Альбумин изоэлектрическая точка

Рис. 84. Данные по рассеянию света для сывороточного альбумина в его изоэлектрической точке в воде, не содержащей ионов. Данные на графике отложены в соответствии с уравнением (17-30) .

Белки с известными изоэлектрическими точками сывороточный альбумин (р1 4,6), овальбумин (р1 4,6), каталаза (р1 5,7), гемоглобин (р1 6,8—7,0), РНКаза (р1 7,8), а-химотрипсин (р18,1), папаин (р1 9,0), лизоцим (р1 10,5), цитохром с (р1 10,0). [c.100]

Ход работы 1. Определение изоэлектрической точки яичного альбумина или желатины. [c.29]

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИЗОЭЛЕКТРИЧЕСКОЙ ТОЧКИ СЫВОРОТОЧНОГО АЛЬБУМИНА [c.35]

Работа 7, Определение изоэлектрической точки сывороточного альбумина...................35 [c.150]

В качестве примера приведем измерения Вебера , проведенные на сывороточном альбумине. Измерения деполяризации, сделанные вблизи изоэлектрической точки белка, дают коэффициенты вращательной диффузии, которые согласуются с коэффициентами, определенными другими методами (табл. 29). Из этого вытекает, что флюоресцирующее место (в этом случае молекула красителя, соединенная с молекулой белка) является неспособным к независимому движению. Когда pH уменьшается, наблюдается резкое увеличение степени деполяризации, т. е. вращательное движение флюоресцирующего места становится облегченным. В то же самое время, как было показано на рис. 110, наблюдается увеличение поступательного коэффициента трения, которое в отсутствие других данных можно объяснить предположением, что либо сывороточный альбумин принимает новую удлиненную жесткую конформацию или что его структура становится рыхлее (набухает) и приближается к структуре гибкого клубка. В любом случае это должно сопровождаться увеличением вращательного коэффициента трения молекулы в целом. Наблюдаемое увеличение свободы вращения флюоресцирующего места должно, следовательно, соответствовать увеличению свободы внутреннего вращения, т. е. это означает, что новая конформация сывороточного альбумина является рыхлой, гибкой структурой. [c.512]

При определенных значениях pH раствора число положительных и отрицательных зарядов в молекулах белка становится одинаковым и такие молекулы не переносятся ни к аноду, ни к катоду. Значение pH раствора, при котором достигается такое состояние белка, называется изоэлектрической точкой. Последняя не одинакова для различных белков, так как в зависимости от их аминокислотного состава они могут содержать разное количество свободных амино- и карбоксильных групп. Например, для яичного белка (альбумина) изоэлектрическая точка находится при pH = 4,8 (кислая среда), а для белка пшеницы (глиадина) — при pH = 9,8 (щелочная среда). [c.295]

Изоэлектрическая точка нативного АГП соответствует 2,7, т. е. примерно на 2 ед. р/ выше, чем у альбумина. Его молекулярная масса составляет 4,1-10 . Предполагают, что сиаловая кислота (14 остатков на всю молекулу белка), присутствующая в углеводных остатках, ответственна за связывание соединений аммонийного типа в нейтральной области pH [95] и этот процесс протекает с некоторой энантиоселективностью. [c.138]

Как видно из изложенного, в этих клинических методах использовано свойство альбумина препятствовать образованию осадка или мути. Это свойство присуще только альбуминам, но не глобулинам. Защитное действие альбумина обусловлено наличием на поверхности его молекул большого числа отрицательно заряженных групп, а также способностью альбумина легко соединяться с анионами (см. стр. 221). Молекулы сывороточного альбумина, изоэлектрическая точка которого лежит примерно при pH 4,7, имеют при pH 7,0 большой избыток отрицательно заряженных групп. Число ионных групп в молекуле глобулина при этом значении pH гораздо меньше, так как изоэлектрическая точка этого белка лежит примерно при pH 6,0. [c.180]

Величина pH раствора, при которой достигается такое состояние белка, называется изоэлектрической точкой. Для яичного белка (альбумина), изоэлектрическая точка в кислой среде соответствует pH 4,8, а для белка пшеницы (глиадина) в щелочной среде — pH 9,8. [c.381]

При денатурации белка наблюдается смещение изоэлектрической точки его. Например, указанная точка нативного фибриногена лежит при pH 4,7, а денатурированного — при pH 5,2. При денатурации сывороточного альбумина изоэлектрическая точка меняется от pH 4,6 до pH 5,4. Указанное говорит об изменениях нри денатурации количеств поверхностно расположенных ионогенных групп в мицелле белка. Характерно, что изоэлектрическая точка белков при солевой и тепловой денатурация смещается в разные стороны. [c.375]

Как и при разделении на ранее описанных полимерных ХНФ, механизм хирального распознавания в данной системе является сложным и до конца не выяснен. Однако основные причины удерживания сорбата были выявлены в ходе систематических исследований влияния его структуры и состава подвижной фазы на коэффициент емкости. Во многих отношениях альбумин-силикагелевый сорбент ведет себя подобно обращенно-фазовым материалам на основе алкилированного силикагеля. Спирты, преимущественно пропанол-1, помогают регулировать время удерживания, поскольку вызывают его быстрое уменьшение вследствие ослабления гидрофобных взаимодействий с сорбентом. Оптимизировать состав подвижной фазы можно, варьируя тремя основными параметрами, а именно pH, ионной силой и органическим растворителем-модификатором [90]. Вероятно, в любой хроматографической системе одновременно наблюдается влияние диполь-ионных и гидрофобных взаимодействий. Кроме того, возможно образование водородных связей и комплексов с переносом заряда. Большое влияние свойств подвижной фазы на значения к разделяемых энантиомеров можно объяснить зависимостью свойств белков от распределения заряда и его конформации. БСА состоит как минимум из 581 остатка аминокислот, связанных в единую цепь (мол. масса 6,6-10 ), и его надмолекулярная структура в значительной мере определяется присутствием в молекуле 17 дисульфидных мостиков. При рН7,0 полный заряд молекулы равен - 18, а изоэлектрическая точка равна 4,7. Как это хорошо известно из химии ферментов, смена растворителя способна вызывать изменения в структуре связывающего центра белка в результате изменения его заряда и конформации. [c.133]

Из сыворотки крови не только вьщелен альбумин в чистом виде, но и определена первичная структура его единственной полипептидной цепи (575 аминокислотных остатков). Альбумин имеет относительно низкую изоэлектрическую точку (4,7) и высокий отрицательный заряд при pH 8,6, благодаря чему он мигрирует с большой скоростью в электрическом поле к аноду. Принято считать, что примерно 75—80% осмотического давления белков сыворотки крови приходится на альбумины кроме того, основной функцией их считают транспорт жирных кислот. Однако точная функция альбуминов не совсем ясна. Известны случаи, когда у некоторых людей в крови фактически отсутствуют альбумины (врожденная аномалия), но они практически здоровы. [c.74]

В случае малых концентраций яичного альбумина по мере удаления от изоэлектрической точки двухмерное давление оказывается не столь велико, чтобы преодолеть электростатические силы отталкивания. Электростатические силы отталкивания начинают преобладать над силами притяжения. Суш ествование электрического барьера приводит к существенному уменьшению как адсорбции, так и возможности образования межмолекулярных связей в слое. Зависимость среднего времени жизни от pH в интервале их значений 2,1—11,5 (однако кроме значения pH, соответствующего изоэлектрической точке) лежит в довольно узком диапазоне времен (60—80 сек). [c.209]

Электрофорез сывороточных белков большей частью проводят в буферном растворе при pH 8,6. При этом значении pH белки сыворотки заряжены отрицательно и движутся к аноду. Так как изоэлектрическая точка сывороточного альбумина при рН 5, а -глобулина при рН 7, то при pH 8,6 наибольшей подвижностью обладает альбумин, а наименьшей -глобулин. Остальные белки имеют промежуточную подвижность. Путь, пройденный частицей данного белкового компонента, помимо заряда, зависит от времени, напряженности электрического поля, силы тока, от природы буферного раствора, его pH и ионной силы. [c.122]

Так, изоэлектрическая точка (5,4) бычьего сывороточного альбумина в 0,15 М хлористом натрии выше по сравнению с его изоионной точкой (4,9). [c.298]

Как и аминокислоты, белки обладают амфотерным характером. Положение изоэлектрической точки (рН<) зависит от природы входящих в их состав аминокислот (рН,- желатина 4,2 казеин 4,6 альбумин яйца 4,8 гемоглобин 6,8 глиадин пщеницы 9,8 клупеин 12,5). [c.296]

Изоэлектрическая точка большинства растворимых в воде белков (сывороточных, яичного альбумина и др.) лежит в слабокислой зоне, т. е. многие белки обладают характером амфотерных соединений, у которых степень диссоциации карбоксильных групп несколько превышает степень диссоциации основных групп. [c.22]

Хлористый натрий и сернокислый магний осаждают глобулины при полном насыщении. При слабом подкислении (в изоэлектрической точке) эти соли осаждают и альбумины не только при полном насыщении, но и при более низкой концентрации хлористого натрия н сернокислого магния. [c.21]

ИЭТ — изоэлектрическая точка МА — метилированный альбумин МАК — метилированный альбумин, сорбированный на кизельгуре или целите [c.5]

Электрофорез зарекомендовал себя как полезный метод при анализе сложных смесей, например сыворотки крови, на содержание в них альбумина и различных фракций глобулина. Поскольку растворителем служит обычно вода и разделение ведется большей частью при температурах 1°, белки подвергаются в этом случае довольно мягкому воздействию. Электрофорез служит высокочувствительным методом определения чистоты препарата (при благоприятных обстоятельствах удается обнаружить примеси в количестве менее 1%). Для контроля чистоты используются два метода. Первый состоит в том, что электрофорез проводят в возможно более широкой области изменения pH, буфера, ионной силы и концентрации белка. Обычно pH выбирают вдали от изоэлектрической точки с тем, чтобы свести к минимуму взаимодействие белковых молекул. Вторым методом является метод обращения направления распространения границы при pH, соответствующем изоэлектрической точке. При наличии примесей в белке граница будет расплываться быстрее, чем это должно было бы происходить за счет одной лишь диффузии. Конвекция за счет градиентов температуры также будет обусловливать размытие границы, однако этот эффект не изменяется при перемене полярности электрического поля. [c.219]

Свойства. Белый или белый с желтоватым йли сероватым оттенком аморфный порошок, растворимый в воде и буферных растворах. Катализирует гидролиз жиров и других сложных эфиров. Панкреатическая липаза действует только на границе поверхности вода —эфир. Преимущественно гидролизуются внешние эфирные связи. Изоэлектрическая точка лежит при pH = 5,2. Условия оптимального действия препарата температура 37 " С, pH = 9,0. Активаторы соли желчных и жирн ых кислот, хлорид кальция, альбумин.. Ингибиторы альдегиды, 4-хлормеркури бензоат, флуоресцеин, эозин, родамин, пиронин, слабо, ингибируется органическими фосфатами и 4-нитрофеннлфосфатом. [c.205]

В противоположность рибонуклеазе, макромолекулы такого белка, как сывороточный альбумин, разворачиваются очень легко. На рис. 153 приведены данные измерений характеристических вязкостей для этого белка в кислом растворе при температуре 25° С. В области, слегка смещенной в кислую сторону от изоэлектрической точки, макромолекула претерпевает предварительное [c.585]

При pH 7,35, присущем нормальной сыворотке крови, а также при более высоких значениях pH, все белки сыворотки представляют собой анионы и, следовательно, движутся в одном и том же направлении, указанном стрелкой на фиг. 17. Сывороточный альбумин, изоэлектрическая точка которого лежит при pH 4,6, движется к аноду с наибольшей скоростью, в то время как глобулины, изоэлектрические точки которых лежат между pH 5 и 6, перемещаются с меньшими скоростями. Максимумы на кривой, изображенной на фиг. 17, указывают положение отдельных границ в момент, когда был сделан снимок. Высота кривой определяется градиентом преломления, т. е. величиной йп1йк, в то время как площадь, заключенная под каждым из пиков на кривой, отвечает концентрации белка, образовавшего данную границу. [c.93]

В настоящее время трудно еще интерпретировать результаты, получаемые при фракционированном осаждении белков плазмы. Мы не можем еще с достаточной уверенностью сказать, существуют ли все эти фракции как таковые в самой плазме крови, а также решить вопрос о возможности их дальнейшего разделения. Всего вероятнее, что белки плазмы находятся в плазме в виде соединений с липидами, у1 леводами, а также друг с другом . Так, например, можно думать, что -глобулины, изоэлектрическая точка которых лежи г около pH 7,0, дают солеобразного тина соединения с альбуминами, изоэлектрическая точка которых находится вблизи pH 4,7. Возможно также, что белковые компоненты липопротеинов и глюкопротеидов плазмы идентичны [c.177]

Отдельные виды белков. 1. Альбумины. Альбумины имеют нейтральную реакцию, растворимы 15 воде и высаливаются нейтральными солями в изоэлектрической точке, лишь при 70—100%-ном иасыщеиии раствора солью. Обычно они богаты серой и не содержат гликоколя. К альбуминам принадлежат, п частности, сывороточный альбумин, лактальбумин, рицин (из семян клещевины), лейкознн (из различных злаков), легумелин (из гороха, вики), [c.398]

В технологии переработки белка одноклеточных исследованы процессы электрофлотационного извлечения белковых веществ на примере глобулина дрожжей при концентрациях ниже 1 г/л, при различных pH. Величина дисперсной фазы белковых веществ (глобулина) зависит от pH и способа получения гидролизата и варьируется в широких пределах (от 40% до 70%). Остальная часть белковых веществ представляет собой смесь растворимых соединений (альбуминов, пептидов, аминокислот) и не поддается извлечению в заданных условиях. Степень извлечения дисперсной фазы при рН=4,5, являющейся изоэлектрической точкой, наибольшая и составляет 60-90 % в зависимости от концентрагщи и объемной плотносга тока ( у = 100-200 мА/дм ). [c.133]

Адсорбция белков и других биологических полимеров чрезвычайно сложна, поскольку в ней участвуют водородные связи с группами ОН, НН или СО, ионные связи через четвертичные аммониевые ионы, присутствующие в некоторых разновидностях белков, и в особенности связп гидрофобной природы, возникающие между сегментами протеиновых цепей и зависящие от их конфигурации. Взаимодействие поверхности кремнезема с желатином обсуждалось в гл. 3 (см. рис. 3.11, лит. к гл. 3 [856]), а с белками и с родственными веществами будет рассмотрено в гл. 7 (см. лит. к гл. 7 [249—273]). Данная тема, вызывает постоянное внимание вот уже в течение более четверти века. Еще в 1954 г. Холт и Боукотт [441а] измерили адсорбционную способность на превращенном в порощок кварце с известной величиной удельной поверхности по отношению к коровьему альбумину. Из полученных данных можно подсчитать, что при монослойном покрытии на 1 нм поверхности удерживалось около 4 амидных сегментов, принимая усредненное значение молекулярной массы амидного сегмента равным 100. По-видимому, такая величина адсорбции является правдоподобной, если рассматривать протеиновую цепь в форме спирали. Максимальная адсорбция наблюдалась при pH 5—6. Те же авторы [4416] исследовали поведение белков и аминов с длинными целями, получаемых в виде мономолекулярных пленок на поверхности раздела фаз воздух—вода, когда ниже этой поверхности вводилась кремневая кислота. Белки более прочно связывались при их изоэлектрической точке такое связывание может происходить между органическими катионными группами молекулы и заряженными участками на поверхности кремнезема и, кроме того, путем образования водородных связей. [c.980]

Молекула БСА образована из одной полипептидной цепи с ас-симетрией, соответствующей элипсоиду, диаметром 40 и длиной 120 А. Молекулярная масса этого белка составляет 66 700 дальтон [305]. Изоэлектрическая точка его находится в интервале 4,3—4,8 и зависит от метода ее определения [306]. Всего альбумин имеет 180 титруемых зарядов на молекулу, которые определяют его большую электрофоретическую подвижность и степень растворимости [307]. [c.231]

Молекулярная масса ЧСА несколько выше, чем у БСА, и составляет 69 ООО дальтон. Изоэлектрическая точка примерно одинаковая. В состав ЧСА входят 20 аминокислот и 35—37 титруемых SH-rpynn. При pH 7,3 молекула альбумина несет суммарный отрицательный заряд. Оба белка лабильны и их структура зависит от концентрации водородных ионов в среде и действия на них ультрафиолетового облучения, высоких температур и органических растворителей [3081. [c.231]

Пример 11-4. В таблице приведены результаты измерения скорости движения молекул сывороточного альбумина быка (САБ) в электрическом поле при различных значениях pH расгвора (отрицательные значения скорости соответствуют изменению направления движения частиц под действием поля). Испо.)1Ь зуя эти данные, опре-деиитге изоэлектрическую точку САБ. [c.117]

Исследование солюбилизации бензола в растворах яичного альбумина, пепсина и химотрипсина при разных значениях pH среды показало, что глобулярные белки обладают наибольшей солюбилизирующей способностью по отношению к бензолу вблизи изоэлектрической точки. Эта особенность, очевидно, является общим свойством глобулярных белков. Процесс денатурации, происходящий с глобулярными белками в растворах при pH, далеких от изоточки, приводит к уменьшению растворимости бензолав растворах белков. [c.25]

Исследователей, изучавших поверхностные свойства белков, всегда интересовало поведение молекул белка при различных pH среды. Однако имеющиеся в литературе данные весьма противоречивы. При изучении поверхностного натяжения белковых растворов Булл и Нейрат [142] обнаружили минимальное значение поверхностного натяжения в изоэлектрическом состоянии и существование максимальных значений в кислой и щелочной областях. ГаузериСвирингеп [143], изучая поверхпостпое патяжеппе 0,005%-ного водного раствора яичного альбумина на границе с воздухом, нашли минимальное значение поверхностного натяжения в изоэлектрической точке и увеличение поверхностного натяжения при отклонениях от нее. После старения слоя эти закономерности становятся более четко выраженными. [c.208]

Рассмотрим влияние электрических зарядов на кинетику образования и прочность адсорбционных слоев яичного и сывороточного альбуминов и казеина на границах с воздухом и с маслом. В кислых и щелочных областях от изоэлектрической точки наблюдалось замедление нарастания прочности межфазных адсорбционных слоев. В этом сказывается большое влияние зарядов на процесс адсорбции и на взаимодействие отдельных молекул друг с другом. Нарастание прочности адсорбционных слоев япчпого альбумина на границе с воздухом показано на рис. 33 при разных [c.208]

Поскольку размеры молекул белкового адсорбата в исследованных системах сопоставимы с размерами мезопор (так, молекула сывороточного альбумина представляет собой в растворе эллипсоид вращения с размерами 14,0x4,0x4,0 нм), то в этом1 случае, по-видимому, нельзя говорить о миграции молекул адсорбата в адсорбционном слое основным фактором, определяющим скорость адсорбции молекул с большой молекулярной массой в мезопористых сорбентах, является диффузия растворенных молекул в порах. На скорость адсорбции влияют также pH раствора, наличие полярных групп на поверхности адсорбента. При увеличении количества кислотных групп (окисленный уголь СКН) адсорбция замедляется и максимальная величина адсорбции также снижается. При pH раствора, близком к изоэлектрической точке белка, величина адсорбции максимальна. Приведенные закономерности свидетельствуют о преобладающем вкладе дисперсионных сил в адсорбцию белков на углеродных сорбентах. [c.142]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология