Хроматография реактивы

Тетрафенилборат натрия, 0,1 М раствор для осаждения. Растворяют 34,2 г тетрафенилбората в дистиллированной воде, приливают 20 мл 10%-ного раствора А12(504)з (в расчете на безводный), дополняют до 1 л и перемешивают. После нескольких часов отстаивания раствор фильтруют через слой окиси алюминия для хроматографии. Реактив в течение нескольких недель не теряет своих свойств. [c.253]

Хроматография на КМ-целлюлозе. Соединяют фракции, обладающие ферментативной активностью, концентрируют с помощью ультрафильтрации диализуют против ацетатного буфера, pH 5,0 (реактив № 3). [c.218]

Для этой же цели предложено использовать триэтиламин в качестве основания, так как этот реактив доступен, растворим, удобен в работе и обладает малой химической актив-ностью. Предполагается, что сильные основания, так же как четвертичные гидроксиды, разрушают силикагелевую подложку. Подвижную фазу для ион-парной хроматографии желательно фильтровать через фильтр из стекловолокна, а после окончания работы колонку следует промывать пятикратным объемом элюента метанол — вода (50 50). [c.81]

При одномерном способе не удается разделить все указанные барбитураты, как в случае хроматографии на бумаге. Однако результаты, полученные с растворителем изопропанол—циклогексан — 25%-ный аммиак (65 + + 25 + 10) (см. табл. 66), можно во многих случаях использовать для контрольных анализов препаратов, содержащих комбинации отдельных барбитуратов. Если к сорбентам добавить неорганические флуоресцирующие вещества (реактив 90 г, з), то в УФ-свете можно обнаружить барбитураты в виде абсорбционных пятен. В других случаях можно использовать специальные реактивы для опрыскивания. Поведение большого числа барбитуратов и других снотворных было исследовано также и другими авторами [41 с использованием растворителя хлороформ — ацетон (90 + 10) на слоях силикагеля Г (см. табл. 67, см. также разд. III, стр. 328). [c.320]

Для разделения элементов в аналитической химии, в частности при фотометрическом анализе, применяются различные хроматографические методы. Из них более прямое отношение к фотометрическому анализу имеет хроматографическое разделение на бумаге. Этот метод широко применяется, например, для анализа смеси редкоземельных элементов, причем после разделения выполняется. проявление и фотометрическое определение. Для последней цели обычно применяют групповой реактив (см. гл. 6, 10). Еще большее значение для анализа сложных смесей органических веществ имеет хроматография на бумаге. Этим методом обычно выполняется анализ смеси аминокислот. [c.164]

Реактив для детектирования редуцирующих сахаров в хроматографах, рабо тающих по принципу распределительной хроматографии (см. разд. 72, 73). В при сутствии щелочи бесцветный реактив восстанавливается в сине-фиолетовое про изводное, растворимое в водно-спиртовых смесях (в водных растворах окрашен ный продукт выпадает в осадок). Продолжительность реакции при 80 С — 1 мин Чувствительность анализа — моль. [c.380]

Силилирующие реактивы, которые используют в ГЖХ для блокирования активных групп носителей. Реактив (10—50 мкл) вводят непосредственно в хроматограф при температуре колонки 150—250 °С. Через 2—3 мин колонка готова для работы. [c.395]

Рис. 1У.2. Схема делителя потока газа и анализатора для хроматографа с пламенноионизационным детектором [17] I — делитель (внутри термостата колонки) II — блок подачи образцов в зону реактивов — находится снаружи термостата колонки, но прижат к крышке термостата, благодаря чему температура питающей линии поддерживается постоянной III — пробирка с реактивом. 1 — аналитическая колонка 2 — вход колонки 3 — выход колонки 4 — игла, длина которой подбирается для получения необходимого коэффициента деления 5 — фитинги 6 — пайка серебром 7 — Т-образное соединение (колонка-детектор) 8 — соединение с ПИД 9 — питающая линия 10 — игла для анализа элюента (достаточно короткая, чтобы предотвратить потери от конденсации) 11 — кран 12 — каналы для термометра 13 — алюминиевый блок 14 — нагреватель 15 — реактив 16 — резиновый колпачок 17 — игла для анализа соединений, выходящих из хроматографа.

Осадочная хроматография - реакт ионная 1 [ланарная хроматография, при которой разде яемые соединения образую т с компонентами элюента труднораа воримые осадки, располагающиеся на поверхности сорба1та в порядке увеличения их произведений растворимости, [c.34]

Цитраты РЗЭ были первыми комплексными соединениями, использованными для разделения смесей РЗЭ методом ионного обмена. Выбор лимонной кислоты в качестве лиганда был сделан случайно, именно этот реактив использовался участниками Манхэттенского проекта [12], создателями первой атомной бомбы в США, для выделения радиоактивных изотопов Zr и Nb из смеси осколочных элементов продуктов деления урана. Сейчас метод ионообменной хроматографии наряду с экстракционным методом широко используется для практического разделения смесей РЗЭ и очистки как радиоактивных изотопов индикаторные, невесомые количества), так и больших количеств РЗЭ для металлургических и других целей, хотя вместо лимонной кислоты в качестве нолидентатного лиганда обычно применяют комплексоны [10]. [c.77]

Проявление нингидрином. Раствор нингидрина наливают в ванночку и равномерно пропитывают им хроматограмму. Хроматограмму высушивают под тягой и выдерживают в темноте при комнатной температуре около 12 ч. В этих условиях с нингидрином реагируют все а-аминокислоты (другие аминокислоты дают реакцию при более высокой температуре — около 100°С). Проявление хроматограмм при качественной хроматографии можно ускорить, помещая последние на 5—10 мин в термостат при 60° С. Окраска, получаемая при проявлении аминокислот нингидрином, неустойчива. Ее можно закрепить, опрыскивая проявленную хроматограмму из пульверизатора раствором ацетона, содержащим азотнокислую медь. Стойкую окраску можно получить при внесении в нингидриновый реактив кадмия (с. 135) или стронция. Окраска сохраняется в течение нескольких недель при проявлении аминокислот смесью 1%-ного раствора нингид-рнна в ацетоне и 1%-ного раствора хлористого стронция в 20%-ном растворе СН3СООН (1 6). [c.129]

Хроматография на ДЭАЭ-целлюлозе. ДЭАЭ-целлюлозу подготавливают в соответствии с инструкцией (с. 109), заполняют колонку (3x25 см) и уравновешивают буфером (реактив № 2). Наносят раствор белка и проводят элюцию в линейном градиенте того же буфера, содержащего О—0,3 М КС1. Скорость элюции — 90 мл/ч. Собирают фракции по 9 мл, определяют в них содержание белка и ферментативную активность. Фракции, в которых обнаружена активность гексокиназы, объединяют и проводят повторную хроматографию на ДЭАЭ-целлюлозе. Для этого подготавливают колонку размером 1,4X15 см. Белок элюируют буфером (реактив 2) (около 200 мл), содержащим О—0,3 М КС1. Скорость элюции — 35 мл/ч. Собирают фракции по [c.218]

Хроматография на ДЭАЭ-целлюлозе рН-градиентная элюция. На колонку размером 1,2X27 см, заполненную ДЭАЭ-целлюлозой, уравновешенную фосфатным буфером (реактив Л Ь 2), наносят раствор белка. Элюцию проводят в градиенте pH, используя 150 мл буфера (реактив № 2) в смешивающем сосуде, и 150 мл буфера (реактив № 4) во втором сосуде. На колонку можно нанести примерно 10 мг белка. Скорость элюции — 20 мл/ч. Собирают фракции по 4 мл. В процессе хроматографии pH изменяется от 7,0 до 5,0. Первым (после выхода из колонки примерно 100 мл раствора) выходит изозим I и вслед за ним — белок, соответствующий изозиму П. [c.219]

Ион-парную хроматографию обычно применяют для анализа физиологических и биологических жидкостей, полярных соединений и веществ с несколькими ионизируемыми группами, в том числе промежуточных продуктов красителей. Расфасованные реагенты для ион-парной хроматографии, состоящие из буфера и противоиона, которые можно непосредственно добавлять в подвижную фазу, выпускает фирма Уотерс . К ним относится реактив А (0,005 М раствор тетрабутиламмонийфосфата, рН=7,5), реактив В-5 (0,005 М раствор пентансульфокислоты, рН=3,5) и реактив В-7 (0,005 М раствор гептансульфокислоты, рН=3,5). [c.80]

Для тонкослойной хроматографии применяют подвижный растворитель хлороформ-метанол-вода (65 25 4) или хлороформ-метанол-уксусная кислота-вода (25 15 4 2) проявляют раствором родамина или йодом. Для идентификации аминофосфатидов (кефалина) хроматограмму опрыскивают раствором нингидрина для холинсодержащих фосфолипидов (лецитина) применяют реактив Драгендорфа [15]. Идентифицированы следующие фосфолипиды [9J лецитин (R — 0,6) и кефалин (Rf —0,32). В качестве метчиков применяли синтетический лецитин и фосфолипиды желтка яйца. [c.374]

При обнаружении стероидных алкалоидов методом бумажной хроматографии используются различные смеси растворителей ме-тнлэтилкетон, насыщенный водой -бутанол — уксусная кислота — вода (10 2 5) м-бутанол — пиридин — вода (10 2 Б) и др. Для обработки хро.матограмм чаще всего применяются реактив Драгендорфа (оранжевые пятна) или концентрированный хлороформный раствор треххлеристой сурьмы с последующим непро-должительньш нагреванием при Ю5 (кирпич но-крас ное окрашивание). [c.165]

Летучие продукты реакти пз реактора носгунаю в холодильник (9), затем - в газовый счетчнк (11) и далее в атмосферу Па случай образования конденсата в схеме предусмотрен предварнтелыю взвешенный Г1рнемпнк (10). Количество конденсата определяют путем взвешивания, замеряют объем и плотность, после чего подвергают анализу на хроматографе [c.27]

Годин предложил разделительный реактив для хроматографии на бумаге. Он представляет собой смесь одного объема 1 %-ного спиртового раствора ванилина с одним объемом 3%-ного водного раствора хлорной кислоты. С помощью этого реактива можно отличить многоатомные спирты от кетоз, но нельзя открыть аль-Дозы. Жири также сообщал о применении хлорной кислоты при хроматографии на бумаге аминокислот. С хлорной кислотой и тирозином илн оксипролином появлялась различная окраска. Триптофан давал с этим реактивом желто-зеленую флуоресценцию. [c.128]

Способ оценки хроматограмм в тонких слоях, состоящий в опрыскивании окрашивающим реактивом с последующей экстракцией окрашенных веществ и фотометрическим определением, часто вызывает трудности, как и в случае хроматографии на бумаге. Соотношение концентраций реактива и определяемого вещества различно в центре и у края хроматографического пятна, поэтому ход реакции может быть различным. Часто также образующиеся окрашенные вещества экстрагируются значительно труднее, чем сами разделенные вещества. Кроме того, сам слой часто также окрашивается реактивом, вследствие чего возникает необходимость учета фона. Наоборот, локализация путем окраски разделенных веществ может применяться без огово--рок, если на последующее количественное определение, например методом газовой хроматографии (ср. стр. 63), используемый для опрыскивания реактив не влияет. [c.59]

Рис. 120. Разделение холестериновых эфиров аорты человека (выделены методом колоночной хроматографии) на слое силикагеля Г смесью четыреххлористый углерод — хлороформ (96 + 4). Обнаружение реактив № 123, затем реактив № 120 в. Холестериновый эфир 1 — жирной кислоты с одной двойной связью 3 — кислоты с двумн двойными связями 3 — кислоты с тремя двойными связями и т. д.

Для обнаружения пептидов целесообразно использовать методы, проверенные в области хроматографии на бумаге. Часто применяемый реактив нингидрина не всегда достаточно чувствителен, особенно для высших пептидов в особенности он непригоден в случае циклических пептидов, поскольку они содержат в боковой цепи свободные амино-группы. Гораздо более широко применимым и более чувствительным (минимально определяемое-количество 0,1 цг) является N-галогенирование по методу Райнделя и Гоппе [73] со следуюш,ими изменениями прописи [149, 8] [c.412]

В фотографическую ванночку соответствующего размера вносят приблизительноравные объемы (по 20—50 мл) 1,5%-ного раствора КМПО4 и 10%-ного раствора НС1 и после перемешивания вставляют сетку из стеклянных палочек (высота ножек 2—3 см). Пластинку с анализируемым веществом кладут на сетку. Ванночку покрывают большим стеклом и оставляют на 15—20 мин. Затем перед опрыскиванием пластинку 2—3 мин обдувают воздухом (запах хлора должен исчезнуть ). Реактив для опрыскивания № 32 нужно применять очень осторожно, так как это повышает чувствительность. Плохо разделенные вещества в этом методе можно по крайней мере в первый момент обнаружить в виде дискретных пятен. Применяемая в хроматографии на бумаге промывка 2%-ной уксусной кислотой в этом случае не нужна. Если в распоряжении имеется баллон с хлором, то проще заполнить хлором лотковую камеру и оставить обрабатываемую пластинку на 5—10 мин в атмосфере хлора. [c.412]

Хроматография. к-Бутанол — ледя-Старт ная уксусная кислота—вода (80-f 20-f 20), восходяш ий метод, 2,5 час, обнаружение нингидрин (реактив № 108). [c.432]

Метод фотокопий [57] для локализации и регистрации производных нуклеиновых кислот непригоден в случае пластинок с нанесенными на них слоями [72]. Цветные реактивы, употребляемые в хроматографии на бумаге-продуктов гидролиза нуклеиновых кислот, до настоящего времени не применялись для тонкослойных хроматограмм. Все реактивы, служащие для обнаружения пентоз в нуклеозидах и 5-нуклеотидах, а также реактивы, реагирующие с эфирами фосфорной кислоты, являются весьма ценным дополнением к методу обнаружения в УФ-свете. Реактив тетраацетата свинца [9] должен быть пригоден для обнаружения нуклеозидов и нуклеотидов на тонкослойных хроматограммах для обнаружения нуклеотидов должна быть пригодна также реакция Хейнса и Ишервуда [37]. [c.444]

Маскирующие реагенты часто используют в методах разделения и концентрирования. Применение реактивов с широким диапазоном действия в экстракционных методах, таких, как оксин, дитизон, диэтилдитиокарбамат, неизбежно связано с использованием маскирующих средств, при помощи которых предотвращается экстракция мешающих ионов. Экстракцию Си + диэтилдитиокар-баматом можно провести в присутствии Ni + и РЬ +, которые также экртрагируются реактивом, если предварительно они маскируются при помощи ЭДТА, образующим менее устойчивые комплексы с u2 чем используемый реактив. В ионообменной хроматографии комплексообразование является широко используемым средством для изменения заряда иона, а следовательно, и для создания возможности участия в ионном обмене на ионитах определенного типа. Так, Ре " под действием разбавленной НР превращается в анионный комплекс РеРе , который можно легко отделить от других катионов, таких, как Ад+, Мп +, РЬ " [c.426]

Полученные в результате жидкостного адсорбционно-хроматографического разделения с различным выходом 10 фракций анализируют методом тонкослойной хроматографии. Силикагель G наносят на пластинки, как описано в разд. П.2.1.2.1. Слой делят на 10 полос шириной 17 мм и отмечают высоту подъема элюента (150 мм). Для нанесения на стартовую линию пластинки пробы готовят в указанных выше колбах, растворяя в определенных объемах подогретого до 40—50 °С метанола (концентрация около 50 мкг вещества в 5 мкл). На стартовую линию каждой из 10 вертикальных полос (i6 мм от нижнего края) наносят по 5 мкл раствора, метанол удаляют потоком холодного воздуха (в течение 1 мин) и пластинку вносят в камеру с налитым на дно элюентом (смесь бутанон-2 — вода). Обычно фронт элюента в течение 20 мин поднимается до метки (150 мм). После этого пластинку сушат теплым воздухом и обрызгивают модифицированным реактивом Драгендорфа. Следует OTMeiHTb, что этот реактив не окрашивает оксиэтилированные соединения с молекулярной массой менее 200 и, в частности, оксиэтилированные алкилфенолы с 3 оксиэтильными группами. [c.237]

Ксантгидроловый реактив может быть также успешно применен для анализа гликозидов в сочетании с методом бумажной хроматографии. [c.248]

TOA — продажный реактив и, как правило, используется в хроматографии в виде технического продукта без какой-либо дополнительной очистки. Коэффициенты рашределения элементов в системах с TOA обычно несколько ниже соошветствующих коэффициентов в системах с ТИОА (рис. И—13). Более низкая удержива- [c.162]

Дитизон. (НгВг)—универсальный экстракционный реагент, используемый для разделения и определения многих тяжелых металлов. Даже слабые окислители действуют на этот реагент, переводя в дифенилкарбодиазон поэтому перед применением реактив необходимо очищать. Несмотря на ряд недостатков (низкая растворимость реагента и дитизонатов металлов в органических растворителях, образование двух типов хелатов), дитизон относительно часто используют в экстракционной хроматографии. [c.406]

Во многих случаях желательно использование достаточно летучих растворителей. Это необходимо в основном 1) при препаративном выделении веществ 2) прн работе с транспортно-ионизационным детектором 3) в тонкослойной и бумажной хроматографии, когда проявляющий реактив может реагировать с компонентами системы растворителей. Однако чрезмерно высокая летучесть создает определенные неудобства в работе. Такие низкокипящие растворители, как пентан и диэтиловый эфир, могут образовывать пузырьки в колонке и в детекторе. В тонкослойной и бумажной хроматографии применение систем растворителей с компонентами, обладающими слишком большим давлением пара, обычно сопряжено с низкой воспроизводимостью. В разд. 162 приведены сведения о температуре кипения при 760 мм рт. ст. и давлении насыщенных паров растворителей при 20 °С. Последние значения полезно сопоставить с ПДК — предельно допустимой концентрацией токсичных веществ в воздухе рабочих помещений — для принятия необходимых мер по технике безопасности. ПДК соответствуют Санитарным нормам проектирования промышленных предприятий СН 245-71 (Стройиздат, 1972). Данные о набухаемости твердых фаз в различных раствори-, телях приведены в соответствующих разделах. Эти данные имеют большое значение при работе с нежесткими гелями и ионообменными смолами набухание должно обеспечивать достаточную проницаемость твердой фазы, но чрезмерная набухаемость сильно затрудняет работу с колонками. [c.382]

Удобной цветной реакцией на аминокислоты является взаимодействие с нингидрином (рис. 12.5) продукт реакции с15льно сопряжен и поэтому интенсивно окрашен. Нингидриковый реактив используют для обнаружения аминокислотных пятен при хроматографии на пластинках или на бумаге, а также для колориметрического количественного определения аминокислот. [c.265]

Хроматография на бумаге в присутствии свидетелей в системах растворителей 1, 2, 3 с просмотром хроматограмм в УФ-свете и визуально. Проявители 1 %-ный раствор ванилина в концентрированной НС1 [8] лейкоантоциановый реактив [9] при нагревании проявленных хроматограмм при 103° (5 мин.) смесь 1%-ных водных растворов Fe ls и Кз[Ре(СК)б)] (1 1) [15]. [c.190]

Адсорбционные свойства бумаги не уменьшаются при окра-Ш1ивании ее органическими красителями. Поэтому при изготовлении бумаги для хроматографии можно прибавлять реактив-проявитель, который образует окрашенные соединения с составными частями испытуемого раствора. [c.112]

При этом воздух отбирают на бумажный фильтр, соединенный последовательно с поглотителем, заполненным метиловым спиртом. Хроматографию проводят на пластинке с силикагелем. Подвижная фаза — этилацетат. Реактив обнаружения — раствор 0,25 г /г-диметилбензальдегида в 50 мл смеси концентрированной серной кислоты и диэтилового эфира (I 1). Количественное определение проводят путем сравнения площадей пятен анализируемого вещества и стандартных растворов. Чувствительность метода — 1,5 мкг вещества на пластинке. [c.280]

B. Л. Умпенев, Л. Н. Коган и Л, М. Гагарипова разработали метод разделения фенолов, содержащихся в сточных водах фенола, резорцина, пирокатехина и гидрохинона [90]. При хроматографии применяют стандартные пластинки 5Пи о1 , на которые нанесен силикагель. Подвижной фазой служит смесь растворителей — бензол (15,6 мл), бензол (9. мл), этилацетат (6,2 мл) и уксусная кислота (2,4 мл). Реактив обнаружения—смесь равных количеств 15%-ного раствора хлорного железа и 1 %-ного раствора феррицианида калия. Чувствительность метода авторами не указана. [c.282]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология