Проба на свободные жирные кислоты

Перед анализом к первоначальной пробе добавляют известное количество н-гептадекановой кислоты, обычно 10—25 мг. Количественное определение находящихся в пробе свободных жирных кислот основано на извлечении этой кислоты, содержащей 17 атомов углерода. [c.488]

В другом простом и удобном методе определения содержания жирных кислот (от С4 до i8) в растительных и животных жирах пробу в течение 2 мин нагревали при температуре 65 °С с метилатом калия в метаноле под слоем азота в течение последних 0,5 мин нагревания реакционную смесь встряхивали. По окончании нагревания в реакционную смесь добавляли смесь силикагеля с хлоридом кальция, перемешивали ее, а затем добавляли S2 и встряхивали сосуд после осветления полученного раствора центрифугированием пробу S2 вводили в газовый хроматограф. Введение силикагеля приводит к тому, что реакционная смесь становится гомогенной и облегчается экстракция из нее метиловых эфиров сероуглеродом. Кроме того, силикагель поглощает небольшие количества присутствующих в маслах свободных жирных кислот, которые мешают анализу. Хлорид кальция образует комплекс с метанолом, и благодаря этому хроматографический пик метилового эфира масляной кислоты не искажается пиком метанола. Наконец, в отличие от метанола S2 не искажает пиков метиловых эфиров низкомолекулярных жирных кислот. Этот быстрый метод дает результаты, которые вполне сравнимы с результатами более длительных анализов [57]. При описанной выше обработке пробы метилатом калия метиловых эфиров свободных жирных кислот не образуется. Для метилирования этих кислот нужно добавить в смесь ВРз и нагревать ее еще в течение 2 мин при температуре 65 °С. [c.142]

На хроматограмме 6 представлено разделение смеси свободных жирных кислот, выделенных экстракцией из биологической пробы. После полного удаления растворителя оставалось приблизительно 100 мг кислот, которых для анализа нужно около 5 мг. Условия для этого разделения были очень близки к тем, которые применили Джеймс и Мартин в своей первой работе по ГЖХ. Трубка из нержавеющей стали длиной 120 сж и с внутренним диаметром [c.68]

Поскольку жиры обычно содержат немного свободных жирных кислот, принято сначала определять так называемое кислотное число (ср. стр. 157). Оно выражает число миллиграммов едкого кали, требуемое для нейтрализации свободных кислот, содержащихся в 1 е пробы 2. [c.292]

Перемешивая содержимое стаканчика стеклянной палочкой, в него из бюретки по каплям прибавляют раствор едкого кали точно установленной концентрации. Пока в пробе имеются свободные жирные кислоты, жидкость в стаканчике будет обладать кислыми свойствами, а цвет ее не будет изменяться. Когда же свободные жирные кислоты будут нейтрализованы, от первой лишней капли щелочи жидкость приобретет щелочные свойства и станет розовой. [c.19]

Масло интенсивно перемешивают с кислотой механической мешалкой и воздухом (в случае необходимости) до того момента, пока оно не окрасится в темно-зеленый цвет, но не дольше 60 мин. Затем, не прекращая перемешивания, из нейтрализатора отбирают пробу и в лаборатории определяют общую кислотность масла (сумму свободных жирных кислот и непрореагировавшей серной кислоты в мг КОН). Масло нейтрализуют раствором щелочи концентрацией 125—200 г л с избытком до 100%, температура раствора не должна превышать 25 °С. Далее процесс ведут как обычно. [c.25]

Проба на свободные жирные кислоты [c.292]

Смесь свободных жирных кислот Сз — С12, Си, ie, is, С20 в виде раствора в хлороформе вводят микрошприцем на слой сорбента. Содержание каждой кислоты составляет 20— 40 мкг/мкл. Объем вводимой пробы 10 мкл. Температура верхней зоны колонки над сорбентом, в испарителе, составляет 300 °С. Стеклянные колонки длиной 1,5 м в зависимости от [c.157]

На рис. 3-34 [51] приведена хроматограмма смеси свободных жирных кислот, от уксусной до каприновой. Пробу автоматически вводили непосредственно в колонку. Относительное стандартное отклонение абсолютных площадей пиков меньше 1%, а относительных площадей пиков — менее 0,4% (число вводов пробы г = 20). Температура устройства ввода пробы была на 20 С выше точки кипения растворителя (дихлорметана). Размывания пиков и искажения их формы удавалось избежать, применяя вторичное охлаждение. Дополнительное охлаждение может оказаться весьма благоприятным при проведении рутинных анализов. Однако снижение температуры термостата до уровня, не превышающего температуру кипения растворителя, занимает много времени. [c.109]

Для отделения жирных кислот от общих липидов 0,1 г пробы растворяют в 40—50 мл петролейного эфира и перемешивают в течение 5 мин с 10 г предварительно обработанной смолы в колбе Эрленмейера на 250 мл. Смоле дают отстояться и надосадочную жидкость сливают. Смолу отмывают от липидов, оставляя на ней свободные жирные кислоты, путем встряхивания с тремя порциями петролейного эфира по 25 мл и сливают [c.487]

Число углеродных атомов в жирных кислотах изменяется от 4 до 18 [19]. Влияние адсорбции затрудняет количественный анализ свободных жирных кислот. Минимальную адсорбцию получают при использовании неподвижной фазы немного более кислой, чем кислоты в анализируемой пробе. Наилучшие результаты дает метилирование [20 — 23] кислот. Так как эфиры не димеризуются, намного менее полярны, чем свободные кислоты, и имеют более высокую упругость паров, можно анализировать жирные кислоты с большим числом углеродных атомов. [c.296]

Берут среднее значение из двух определений. Из экстракта, собранного в мерной колбе, отбирают пробы для определения неозона Д и свободных жирных кислот. В экстракте, собранном в конической колбе, определяют связанные жирные кислоты. [c.87]

Однако, если не позаботиться о том, чтобы все определяемое вещество в пробе было в свободном виде, тогда предварительная обработка (или хранение) пробы может существенно влиять на результат. Тироксин (Т4) и многие другие малые молекулы почти полностью связаны с белком, ио вытесняются с помощью неэтерифицированных жирных кислот. Поскольку эти жирные кислоты образуются при хранении пробы из-за воздействия липаз, то определение тироксина может стать скорее способом оценки возраста пробы, чем уровня определимого вещества. [c.602]

По окончании загрузки всей жировой смеси и раствора щелочи кипячение мыльной массы продолжают еще 1 ч при умеренном пропускании острого пара. Затем производят анализ пробы мыльного клея. К концу процесса добавляют жирные кислоты для снижения остаточной свободной едкой щелочи до 0,15—0,20% от массы мыла. [c.96]

В ходе отстаивания через 24, 28 и 32 ч на глубине 1—1,5 м от поверхности мыла отбирают пробу и анализируют ее на содержание жирных кислот, свободного едкого натра и хлористого натрия. [c.124]

Такой способ фракционирования можно сочетать с выделением пробы. Например, при исследовании липидных фракций одноклеточных организмов первой стадией является деструкция клетки, обычно выполняемая под давлением или с помощью ультразвука. В любом случае разрушаемые клетки помещают в метанольный или водный раствор. Раствор сильно подщелачивают (10%-ный раствор гидроксида натрия) и оставляют на ночь. На этой стадии большинство эфирных связей (триглицериды) гидролизуются, а свободные кислоты, конечно, полностью нейтрализуются сильным основанием. Экстракция таким неполярным растворителем, как -гептан, приводит к удалению только так называемых не омыляемых липидов (стеринов), не затрагивая заметную часть основы клеточного вещества. Большие массы остатков органического вещества клетки могут создавать затруднения при экстракции, особенно после гидролиза. Поэтому перед экстракцией удобно проводить чисто механическое разделение — удалять остатки органических веществ центрифугированием. Фракция, содержащая жирные кислоты, может быть получена подкислением водной фазы с последующей второй экстракцией гептаном. [c.516]

III. Проба на ненасыщенные жирные кислоты. К 1 мл растительного масла и 1 мл воды в пробирке добавить 2 капли спиртового раствора йода. После непродолжительного встряхивания содержимое пробирки с раствором крахмала не дает синего окрашивания, т. е. не обнаруживает присутствия свободного йода. [c.116]

При таком более строгом подходе к оценке параметров нужно построить доверительную область для их возможных значений. В качестве примера на рис. 36, заимствованном из [156], построена доверительная область для параметров линейного уравнения, полученного при изучении объемного метода определения жирной кислоты в каучуке. По оси ординат здесь отложены значения углового коэффициента Ь, по оси абсцисс — значения свободного члена а. На графике нанесена точка с координатами а = 6,99, Ь = 1,00765, которые соответствуют параметрам, полученным методом наименьших квадратов, для линейного уравнения, связываюш,его найденное количество жирной кислоты с действительным ее содержанием в пробе. Доверительная область ограничивается эллипсом, правила построения которого будут даны ниже. Статистический анализ должен был ответить на два вопроса [c.281]

Проба на омыление. К 5 мл 5%-ного спиртового раствора щелочи прибавляют 3 капли исследуемого растительного масла. Смесь нагревают на кипящей водяной бане до испарения спирта. В пробирку наливают горячую воду и растворяют мыло. К раствору мыла прибавляют небольшими порциями 5%-ный раствор НС1 или H2SO4 и наблюдают выделение свободных жирных кислот, всплывающих на поверхность жидкости. [c.178]

Раздеаевие методом жидкостной колоночной хроматографии [490]. В колонку, заполненную силикагелем, вносят навеску 0,3—1,5 г образца. Элюируют последовательно порциями по 300 мл растворителями бензол (вымывает высокомолекулярные полимерные компо- ненты пробы), бензол 4-10% диэтилового эфира (свободные жирные кислоты, триэфиры жирных кислот и сорбитана, моно- и диэфиры жирных кислот и изосорбида), диэтиловый эфир (моно- и диэфиры жирных кислот и сорбитана), этанол (свободные полиспирты). [c.257]

Метод позволяет определить содержание в пробах алканоламидов жирных кислот (в процентах) следующих соединений свободные жирные кислоты, диэфир диэтаноламида, моноэфир диэтаноламида, лминодиэфир, эфир моноэтаноламида, моноэтаноламид, амидо-амины, свободные амины. Свободные амины (диэтаноламин) элюируются из колонки соляной кислотой. [c.264]

Кауфман и Висманатан [11] использовали смесь петролейного эфира (35—45°С) и бензола (4 7) и силикагель С. При этом фосфатиды оставались в исходном положении, а за ними в порядке возрастания величин Rf следовали свободные кислоты, холестерин, триглицериды и эфиры холестерина. Мен-голд [12] элюировал пробы липидов смесью петролейного эфира (60—70°С) и диэтилового эфира (92 8) и получил хорошее разрешение. Николс [13], исследуя экстракты липидов из салата и капусты, провел предварительное разделение в колонке с кремневой кислотой, элюируя пробу диэтиловым эфиром. Этот растворитель элюирует нейтральные липиды, к которым относятся углеводороды, сложные эфиры стеринов, триглицериды, свободные жирные кислоты, диглицериды и стерины, тогда как полярные липиды (гликолиниды, фосфолипиды и гликозиды) стеринов остаются вверху колонки. Полярные липиды Николс элюировал смесью эфира с метанолом (1 1) и метанолом, после чего разделял нейтральные липиды на кремневой кислоте, применив смесь гексан—диэтиловый эфир—уксусная кислота (70 30 1) в качестве элюирующего растворителя. Фо- [c.52]

Для определения в конических колбах на аналитических весах (в двух параллельных пробах) отвешивают по 2—2,5 г высушенного и профильтрованного масла. При взбалтывании в колбы приливают по 20 мл нейтрального этилового спирта. Растворившиеся свободные жирные кислоты отти-тровывают 0,1 н. спиртовым раствором КОН в присутствии фенолфталеина. [c.15]

Джемс и Мартин [38] первыми описали разделение жирных кислот от муравьиной до додекановой с помощью газовой хроматографии. На силиконовых набивках вследствие молекулярной ассоциации, зависящей от концентрации растворенных веществ в распределяющей жидкости, наблюдались сильно размытые пики. Добавление стеариновой кислоты в неподвижную фазу улучшило симметрию пиков при этом кислоты стремятся взаимодействовать с набивкой колонки, а не димеризоваться. Этот метод, однако, оказался непригодным для высших жирных кислот, поскольку стеариновая кислота испаряется из колонки при температурах, необходимых для хроматографического разделения. Исследования спектров в инфракрасной области [4] показали, что степень ассоциации кислот в растворе парафинов зависит от температуры и концентрации, причем кислоты можно получить почти целиком в виде мономеров, нагревая до 200° и поддерживая молярные концентрации ниже 0,007. Это позволяет отделять свободные жирные кислоты с 12—18 атомами углерода на апьезоне Ь при 276°. Пики, однако, при этом заметно несимметричны. При повышении температуры до 300° несимметрия уменьшается, но не исчезает. Поэтому метод не обеспечивает настолько хорошего разделения, которое позволило бы определять жирные кислоты с нечетным числом атомов углерода или разделять насыщенные и ненасыщеные соединения, обладающие одинаковым числом атомов углерода. Недавно была описана попытка анализа свободных жирных кислот [60], при которой в качестве жидкой фазы были использованы полиэфиры, обработанные фосфорной кислотой. Отчетливая симметрия пиков получается при разделении кислот, содержащих от 4 до 22 атомов углерода в качестве неподвижной фазы для этого используют поли-(диэтиленгликольадипат), обладающий поперечными связями с пентаэритритом (ЬАС-2-К446) и содержащий 2% фосфорной кислоты (85-процентной). Эту фазу наносят на целит 545 (60/80 меш) и проводят разделение при температуре колонки 220—235°. При данных экспериментальных условиях стеариновая и олеиновая кислоты неполностью разделяются, однако были выделены кислота, имеющая 18 атомов углерода и две двойные связи, а также ненасыщенные кислоты с 16 атомами углерода. Для получения от детектора на нитях накала сигнала такой же величины, как и в случае метиловых эфиров этих же кислот, необходима несколько большая величина пробы свободных кислот, причем количественные результаты не совпадают полностью — воз-1 Южно, из-за различий в теплопроводности свободных кислот и сложных эфиров, что указывает на необходимость проведения калибровки. Ряд исследователей, работая по этой методике, столкнулся с определенными трудностями. [c.483]

Бес кости, г Жир + жирные кислоты, г Израсходовано NaOH на нейтрализацию свободных жирных кислот, мл Поправка на остаток глицерина, г Вес нейтрального жира, г Жир во взятой пробе. Уо [c.389]

Обязательные исследования при проведении инсулинотерапии — анализ мочи по Зим-ницкому, содержание глюкозы в крови натощак, определение количества глюкозы в суточной моче, определение гликемического и глюкозурического суточных профилей (6-8 исследований крови и мочи на глюкозу каждые 3-4 ч), pH крови, исследование мочевого осадка, остаточного азота и креатинина крови, протромбина, проведение осадочных белковых проб, определение концентрации билирубина, холестерина, р-липопротеидов в крови, ЭКГ, изучение глазного дна и оценка неврологического статуса. Дополнительно можно определять концентрацию в крови кетоновых тел, свободных жирных кислот, инсулина, глюкагона, соматотропно-го гормона (СТГ), иммуноглобулинов, оценивать степень агрегации тромбоцитов. [c.403]

В случае оксиэтилированных жирных кислот содержание свободных нолиэтиленгликолей можно находить другим способом. Пробу, очищенную от нолиэтиленгликолей вышеописанным способом, помещают в колбу емкостью 100 мл и греют на кипящей водяной бане примерно 15. чин при остаточном давлении около 2 мм рт. ст. Пагреванпе следует вести медленно, так как может произойти вспенивание. Содержимое колбы фильтруют через стеклянный фильтр с порами средней величины. Чтобы раствор нри фильтровании не охлаждался, ого можно нагревать инфракрасной лампой. Фильтрат должен быть прозрачным. Нужно следить, чтобы соль и вода были полностью удалены. В исходном образце и в исследуемой пробе поело фильтрации определяют число омыления. [c.186]

Нормализацию мыла производят в котле-корректировщике. Качество готового мыла при отсутствии средств автоматического контроля и регулирования проверяют путем периодического отбора проб через 2—3 ч. Если в результате неточной дозировки щелочи сваренное мыло имеет отклонения от показателей, предусмотренных техническими условиями, то к мылу при кипячении его острым паром добавляют жирные кислоты, если в нем больше, чем допустимо, свободной едкой щелочи. Наоборот, если по данным анализа мыла, взятого из приемника, в нем содержится повышенное количество неомыленного жира или остаток свободной щелочи меньше 0,15%, то к нему добавляют по расчету раствор каустической соды. Режим работы при корректировке состава мыла такой же, как и при периодическом методе варки. [c.113]

Реакция ненасыщенных жиров и жирных кислот с 1Вг, в результате которой образуются производные, содержащие по одному атому иода и брома, лежит в основе известного титриметри-ческого метода Гануса [53]. В работах [54, 55] описан метод определения микроколичеств этих веществ, в котором используется бромистый иод, меченный изотопом В анализе этим методом пробу наносят на фильтровальную бумагу и обрабатывают ее раствором радиореагента в абсолютном метаноле, насыщенном бромидом натрия. Реакционная способность нанесенных на бумагу соединений значительно увеличивается за счет получающейся относительно большой поверхности их контакта с реагентом. Для приготовления раствора ЧВг в мерную колбу емкостью 10 мл переносят порцию водного раствора Ыа Ч, в которой содержится I мМ соли и радиоактивность которой равна 0,5 мКи. После выпаривания этой порции и тщательного высушивания остатка в эту колбу добавляют теоретический объем 0,2 н. раствора брома в. сухом метаноле о завершении реакции в колбе судят по изменению цвета раствора с коричневого на оранжевый. Образующийся в этой реакции ЫаВг служит для насыщения реагента, в котором пе должно быть свободного брома. [c.229]

Трудности создания быстрого метода газо-жидкостного хроматографического определения количества и состава растворимых л воде свободных низкомолекулярных жирных кислот Са—С5 (уксусная, пропионовая, изо- и к-масляная, изо- и н-валериановая) связаны главным образом с образованием расплывчатой хвостовой части пиков, вызванной взаимодействием кис.чот с насадкой и стенками колонки, а также с низкой устойчивостью жидких фаз к действию воды и плохим разделением некоторых кислот. Так, для разделения пары изомасляная — пропионовая кислоты эффективной жидкой фазой является неоцентилгликольсукцинат [505]. На обработанном фосфорной кислотой порапаке Q эта пара кислот также разделяется, но одновременно ухудшается разделение пары к-маслян я—изомасляная кислоты [506]. По данным работы [507], эффективность разделения пары изомасляная—пропионовая кислоты увеличивается с уменьшением. полярности жидкой фазы. Необходимой низкой полярностью обладают полиэфирные фазы, но они имеют сравнительно невысокую термическую стабильность и недостаточно устойчивы к большим количествам пропускаемых через кодонку паров воды. Частичным решением задачи продления активной работы указанных фаз является применение для анализа малых объемов проб воды, что связано, однако, с необходимостью использования высокочувствительного детектора и сравнительно небольшого разбавления кислот водой. [c.276]