Натрий пептидной связи

Биуретовая реакция на белки. В пробирку с 1 мл 10%-ного раствора яичного альбумина вливают 1 мл 10"6-ного раствора едкого натра и 2 капли 2%-ного раствора медного купороса. Появляется красно-фиолетовое окрашивание, указывающее на наличие в белковой молекуле пептидных связей —СО—КН—. [c.120]

Детали метода следующие. Пептид (0,2 мг на каждую пептидную связь при определении концевой группы 1,0 мг на пептидную связь при определении последовательности) растворяют в 25%-ном растворе (по объему) диоксана в воде (2—4 мл) и выдерживают при 40° в атмосфере очищенного азота. Доводят pH до 8,0 и при перемешивании добавляют к раствору сероуглерод (0,25 мл)] добавляя небольшие количества 0,1 н. раствора гидроокиси натрия, поддерживают постоянное значение pH. Это лучше всего достигается с помощью автотитратора горизонтальный ход кривой поглощения щелочи является указанием на завершение реакции (2—3 час). Затем смесь экстрагируют в приборе для непрерывной экстракции эфиром, для удаления диоксана и избытка сероуглерода. Доводят [c.175]

Сходные результаты получены при пропускании искровых разрядов через смеси, содержащие только метан и аммиак, с последующим мягким гидролизом [57]. По-видимому, дело здесь в том, что при пропускании электрических разрядов образуются полимеры, которые и представляют собой предшественники полипептидов, возникающих при последующем гидролизе эти пептиды все еще содержат большое число пептидных связей. Вероятно, цианистый водород и другие нитрилы играют важную роль в этом процессе, выступая в качестве ключевых промежуточных продуктов, В этом эксперименте метан и аммиак предварительно высушивали, пропуская их над безводным едким натром. Затем в течение 6 ч пропускали искровые разряды. В числе продуктов реакции были обнаружены также водород, азот, цианистый водород, ацетилен, этилен и этан. Последующий гидролиз проводился в 0,1 н. H l в течение 30 мин при 100 °С, а затем в 6 н. НС1. После этого были идентифицированы многочисленные аминокислоты, в том числе лизин, гистидин, аспарагиновая кислота, треонин, серин, глицин, аланин и изолейцин. [c.228]

Крайний случай конформационно о изменения — денатурация белков, которая может быть вызвана нагреванием или обработкой различными реагентами, например сильными кислотами и основаниями, мочевиной, гуанидингидрохлоридом и додецилсульфатом натрия. Денатурация приводит к развертыванию молекулы белка, и он переходит в более или менее разупорядоченное состояние (здесь уже почти нет ни спиралей, ни (3-слоев, ни любых других типов регулярной укладки цепи). В денатурированном состоянии амидные группы пептидной цепи образуют водородные связи с окружающими их молекулами воды таких водородных связей значительно больше, чем внутримолекулярных. Специфическая биологическая активность белка при денатурации теряется, изменяются и физические свойства, например меняется константа седиментации, вязкость и поглощение света. Легкость, с которой происходит денатурация белка, и тот факт, что денатурация в принципе обратима, свидетельствуют о том, что различия в энергии между свернутыми конформациями и открытой конформацией статистического клубка невелики. [c.105]

ГЛИКОЛЯТЫ, соли и эфиры гликолевой к-ты. См. также Натрия гликолят, Натрия-цирконила гликолят. ГЛИКОПЕПТИДЫ, вещества, в к-рых к пептидной цепи из неск. аминокислот присоединены О- или N-гликозид-ными связями остатки моно- или олигосахаридов. Получ. при частичном расщеплении прир. гликопротеинов или синтетически. [c.137]

Цветные реакции на белки. 1. Биуретовая реакция. При добавлении к раствору белка едкого натра и нескольких капель разбавленного раствора медного купороса появляется фиолетовое окрашивание, которое связано, как показывает опыт, с наличием в молекуле белка многочисленных пептидных групп. Название этой реакции произошло от названия вещества, образующегося при нагревании мочевины и именуемого биуретом (см. стр. 248), Биурет, имеющий две пептидные группы в молекуле, также дает эту цветную реакцию. [c.281]

При каталитическом гидрировании в органических растворителях (уксусная кислота, спирты, ДМФ и др.) или в водно-органическои фазе с катализаторами (палладиевая чернь, палладий на угле или палладий на сульфате бария) наряду со свободным пептидом получаются не мещающие выделению толуол и диоксид углерода. Окончание выделения СО2 означает одновременно заверщение процесса отщепления. В том случае, если в пептиде присутствуют остатки цистеина или цистина, гидрогенолитического отщепления не происходит, но его можно проводить в присутствии эфирата трифторида бора [59] или 4 г-экв. циклогексиламина [60]. Такие же условия нужно соблюдать и при деблокировании в присутствии метионина. При восстановительном расщеплении натрием в жидком аммиаке [61] наряду с желаемым пептидом образуются 1,2-дифенилэтан и небольщие количества толуола углекислота же связывается в карбонат натрия. При работе по этому методу одновременно с бензилоксикарбонильным остатком отщепляются N-тозильная, N-тритильиая, S- и О-бензильные группы, а метиловые и этиловые эфиры частично переводятся в амиды. В качестве побочных реакций наблюдается частичное разрущение треонина, частичное деметилирование метионина, а также расщепление некоторых пептидных связей, например -Lis-Pro- и - ys-Pro-. [c.103]

В синтезах пептидов с применением метиловых эфиров для защиты концевой карбоксильной группы могут встретиться затруднения в омылении эфира без сопутствующего частичного гидролиза пептидных связей. Пб этой причине для защиты карбоксильной группы часто прибегают к бензиловым эфирам, которые можно легко получить прямой этерификацией, применяя бензолсульфокислоту [402] или полифосфорную кислоту [403] в качестве катализатора (см. также [2]). Бензиловые эфиры можно снова превратить в свободные карбоновые кислоты каталитическим гидрогенолизом [2, 64], действием металлического натрия в жидком аммиаке [404] или же кислотным или щелочным омылением. Следует отметить, что неги-дролитически, действием бромистого водорода в уксусной кислоте, можно отщепить группу ЫНСООСНаСеНв, но не НСООСНгСвНв [120]. Защита карбоксильной группы в аминокислотах и пептидах превращением в бензиловые эфиры, несомненно, тесно связана с применением карбобензилоксигруппы для защиты аминогрупп (см. раздел Уретановые производные , стр. 209). Обе защитные группы обычно отщепляются при действии одних и тех же реагентов, за исключением одного упоминавшегося метода. [c.245]

Нагревание пептида с гидразином (Акабори, 1952 г.). Приэтом все а-аминокислоты за исключением С-концевой а-аминокислоты превращаются с расщеплением пептидных связей в гидразиды. С-Концевую а-аминокислоту при действии раствора едкого натра можно выделить из полученной смеси и затем идентифицировать. , [c.652]

Ацилирующие свойства кофермента А навели Шалленберга и Кельвина [31 на мысль о том, что Т. к. э. э. может служить ацили-рующим агентом. Действительно, реакция легко осуществляется в условиях Шоттен — Баумана в водном растворе при pH 8—9. Защитную группу отщепляют гидролизом прн pH 10 или выше (разб. водный едкий натр нли конц. водный аммиак) в этих условиях пептидные связи не разрушаются. Применимость методики к пептидному синтезу была продемонстрирована на примере получения Ы-трифторацетилглицнл-о1-аланина. [c.294]

ОТ отношения массы к заряду) в магнитном поле и наконец регистрация масс-спектра. Вследствие цвиттер-ионного характера пептиды с большим трудом подвергаются испарению. Летучесть их может быть повышена путем ацилирования и этерификации. Для ацилирования обычно используют трифторуксусный ангидрид или М-гид-роксисукцинимидный эфир жирной кислоты, например декановой. Этерификацию можно осуществить метанолом в присутствии каталитических количеств хлористого сульфурила. В ряде случаев прибегают также к переметилированию атомов азота в пептидных связях путем обработки ацилированного пептида иодистым метилом и гидридом натрия в диметилсульфоксиде. [c.71]

СО—обладающего характерным максимумом поглощения при 555 нм. Интенсивность окраски определяется в данном случае лишь количеством пептидных связей. Биуретовая реакция пригодна для определения белка в концентрации 0,25— 25 мг/мл, причем выход окраски стандартизуют по чистому белку. Биуретовую реакцию можно проводить в пробирках и в проточной системе. 0,1—4 мл раствора белка (1—5 мг белка) разбавляют до 5 мл раствором А (0,85%-ный хлорид натрия), прибавляют 5 мл раствора Б и полученную смесь нагревают на водяной бане при 32 °С в течение 30 мин. Количество белка определяют путем измерения оптической плотности при 555 нм. Раствор Б готовят следующим образом к раствору виннокислого калия—натрия (45 г) прибавляют при перемешивании 15 г сульфата меди uS04 5НгО, 5 г иодида калия и разбавляют до 1 л 0,2 М гидроокисью натрия (не содержащей углекислого натрия). Раствор гидроокиси натрия готовят путем нагревания до 90 °С 50%-ного едкого натра в течение 24 ч и после отделения от выпавшего углекислого натрия разбавляют прокипяченной водой. [c.456]

Буассон и Прейтнер [1135] показали, что пептидные связи очень устойчивы по отношению к водороду (+РЮг) в уксусной кислоте и к натрию в жидком аммиаке. [c.160]

Свойства, Белая или белая с желтоватым оттенком пористая масса. ЛегкС , растворима в воде и в изотоническом 0,9%-ном растворе хлорида натрия с образованием прозрачных или слабо опалесцирующих рестворрв. Коллагеназа —I протеолитический фермент с узко специфической направленностью к расшепле- нию коллагеновых волокон. Гидролизует пептидные связи между двумя ами- нокйслотами, рядом с которыми находятся остатки пролина или гидроксипро- лина, т. е. действует на такую последовательность аминокислот в полипептидной i цепи, которая характерна для белков группы- коллагена. Растворы коллагеназы. нестойки и могут храниться не более суток при температуре 0—8 °С. - I [c.193]

При кипячении белка с кислотой или щелочью происходит гидролитическое расщепление пептидных связей с образованием свободных аминокислот. Для того чтобы проследить за этим процессом, можно применить метод формолтитрования (см. работу 21), который позволяет констатировать постепенное нарастание свободных аминогрупп по ходу гидролиза. В настоящей работе мы ограничимся определением количества едкого натра, идущего на формолтитрова-ние до начала гидролиза и через час после начала гидролиза. [c.52]

ТРОМБИН — протеолитич. фермент системы свертывания крови, катализирующий превращение фибриногена в фибрин относится к классу гидролаз, расщепляющих пептидные связи шифр фермента 3.4.4.13 (см. Номенклатура и классификация ферментов). Т. образуется в плазме крови из своего неактивного предшественника протромбина, представляющего собой глюконротеид — белок, содержащий 6,5% восстанавливающих сахаров (типа глюкозы), 2—4% амипосахаров и 5% нейраминовой к-ты. Мол. вес протромбина быка 62 700, протромбина лошади 130 000, р/ 4,2. Молекула протромбина имеет форму эллипсоида длиной 119 А и диаметром 34А в разб. р-рах молекула протромбина диссоциирует на субъединицы с мол. в. 32 ООО. Протромбин превращается в Т. в результате воздействия фермента т р о м-б о к и н а 3 ы, присутствующего в нек-рых клетках крови (тромбоцитах), а также в клетках др. тканей (напр., легочной) его активность проявляется лишь в присутствии ионов Са . Активный Т. может быть получен также воздействием на протромбин таких протеолитич. ферментов, как трипсин, папаин, или обработкой протромбина 25%-ным р-ром цитрата натрия. [c.144]

По данным Баюса и Медзиградского [1519], в условиях реакции восстановления натрием в жидком аммиаке пептидная связь достаточно устойчива влияние присутствующих в жидком аммиаке следов влаги на разрыв пептидной связи было исследовано Гуттманном [892]. [c.43]

N-Зaщищeнныe аминокислоты синтезируют обычными методами [301, 482]. Защитные группировки отщепляются путем продолжительного каталитического гидрирования или действием натрия в жидком аммиаке [301]. Отщепление бромистым водородом в ледяной уксусной кислоте также возможно, но требует таких жестких условий реакции, что избежать разрыва пептидных связей в этом случае не удается [301]. Поэтому указанные защитные группы нецелесообразно использовать в синтезе пептидов. [c.67]

Эфиры аминокислот в форме соответствующих аммониевых солей не способны вступать в реакцию образования пептидной связи с N-защишенными аминокислотами. Поэтому для синтеза пептидов необходимо использовать эфиры свободных аминокислот. Последние можно получить обработкой соответствующих хлоргидратов водным раствором щелочи и карбоната калия с последующей экстракцией эфиром или этилацетатом [714, 2251]. Эфиры свободных аминокислот получают также добавлением оснований, таких, как триэтиламин или аммиак, к раствору соответствующего хлоргидрата в органическом растворителе, например в хлороформе [95, 1007] или метаноле [478] затем хлористый аммоний осаждают эфиром, а из фильтрата после отгонки растворителя выделяют свободный аминоэфир. Выделение эфира аминокислоты из соответствующего хлоргидрата можно осуществить также действием метилата натрия в метаноле [719, 722, 1625, 2029]. Описан метод выделения аминоэфиров, основанный на обработке их хлоргидратов дициклогексиламином в отсутствие растворителя с последующей отгонкой в вакууме свободного аминоэфира [2496]. Обычно свободные эфиры аминокислот представляют собой крайне неустойчивые соединения. Аминолиз приводит к образованию соответствующих дикетопи- [c.90]

Синтез пептидов с S-бензилцистеином не вызывает затруднений, если только нет необходимости в каталитическом гидрогенолизе или восстановлении натрием в жидком аммиаке. По этой причине были получены всевозможные N-защищенные производные и эфиры S-бензилцистеина, а создание пептидной связи осуществлялось самыми разнообразными методами независимо от того, был ли конечной целью синтеза пептид, содержащий остаток цистеина или цистина. [c.295]

Синтез фрагментов фаллоидина осуществлен в соответствии с первоначально предложенной для него структурой (ср. [2552]). В качестве исходного соединения для синтеза модельного сульфида (D) (рис. 120) использован bo-Ala-Thr- ys( l)-OH (В), полученный в свою очередь ангидридным методом из bo-L-Ala-L-Thr-OH и натриевой соли цистеина (в атмосфере азота). SH-Группу цистеина хлорировали действием N-хлорсук-цинимида в смеси бензола и хлороформа. Ввиду нестойкости сульфенилхлорид (В) не выделяли, а непосредственно вводили при 0° (в смеси тетрагидрофурана и трихлоруксусной кислоты) в реакцию с H-Ala-Hypro-Try-Ileu-OMe (А), Продукт конденсации (С) выделяли из реакционной смеси в виде соответствующего формиата с помощью препаративного электрофореза на бумаге в буферном растворе, содержавшем муравьиную кислоту. Последующая циклизация соединения (С) путем образования пептидной связи между остатками цистеина и аланина с помощью N, N -дициклогексилкарбодиимида протекала неудовлетворительно более удачным оказалось использование для этой цели ангидридного метода с применением в качестве растворителя смеси тетрагидрофурана и трихлоруксусной кислоты. Сложноэфирную группировку в продукте циклизации (D) омыляли едким натром в диоксане, а карбобензоксигруппу удаляли действием бромистого водорода в ледяной уксусной кислоте. Попытки осуществить вторую циклизацию путем создания пептидной связи между освободившимися амино- и карбоксильной группами в циклопептиде (D), которая привела бы к образованию бициклической системы, до сих пор не дали однозначных результатов. [c.588]

Многими авторами исследован гидролиз полипептидов иод действием кислот и щелочей [33—37]. Симха [38] изучил кинетику гидролиза пептидной связи. Под каталитическим влиянием цианистого натрия в растворе диметилформамида легко деструктируются гомополимеры моноизоцианатов [22]. [c.263]

Боргидриды. Количественное восстановление дисульфидных связей рибонуклеазы, трипсиногена, лизоцима и Р-лактоглобулина было осуществлено при действии боргидрида натрия в 8 М растворе мочевины при температуре 41° и р] около 10 [278] при pH 8,5 количественное восстановление провести труднее. Поскольку при восстановлении боргидридом в молекулы белка не вводится никаких новых атомов серы, этот метод расщепления дисульфидных связей обладает некоторыми преимуществами перед восстановлением тиоловыми соединениями. Кроме того, образовавшиеся после восстановления боргидридом меркаптогруппы можно алкилировать для устранения возможности обратного превращения их в дисульфидные. В этом случае нет необходимости в применении большого избытка алкилирующего агента, поскольку боргидрид с ним не реагирует. Дисульфидные связи шерсти были полностью восстановлены боргидридом натрия [279], а затем алкилированы иодуксусной кислотой. Протекание реакции по предлагаемой схеме подтверждается результатом анализа на содержание цистина в модифицированном продукте, которое было равно 5 цмолъ/г по сравнению с 470 1моль/г в исходной шерсти. При восстановлении боргидридом натрия может происходить расщепление пептидных связей, а также рацемизация, что ограничивает возможности применения этого реагента [263]. [c.407]

Дисульфидные связи можно восстанавливать с помощью других реагентов однако эти методы не находят применения в аналитической химии белка. Например, восстановление борогидридом натрия (при pH 7—10) сопровождается расщеплением пептидных связей [35] при реакции с дибораном идет восстановление карбоксильных групп (в виде карбоксилат-иона) в гидроксильные [5, 6]. В принципе диборапами можно восстанавливать белки с непротонированпыми карбоксильными группами. Редко в химии белка применяется электролитическое восстановление на ртутном капельном электроде [27, 111]. [c.86]

Смотреть страницы где упоминается термин Натрий пептидной связи: [c.679] [c.119] [c.209] [c.294] [c.665] [c.699] [c.266] [c.277] [c.291] [c.37] [c.352] [c.67] [c.266] [c.277] [c.291] [c.47] [c.341] [c.570] [c.586] [c.483] [c.592] [c.125]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология