Методы анализа белковых макромолекул селективны и осуществляются в зависимости от того, какая структура является объектом исследования, и начинаются с определения аминокислотного состава. Для этого необходимо провести полный гидролиз пептидных связей и получить смесь, состоящую из отдельных аминокислот. Гидролиз проводят при помощи 6 М соляной кислоты при кипячении в течение 24 ч. Так как для гидролиза пептидных связей изолейцина и валина этого может быть недостаточно, проводят контрольный 48- и 72-часовой гидролиз. Некоторые аминокислоты, например триптофан, при кислотном гидролизе разрушаются, поэтому для их идентификации используют гидролиз при помощи метансульфоновой кислоты в присутствии триптамина. Для определения цистеина белок окисляют надмуравьиной кислотой, при этом цистеин превращается в цистеиновую кислоту, которую затем анализируют. Вьщеление и идентификацию аминокислот проводят при помощи аминокислотных анализаторов, принцип действия которых основан на хроматографическом разделении белкового гидролизата на сульфополистирольных катионитах, В основе количественного определения той или иной аминокислоты лежит цветная реакция с нингидрином, однако более перспективным следует считать метод, при котором аминокислоты модифицируют в производные, поглощающие свет в видимом диапазоне. Разделение смеси аминокислот проводят при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии, а само определение — спектрофотометрически. Следующим этапом является определение концевых аминных и карбоксильных [c.40]

    Высокоэффективная жидкостная хроматография. . . Работа 42. Разделение и количественное определение следовых количеств [c.207]

    По.мимо указанных выше методик, газохроматографический анализ также успешно используется для количественного определения влаги [16] однако этот метод предпочитают для селективного определения других примесей. Бумажная, тонкослойная, а в последнее время и высокоэффективная жидкостная хроматография тоже применяется для анализа растворителей на содержание загрязнений. Но все же, как правило, эти методы используют только для определения (качественного или количественного) каких-то особых загрязнений. Чаще всего, однако, достаточно определить какие-либо характерные и чувствительные к данной примеси физические свойства предварительно тщательно очищенной системы растворителей. [c.238]

    При использовании методов расчета, аналогичных описанным в разделе Газовая хроматография , методика высокого давления дает возможность получать более точные результаты и поэтому чрезвычайно удобна для количественных определений. Эта методика требует мало времени и используется для осуществления многих высокоэффективных разделений, однако для ее применения нужны специальные приборы и во многих случаях дорогостоящие материалы для заполнения колонок. Потенциальное преимущество этой методики перед газовой хроматографией состоит в том, что летучесть п термостабильность, факторы столь важные для последней, не имеют никакого значения для жидкостной хроматографии. К ее недостаткам в настоящее время относится отсутствие универсальной детекторной системы. [c.421]


    Высокоэффективная жидкостная хроматография в нормальнофазовом варианте (полярный сорбент — неполярный элюент) рекомендуется для разделения изомеров. Изомеры имеют различное время удерживания на силикагеле благодаря разному расположению полярных групп. Идентификацию пиков на хроматограмме проводят методом добавок индивидуальных изомеров. Количественное определение одного из изомеров проводят методом абсолютной калибровки. [c.206]

    В последние годы для определения витаминов в пищевых продуктах с успехом стали использовать метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Этот метод является наиболее перспективным, так как позволяет одновременно разделять, идентифицировать и количественно определять различные витамины и их биологически активйые формы. ВЭЖХ значительно сокращает время проведения анализа и, по-видимому, постепенно будет вытеснять трудоемкие и длительные методы анализа. [c.290]

    Методы газовой хроматографии (ГХ) и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) позволяют за короткое время проводить разделение, идентификацию и количественное определение состава сложных смесей. Благодаря сочетанию высокоэффективных разделительных систем с чувствительными, селективными и специфическими детекторами, такими, например, как диодноматричный детектор (ДМД) в видимой и УФ-областях спектра, масс-спектрометрия и ИК-фурье-спектроскопия (ИКФС) удается надежно идентифицировать отдельные вещества. Приборное оформление этих методов настолько хорошо развито, что почти всегда удается автоматизировать проведение хроматографических анализов. [c.5]

    Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) в настоящее время является основным методом количественного определения в USP XXIII, широко применяется в ВР 1993, DAB 10 и, в пер спективе, может вытеснить все остальные методы анализа. [c.476]

    В высокоэффективной жидкостной хроматографии необходим детектор для регистрации результатов разделения. Поэтому при разработке методик с использованием ВЭЖХ, особенно экспресс-методик дпя рутинного анализа, приходится искать способы калибровки детектора, позволяющие проводить количественные расчеты с использованием хроматограммы. В упоминавшейся уже методике [26] группового анализа бензинов с вьщелением насыщенных углеводородов, олефинов и ароматических соединений для регистрации результатов разделения используют дифференциальный рефрактометр. Поскольку показатель преломления моноароматических углеводородов относительно постоянен дпя алкилбензолов Сб—С12, количество ароматических углеводородов определяют непосредственно из площади пика хроматограммы. Показатели преломления Л насьпценных углеводородов и олефинов в значительной степени зависят от их структуры и молекулярной массы, что исключает возможность прямого определения содержания этих групп из хроматограммы. Оказалось, однако, что отношение ЛЯ олефинов и насыщенных посто.тано и равно 1,10 (ЛЛ равно разности показателей преломления соответствующей группы и растворителя). Это обстоятельство позволило рассчитьтать содержание всех групп при анализе разных бензинов по одним и тем же формулам и коэффициентам. [c.62]

    В основе распределительной хроматографии лежит обмен хроматографируемым веществом между двумя фазами — подвижной и неподвижной, основанный на непрерывности в этих фазах. Разделение смеси веществ достигается за счет различия в коэффициентах распределения этих веществ между двумя несмешивающи-мися растворителями (жидкостно-жидкостная хроматография) или газом и жидкостью (газожидкостная хроматография). Неподвижной фазой в этом варианте хроматографии является пленка жидкости, нанесенная на поверхность гранул сорбента. Использование этого варианта хроматографии позволяет значительно расширить возможности разделения веществ, близких по строению и свойстаам, так как для каждой разделяемой смеси возможен подбор той неподвижной жидкой фазы, которая обеспечит наибольшую полноту разделения в данном конкретном случае. Выбор подвижной фазы (элюента) тоже очень важен. Имено к этому варианту хроматографического разделения относится метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), все более широко используемый в фармацевтическом анализе. ВЭЖХ применяют для разделения и количественного определения близких по хи- [c.209]

    Хроматографические способы анализа различных противотуберкулезных средств и их метаболитов предусматривают использование, в основном, методов высокоэффективной жидкостной хроматографии [37, 43, 47, 48, 53, 55, 58]. Разработай способ количественного определения пиразинамида в сыворотке крови высокоэффективной жидкостной хроматографией с расчетом содержания препарата по хроматограмме [28]. Широко применяется методика для экспрессного метода определения концентрации пиразинамида в плазме крови, используемого в комбинации с рифампицином. В качестве элюента применяют смесь бензол—спирт. Детектирование осуществляют по поглощению при 269 нм. Этот метод надежен в диапазоне концентраций пиразинамида 1—50 мг/л [44]. [c.359]


    Методика количественного химического анализа. Определение содержания производньк фурана в электроизоляциоиньк маслах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. РД 34.43.206-97. [c.108]

    При разработке технологий получения препарата Бромезида, в качестве критериев, определяющих диагностическое качество этого РФП, были выбраны скорость образования и выход комплекса " Тс-бромезида. С целью их определения были разработаны два метода количественного анализа радиохимического состава растворов с применением высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) и электрофореза (ЭФ) [53]. [c.410]

    Оценка результатов хроматографического разделения путем анализа отдельных фракций — процедура относительно медленная, однако очень часто только таким методом можно получить важную специфическую информацию, а если анализируются радиоактивные материалы, то и повысить чувствительность обнаружения, Чаще всего используется автоматическая регистрация процесса разделения детектором, дающим на выходе электрический сигнал, интенсивность которого пропорциональна концентрации анализируемого соединения. Этим же методом можно провести количественное определение. Обнаружение соединений в жидкостной хроматографии проводится различными способами. Мнопие детекторы оценивают различие в характеристике анализируемого соединения и элюента. В частности, этот принцип положен в основу спектрофотометрического детектирования в ультрафиолетовой, видимой и инфракрасной областях. Детекторы неселективного действия измеряют показатели преломления, проводимость или диэлектрическую проницаемость при тщательной температурной компенсации рабочей ячейки и ячейки сравнения. В некоторых типах детекторов растворитель перед вводом соединения в регистрирующий блок удаляется (например, пламенно-ионизационный детектор с подвижной нагреваемой лентой). Конструкция спектрофотометрических детекторов для высокоэффективной жидкостной хроматографии (особенно ультрафиолетового абсорбционного и рефрактометрического детекторов) хорошо разработана. Если для работы с одной колонкой объединяют два детектора, то сначала устанавливают УФ-детектор, а затем рефрактометрический детектор. [c.67]

    Для определения стабилизаторов используется и колоночная жидкостная хроматография. С 1970-х годов, когда технология получения сорбентов достигла высокого уровня, в основном применяется метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), который позволяет быстро и с высокой точностью проводить количественное определение стабилизаторов. В 4—5 раз можно сократить длительность анализа при улучшении эффективности хроматографического разделения, используя мелкодисперсные набивки (3—5 нм) для колонок и малоинерционные детекторы при увеличении скорости потока подвижной фазы до 2—5 мл/мин. Более высокая чувствительность ВЭЖХ исключает в ряде случаев необходимость предварительного концентрирования экстрактов. [c.248]

    Даиные анализов смесей, получевные при иопользо-вании колоночной хроматографии, ранее трудно поддавались количественной обработке. В настоящее время высокоэффективная жидкостная хроматография, применяемая в сочетании с автоматическими устройствами, которые позволяют производить измерение и расчет методами, разработанными для газовой хроматографии, представляет собой аналитический метод высокой точности. Точность определения количественного состава при использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии сравнима с точностью, получаемой при использовании газовой хроматографии. [c.174]

    Анализ, основанный на изучении и сравнении метиловых эфиров жирных кислот (МЭЖК), входящих в состав липидов, получил широкое распространение вследствие его простоты и доступности. Полный,процесс идентификации включает эстерификацию липидов, метилирование входящих в их состав жирных кислот, их разделение на хроматографических колонках и количественное определение с помощью газовой хроматографии или высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Специальным образом обработанные колонки дают хорошее разрешение МЭЖК, что позволяет сравнивать их время удерживания с ранее идентифицированными липидными профилями (стандарты). Количество каждой жирной кислоты может быть рассчитано по площади хроматографического пика, а абсолютные концентрации определяют, вводя внутренний стандарт. [c.255]

    Интегральную интенсивность флуоресценции хроматографических пятен на тонкослойных пластинках можно оценить с помощью сканирующего флуориметра. Такой метод полуколичест-венного анализа используют, в частности, в клинической практике для обнаружения природных порфиринов [6]. Задача количественного определения тетрапирролов значительно упростилась в связи с появлением метода высокоэффективной жидкостной хроматографии, который можно легко приспособить для анализа любой из описанных ниже хроматографических систем. Так, с помощью детектора, работающего в режиме измерения поглощения при фиксированной длине волны или сканирования по всем длинам волн видимой области спектра, можно определить нанограммовые количества порфиринов [7], а с помощью проточного флуориметра — до 30 пг [8]. [c.205]

    Развитие аналитических методов обнаружения и количественного определения имело решающее значение для выявления витамина С в природе й изучения его стабильности. Применявшиеся первоначально биологические методы постепенно были вытеснены химическими вследствие простоты, большей чувствительности, селективности и воспроизводимости последних. Многие успешно используемые сегодня методы анализа основаны на применении высокоэффективной жидкостной хроматографии. Однако возможности этих методов применения ограничены относительно низкой чувствительность обнаружения дегидроаскорбиновой кислоты в присутствии г сюкорбиновой кислоты, что значительно затрудняет количественное определение дегидроаскорбиновой кислоты в животных и растительных тканях. Ситуация аналогична и в случае продуктов дальнейшего окисления. Поэтому существует настоятельная необходимость в совершенствовании методов обнаружения этих соединений, что позволило бы изучать механизм и кинетику окисления ь-аскорбиновой кислоты в овощах и фруктах, определяя количество всех продуктов окисления. [c.10]

    Тонкослойная хроматография (ТСХ английское TL ) и предшествовавший ей метод хродгатографии на бумаге до середины 70-х годов занимали центральное место в исследованиях структуры белков и нуклеиновых кислот. В последнее десятилетие эти методы были явно оттеснены электрофорезом и высокоэффективной жидкостной колоночной хроматографией при высоком давлении. Оба метода превосходят ТСХ но разрешающей способности, а второй из них — и по скорости анализа. Кроме того, в результате ЖХВД экспериментатор получает уже разделенные жидкие фракции исходного препарата, в то время как после ТСХ ему надо еш,е локализовать пятна на пластинке, а в случае необходимости дальнейшего анализа — выполнить длительные операции элюции из них веш,ества. Точное и проводимое в ходе самого фракционирования определение микроколичеств вещества во фракциях прп ЖХВД, которое позволяют осуществить высокочувствительные детекторы и интегрирующие устройства современных жидкостных хроматографов, оставляет далеко позади соответствующие возможности ТСХ — ввиду плохой воспроизводимости процессов элюции из пятен и высокого уровня фона или самопоглощения в слое носителя при использовании оптических, флюоресцентных и радиоактивных методов оценки количества вещества в пятнах на пластинке без его элюции. Наконец, в препаративном варианте фракционирования количественные возможности ТСХ на несколько порядков меньше, чем у обычной колоночной хроматографии и даже у электрофореза. [c.457]

    Характеристика данных продуктов для количественной оценки содержания гидроксиалкансульфонатов включает определение анионных ПАВ и гидроксильного числа. Негидролизованные сультоны удаляются методом колоночной хроматографии, и в последствии анализируются методом высокоэффективной жидкостной [20] или газовой [21] хроматографии. Количество несульфированных соединений (углеводороды), как правило, определяется гравиметрически или хроматографически после их экстракции четыреххлористым углеродом, петролейным эфиром или гексаном. И вновь хлорированные растворители ограничивают применимость этих методов и требуют определенных условий их использования. Чтобы избежать потери низкомолекулярных олефинов при выпаривании растворителя, необходимо быть чрезвычайно аккуратным. [c.126]

    Ионная хроматография. В настоящее время под ионной хроматографией (ИХ) подразумевают высокоэффективную ионообменную жидкостную хроматографию, целью которой является количественное определение ионов. Необходимость количественного определения, прямо связанная с обеспечением высокой чувствительности кондуктометрического детектирования, накладывает определенные требования на условия разделения ионов. В первую очередь — это использование по возможности разбавленных элюентов, обеспечивающих низкий уровень электропроводности, на фоне которой происходит детектирование разделяемых ионов. Соответственно, применяемые в ИХ ионообменники должны иметь невысокую ионообменную емкость, обычно от 10 до 100 мкэкв/г. Среди других требований можно отметить необходимость высокой механической прочности и гидролитической устойчивости, однородность распределения функциональных групп в зерне сорбента. Синтез таких ионообмеников представляет непростую задачу, поэтому ассортимент выпускаемых сорбентов для ИХ весьма ограничен, стоимость их высока (цена готовой колонки примерно 600 долл. США). По этой причине компании, выпускающие сорбенты для ИХ, предоставляют весьма ограниченную информацию о структурных и других характеристиках ионообменников и для этого варианта хроматографии поставляют, как правило, только готовые колонки. В табл. 8.4 представлены характеристики сорбентов на основе силикагеля, используемых в ионной хроматографии. [c.417]

Смотреть страницы где упоминается термин Высокоэффективная жидкостная хроматография ВЖХ количественное определени: [c.430]    [c.230]    [c.10]   
Иммунологические методы исследований (1988) -- [ c.123 , c.128 , c.137 , c.149 ]



ПОИСК





Смотрите так же термины и статьи:

Высокоэффективная жидкостная

Высокоэффективная жидкостная хроматография

Жидкостная хроматография хроматографы

Хроматография высокоэффективная

Хроматография жидкостная

Хроматография жидкостно-жидкостная

Хроматография количественная

Хроматография определение

Хроматография определение жидкостная

Хроматография определение жидкостно-жидкостная

Хроматографы жидкостные



© 2025 chem21.info Реклама на сайте