Хроматографический анализ свободных кислот и эфиров

В другом простом и удобном методе определения содержания жирных кислот (от С4 до i8) в растительных и животных жирах пробу в течение 2 мин нагревали при температуре 65 °С с метилатом калия в метаноле под слоем азота в течение последних 0,5 мин нагревания реакционную смесь встряхивали. По окончании нагревания в реакционную смесь добавляли смесь силикагеля с хлоридом кальция, перемешивали ее, а затем добавляли S2 и встряхивали сосуд после осветления полученного раствора центрифугированием пробу S2 вводили в газовый хроматограф. Введение силикагеля приводит к тому, что реакционная смесь становится гомогенной и облегчается экстракция из нее метиловых эфиров сероуглеродом. Кроме того, силикагель поглощает небольшие количества присутствующих в маслах свободных жирных кислот, которые мешают анализу. Хлорид кальция образует комплекс с метанолом, и благодаря этому хроматографический пик метилового эфира масляной кислоты не искажается пиком метанола. Наконец, в отличие от метанола S2 не искажает пиков метиловых эфиров низкомолекулярных жирных кислот. Этот быстрый метод дает результаты, которые вполне сравнимы с результатами более длительных анализов [57]. При описанной выше обработке пробы метилатом калия метиловых эфиров свободных жирных кислот не образуется. Для метилирования этих кислот нужно добавить в смесь ВРз и нагревать ее еще в течение 2 мин при температуре 65 °С. [c.142]

Кислородсодержащие монотерпены с различными функциональными группами часто выделяют и подвергают хроматографическому анализу отдельно. При экстракции эфирного масла растворителем в нем могут присутствовать свободные кислоты. Их можно удалить путем экстракции эфиром или смесью петролейного эфира с водным раствором карбоната натрия. Кислоты вновь экстрагируют из подкисленного водного раствора эфиром и перед хроматографическим разделением метилируют, как описано в гл. 7. [c.347]

Газо-жидкостной хроматографический анализ как низко- (до С ) так и высокомолекулярных жирных спиртов разработан достаточно полно [2]. Низкомолекулярные спирты, как правило, анализируют в свободном виде, высокомолекулярные — в свободном виде и в виде их менее полярных уксуснокислых, триметилсилиловых и других эфиров. При газо-жидкостном хроматографическом анализе свободных жирных спиртов трудности, связанные с возникновением на хроматограммах асимметричных пиков и увеличением времени удерживания, проявляются в общем менее заметно (см. табл. 10), чем при анализе жирных кислот (см. разд. 1.3.1.2.5). [c.105]

Удобным методом анализа свободных кислот оказалась этери-фикация смеси диазометаном, поскольку озониды не реагируют с ним. После обработки диазометаном озониды разрушали термически нри 100° С и хроматографически анализировали на содержание метиловых эфиров кислот [40]. Предварительно, путем введения альдегидов в озонируемый олефин, показано, что наблюдаемые кислоты не образуются за счет окисления альдегидов, присут-ствуюш их в системе. Отношение кислоты/озониды в течение опыта сохраняется ностоянным. В табл. 3.19 приведены данные о зависимости выхода кислот от температуры [40]. [c.106]

В этом методе [12] образцы гидролизуют 6 н. соляной кислотой. Хлорамины этерифицируют и выделенный эфир подвергают хроматографическому анализу на колонке высотой 2 м с 5%-ным диэтиленгли-кольадипинатом. Другую порцию продуктов гидролиза нейтрализуют и экстрагированные свободные амины хроматографируют на колонке высотой 2 м и диаметром 6 мм, содержащей 1% Apiezon L или стеклянные шарики. Сополиамиды типа 66/610 и 66/610/612 удовлетворительно анализируются этим методом. Поскольку аминокапроновая кислота не анализируется, то количество ПА 6, если известно, что он присутствует в сополимере, определяется по разности массы. [c.247]

Так как полиароматические гели почти не адсорбируют полярные соедин ния, их рекомендуют для разделения сильнополярных веществ воды, спирто гликолей, свободных жирных кислот, аминов, эфиров, альдегидов, кетонов, также низкомолекулярных алифатических, ароматических и хлорированнь углеводородов, а также серусодержащих соединений н других веществ. Вод как правило, при хроматографировании газов выходит раньше других вещест что особенно благоприятно для газо-хроматографического анализа веществ i водных растворов. Полиароматические гели используются также для определ ния фракционного состава полимеров (по МВ). Специальные хлорметилированн полиароматические смолы, расположенные в конце данной таблицы, предназн чены для синтеза пептидов в твердой фазе (по Меррифилду и др.). [c.172]

Количественное динитрофенилирование смеси аминокислот (например, продуктов гидролиза протеина). По Валленфелсу [159],. сухой остаток после гидролиза 2—5 мг-окисленного надмуравьиной кислотой воздушносухого протеина растворяют при комнатной температуре и сильном перемешивании (магнитной мешалкой) в 2 мл воды, не содержащей СО2. Пипеткой переносят аликвотную часть (1,2 мл) в небольшой сосуд, с магнитной мешалкой, разбавляют 1,8 мл воды, свободной от СО2, добавляют 0,1 мл 3,1 н. КС1 и нагревают при 40 0,1 (термостат). При сильном перемешивании устанавливают pH 8,90 добавлением 0,2 н. NaOH с помощью автотитратора. В темноте вносят 0,1 мл (что соответствует небольшому избытку) 2,4-динитрофторбензола и с помощью-автотитратора поддерживают pH 8,90 в течение 100 мин. Самописец титратора регистрирует расход щелочи во времени реакция заканчивается уже через 50 мин, вторая половина опыта служит для установления скорости гидролиза динитрофторбензола (образование динитрофенола). После окончания реакции избыточный 2,4-динитрофторбензол удаляют экстракцией эфиром, очищенным от перекисей, двумя порциями по 5. ил [160,. 161]. Реакционную смесь подкисляют 0,5 мл соляной кислоты (1 ч. НС1 = 1,19 + -Ь1 ч. НпО) и эфирный раствор ДНФ-аминокислот 5 раз экстрагируют свободным от перекисей эфиром порциями по 4 мл экстракты объединяют и эфиром доводят объем точно-до 25 мл. Отбирают 1 мл для хроматографического анализа, упаривают пробу и количественно наносят капиллярной пипеткой. [c.414]

Газо-жидкостный хроматографический анализ метиловых эфиров высших жирных кислот [36, 56, 83, 87, 143, 184]. Разделение вместо свободных жирных кислот их метиловых эфиров с более низкими точками кипения было описано Кгоррег и Неии оос [85], Керр1ег и др. [161]. Анализ проводили при температурах, превышающих 200°, в связи с чем удавалось разделение жирных кислот, включая бегеновую кислоту (Сгг). Кислоты с малым молекулярным весом (Сб—Сд) можно анализировать при температуре 90° [33]. [c.64]

Низшие жирные кислоты можно подвергнуть хроматографическому анализу в виде свободных кислот или в виде эфиров. Свободные кислоты стремятся димеризоваться на колонке и, если не принять специальных мер, вызывают размытие хвоста пика. Поэтому Джеймс и Мартин [61] добавляют к силиконовому маслу 0.с.550, используемому в качестве неподвижной фазы для их разделения, 10% стеариновой кислоты. Можно добавлять небольшое количество ортофосфорной кислоты, что дает лучшее разделение муравьиной и уксусной кислот. Используют также полярную набивку — диоктилсебацинат, содержащий 15% себациновой кислоты, и получают [c.247]

Джемс и Мартин [38] первыми описали разделение жирных кислот от муравьиной до додекановой с помощью газовой хроматографии. На силиконовых набивках вследствие молекулярной ассоциации, зависящей от концентрации растворенных веществ в распределяющей жидкости, наблюдались сильно размытые пики. Добавление стеариновой кислоты в неподвижную фазу улучшило симметрию пиков при этом кислоты стремятся взаимодействовать с набивкой колонки, а не димеризоваться. Этот метод, однако, оказался непригодным для высших жирных кислот, поскольку стеариновая кислота испаряется из колонки при температурах, необходимых для хроматографического разделения. Исследования спектров в инфракрасной области [4] показали, что степень ассоциации кислот в растворе парафинов зависит от температуры и концентрации, причем кислоты можно получить почти целиком в виде мономеров, нагревая до 200° и поддерживая молярные концентрации ниже 0,007. Это позволяет отделять свободные жирные кислоты с 12—18 атомами углерода на апьезоне Ь при 276°. Пики, однако, при этом заметно несимметричны. При повышении температуры до 300° несимметрия уменьшается, но не исчезает. Поэтому метод не обеспечивает настолько хорошего разделения, которое позволило бы определять жирные кислоты с нечетным числом атомов углерода или разделять насыщенные и ненасыщеные соединения, обладающие одинаковым числом атомов углерода. Недавно была описана попытка анализа свободных жирных кислот [60], при которой в качестве жидкой фазы были использованы полиэфиры, обработанные фосфорной кислотой. Отчетливая симметрия пиков получается при разделении кислот, содержащих от 4 до 22 атомов углерода в качестве неподвижной фазы для этого используют поли-(диэтиленгликольадипат), обладающий поперечными связями с пентаэритритом (ЬАС-2-К446) и содержащий 2% фосфорной кислоты (85-процентной). Эту фазу наносят на целит 545 (60/80 меш) и проводят разделение при температуре колонки 220—235°. При данных экспериментальных условиях стеариновая и олеиновая кислоты неполностью разделяются, однако были выделены кислота, имеющая 18 атомов углерода и две двойные связи, а также ненасыщенные кислоты с 16 атомами углерода. Для получения от детектора на нитях накала сигнала такой же величины, как и в случае метиловых эфиров этих же кислот, необходима несколько большая величина пробы свободных кислот, причем количественные результаты не совпадают полностью — воз-1 Южно, из-за различий в теплопроводности свободных кислот и сложных эфиров, что указывает на необходимость проведения калибровки. Ряд исследователей, работая по этой методике, столкнулся с определенными трудностями. [c.483]

Жирные кислоты в липидах тканей встречаются в свободном состоянии или в виде сложных эфиров и являются основными компонентами омыляемой фракции. Их наиболее часто подвергают хроматографическому анализу на полярных и неполярных неподвижных жидкостях в виде сложных метиловых эфиров. Их разделяют на неполярных набивках, таких, как апьезоно-вая смазка, по числу атомов углерода и на полярных набивках, таких, как поли-(этиленгликольадипат), в соответствии со степенью ненасыщенно- [c.513]

Для определения химических форм элементов используют все инструментальные методы, обеспечивающие необходимые пределы обнаружения элементов. Для ряда элементов, главным образом, неметаллов, разработаны и применяются в практике анализа для оценки качества природных, питьевых и сточных вод методы определения как суммарных содержаний, так и различных молекулярных и ионных форм. Панример, для серы предусматривается раздельное определение сульфат-, сульфид-, сульфит- и тиосульфат-ионов [9 - 10]. При оценке содержания фосфора также раздельно определяют полифосфаты, эфиры фосфорной кислоты и растворенные ортофосфаты [9 - 10]. Содержание азота в водах характеризуется главным образом концентрацией свободного аммиака и ионов аммония, а также нитрит- и нитрат-ионов, аналогичная ситуация для пары хлорид-свободный хлор [9 - 10]. Для раздельного определения химических форм азота, фосфора, серы, хлора и других широко применяют спек-трофото-метрические методы анализа, а также различные варианты хроматографии ионной, жидкостной, газовой [9 - 10]. Определение химических форм металлов - более сложная задача, для решения которой требуются высокочувствительные инструментальные методы, обеспечивающие возможность онределения на более низком уровне концентраций, чем их реальные содержания в водах, т.е. на уровне от 1 мкг/л до 1 нг/л. В сочетании с хроматографическими методами разделения эти методы выполняют роль детекторов. Наиболее предпочтителен вариант элемент-селективного детектора, к которым и относятся большинство современных инструментальных методов (ААС, АЭС, МС), в отличие от снектро-фотометрического и электрохимических. [c.25]

Методом газовой хроматографии удалось также разделить триметилси-лиловые производные аминокислот [43]. Эти производные готовят, обрабатывая соли аминокислот триметилхлорсиланом или воздействуя Ы-триметил-силилдиалкиламинами на свободные аминокислоты. При этом карбоксильные и аминогруппы взаимодействуют, и в результате получаются триметилсили-ловые эфиры Ы-замещенных аминокислот. Производные глицина, аланина, лейцина, изолейцина, валина, глутаминовой кислоты и фенилаланина можно разделить при 165° на колонке (280 см), заполненной силиконовым маслом на стерхамоле (30 70). Производные фенилаланина элюируются через 28—30 мин. Результаты воспроизводятся с точностью до 0,5% при использовании метода измерения площадей под пиками и применении ТК-ячейки в качестве детектора. Авторы указывают, что эту реакцию можно провести почти количественно со всеми доступными аминокислотами, но не приводят данных по хроматографическому анализу высокомолекулярных соединений, таких, как производные триптофана и гистидина. [c.535]

Высшие жирные кислоты и их соли с щелочными металлами применяют в качестве добавок (10%) к малополярным или неполярным неподвижным фазам (углеводородам, метилсилико-новым маслам), чтобы при анализе веществ, которые могут образовывать водородные связи (в частности, свободных карбоновых, дикарбоновых и гидроксикислот, спиртов и эфиров аминокислот), предупредить образование хвостов у хроматографических пиков. При этом необходимо, чтобы газ-носитель был не полностью осушен [103]. [c.169]

Как душистые вещества имеют применение алифатические насыщенные спирты нониловый, дециловый, ундециловый и ла-уриловый. Общий метод определения содержания этих спиртов — ацетилирование в пиридине при комнатной температуре. Перечисленные спирты могут быть получены восстановлением сложных эфиров соответствующих кислот или окислением парафинов с последующим выделением из смеси ректификацией. В спиртах, полученных восстановлением сложных эфиров, могут присутствовать в виде примесей сложные эфиры, альдегиды-и свободные карбоновые кислоты. Для анализа смеси спиртов могут применяться методы хроматографического разделения нэ бумаге в виде антранилатов [1] или газовой хроматографии [2], [c.233]

Для препаративного выделения порфиринов, связанного с -очисткой основного компонента от небольших количеств примесей, оксид алюминия можно брать из расчета 50 г на 1 г образца, а часто бывает достаточно и половины указанного количества сорбента. Однако в более сложных случаях следует использовать значительно большее количество оксида алюминия — вплоть до 500 г на 1 г образца. Благодаря высокой растворимости эфиров порфиринкарбоновых кислот их можно наносить на колонку в небольшом объеме бензола или хлороформа. Подходящий элюент можно подобрать путем анализа данных о хроматографической подвижности компонентов смеси, подлежащей разделению или очистке, в условиях ТСХ на пластинках с оксидом алюминия. Для этой цели обычно пригодны смеси бензола, хлороформа или дихлорметана с метанолом. Все эфиры порфиринкарбоновых кислот можно элюировать путем постепенного увеличения полярности смеси растворителей, создавая градиент концентрации сначала хлороформа, а затем метанола. Хроматографирование может сопровождаться расщеплением сложноэфирных связей с образованием некоторого количества свободных порфиринкарбоновых кислот, которые довольно проч- [c.224]