Методы внутренней локализации

Методы внутренней локализации [c.81]

Критерии, используемые в методах внутренней локализации, подразделяются на пространственные и энергетические. В первом случае хорошо локализованными считаются два электрона на двух различных орбиталях, находящихся на возможно большем расстоянии друг от друга, а во втором — два электрона, взаимодействие между которыми характеризуется наименьшей величиной. Обычно создание этих методов связывают с именами Бойса и Рюденберга, несмотря на то что существуют и используются различные варианты, предложенные другими авторами. [c.81]

Интерполяционный метод двойного внутреннего стандарта обеспечивает улучшение воспроизводимости результатов и предусматривает введение в пробу индивидуальных веществ, которые должны элюировать до и после определяемых компонентов [107]. В зависимости от локализации пика г-го компонента на хроматограмме влияние образцов сравнения будет неодинаковым. [c.412]

Для исследования локализации интегральных белков в мембране используются различные методы [И]. Среди них наиболее предпочтительными благодаря своей селективности являются ферментативные. С помощью протеаз, например, если действовать ими сначала на наружную, а затем на внутреннюю поверхности мембраны, можно определить, различна ли структура и функция белка на разных сторонах бислоя. Было показано, в частности, что при перфузии аксона проназой, мишенью действия фермента оказались белки, участвующие в инактивации натриевого канала, и, следовательно, они должны быть размещены на внутренней стороне мембраны. Если же проназой действовали извне, то на инактивацию натриевого канала она почти не влияла (гл. 6). [c.77]

Третье направление — установление зависимости свойств твердых фаз от их состава и структуры. Исследование корреляции между составом и строением твердых тел, с одной стороны, и их свойствами — с другой, осуществляется путем использования комплекса физических и химических методов определения газов в металлах. При этом, наряду с задачей определения валового содержания того или иного газообразующего элемента, возникает и задача их раздельного определения в разных формах нахождения. Химическая форма и место локализации в металле газовой примеси могут быть различны. Газ может находиться в кристаллической решетке металла в виде раствора внедрения или замещения (в атомном или ионном состоянии) может быть связан в химические соединения (гидриды, нитриды, оксиды и т.д.) как с основным элементом исследуемого материала, так и с различными случайными примесями или легирующими добавками может быть сорбирован на поверхностях металла (как наружных, так и внутренних) в виде атомов, молекул или химических соединений может быть зажат под большим давлением в пузырьковых дефектах внутри металла в состоянии молекулярного газа может находиться в составе случайных загрязнений поверхности металла, возникающих в результате небрежного их хранения (влага, тонкие пленки нефтепродуктов и пр.). Совокупность методов определения газов в металлах может быть представлена несколькими основными группами. [c.931]

Подавляющее большинство методов квантовой химии опирается на валентное приближение. Дело в том, что между валентными и внутренними (остовными) электронами атомов существуют различия как но орбитальной энергии, так и по пространственной локализации. В образовании химической связи играют роль только Самые верхние заполненные электронами АО и, в некоторой мере, также вакантные АО. Это позволяет упростить расчет, решая уравнение ССП лишь для валентных электронов. Внутренние электроны атомов рассматриваются как неполяризуемые остовы, а взаимодействие между валентными и остовными электронами молекулы описывается приближенными способами [20]. В рамках валентного приближения уравнения ССП МО ЛКАО (11.13) сохраняют свой смысл с тем изменением, что при вычислении матричных элементов крд в качестве к следует использовать оператор [c.32]

Высокая каталитическая активность, регулярная структура и способность к ионному обмену делают цеолиты уникальными объектами для изучения гетерогенного катализа. После переведения в соответствующие формы путем ионного обмена эти кристаллические алюмосиликаты по своей активности и селективности становятся значительно более эффективными катализаторами, чем аморфные алюмо-силика.ты Ц], хотя такую закономерность и нельзя распространять на все реакции [2]. Цеолиты являются кристаллическими веществами с развитой пористостью, поэтому их внутренняя поверхность определяется системой пор, которая регулярно повторяется в трехмерном пространстве. В этом отношении цеолиты выгодно отличаются от большинства других гетерогенных катализаторов, в том числе и кристаллических, где активные центры расположены главным образом на внешних гранях или в дефектных узлах решетки. Таким образом, данные, полученные рентгеноструктурным анализом или каким-либо спектроскопическим методом, в принципе можно использовать для определения структурных особенностей каталитически активных центров. (В действительности, однако, такие попытки успехом не увенчались [3], потому что методы рентгеновского анализа оказались слишком малочувствительными, чтобы можно было выявить локализацию активных центров.) Разнообразие каталитических свойств цеолитов объясняется прежде всего тем, что существует несколько различных типов кристаллических. каркасов и что методами регулируемого ионного обмена структурные особенности каркасов можно модифицировать. Для выяснения механизмов реакций особое значение имеет тот факт, что изменение структуры цеолитов непосредственно отражается на каталитических свойствах. [c.5]

По нашему мнению, нет оснований придавать особый смысл процессу внутренней релокализации. Как будет отмечено в разд. 1.4, результаты, к которым приводят методы внешней или внутренней локализации, в целом аналогичны. Более того, иногда внутренней локализации должна предшествовать внешняя для того, чтобы получить химически. значимый результат, как, например, в случае производных бензола при проектировании одной предельной кекулевской формулы [42]. [c.83]

Ферменты локализованы во всех компартментах клеток. Ядерные ферменты катализируют синтез информационных макромолекул, а также процессы их созревания, функционирования и распада. В митохондриях действуют ферменты энергетического обмена, в аппарате Гольджи — ферменты, катализирующие созревание белков, в лизосомах — гидролитические ферменты. Значительное число ферментов ассоциировано с внешней и внутренними мембранами. Так, ферменты, защищающие клетку от действия чужеродных химических веществ, локализованы в эндоплазматическом рети1сулуме. Распределение ферментов в клетках определяют методом дифференциального центрифугирования гомогената тканей. Локализация некоторых ферментов идентифицирована гистохимическими методами in situ. Для этого при помощи микротома получают срезы ткани и обрабатывают их раствором субстрата. Идентификация продуктов ферментативной реакции облегчена, если последние окрашены. [c.65]

В ряде других случаев, наоборот, требуется ускорение процессов пропитывания, например при варке древесины, когда процесс в значительной степени лимитируется скоростью пропитывания ее варочной жидкостью. Этот вопрос играет особую роль в связи с методом высокотемпературной варки сульфитной целлюлозы, предложенным проф. Л. П. Жере-бовым. При этом период заварки исключается, процесс же пропитывания должен быть весьма интенсивным и проводиться всегда в максимально короткий срок при температуре, которая еще не вызывает заметную кислотную конденсацию лигнина. В данном случае технология глубокой пропитки щепы растворами активных реагентов в основном решает успех варочного процесса при высокой температуре. Неоднородность строения древесной ткани и характер локализации лигнина и других спутников целлюлозы в клетках древесины весьма усложняют вопрос о том, в какой мере возможно свести к минимуму неблагоприятное влияние гетерогенности структуры древесины при использовании метода ускоренной варки. С помощью тех способов пропитывания древесины, которые обычно используются на производстве в процессе сульфитной варки, очень трудно быстро подвести все необходимое количество основания и ЗОг к внутренним областям клеточных стенок и к наиболее лигнифицированным первичным оболочкам трахеид. Учет природных факторов выдвигает задачу специального исследования условий предварительного пропитывания, определяющего в значительной степени скорость процесса варки. [c.362]

Подведем итоги анализа локализуемости волновых функций. Этим способом было подтверждено, что удачно определенные локализованные орбитали хорошо описывают электроны внутренних оболочек, неподеленные электронные пары и двухцентровые связи. Локализованные функции характеризуются значительной устойчивостью (трансферабельностью) при переходе между разными (в известном смысле родственными) молекулами. Кроме того, характер гибридизации атомных орбиталей, который влияет на локализованные функции, коррелирует с положением атома в периодической системе. Применение анализа локализуемости орбиталей к волновым функциям электронодефицитных молекул количественно подтвердило существование трехцентровых двухэлектронных связей ВНВ и ВВВ в боргнд-ридах. Интересным оказалось применение метода локализованных орбиталей к я-электронной системе обоих изомеров бутадиена [12]. Для двухцентровой я-связи i—Сг число заполнения равно й=1,96, т. е. меньше, чем число заполнения для ог-орбитали, но разность этих значений не настолько велика, чтобы можно было рассматривать степень локализации как принципиальный фактор, позволяющий провести различие между я- и а-системами. Намного меньше числа заполнения для орбиталей связей Сг—Сз и i—С4, и самое небольшое число заполнения имеет связь i—С3 последний факт согласуется с теоремой Румера, согласно которой из валентных схем следует исключать те, которые соответствуют пересечению связей. [c.306]

Методика определения остаточных количеств хлорорганических пестицидов тонкослойной хроматографией. Основные положения. Настоящие методические указания распространяются на определение содержания ДДТ, ДДЭ, ДДД, гексахлорана, альдрина, кельтана, гептахлора, метоксихлора, дактала, тедиона и эфирсульфоната в воде, почве, вине, овощах, фруктах, грибах, зерне, комбикормах, корнеклубнеплодах и зеленых кормах, рыбе, мясе, мясопродуктах, внутренних органах, молоке и молочных продуктах, животном жире, сливочном и растительных маслах, жмыхах, шротах, лузге, меде, сахаре, яйцах и яйцепродуктах, а также в табачных изделиях.. Принцип метода. Метод основан на хроматографии хлорсодержащих пестицидов в тонком слое окиси алюминия, силикагеля или пластинок Силуфол в различных системах подвижных растворителей после экстракции их из исследуемых образцов и очистке экстрактов. Подвижным растворителем служит гексан или гексан в смеси с ацетоном. Места локализации препаратов обнаруживают после опрыскивания пластинок раствором аммиаката серебра с последующим ультрафиолетовым облучением или после облучения ультрафиолетовым светом пластинок Силуфол , содержащих о-толидин. [c.37]

Методика определения бетанала в тканях внутренних органов теплокровных, крови, моче тонкослойной хроматографией. Основные положения. Принцип метода. Метод основан на извлечении препарата из исследуемой пробы органическим растворителем, концентрировании его и хроматографировании в тонком слое окиси алюминия. Подвижная фаза — смесь хлороформа и этилового спирта (20 1). Зоны локализации пестицида обнаруживают по реакции взаимодействия с диазотирован-ной сульфаниловой кислотой, либо с /г-диметиламинобензальдегидом, либо с 4-аминоантипирином в присутствии окислителя надсернокислого аммония. [c.148]

Недавно опубликованная работа [75] показала, что для исследования привитых и блок-сополимеров окисей пропилена и этилена целесообразнее использовать метод изменения температуры. Растворимость этого класса соединений в воде в отличие от обычно наблюдаемой уменьшается с увеличением температуры, так что осаждение происходит выше критической точки. При концентрации 1,4 жг/100 мл кривые изменения мутности лежат между примерно 10 и 90°. Образовавшиеся осадки абсолютно устойчивы и полученные при понижении и повышении температуры кривые мутности очень хорошо соответствовали друг другу, если скорость изменения температуры не превышала 1 град/мин. Присутствие в системе окиси этилена вызывает смещение кривых изменения мутности в сторону более высоких температур. При этом играет роль не только общее количество окиси этилена, но также и раснолол е-ние этих звеньев внутри молекулы. Локализация звеньев окиси этилена во внутренних участках макромолекул увеличивает растворимость образца в большей степени, чем расположение этих звеньев на концах цепей. [c.211]

Квантовохимические расчеты на разных уровнях используются широко для идентификации полос в ФЭС. Часто такая интерпретация является единственно возможной по отношению внутренних МО. При этом и такая интерпретация неоднозначна, так как различные методы расчета приводят нередко к резко отличающимся друг от друга результатам как по отнсшению энергетической последовательности, так и характера локализации МО. Дело в том, что хотя МО по существу делокализованы, можно во многих случаях выделить довольно обоснованно характер [c.69]

Отсюда ясно, что различные части белковой структуры участвуют в быстрых спонтанных движениях, отличающихся друг от друга по ряду параметров. Увидеть эти быстрые внутренние движения, измерить их характерные времена, определить места локализации в белковой глобуле стало возможным главным образом благодаря внедрению современных физических методов. Среди них решаюшую роль в исследовании динамики белка сыграли резонансные методы радиоспектроскопии (электронный парамагнитный, ядерный магнитный резонансы, ядерный гамма-резонанс), методы люминесценции, водородного обмена. Полная картина динамики [c.263]

Тени эритроцитов, полученные путем гипоосмотического гемолиза и отмытые от гемоглобина в изотоническом буфере, содержат около 50 % белков, 43 % липидов и 7 % углеводов. Белковые компоненты мембраны были идентифицированы методом электрофореза в ПААГ в присутствии додецилсульфата натрия. В соответствии с локализацией их подразделяют на периферические и интегральные (см. главу 1). Периферические белки расположены на поверхности мембраны и им соответствуют полипептидные полосы 1, 2, 4, 5 и 6. Интегральные белки погружены в липидный бислой и в некоторых случаях пронизывают его. Основным интегральным белком является белок полосы 3, осуществляющий транспорт анионов через мембрану. Его М-конец находится с цитоплазматической стороны, а С-конец погружен в бислой с наружной стороны мембраны. Периферические белки взаимодействуют друг с другом, образуя двумерный каркас, выстилающий внутреннюю поверхность эритроцитарной мембраны, который называют мембранным скелетом. Он содер- [c.230]

Успешное изучение мембран стало возможным лишь с применением метода замораживания—скалывания. При этом обнаружилось, что распределение белковых частиц обусловливает внутреннюю структуру мембран, которая от скалывания замороженного при — 100°С препарата хлоропластов расщепляется вдоль срединного неполярного слоя липидов. В результате такого расщепления видно два слоя, являющихся как бы зеркальным отражением один другого. На. рисунке 10 представлено три типа поверхности наружная, внутренняя и поверхность расщепления, возникшая путем сублимации льда сверху и снизу мембраны. Изображена локализация белковых частиц в мемб- [c.28]

В большинстве случаев эффективное использование техники гетерояуплексного картирования, которую мы только что описали, требует аккуратного измерения длин одно- и двухцепочечных участков ДНК. Измерение расстояния между различными петлями или особенностями гибридов позволяет построить физическую карту ДНК. Если генетическое значение делеции или локализация отдельных генов известны, физическая карта может быть использована для построения генетической карты. Метод является особенно мощным потому, что он позволяет локализовать гены, используя лишь выделенные транскрипты РНК, даже когда не удается обнаружить мутантные фенотипы. В принципе он позволяет картировать даже области ДНК, которые вовсе не были транскрибированы. Любой изолированный или синтезированный фрагмент ДНК может быть гибридизован с образованием двухцепочечной структуры и затем идентифицирован с помощью электронного микроскопа. Длины соответствующих участков можно измерить абсолютным методом, если в поле микроскопа имеется стандарт длины для калибровки увеличения. При некоторых условиях с помошью электронного микроскопа удается получить контурную длину ДНК, находящуюся в прекрасном соответствии с теми размерами, которые вычисляют исходя из известной геометрии двойной спирали. Однако контурная длина зависит от процедуры нанесения ДНК на подложку, которая поддерживает образец в микроскопе. Поэтому на практике для более точного измерения длин к каждому образцу добавляют молекулы ДНК известной длины и используют их в качестве внутреннего стандарта. [c.167]

С помощью иммунохимических методов доказано, что кальсеквестрин и белок с высоким сродством к Са2+ локализуются во внутреннем объеме саркоплазматического ретикулума. Са-АТФаза пронизывает толщу мембраны и не менее чем на 1/3 выступает над цитоплазматической поверхностью липидного бислоя. Предполагаемая локализация в мембране основных компонентов саркоплазматического ретикулума скелетной мышцы показана на рис. 15. [c.54]

Вначале при разработке метода ЭИЗ электрофоретическому разделению подвергали очищенные и гомогенные белкн или же белковые смесн, а затем для ориентировочной локализации молекул с разным зарядом применяли иммунодиффузию. Перед электрофорезом с изменением заряда ие рекомендуется проводить ДСН-ПАГЭ, поскольку при этом белки могут подвергаться денатурации с обнажением внутренних гидрофобных областей. Чтобы повысить разрешающую способность электрофоретического анализа, мы сначала проводили ЭИЗ, а затем, вырезав нужные участки геля, элюировали белки и подвергали их иммунопреципитации и ДСН-ПАГЭ. Иными словами, мы сочетали фракционирование нативных образцов по гидрофобно-сти в ЭИЗ с иммунопреципитацией и разделением по величине молекул в ДСН-ПАГЭ, что позволяет отнести всю процедуру к методам двумерного электрофоретического разделения. [c.85]

На рис. 20 представлены схема высокоэффективного варианта аллель-специфической ПЦР, разработанного нами и использованного для диагностики мутации FV Leiden при тромбофилиях, а также полученные с помощью данного метода результаты [286]. Эта мутация локализована в экзоне 10 гена фактора V системы свертывания крови человека и часто ассоциирована с синдромом ее повышенной свертываемости. В соответствии с последовательностью нуклеотидов анализируемого участка генома синтезируют два праймера, З -концевой нуклеотид одного из которых комплементарен мутантному нуклеотиду матричной ДНК, а у другого - нуклеотиду дикого типа (см. рис. 20 й, б). Для усиления специфичности действия праймеров вблизи их 3 -концов были введены некомплементарные матрице нуклеотиды. Для исключения ложноотрицательных результатов в пробах, где продукт ПЦР отсутствует, повышали число циклов ПЦР сверх оптимального, после чего, если система работает нормально, продукт ПЦР появляется и в этих пробах, что может служить дополнительным внутренним контролем. Другой тип разработанных нами универсальных аллель-спе-цифических праймеров содержит З -концевой нуклеотид, всегда некомплементарный матрице, а мутантный нуклеотид матрицы попадает в его внутреннюю часть (рис. 20 а, в). В этом случае продукты ПЦР отсутствуют, если в гибриде во внутреннюю часть праймера попадает любой некомплементарный мутантный нуклеотид матричной ДНК вне зависимости от его точной локализации. Такие праймеры позволяют обнаруживать любые точковые мутации в гомозиготном состоянии и у гаплоидных микроорганизмов. [c.216]

Эти методы были применены также для локализации гидрофильных связок между а-спиральными колоннами. Показано, что колонны Л (ближайшая к N-концу) и В (вторая по счету от N-конца) связаны участком полипептидной цепи, содержащим Л5/7-36 и Phe-42, которые доступны для антител с цитоплазматической стороны мембраны. Следующая связка (между колоннами Б и С) обращена в периплазму и включает Lew-66 и Gly-72. Связка С—D экспонирована в цитоплазму. Она состоит из аминокислот, локализованных на участке между Туг-83 и Met- . Обработка лактопероксидазой выявила, что Туг- 3 и Туг-133 находятся на внешней стороне мембраны, участвуя, по-видимому, в связке D—Е. Связки Е—F и F—G оказались, соответственно, на внутренней и внешней сторонах, причем было показано, что в связке Е—F для образования антигенной детерминанты существен Р/ге-156, а в связке F—G — С/ -194. [c.105]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология