Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Анализ путей метаболизма

    Биохимия изучает метаболизм лекарственных веществ, привлекая методы клинической биохимии анализ лекарств и их метаболитов в биологических материалах, измерение активности и кинетики ферментов и т. д. Нужно отметить, что метаболизм лекарств зависит не только от таких факторов, как генетические, возрастные, органоспецифические, нейроэндокринные особенности организма, но и от способа введения лекарства в организм и от состояния внещней среды. Например, способ введения лекарства в организм определяет путь его метаболизма. Энтеральный способ введения лекарства обеспечивает его быстрый ферментативный гидролиз в желудочно-кишечном тракте, продукты которого при всасывании с кровью воротной вены сразу поступают в печень. Нужно отметить, что печень — это самый главный орган переработки неродственных организму [c.506]


    Механизм биосинтеза микроорганизмами биологически активных соединений, в том числе антибиотиков, изучается разными методами. В последние годы нередко используют метод сравнительного анализа путей метаболизма продуцентов антибиотических веществ и соответствующих им мутантов. В качестве мутантов применяют штаммы, у которых биосинтез антибиотика нарушен в разных звеньях цепи реакций, связанных с образованием изучаемого соединения (такие мутанты часто синтезируют не полностью завершенные молекулы этих веществ), или мутанты, не способные вырабатывать соответствующие биологически активные вещества. Методом сравнительного анализа получены интересные результаты при изучении биосинтеза таких антибиотиков, как тетрациклин, новобиоцин, хлортетрациклин, нистатин, пенициллин, окситетрациклин, стрептомицин и др. [c.90]

    Изучение метаболизма и биотрансформации ядовитых и лекарственных веществ в организме и трупе и методов химического доказательства продуктов превращения приобретает все больший интерес и значение. В связи с расширяющимися исследованиями метаболизма ядовитых и особенно лекарственных веществ перед провизорами, посвятившими свою деятельность токсикологической химии, неизбежно встанут вопросы о разработке методов синтеза химических веществ, встречающихся в качестве метаболитов, и дальнейших путей их анализа. [c.29]

    АНАЛИЗ ПУТЕЙ МЕТАБОЛИЗМА [c.421]

    Доступность материала для исследования ферментов гликолиза. В настоящее время наследственные повреждения известны почти для всех ферментов гликолиза. Этим гликолиз выделяется среди прочих путей метаболизма, для которых далеко не всегда известно, существуют ли наследуемые дефекты, затрагивающие хотя бы некоторые из ферментов. Проще всего можно объяснить этот факт тем, что необходимую для исследований кровь больных сравнительно легко получить анализ венозной крови больных, находящихся в стационаре, вполне доступен в отличие, например, от соскоба кожи, не говоря уже о биопсии мозга. Кроме того, эритроциты-это высокоспециализированные клетки, поэтому в них функционируют далеко не все ферментативные системы, имеющиеся в других клетках. Таким образом, количество реакций, которые могут быть нарушены, относительно невелико. Это значительно облегчает анализ. [c.17]

    С биосинтетической точки зрения так называемый структурный анализ представляет собой всего лишь химическую головоломку его целью является обнаружение элементов структуры, которые могли бы образоваться из известных первичных предшественников (см. табл. 28.1.1). Примеры структурного анализа различных продуктов метаболизма микробов и растений приведены в разд. 28.1.6.1—28.1.6.5. Происхождение большинства из этих соединений было доказано путем включения соответствующих меченых предшественников. [c.351]


    Прежде всего об общих принципах эксперимента. Меченый предшественник должен более или менее свободно входить в систему и становиться метаболически эквивалентным эндогенному субстрату, в который требуется ввести метку. Эти требования в общем соблюдаются, например, для ацетат-иона, в меньшей степени—для малонат-иона и часто совершенно не соблюдаются для введенного мевалонат-иона. Конечно, во время эксперимента организм должен продуцировать требуемое соединение из эндогенного субстрата (а не, например, из некоторого накапливаемого позднее промежуточного вещества). Эксперимент должен также обеспечивать возможность отличать проверяемый прямой путь включения от любых других неожиданных и часто в высшей степени косвенных путей. Например, структуры многих поликетидов таковы, что меченый поликетид в результате простых реакций расщепления может стать источником специфически меченного аце-тил-КоА, который затем может включаться в совершенно иное соединение. Еще один пример такие совершенно различные по структуре аминокислоты, как глицин, серии и триптофан, могут являться эффективными предшественниками С-метильных групп количественное сравнение с меченым метионином показывает, что последний представляет собой гораздо лучший предшественник, но результаты с другими аминокислотами могут быть правильно интерпретированы только при наличии определенных данных о промежуточном метаболизме. Соблюдение соответствующих биологических принципов может также оказаться выгодным при выборе наиболее экономичной или наиболее чувствительной методики. Как будет показано ниже, различные применяющиеся в настоящее время изотопы следует вводить в различных количествах этот факт следует учитывать, например, при проведении предварительных опытов с целью оптимизации условий включения предшественника. Кинетика включения предшественника может быть чрезвычайно сложной. Эта тема достаточно хорошо осЕ-г-щена в обзорах [1,96,97] описано и применение математического анализа кинетических данных, который имеет, по-видимому, ограниченное применение, но тем не менее важен как инструмент фундаментального исследования [98,99]. [c.467]

    Предварительная оценка может быть осуществлена путем добавления известного количества исходного вещества к препарату ткани и последующего осуществления обычной процедуры экстрагирования. Высокий выход продукта в таких опытах еще не гарантирует, что и в реальных экспериментах будут достигнуты хорошие результаты. После осуществления удовлетворительного экстрагирования в предварительных опытах меченое соединение должно быть добавлено к образцу в условиях практического применения (например, введение в живой организм) и по истечении промежутка времени, необходимого для процессов метаболизма, должны быть проделаны обычные процедуры экстрагирования и анализа, причем результаты конечных анализов необходимо сравнить с общей величиной введенной радиоактивности. Эта величина может [c.412]

    Запись хроматограммы с помощью самописца позволяет определить качественный и количественный состав пробы биологического происхождения. Нередко, однако, таких сведений недостаточно для решения поставленной задачи, и необходимо определить степень участия в метаболизме различных соединений путем ввода в ткани или организмы радиоактивных субстратов с последующим измерением распределения метки. Поэтому газовую хроматографию часто сочетают с радиохимическим анализом для получения максимума полезных сведений. В настоящее время происходит быстрое усовершенствование соответствующих методик и аппаратуры. [c.125]

    В то же время наличие в молекулах аминокислот и пептидов таких различных функциональных групп, как карбоксильная, сульфгидрильная, имидазольная, гуанидиновая, индольная, амино-, имино- и оксигруппа, весьма затрудняет разработку единой универсальной методики, обеспечивающей воспроизводимое, количественное и одновременное превращение всех аминокислот в летучие и стабильные производные, пригодные для разделения методом газовой хроматографии. Перечисленным требованиям не удовлетворяет ни одна из разработанных к настоящему времени методик. Таким образом, газовая хроматография не является рутинным методом определения аминокислот и пептидов, хотя она представляет собой чрезвычайно полезный и чувствительный метод специального анализа. С помощью этого метода — особенно в сочетании с масс-спектрометрией и методами, основанными на использовании стабильных изотопов, — можно, например, следить за превращениями определенного числа аминокислот, изучать пути их метаболизма, разделять оптические изомеры. Эти области применения газовой хроматографии рассмотрены в обзорах [179—181] и [2, 182]. [c.68]

    В разд. 18.1 рассматриваются различные типы клеточных препаратов, обычно используемых в энзимологических исследованиях, после чего следует описание того, как измеряется активность ферментов вообще и ферментов шести основных классов в частности (разд. 18.2). С помощью ферментов можно изучать различные процессы регуляции, связанные с изменениями их активности в разд. 18.3 рассматриваются эти процессы в целом, а также два основных типа регуляции — аллосте-рический и путем ковалентной модификации. Присутствие и отсутствие тех или иных ферментов у определенной бактерии зависит, разумеется, от ее генотипа. Но даже если у бактерии имеются определенные гены, их транскрипция и трансляция с образованием соответствующих молекул фермента могут и не происходить. Здесь следует учитывать факторы, участвующие в регуляции генетической экспрессии и, следовательно, синтеза ферментов, рассмотренные в разд. 18.4. И наконец, поскольку ферментативные реакции редко протекают в бактериальных клетках как изолированные процессы и чаще всего являются частью сложной сети метаболических путей и циклов с взаимозависимыми этапами, мы сочли нужным рассмотреть здесь некоторые общие и специальные методы анализа путей метаболизма (разд. 18.5). [c.375]


    Даже при использовании чистых веществ проследить судьбу меченых молекул одного вида среди несметного числа взаимосвязанных и часто обратимых потоков метаболических реакций непросто. Чем быстрее метаболиты входят в активные метаболические пулы, тем труднее выявить их специфические функции. Поскольку активно делящиеся бактерии (в отличие от покоящихся клеток) прежде всего осуществляют реакции синтеза, оборот и перераспределение метаболитов у них сводится к минимуму. Поэтому для радиоизотопного анализа путей метаболизма рекомендуется использовать по возможности акгивио делящиеся бактерии. Полезно также [c.425]

    Для анализа путей метаболизма можно также использовать метод конкуренции изотопов. Этот метод основан на том, что при мечении всех компонентов, участвующих в определенном пути метаболизма, добавление немеченого компонента вызывает пропорциональное снижение удельной радиоактивности всех метаболитов начиная с добавленного. Робертс и др. [38] широко и успешно применили этот метод в своих классических исследованиях биосинтеза аминокислот у Е. oli. [c.427]

    В течение нескольких последних десятилетий химики и биохимики поделили сферы интересов в области молекулярных аспектов биологии. Сферой биохимиков стала динамика живой клетки, ее отдельные функции и их контроль. Интересы химиков-органиков сфокусировались на изучении аккумулирующихся в клетках метаболитов первичных метаболитов (углеводов, белков, нуклеиновых кислот, липидов, стероидов) и множестве вторичных метаболитов (алкалоидов, терпенов, фенолов, хннонов и разнообразных микробных антибиотиков). Это разделение сфер интересов не должно заслонять общие цели. Поэтому, хотя в последующих главах и в тексте всей книги основное внимание при обсуждении биосинтеза уделяется темам, представляющим особый интерес для химиков, мы считаем необходимым рассматривать результаты исследований прежде всего исходя из наших знаний о промежуточном метаболизме и двух фундаментальных биосинтетических процессах — фотосинтеза и фиксации азота, являющихся исходным пунктом и основой для последующего анализа путей биосинтеза. [c.396]

    Главное требование, предъявляемое к методикам хроматографического анализа пептидов, заключается в том, чтобы они позволяли разделять близкородственные аналоги. По традиции разделение олигопептидов проводят методом ионообменной или тонкослойной хроматографии. Однако разработанный позднее метод ВЭЖХ позволяет следить за ходом реакций, контролировать чистоту синтетических пептидов, изучать пути метаболизма. а также осуществлять препаративное разделение смесей. В силу полярности незащищенных пептидов их разделение на силикагеле сопряжено со значительными трудностями [142— 144], поэтому чаще всего пептиды разделяют в виде их производных. [c.59]

    По сравнению с другими классами химических веществ (например, промышленными химическими продуктами, пестицидами) изучение фармацевтических препаратов представляет собой область, в которой чрезвычайно широко используется и совершенствуется большое число различных хроматографических методов, в первую очередь ВЭЖХ и хроматомасс-спектрометрия. Хроматография (ГХ, хроматомасс-спектрометрия, ВЭЖХ и ТСХ) находит широкое применение для проверки чистоты, однородности и устойчивости промышленной продукции, в анализе биологических жидкостей и тканей, для установления соответствующей дозировки, путей метаболизма и фармакокинетики, а а также в токсикологии и судебно-медицинской практике. [c.88]

    Подробный анализ и оценка имеющихся в настоящее время методик изучения путей метаболизма даны в работе Дэгли и Чэпмена [8]. В последующих разделах данной главы кратко обсуждаются общие методы, описанные этими авторами, и достаточно подробно описано оборудование для радиоизотопных работ. Это поможет получить общее представление о методах изучения путей метаболизма. [c.422]

    После открытия у бактерий Ф. Жакобом и Ж. Моно оперонов возник вопрос универсальна ли подобная организация генетического материала Генетический анализ у эукариот (в частности, у их простейших представителей — дрожжей и нейроспоры) показал, что гены, контролирующие различные этапы одного и того же пути метаболизма, как правило, случайно разбросаны по всему геному и обычно не образуют скоплений, напоминающих опероны бактерий (рис. 19.2). Было найдено несколько исключений, привлекших пристальное внимание. Например, компактный участок генетического материала у грибов контролирует три реакции в биосинтезе гистидина. Сходная ситуация (также у грибов) обнаружена при изучении генетического контроля биосинтеза ароматических аминокислот — триптофана, тирозина, фенилаланина, а также жирных кислот. Может быть, в этих и некоторых других случаях наблюдается некий атавизм — пример оперонов, не типичных для эукариот  [c.479]

    Радиоизотопы часто применяются для выяснения путей метаболизма различных соединений. Эти исследования обычно проводят по следующей схеме. Сначала добавляют меченое соединение, затем в различные моменты времени извлекают пробы, экстрагируют из них продукты и проводят их хроматографический анализ. Радиоактивность определяют либо сканированием хроматограмм счетчиком Гейгера, либо авторадиографически, выдерживая хроматограммы в контакте с рентгеновской пленкой в течение некоторого времени. Идентифицировав меченые соединения, определив в каждом из них радиоактивность, построив соответствующие графики, можно получить информацию о реакциях, участвующих в метаболизме. [c.208]

    Генетические различия в реакциях на действие факторов внешней среды могут быть установлены с помошью генеалогического (семейного) анализа, близнецового или популяционно-статистического метода. Как и для других разделов генетики, каждый из этих методов применительно к экогенетике имеет свои разрешающие возможности и ограничения. В выявлении новых экогенетических вариаций генотипов все методы дополняют друг друга. Кроме того, наряду с применением генетических методов нужно проводить биохимические исследования молекулярных механизмов патологических реакций (варианты ферментов, рецепторов, транспортных белков). Одновременно с генетическим анализом должны применяться токсикологические и фармакологические методы для определения концентрации различных веществ в организме и путей метаболизма этих соединений. [c.230]

    Биохимия изучает химический состав веществ, содержащихся в живых организмах, их структуру, свойства, места локализации, пути образования и превращения. Основные задачи биохимии — исследования обмена веществ (метаболизма) и регуляции энергетических процессов в клетке (биоэнергетика), изучение природы действия ферментов (энзимологня), анализ биохимических закономерностей Б ходе эволюции живых организмов. [c.35]

    В некоторых ранних работах меченные радиоактивными изотопами предшественники использовали для обнаружения промежуточных продуктов метаболизма с помощью ауторадиографни например, при изучении хлорофиллзависимых путей фиксации углерода растения на короткое время помещали в атмосферу СОг Ц]. Однако в большинстве работ по биосинтезу природных соединений исследовалось специфическое включение более сложных промежуточных веществ. Выбор вероятных предшественников обычно основывается на предварительном рассмотрении принципиально возмсчкных схем биосинтеза. Последние, в свою очередь, вытекают из анализа структуры изучаемого природного соедине- [c.340]

    Значение метода масс-спектрометрии в химии биологически активных веществ, в том числе транквилизаторов 1,4-бенздиазепииового ряда, далеко не ограничивается доказательством структуры новых соединений. Особую ценность метод приобретает н исследованиях биотрансформации (метаболизма) препаратов, что обусловлено информативностью масс-спектров и высокой чувствительностью современных масс-спектрометров (см. главу 7). Естестоенгю, что для эффективного использования данного метода при анализе веществ или смесей веществ, выделенных из организма человека или животного, важно знать основные пути фрагментации соединении под электронным ударом. [c.110]

    Появился и ультравысокомолекулярный полиэтилен. Уже есть универсальные установки, которые могут выпускать полиэтилены с самой разной структурой. Будущее готовит нам новые сюрпризы, и все большее значение в нашей жизни будут иметь полимеры. Биохимия изучает химический состав веществ, содержащихся в живых организмах, их структуру, свойства, места локализации, пути образования и превращения. Основные задачи биохимии — исследования обмена веществ (метаболизма) и регуляции энергетических процессов в клетке (биоэнергетика), изучение природы действия ферментов (энзимология), анализ биохимических закономерностей в ходе эволюции живых организмов. [c.35]

    Процесс выделительной разгонки применяется для идентификации вещества путем определения его максимума выделения и сравнения последнего с известной величиной. Например, прежние наблюдения показали, что витамин А находится в ворвани в виде эфира. Поскольку как спирт, представляющий витамин А, так и эфир витамина А дают одинаковые результаты при идентификации, анализ был трудным. При помощи аналитической разгонки Хикмену [41] удалось показать, что витамин А существует в основном в форме эфира как в жире из печени трески, так й в жире из печени палтуса. Кривые, построенные по данным разгонок исходных масел, показаны на рис. 11. Кривая, полученная при разгонке другого образца исходного масла, к которому было добавлено некоторое количество спирта витамина А, показана на рис. 12. Исследование фракций, полученных аналитической разгонкой, на метаболизм витамина А в опытах с крысами было проведено Греем и сотрудниками [42]. Полученные ими кривые показаны на рис. 13. [c.442]

    Много внимания уделяется использованию наблюдений собственной люминесценции, как диагностического признака раковых заболеваний. Так, ряд авторов наблюдали у больных злокачественными опухолями флуоресценцию пораженных тканей, мочи и крови, отличавшуюся большей яркостью и цветом свечения по сравнению со здоровыми людьми. По Роффо [22], свечение пораженной кожи позволяет проводить раннюю диагностику предраковых состояний. Ферруфино [23] полагает, что этим путем обнаруживается предрасполагающее к раку повышенное содержание холестерина в кожных инфильтратах. В книге Гладкова [13] подробно рассмотрены возможности использования наблюдения люминесценции опухолей для контроля правильности их удаления в ранних стадиях рака гортани. Как диагностический признак рака описана более яркая флуоресценция мочи больных [24], флуоресценция красного цвета гене-талий женщины [25], [26] кожи и т. д.. Следует подчеркнуть, что данные отдельных авторов нередко находятся между собой в противоречии. Например, Розенталь [17] указывает, что практическая ценность желтого свечения при кожных поражениях, о котором писал Роффо, не подтвердилась, не оправдались и другие диагностические признаки. Такое расхождение наблюдений отдельных авторов понятно, если учесть, что в указанных методах диагностики довольствуются констатацией различия флуоресценции тканей или биологических жидкостей у больных раком по сравнению со здоровыми факторы же, обусловливающие это различие, остаются невыясненными. Иными словами, сортовой (групповой) анализ здесь еще не перерос в химический и использование рекомендуемых диагностических люминесцентных признаков требует большой осторожности. Потребуется много труда для того, чтобы выяснить, какими отклонениями в процессах метаболизма обусловливается появление той или иной флуоресценции, используемой как диагностический признак. [c.296]

    Важнейшим свойством ила является его способность образовывать хлопья, которые можно отделить от воды путем седиментации. Ил отделяют от воды во вторичных отстойниках, после чего он возвращается вновь в аэротенк, а очищенная вода направляется на последующую обработку. Избыток ила, т. е. тот его прирост, который образуется в процессе использования органических веществ сточной воды, удаляется из сооружений. Имеется несколько теорий хлопьеобразования, из которых наиболее удачной считается теория Маккини. По этой теории хлопьеобразование происходит в той стадии метаболизма, когда соотношение содержания питательных веществ к бактериальной массе становится низким. Низкое соотношение обусловливает и низкий энергетический уровень системы активного ила, что, в свою очередь, приводит к недостаточному запасу энергии движения. Энергия движения противодействует силам притяжения, а если она мала, то противодействие тоже мало, и бактерии взаимно притягиваются. Считается, что важными факторами флокуляции являются электрический заряд на поверхности клетки, образование бактерией капсулы и выделение слизи на поверхности клетки. Химический анализ слизи и капсулы (оболочки клетки) показал, что они в значительной степени состоят из ацетильных групп и аминогрупп. [c.334]

    Анализ большого числа ауксотрофных мутантов, различающр1хся по потребностям в индивидуальных факторах роста, позволяет не только изучать метаболизм, но и судить о генотипе данного организма. Допустим, что мы выделили мутант (назовем его г), для роста которого на минимальной среде необходим один-единственный фактор роста — соединение Z. В большинстве случаев удается найти второй мутант, у, для роста которого на минимальной среде необходимо или соединение Ъ, или соединение У. Иногда можно выделить третий мутант, х, который также является ауксо-трофом по веществу Ъ, но способен расти не только в присутствии Z, но также в присутствии X или . Пусть, далее, мы получили мутант -дг четвертый ауксотроф по Ъ, который может расти в присутствии любого из четырех соединений — , X, У или Ъ. Допустим, что вещество — хорошо известный проме куточный продукт обмена. Совершенно очевидно, что путь [c.486]

    Мы уже указывали, что соединения, послуживщие основой для биохимической эволюции, получались в абиогенный период многими путями и в то же время далеко не все в первичном океане и на поверхности земли оказалось подходящим для ранних стадий метаболизма. Уникальность исходного набора веществ требует анализа вопроса о том, какими же качествами должны были обладать вещества, чтобы они были вовлечены в совокупность реакций, необходимых для возникновения жизни. [c.64]

    Для исследования пути и скорости метаболизма органических веществ, включающих в свой состав меченый углерод, листья растений обычно помещают на разлйчное время в атмосферу, содержащую радиоактивную углекислоту. Пробы листьев, экспонировавшихся в присутствии С Ог, затем фиксируются и подвергаются радиохимическому анализу, в котором широко используются методы разделения веществ на ионообменных смолах, хроматография на бумаге, радиоавтография п т. п. [c.43]

    Однако изложенные данные типичны лишь для фазы длительного покоя и динамически изменяются в зависимости от функциональной нагрузки и общего типа метаболизма животного концентрационный градиент содержания гликогена во взаимосвязанных и физиологически взаимозависимых компонентах нервной системы периодически изменяет свой знак. Так, соотношения гликогенона-коплений в специфических нервных клетках и симбиотически связан-нойс ними нейроглии совершенно различны в сегментарном (спинной мозг) и интегративном (кора полушарий) отделах. В первом случае — в передних рогах — доминируют накопления гликогена в нейронах, во втором — в нейроглии. Как известно, разделить обе эти ткани для биохимического анализа невозможно даже путем дифференциального центрифугирования. По нашим данным, коэффициент [c.159]

    Последующие главы посвящены отдельным химическим соединениям. При этом в связи с тем, что органические вещества, как правило, подвергаются в организме разнообразным превращениям, излагаются пути биотранс-фор.маций яда, которые включают в себя, помимо метаболизма, тканевое распределение и выведение из организма как яда, так и его метаболитов. Для каждого вещества приведены современные методы определения самого яда и его метаболитов. Даны рекомендации по использованию тех практических выводов, которые могут быть сделаны на основе полученных лабораторных анализов. [c.2]

    Вещества, служащие субстратами метаболизма, претерпевают в организме ряд ферментативных биохимических превращений. Последовательность биохимических реакций, направленных на модификацию того или иного субстрата до конечного продукта in vivo, называют метаболическим путем или — в случае замкнутых процессов — циклом. Промежуточные продукты метаболического пути или цикла называют метаболитами. Даже в таком простом организме, как бактериальная клетка Е. oli, насчитывается несколько тысяч типов различных взаимосвязанных химических реакций. Упорядочение этих реакций может на первый взгляд показаться недостижимым. Однако при более глубоком анализе оказывается, что, несмотря на большое количество отдельных реакций, формирующих метаболизм организма в целом, число типов таких реакций относительно мало. Например, in ww двойная связь в основном образуется в результате реакции дегидратации. [c.311]

    В настоящее время существует много различных методов изучения метаболизма бактерий, рассмотрение которых следовало бы включить в эту главу. Здесь было бы полезно, например, обсудить методы, применяемые для идентификации и количественного определения различных ферментов дыхагельной цепи, участвующих в образовании взаимосвязанных путей, через которые идет поток электронов и образуются хемиосмотические градиенты. Интересно было бы рассмотреть также общие методы анализа специфических катаболических и анаболических процессов. К сожалению, объем данной книги не позволяет включить описание этих и многих других методов. [c.375]

    Все наши современные представления о свойствах тонопла-ста основываются, во-первых, на результатах ультраструктур-ных исследований и, во-вторых, на выявлении различий в составе вакуоли и цитоплазмы. Попытки выделить тонопласт иэ прочих мембранных фракций не имели успеха вплоть до недавнего времени, когда наконец удалось разработать методику отделения интактных вакуолей от остального клеточного содержимого (рис. 2.26). Первый этап этой процедуры сводится к получению сферических протопластов путем ферментативного переваривания клеточных стенок в высококонцентрированном растворе какого-нибудь осмотически активного вещества. Затем протопласты переносят в менее концентрированную (гипотоническую) среду. Здесь они поглощают воду, набухают и в конце концов разрываются, высвобождая вакуоли. После этого дифференциальным центрифугированием отделяют вакуоли от органелл и от инкубационной среды. Первые же анализы таких изолированных вакуолей показали, что в тонопласте сосредоточены ферменты, регулирующие транспорт солей, В настоящее время во многих лабораториях проводятся дополнительные эксперименты, цель которых состоит в том, чтобы определить характеристики проницаемости и ферментный состав тоноплас-та такого рода сведения значительно расширили бы наши представления о роли тонопласта в регуляции клеточного метаболизма. [c.60]


Смотреть страницы где упоминается термин Анализ путей метаболизма: [c.431]    [c.583]    [c.58]    [c.70]    [c.513]    [c.157]    [c.240]    [c.513]    [c.384]    [c.399]    [c.296]    [c.7]    [c.59]   
Смотреть главы в:

Методы общей бактериологии Т.2 -> Анализ путей метаболизма




ПОИСК





Смотрите так же термины и статьи:

Метаболизм

Метаболизма пути



© 2025 chem21.info Реклама на сайте