Определение содержания фосфолипидов

Работа 76. Определение общих фосфолипидов в сыворотке крови по содержанию в них фосфора (УИРС) [c.238]

Определение содержания фосфолипидов осуществляется на основании анализа содержания липидного (липоидного) фосфора, т. е. фосфора, определяемого в экстракте липидов. Для этих целей возможно использовать многие методы, поскольку липиды во всех случаях подвергаются минерализации. Существенным моментом является лишь трудность минерализации образцов, в которых фосфолипиды составляют лишь небольшую долю в сравнении с триглицеридами. Часто для ускорения минерализации используют хлорную кислоту [2], однако, увеличив время минерализации, можно применять и серную. Полученные величины содержания липидного фосфора умножают на усредненный лецитиновый коэффициент 25 и находят суммарное количество фосфолипидов. [c.217]

Определение содержания фосфолипидов [c.325]

Фосфолипиды. Количественное определение фосфолипидов сводится к измерению содержания фосфата, входящего в состав этих соединений. [c.74]

Общее содержание фосфолипидов в масле облепихи, определенное по количеству фосфора [14], составляет 1%. Идентификация их произведена хроматографией в тонком слое силикагеля-гипса. Газо-жидкостной хроматографией исследованы жирнокислотный состав фосфолипидов. [c.374]

Определение содержания яиц в пищевых продуктах с помощью ферментативного гидролиза фосфолипидов [791]. [c.372]

Определение содержания фосфатидилхолина в десяти образцах фосфолипидов семян сои дало среднее значение 44,64 1,34%. Следовательно, получение результатов с таким небольшим разбросом дает возможность применять денситометрию при количественном определении веществ методом тонкослойной хроматографии. [c.41]

Наличие липидов служит хорошим маркером для определения биомассы, поскольку все клетки окружены мембранами, содержащими липиды. Количество эргостерола в пробе отражает содержание грибов, поскольку его практически не содержат ни растения, ни археи с бактериями. Определение концентрации и состава метиловых эфиров жирных кислот фосфолипидов позволяет наряду с оценкой общей биомассы найти концентрацию той или иной группы микроорганизмов в образце, взятом из природных ниш. [c.260]

Л. относятся к числу важных в биологич. отношении веществ, входящих в состав всех живых клеток. Нек-рые Л. в той или иной степени специфичны для определенных тканей или органов (напр., цереброзиды для мозговой ткани), другие (напр., нейтральные жиры) встречаются во всех тканях. Особенно богата Л. нервная ткань содержание фосфолипидов и гликолипидов в белом веществе мозга достигает 7,5—9,0% от веса ткани. Л. в живых организмах находятся в свободном или в связанном состоянии — в виде комплексов с белками липопротеидов и протеолипидов. Биохимич. и физиологич. функции отдельных групп Л. довольно разнообразны и далеко еще не изучены. Важнейшее физико-химич. свойство JI. — нерастворимость в воде — определяет их роль основного структурного элемента протоплазмы из Л. и липопротеиновых комплексов построены поверхностные мембраны клеток и клеточных органоидов — ядер, митохондрий, рибосом. Л., входящие в состав мембран, принимают непосредственное участие в процессах активного переноса через эти мембраны ионов и молекул различных веществ. Нейтральным жирам принадлежит важная роль источника энергии и экономичной формы, в к-рой организм запасает эту энергию. [c.487]

Исследование состава жирных кислот и фосфолипидов рапсового масла. (Определение содержания эруковой и линолевой к-т.) [c.62]

Значения относительных концентраций использовались затем для определения процентного содержания спиновой метки в водной фазе. При отсутствии холестерина водная фаза содержала 3,7% спиновой метки. В присутствии холестерина [10% (мол.)] водная фаза содержала 2,4% (мол.) спиновой метки. Мольные коэффициенты распределения равнялись соответственно 5,6-10 и 2,9-10 (суммарное отношение Липид/Вода). Что касается фосфолипида, то его мольный коэффициент распределения в воде для обоих образцов равнялся соответственно 5,6-10 и 3,2-10 . [c.190]

Липиды пищи являются не только источниками энергии для организма, но и содержат ряд физиологически активных веществ (полиненасыщенные жирные кислоты, стерины, фосфолипиды, жирорастворимые витамины). Определения лишь количественного содержания липидов в продуктах питания недостаточно для полной характеристики их пищевой ценности. Таким образом, при анализе липидного состава продуктов должен быть использован комплекс методов, обеспечивающих полное извлечение суммы липидов из продуктов, определение их колияесТ ва и возможность качественной и количественной характеристики отдельных компонентов. [c.211]

Прекрасная методика определения общего состава липидов плазмы или сыворотки с использованием ТСХ включает двухступенчатое элюирование сначала смесью петролейный эфир — диэтиловый эфир (9 1) и затем смесью петролейный эфир — диэтиловый эфир — уксусная кислота (400 100 1) в одном и том же направлении (элюирование второй системой начинают после прохождения фронтом растворителя первой системы 5 см). В этом случае полярные липиды, остающиеся на старте, состоят почти полностью из фосфолипидов [678, 679]. Содержание эфиров холестерина, триацилглицеринов, свободных жирных кислот и холестерина, а также фосфолипидов определяли карбонизацией с последующей денситометрией [680, 681]. [c.205]

Для приготовления бислойных пузырьков (липосом) можно-применять как клеточные, так и синтетические липиды. Клеточные липиды представляют собой сложную смесь фосфолипидов, гликолипидов и других компонентов. Из-за высокого содержания ненасыщенных компонентов клеточные липиды характеризуются определенной нестабильностью. С синтетическими липидами работать легче, и их состав можно подбирать в соответствии с требованиями предстоящего исследования. [c.154]

Петер и Вольф [295] разработали чувствительный флуоресцентный метод определения содержания фосфолипидов in situ вплоть до 10 г. Чтобы получить нужное разделение, пластинку со слоем силикагеля выдерживали в течение часа в атмосфере паров смеси серной кислоты и воды (1 1), а затем в атмосфере паров смеси бензола с метанолом, содержавшей от 2 до 16 % метанола в зависимости от характера анализируемых соединений. Элюирующий растворитель представлял собой смесь легкого петролейного эфира, хлороформа, метанола и воды (6 8 8 1). Образцы наносили с помощью линомата фирмы САМА G, потому что при этом достигалось лучшее разделение, чем при нанесении образца в виде пятен. Чтобы слой флуоресцировал, готовую хроматограмму опрыскивали смесью концентрированной серной кислоты с эфиром (1 19) и нагревали 10 мин в сушильном шкафу при 100°С. Устойчивая флуоресценция сохранялась в течение нескольких месяцев. Измерение интенсивности свечения проводили при длине волны 400 нм, а возбуждали флуоресценцию облучением светом с длиной волны 360 нм. [c.102]

Пластинки с идентифицированными пятнами фосфолипидов фотографировали способом контактной печати (см. стр. 32). Количественное содержание этих веществ измеряли или при помощи денситометра, или элюированием пятен для определения содержания в них фосфора, которое в дальнейшем пересчитыйа-лось на фосфолипиды. [c.31]

О количественном содержании фосфолипидов судили по молярному содержанию фосфора. Содержание фосфора определяли по методу Блэка и Хеммонда (Blak, Hammond, 1965) в модификации А. В. Жукова и А. Г. Верещагина (1970), которую мы полностью приводим ниже. Применяли колориметрический метод определения фосфора, используя его способность давать фос-форно-молибденовый комплекс, который при восстановлении по методу Блэка и Хеммонда хлоридом олова (Sn+ ) в кислой среде образует окрашивание гетерополикислот молибдена (Мо+ ). [c.37]

Как можно видеть из данных табл. 4 и рис. 26 и 28, смесь фосфолипидов семян сои на пластинках с закрепленным слоем силикагеля делится на 13 пятен. Эти липиды были идентифицированы нами при помощи метчиков (фосфатидная кислота, фосфатидилэтаноламип, фосфатидилхолин, фосфатидилинозит, сфингомиелин) и при проведении специфических реакций (опрыскивание нингидрином для обнаружения азотсодержащих фосфолипидов, раствором Драгендорфа — для обнаружения фосфолипидов, содержащих холип, и т. д. см. стр. 30). Определение содержания фосфора в пятнах хроматограммы показало, что главными фосфолипидами семян сои являются фосфатидилхолин и фосфатидилэтаноламип. [c.39]

Для проведения количественного определения фосфолипидов по фосфату ну жно проверить силикагель на содержание в нем фосфора. Если фон фосфора значителен, силикагель промывают водой, многократно перемешивая суспензию, оставляют на 8—12 ч, после чего воду с самыми мелкими частицами осторожно сливают, а силикагель высушивают в кюветах на воздухе, сначала при комнатной температуре, а затем в течение 48 ч при 110—115°С. [c.72]

Иногда нужно элюировать фосфолипиды с адсорбционного слоя для последующего анализа, но в некоторых случаях это трудно сделать. Френч и Андерсен [270] чередовали двукратное элюирование смесью хлороформ—метанол (2 1) с двукратным элюированием смесью хлороформ—метанол—вода(3 5 2). Раузер и др. [271, 272] считают ненужным элюировать фосфолипиды с силикагеля для определения содержания фосфора, а Тихи [273] нашел, что для образования синего комплекса фосфомоли-7 [c.99]

Фосфолипиды (фосфатиды) представляют собой группу липидов, содержащих в качестве обязательного компонента фосфорную кислоту. По природе входящего в фосфолипиды спирта их разделяют на глицерофосфолипиды и сфингофосфолипиды. Общую концентрацию фосфолипидов определяют по содержанию в них липидного фосфора, на долю которого приходится 4% молекулярной массы фосфолипидов. В качестве унифицированного предложен метод определения общих фосфолипидов сыворотки по содержанию общего фосфора в липопротеинах, осаждаемых трихлоруксусной кислотой (способ Зильверсмита и Даниса, 1950). (У здорового взрослого человека концентрация липидного фосфора составляет 1,97-4,68 ммоль/л.) [c.238]

Определение содержания стеринов и фосфолипидов в пищевых продуктах. Стерины и фосфолипиды обладают выраженной физиологической активностью и должны учитьшаться при расчете рационов питания. Большое практическое значение в настоящее время имеет вопрос о содержании в продуктах животного происхождения холестерина. При ряде нарушений липидного обмена (состояние гиперхолестерине-мии) количество холестерина в суточном рационе нормируется. В продуктах растительного происхождения представляет интерес ]8-ситостерин, [c.325]

Например, данные анализа тотальной ДНК (Г + Ц) не позволяю четко дифференцировать микробные сообщества разных почв достоверно коррелируют в основном со значением pH. Существенн более информативным в экологическом плане представляется мето определения содержания и состава метиловых эфиров жирных кисло фосфолипидов (МЭЖК), который по структуре функциональн активной части сообщества позволяет характеризовать весьм широкий круг экологических параметров. Так, например, марке [c.84]

Единственная установленная функция витамина К — это его связь со свертыванием крови. Как удалось проследить, недостаточность витамина К приводит к понижению содержания протромбина (рис. 6-16), некоторых факторов свертывания крови (факторов VII, IX и X) н одного плазматического белка, функция которого пока еще не установлена. В 1972 г. было обнаружено, что дефектный протромбин, образующийся в печени в отсутствие витамина К, не способен связывать ионы кальция, необходимые для последующего связывания протромбина с фосфолипидами и активации его в тромбин. Основываясь на этих сведениях, удалось локализовать структурные различия между нормальным и дефектным белком в М-концевом участке этого гликопротеида, содержащего 560 остатков . Из триптических гидролизатов нормального и дефектного протромбина были выделены пептиды, различающиеся по электрофоретической подвижности. Тщательный химический анализ в сочетании с изучением ЯМР-спектров показал, что в нормальном протромбине остатки в положениях 7, 8, 15, 17,20, 21, 26, 27, 30 и 33, которые при определении аминокислотной последовательности были все идентифнцнро-ваны как глутаминовая кислота, в действительности являются остатками карбокснглутамата. [c.389]

Липиды различных организмов подразделяются на две. фуппы 1) липиды, присутствующие постоянно 2) липиды, количество которых непостоянно. Постоянно присутствующие в клетке липиды рассматриваются как ее необходимая составная часть количество их не может уменьшаться ниже определенного предела, определяемого физиологическими особенностями организма. Липиды, содержание которых непостоянно, составляют, по-видимому, резерв питательньк веществ, и количество их может быть весьма разлитым. Кроме дрожжей как продуценты липидов в перспективе могут рассматриваться мицелиальные фибы и микроформы водорослей. Известный интерес (как источники специфических жирных кислот, поли-р-гидроксибутирата, фосфолипидов и восков) представляют бактериальные продуценты. [c.68]

Приведенные в табл. 13 величины не отражают точно содержание липидов в какой-либо определенной мембране растительной клетки. Больше всего липидов в хлоропластах, которые особенно богаты стеринами, галактолипи-дами и фосфатидилглицерином. Как показал анализ бледно-зеленых внутренних листьев кочана капусты, которые должны быть относительно бедны хлоропластами,—50% всех липи-дов (включая стерины) составляют фосфолипиды, среди которых доля фосфатидилглицерина оказалась необычно низкой [33]. [c.48]

Другой колориметрический метод, который можно применить к фосфолипидам, заключается в следующем образец растворяют в хлорной кислоте и определяют содержание фосфора с помощью раствора молибдата аммония. Курри и др. [161] обрабатывали пятна на силикагеле 0,4 мл 70 %-ной хлорной кислоты в специальной пробирке, осторожно выпаривая на маленьком огне до полного высушивания. Остаток растворяли в 12 %-ной хлорной кислоте и нагревали 10 мин на бане с кипящей водой. Такая обработка затрагивает не только фосфолипиды в результате ее силикагель переходит в нерастворимое состояние. После охлаждения определяли содержание фосфора по методу Вагнера [153, 264, 265] к пробе добавляли 0,3 мл 2,5 %-ного раствора молибдата аммония и 0,3 мл свежеприготовленного 10 %-ного раствора аскорбиновой кислоты. Смесь тщательно встряхивали и выдерживали 2 ч при 38°С, после чего раствор центрифугировали и определяли его коэффициент поглощения при длине волны 820 нм. Робинсон и Филлипс [266, 267] вместо аскорбиновой кислоты использовали в качестве восстановителя 1-амино-2-нафтол-4-сульфоновую кислоту, а Растоджи и др. [268]—раствор 2,4-динитрофенилгидразина в соляной кислоте. Дойзаки и Зиве [269] применили для подобных определений несколько другой метод они обрабатывали липиды серной кислотой с добавкой пероксида водорода. [c.99]

Сравнение жирнокислотного состава отдельных классов фосфолипидов позволило выявить определенные закономерности [15]. Например, в фосфатидилэтаноламинах (см. стр. 282) из насыщенных кислот преобладает стеариновая, а в фосфатидилхолинах (см. стр. 280) —пальмитиновая кислота. Содержание полиеновых кислот состава С20 в фосфатидилэтаноламинах выше, чем в фосфатидилхолинах. В инозитфосфа-тидах содержится большое количество стеариновой кислоты (50—80%), в кардиолипине (см. стр. 292) — линолевой кислоты (60—70%). [c.198]

Содержание разных липидов в искусственных мембранах можно варьировать это позволяет проводить систематическое исследование влияния липидного состава мембран на ту или иную функцию. Например, можно получить везикулы исключительно из фосфатидилхолина или, наоборот, из смеси фосфолипидов известного состава с включением гликолипидов и холестерола. Можно строить мембраны из липидов с разными остатками жирных кислот. Это позволяет провести ситематические исследования влияния жирнокислотного состава на определенные функции мембран (например, на транспорт). [c.133]

Активность пептидных антибиотиков определенным образом зависит от компонентного состава цитоплазматической мембраны и от трансмембранного электрического потенциала клетки-мишени. В составе бактериальных мембран присутствует большое количество кислых фосфолипидов (фосфатидилглицерола и кардиолипина), которые практически отсутствуют в мембранах эукариотических клеток. Эти фосфолипиды являются не только маркерами, но и центрами связывания пептидных антибиотиков животного происхождения, в частности дефенсинов и протегринов, за счет сильных ион-ионных связей, которые устанавливаются по кооперативному механизму аналогично концентрационной зависимости, представленной на рис. 10, А. Кроме того, известно, что мембранный потенциал бактерий в 1.5—2 раза выше, чем у мембран эукариотических клеток. Так что пептидные антибиотики с высоким содержанием лизина и аргинина могут проникать в клетку через мембрану путем электрофореза, подобно тому как это описано для микробных антибиотиков полимиксина В и грамицидинов (Франклин, Сноу, 1984). [c.134]

Как известно, кожа человека обладает не только развитой сенсорной системой, но и системой капиллярного транспорта биологически активных компонентов. Регуляция транс-дермальных потоков извне через кожу в лимфатическую систему и в кровоток поддерживается гидрофильно-липо-фильным балансом между эпидермисом и стенками сосудов. Определенные сдвиги в состоянии нервной и эндокринной систем у лиц пожилого возраста приводят к изменениям физиологических функций кожи. Снижается влагосодержа-ние кожи, замедляется отшелушивание рогового слоя клеток, в эпидермисе и дерме уменьшается содержание мукополисахаридов, холестерина и фосфолипидов. В этих условиях тканеспецифические липосомальные кремы, содержащие РП, служат не только средством целенаправленной доставки РП в организм, но и компенсируют снижение влагосодер-жания и фосфолипидов в составе дермы ( hien, 1992). [c.179]

Еще большую вариабельность имеют данные по фракционному составу липидов, что в значительной степени объясняется разнообразием вариантов методов их определения и худшей межлаборатор-ной сходимостью. В результате общая вариабельность данных по содержанию триглицеридов для большинства животных (кроме рыбы) и растительных продуктов находится в пределах 15—20%, для рыб 25— 30 %. Для фосфолипидов (сумма), токоферолов и стеринов эти данные соответственно равны 10—15 % (для большинства продуктов) и 20— 25 % (для рыб). Для определения состава и количества жирных кислот, как отмечалось выше, используются исюхючительно методы газожидкостной хроматографии. Внутрилабораторная сходимость данных, полученных на современных хроматографах с набивными и капилляр-1п>1ми колонками, составляет 2 %. Межлабораторная воспроизводимость для большинства основных жирных кислот обычно в 2—3 раза выше. Вместе с тем следует помнить, что жирнокислотный состав продуктов зависит от сорта (вида), условий произрастания (содержания), хранения. Все это вместе взятое, а также естественное колебание в содержании общих липидов в продуктах приводит к тому, что общая вариабельность основных жирных кислот (тех, которые составляют более 10% относительно суммы жирных кислот) в большинстве продуктов составляет 15—20 %, а в сое и рыбах — 30—35 % [12]. [c.327]

В разработанных несколькими группами исследователей [4, 37, 57] ферментных электродах для определения свободного холестерина использовали холестериноксида-зу (СОВ, ЕС 1.1.3.6), иммобилизованную на поверхности коллагеновой мембраны или на найлоновой сетке. Концентрацию свободного холестерина определяли с погрешностью 5-25%. Для определения общей концентрации холестерина сыворотку выдерживают в растворе Тритон Х-100 или дезоксихолатсодержащих растворах с добавкой гидролазы эфиров холестерина (СЕН, ЕС 3.1.1.13). Ту же реакционную схему используют в липидном анализаторе 1СА-ЬО 400 фирмы Тоуо 1ого (Япония). Для получения свободного холестерина пробу сыворотки (30 мкл) предварительно обрабатывают 7,5 мкл раствора СЕН в течение 11 мин при 37 °С. Концентрацию холестерина находят с помощью СОВ, иммобилизованной на кислородном электроде. Быстрый отклик электрода (всего 15 с) обусловлен использованием скоростного метода измерения расхода кислорода. В получаемую величину вносят поправку на сигнал кислородного датчика без фермента. Одновременно с холестерином определяют также концентрацию триглицеридов и фосфолипидов (см. ниже). Производительность анализатора-40 проб в час. Аскорбиновая кислота и билирубин не мешают определению. Уравнение корреляции с данными неспецифического стандартного метода анализа для общего содержания холестерина имеет вид у = 1,03х — 0,15 ммоль/л г = 0,985 (и = 50). [c.272]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология