Пробы биологических образцов

В настоящее время для обнаружения наркотических веществ в биологических жидкостях человека используют сочетание физико-химических и иммунохимических способов определения. В первой группе наибольшее распространение получили методы, основанные на различных хроматографических приемах, либо их сочетании с другими высокочувствительными способами анализа (газожидкостная, тонкослойная хроматография, хроматомасс-спектрометрия, высокоэффективная хроматография под давлением). Основное достоинство этих методов заюшчается в том, что они позволяют определять с высокой чувствительностью индивидуальные по структуре соединения, используя при этом стандартные эталоны веществ. Однако для проведения анализа данными методами требуется специальное дорогостоящее оборудование, обученный персонал, время определения значительно увеличивается за счет предварительной обработки исследуемых образцов, что связано с экстракцией биологической жидкости и получением легколетучих производных анализируемой пробы. Все это значительно усложняет процедуру проведения анализа и делает ее дорогостоящей. [c.198]

Важным требованием правил GLP является наличие архива, в котором сохраняются все первичные данные, документация, план (протокол) исследований, заключительный отчет, пробы и образцы, полученные в ходе исследований (за исключением биологических жидкостей). Срок хранения определяется соответствующими нормативами. [c.500]

Дискриминация пробы в нем случае превышает 33% Часто приходится анализировать пробы (биологические образцы и объекты окружающей среды), содержащие побочные продукты большой молекулярной массы. Низкая температура узла ввода в отсутствие деления потока приведет к тому, что низколетучая основа будет удерживать представляющие интерес соединения. Для того чтобы повысить диффузию компонентов с нелетучей основы, необходимо поднять температуру узла ввода. [c.42]

Применение ГХ вызвало заметный прогресс в области биологических наук. Этот метод позволяет количественно определять очень малые количества химических веществ, или, точнее, количества соединений в биологических образцах, находящиеся на физиологическом уровне . Как и прежде, в таких анализах требуются предварительные разделения и (или) очистка путем разделения для выделения фракций, содержащих соединения с определяемой функциональной группой. В случаях, когда в анализируемой пробе содержатся функциональные группы или элементы, к которым чувствительны высокоспецифичные детекторы (см. разд. Г), становится возможным определить чрезвычайно малые количества соединений (нанограммы и пикограммы) кроме того, такие анализы высокоспецифичны, поскольку детектор слабо или вообще не реагирует на посторонние вещества. Высокоспецифичные детекторы имеют огромное значение для повышения чувствительности анализа путем образования производных по данной функциональной группе часто с этой целью специально получают производные, содержащие элементы или группы, к которым особо чувствительны специфические детекторы (см. разд. В. 3). [c.424]

Очистка должна быть по возможности простой и быстрой. С этой целью часто применяют распределение образца между двумя несмешивающимися растворителями. Жиры, например, почти полностью удаляются из экстрактов биологических образцов путем распределения экстракта между гексаном и ацетонитрилом жир при этом остается в гексане, а определяемое соединение — в ацетонитриле. Часто помогают групповые разделения (например, разделение кислотной, основной и нейтральной фракций путем экстракции). Для удаления ненужных материалов, а часто и для одновременного разделения анализируемых соединений пробу хроматографируют, применяя подвижную фазу, элюционную способность которой в ходе анализа увеличивают (колоночная хроматография). С этой же целью применяют и тонкослойную хроматографию. Во многих случаях мешающие вещества удается удалить путем такой химической обработки образца, которая не затрагивает анализируемые соединения (например, удаление жиров путем [c.426]

Применение метода внутреннего стандарта к биологическим образцам требует, однако, учета дополнительных факторов, связанных с особенностями АРП. В отличие от традиционного метода внутреннего стандарта (когда в хроматограф вводится непосредственно раствор со стандартом), при использовании АРП необходимо учитывать не только чувствительность хроматографического детектора к этиловому спирту и стандарту, но и тип анализируемого объекта — цельная кровь, плазма, сыворотка [46] (различие коэффициентов распределения, см. раздел 1.4). Если содержание стандарта поддерживать постоянным и строго воспроизводить условия подготовки пробы к анализу (количество добавляемых реагентов, температура и соотношение объемов фаз в сосуде для установления равновесия), то абсолютное значение концентрации стандарта может не [c.127]

Надежность идентификации и достоверность количественных определений будут зависеть от процедуры отбора и подготовки пробы к анализу, степени фракционирования исходного материала и очистки его от мешающих примесей. Особые требования предъявляются к чистоте используемых сорбентов и растворителей. Для исключения влияния загрязнения, возможного даже при соблюдении всех предосторожностей, при количественных определениях целесообразно проводить анализ холостых проб, а для компенсации потерь в процессе подготовки пробы к анализу вводить внутренний стандарт в образец до экстракции, очистки и этерификации. Выполнение этих приемов особенно существенно при исследовании биологических образцов, количественное выделение которых сопряжено с большими трудностями [125, 135]. [c.118]

ГЕОЛОГИЧЕСКИХ ПРОБ И ОБРАЗЦОВ БИОЛОГИЧЕСКОГО [c.133]

Экстракция суммарной ДНК из биологических образцов и ее документальная характеристика по следующим параметрам количество, степень деградации полученного препарата ДНК, наличие/отсутствие ингибиторов ПЦР-реакции, тестирование работы ДНК-матрицы со стандартными праймерами в ПЦР-реакции. Передача препаратов ДНК с соответствующим паспортом для проведения экспертных работ и в депозитарий проб ДНК [c.19]

Отбор проб воды для химико-биологических анализов производили в точках 1 и 5. Кассеты с образцами-свидетелями помещали в трубопроводы перед закачкой ударной дозы ингибитора. Продолжительность выдержки образцов-свидетелей — 31 сут. [c.95]

Коллекции должны быть запротоколированы по списку в порядке поступления и с указанием места сбора. Даже в случаях обгоревших или фрагментированных останков для проведения анализа необходимо отобрать хотя бы несколько микролитров крови или несколько миллиграммов ткани. При отсутствии образцов крови потерпевшего, для проведения ДНК-анализа требуется установить связь с соответствуюш ими службами по идентификации и получить соответствующую информацию о возможных прямых родственниках и пробы их крови. На образцах крови несмываемым фломастером или шариковой ручкой должны быть указаны фамилия и инициалы донора, родственные отношения с погибшим, дата взятия биологического образца. Образцы крови родственников потерпевшего должны быть немедленно отправлены в службу ДНК-идентификации. [c.21]

В виду того, что сбор биологических образцов — неотъемлемая часть процедуры ДНК-типирования, персонал, привлекаемый для сбора образцов, должен знать принципы ДНК-анализа и иметь соответствующее техническое оснащение для гарантии сохранности биологических образцов. Группу по сбору ДНК-проб необходимо укомплектовать медицинским инструментарием для забора проб, спецодеждой, термоизолированными контейнерами с сухим льдом в достаточном количестве и пластиковыми пакетами для сбора и хранения биологических образцов в сухом льду, транспортными средствами, контейнерами для отработанного инструментария, дезинфекционными средствами. [c.31]

Все биологические пробы, находящиеся в депозитарии, обязательно должны проходить контрольную проверку через установленные интервалы времени. Результаты тестирования должны быть обязательно отражены в паспорте образца. Если хранение биологических образцов осуществляется в холодильных установках, необходимо чтобы данное помещение было оборудовано системой отвода тепла от компрессоров холодильных установок (например, кондиционерами). [c.56]

В общем случае химическим или бактериальным превращениям биопроб способствует наличие воды. Поэтому в некоторых методиках перед хранением проб рекомендуется их сушка. Однако она необратимо изменяет биологическую матрицу. Так называемую сухую массу, как правило, применяют лишь для сравнения данных, полученных в разных лабораториях, поскольку при сушке на состав образца влияют температура, вид биологического материала и природа определяемых компонентов Так, большая часть ртути теряется при сушке то же наблюдается для МЫШЬЯК и селена Более предпочтительна лиофилизация, в ходе которой биологический материал изменяется меньше [c.203]

Как правило, химики стремятся сохранить образцы изучаемых или синтезированных веществ. Особенно это относится к веществам, синтезированным впервые, или к препаратам, полученным новым способом. Обычно от основного продукта для хранения отбирают небольшое количество (от 500 до 50 мг), а в случае работы с малыми количествами — еще меньше. Наличие таких образцов дает возможность в спорных случаях определить температуру плавления смешанной пробы, проверить некоторые физические свойства (ИК- и УФ-спектры), биологическую активность и т. д. Кроме того, наличие образцов в ряде случаев позволяет идентифицировать побочные продукты, образующиеся при том или ином синтезе, доказать идентичность вновь приготовленных веществ, полученных тем же автором другим путем или различными авторами. Практика показывает, что отбор малых количеств препаратов или отдельных полупродуктов оправдан даже тогда, когда речь идет о веществах очень ценных и малодоступных. Наличие образцов экономит много времени и труда, связанного с повторным синтезом эталонов. [c.716]

АЭС с ИСП подходит для анализа любой пробы, которую можно перевести в раствор. Это открывает широкую область применения, включающую металлы и сплавы, геологические материалы, природные образцы, биологические и клинические пробы, сельскохозяйственные и пищевые пробы, материалы для электроники, металлы износа в маслах, высокочистые химические реагенты и т. д. Основным ограничением этого метода является необходимость использовать растворы, что связано с затратами времени и утомительно при анализе твердых проб. Это объясняет современную тенденцию проводить прямой ана- [c.36]

Разработан также прямой ГП-ААС анализ твердых проб [8.2-30]. По ряду причин, таких, как отсутствие подходящих стандартных материалов, от этого метода постепенно отказались. Интересной альтернативой является использование суспензий (взвесей). Пробу вводят в ГП в виде взвеси. Электротермическая программа и модификаторы те же, что для анализа растворов. Процедура градуировки может быть проведена с использованием простых водных стандартных растворов с той же производительностью, как при анализе растворов. Поскольку анализируют очень малое количество пробы, существуют очень большие проблемы, связанные с однородностью исходной пробы. Тем не менее, так как нет необходимости растворять пробу, анализ твердых проб применяют для широкого круга объектов, таких, как металлы и сплавы, биологические материалы, полимеры, уголь, волосы, природные образцы и многие другие. [c.55]

В отношении контрольного опыта активационный анализ представляет уникальный метод, даже при использовании радиохимического разделения. Поскольку внесение загрязнений после этапа облучения более невозможно, ана-лш образцов твердой пробы не требует проведения контрольного опыта. Однако при анализе проб (таких, как многие природные и биологические пробы), которые нельзя протравить, чтобы снять поверхностные загрязнения, следует уделить особое внимание обработке и хранению пробы. В любом случае из реагентов, используемых для растворения и разделения, не может быть внесено никакого радиоактивного загрязнения. В настоящее время это можно рассматривать как величайшее из преимуществ активационного анализа в сравнении с другими методами. В НАА можно провести очень точную градуировку путем одновременного облучения пробы и синтетических многоэлементных стандартных образцов. Это является уникальным для активационного анализа ни один другой метод не дает возможности одновременного возбуждения пробы и стандартного образца. По этим двум причинам из всех методов определения следов элементов активационный анализ наилучшим образом удовлетворяет строгим требованиям получения точных результатов даже при крайне низких уровнях содержания —нг/г и ниже. [c.101]

На рис. 3-16 приведены хроматограммы, полученные при анализе стирола и иллюстрируюшие влияние температуры узла ввода. Повышение температуры узла ввода может явиться причиной появления дополнительных пиков на хроматограмме. Отметим, что при более высоких температурах на хроматограмме не только появляется больше пиков, но и соотношение истинных пиков (определенное путем непосредственного вйода пробы в колонку) также изменяется. Непосредственный ввод пробы в колонку позволяет получать наиболее точные результаты. Данные анализа свидетельствуют о том, что при вводе испаренной пробы наблюдается дискриминация ее компонентов, вызванная шприцем. Как укЕ13ывалось ранее, дискриминация компонентов пробы за счет шприца является одной из основных причин ошибок. Отношение высот пиков гексена ( ) и дифенилциклобутана (у) при непосредственном вводе в колонку составляет 1,35 при вводе без деления потока при температуре 200 С — 0,84. Дискриминация пробы в последнем случае превышает 33% Часто приходится анализировать пробы (биологические образцы и объекты окружающей среда), содержащие побочные продукты большой молекулярной массы. Низкая температура узла ввода в отсутствие деления пото- [c.81]

Пробы биологических образцов растений или животных включают сбор биологических жидкостей (растительный сок, кровь, моча, лимфа, мокрота), выделений (каловые массы) или проб с поверхности объекта, а также внутренних органов (биопсии). С поверхностей микроорганизмы смывают или счищают стерильным буферным раствором или физраствором (0,85%-й раствор Na l в дистиллированной воде) с помощью стерильных ватных тампонов. В других случаях микроорганизмы сохраняют непосредственно в образцах тканей, что важно для наблюдения их топографического распределения в тканях или количественного учета. Иногда анализы образцов проводят непосредственно под микроскопом (сканирующая электронная микроскопия) для рассмотрения взаимодействия микробных сообществ или изучения ассоциаций между животными, растениями и микробиотой. [c.252]

В крови трупа в результате различных причин pH крови может снижаться до 5,5- 6,0, что замедляет или останавливает скорость химического гидролиза кокаина и БЭ и МЭ в Э. Скорость энзимного гидролиза после смерти или при хранении проб может снижаться по отношению к значениям, характерным для живого организма, но это снижение незначительно и энзимный гидролиз может протекать, в то время как химический замедлился или остановился. Эти изменения ведут к накоплению МЭ, уменьшению кокаина и сохранению БЭ на постоянном уровне в трупе или в хранящихся образцах. Для подавления энзимного гидрапиза кокаина рекомендуется добаплять консерванты 2% фторида натрия или органические фосфаты при pH 5 и хранить биологические образцы при температуре ие выше 4°С. При этих условиях обеспечивается стабильность кокаина в течение 150 дней [191- Для сохранения проб мочи, содержащих кокаин и метаболиты, с целью подавления гидролитических превращений и искажения результатов анализа, рекомендуется хранить пробы в стеклянных несиланизированных сосудах в темноте в замороженном виде лри —15°С после установления pH 5.0 с помощью аскорбиновой кислоты. В этих условиях не происходит потерь кокаина до 110 дней хранения [17]. При соблюдении тех же условий, с разницей в температу- [c.101]

О, Р, Ка, К и др.), которые имеют более высокий, по сравнению с тяжелыми элементами, порог (у,и)-реакции [36]. Так, при анализе проб биологической ткани, несмотря на то, что НАА имеет на 2-3 порядка более низкие пределы определения большинства элементов, ФАА оказывается более предпочтш-ельным. Поскольку нейтронный анализ приводит к сильной активации макроосновы биологического образца за счет Ка, К и С1, гфактически невозможно использовать инстру менталь-ный НАА по радионуклидам с периодами полураспада менее одних суток. ФАА обладает высокой экспрессно-стью и производительностью, так как для подавляющего числа возникающих по реакции (у, )-радионуклидов характерны малые периоды полураспада. Имеется также возможность анализа проб большой массы (до 1 кг) из-за отсутствия эффекта самоэкранирования. Наиболее широкое распространение ФАА получил после создания линейных ускорителей электронов, бетатрона и микротрона, на которых формируют мощные пучки регулируемого по максимальной энергии тормозного излучения электронов высокой стабильности, что дало возможность ФАА получить низкие пределы определения большинства элементов (табл. 9.5). В настоящее [c.59]

Схема экспрессного анализа примерно следующая. Образец и стандарт транспортируют на облучение и обратно с помощью быстрой пневмопочты. Облученный образец быстро растворяют, используя подходящие реагенты. Для образцов, плохо растворяющихся в воде или кислотах, часто применяют плавку с перекисью натрия в никелевом тигле. Тонкоизмельченный образец вносят в тигель, в котором уже расплавлено несколько граммов перекиси натрия, нагревают тигель на горелке до красного каления и быстро охлаждают, погружая в холодную воду. Затем плав растворяют в соответствующем растворителе. Таким образом удается переводить в раствор пробы горных пород и биологические образцы в течение 1 мин. После этого следуют избирательная экстракция определяемого элемента и измерение активности, как правило, на гамме-спектрометре. Химический выход определяют после измерения или в отдельной аликвоте спектрофотометрически либо по долгоживущему индикатору, введенному перед разложением пробы. [c.199]

Отбор пробы представляет собой определенные проблемы при работе с неоднородными твердыми образцами. С определенными трудностями связан отбор проб биологических и сельскохозяйственных продуктов. Для получения представительной пробы мочи ее следует собирать в течение 24 ч. Привходящие обстоятельства, такие, как прием лекарств и изменение диеты, могут повлиять на состав отбираемой пробы. Хранение пробы может также привести к ошибкам, связанным с потерями за счет улетучивания либо взаимодействия с воздухом и влагой. Так, ненасыщенные жирные кислоты быстро разрушаются кислородом. Предварительная подготовка пробы необходима при анализе многих биологических продуктов, таких, как протеины и нуклеиновые кислоты. Реакции должны быть количественными и при этом должно быть исключено попадание в анализируемую смесь веществ, которые мешали бы определению либо могли бы быть спутаны с определяемыми компоцен-тами смеси. [c.175]

Для того чтобы при анализе биологических образцов свести к минимуму влияние основного компонента пробы, следует использовать селективные детекторы. В большинстве случаев чувствительность этих детекторов к специфическим элементам выше, чем у детектора по теплопроводности или пламенно-ионизационного детектора, а следовательно, они идеально подходят для определения следовых количеств веществ в сложных смесях. В результате исключаются стадии предварительной подготовки пробы — экстр 1кция и концентрирование, или же предварительная подготовка существенно упрощается. Среди наиболее часто применяемых селективных детекторов следует отметить электронозахватный (анализ хлорсодержащих соединений), пламеннофотометрический (анализ серу- и фосфорсодержаш 1Х соединений) и с13отно-фосфорный (анализ азот- и фосфорсодержащих соединений). Кроме того, в результате внедрения в лабораторную практику гибридных методов анализа — ГХ-МС и ГХ-ИК — спектроскопии — клиническая медицина имеет в своем распоряжении широкую гамму методов, позволяющих определить строение различных химических веществ. [c.253]

Поступающие в депозитарий биологические образцы считаются потенциально патогенным материалом. Это имеет отношение также и к пробам крови на РТА-картах. Работа по первичной приемке проб, их извлечение из транспортной упаковки и сортировка должны вестись в отдельном блоке на грязной половине депозитария. После окончания приемки и сортировки вновь поступившего материала упаковочный материал должен быть уничтожен, инструментарий и посуда обработаны дезинфицирующими растворами и проавтоклавированы. После окончания работы, поверхности столов и стены должны быть вымыты дезинфицирующим рас- [c.51]

Так, в кислой среде метилртуть хлоридом олова не восстанавливае в щелочной среде — на 67 %. Добавление к восстановителю ионов ме повышает степень восстановления метилртути до 82 %, а при предвари ном добавлении к анализируемому раствору комбинированного рас окислителя (персульфата калия) и катализатора (ионов меди (П)) в< новление метилрути достигает 100 % [360]. Эффективность восстанов органических форм ртути зависит от концентрации щелочи и хлорид ва, а также от соотношения анализируемой пробы и восстановителя 602, 607]. Для достижения полноты восстановления ртутьорганическу динений используют катализаторы — соли золота, серебра, кадмия, к та, палладия. Наиболее эффективны соли кадмия [487]. Впервые ком рованный восстановитель хлорид олова — кадмий (II) в щелочной ср( пользован при определении метилртути в биологических образцах Магоса) [462]. В дальнейшем его использовали для анализа как биоло [c.98]

С целью сохранения тканей в условиях, гарантирующих постоянство состава в отношении определяемых компонентов, пробу обычно сразу же замораживают и сохраняют до анализа при низких темпера гурах (до -180 С) 186-881, Применяют и другие методы фиксации биологического материала, например в формалине. Иногда тк ши перед заморазкиванием гомогенизируют. Замороженные образцы хорошо сохраняются длительный период и могут находиться в таком состоянии многие годы (89 . Так, в Канаде банк образцов содержит свыше 10 тыс. тканей 210 видов птиц, 43 видов млекопитающих, 50 видов рыб, 11 видов рептилий и 6 видов амфибий. В качестве емкостей для замороженнь(х проб используются фольга или стеклянная посуда. [c.193]

Обычно отбор проб тканей млекопитающих производится в зимний период От свежей туши крупного животного (волка, лисицы и др.) отре-застся кусок мышечной ткани (100 г) и жира (50 г), а от небольшого хищника (соболя, куннцы и др.) - нижняя половина туши без хвоста Еще более мелкие особи (до 300 г) берутся на пробу целиком. В один сезон достаточно отобрать биологический материал от 5-7 особей одного вида. Образцы хранятся в замороженном состоянии до анализа [c.193]

В последние годы разработаны новые варианты иммуноанализа, используемые при массовых обследованиях населения для установления факта злоупотребления наркотическими препаратами. В основе этих методов лежит принцип иммунохроматографии. Все реагенты, необходимые, адя проведения анализа, нанесены в сухом виде на специальную полоску -стрип, с помощью которой при контакте с исследуемой пробой можно сразу на месте в считанные минуты увидеть результат определения. Вот почему именно эти способы анализа наиболее удобно использовать для экспресс-диагностики при скрининговых обследованиях населения. Иммуноанализ на полосках отличается простотой исполнения, не требует дорогостоящего оборудования, специально обученного персонала, время анализа составляет 5-8 минут, позволяет без какой-либо обработки анализируемого образца получать предварительные результаты, свидетел1.ствую-щие о наличии или отсутствии наркотического препарата в биологической жидкости человека. [c.199]

При работе с образцами особо сложного состава (например, биологическими жидкостями) подготовка к анализу, как правило, многостадийная. Она может включать операции по осаждению, центрифугированию, фильтрованию, экстракции. Прп этом успех анализа в большей степени зависит от качества подготовки проб, чем от выбора условий хроматографирования. В последние. годы ряд фирм освоили выпуск пластмассовых хроматографических патронов для очистки и концентрирования образцов. Эти патроны (объем 1—20 мл) заполняются крупнозернистыми сорбентами, по химии поверхности совершенно аналогичными тем сорбентам, которые используются в ВЭЖХ. Принцип их использования следующий. Изучаемый объект растворяют в растворителе, обладающем незначительной элюирующей силон по отношению к анализируемым веществам. Полученный раствор пропускают через патрон, при этом более подвижные компоненты пробы в нем не задерживаются, а определяемые соединения накапливаются в верхней части слоя сорбента. Таким образом через патрон можно пропустить довольно большой объем образца, во много раз превышающий объем сорбента в нем. По окончании этой операции колонку промывают небольшим объемом растворителя, обладающего значительной элюирующей силой по отношению к определяемым соединениям (й яаЮ ). В результате такой процедуры из образца удаляются механические примеси, слабо и необратимо сорбирующиеся вещества. Получают фракцию небольшого объема, содержащую помимо определяемых соединений лишь фоновые компоненты с близкой хроматографической подвижностью. [c.212]

Ионообменная хпоматотаФия. Неподвижная фаза - ионит, характеризуемый различными константами ионообменного равновесия по отношению к компонентам разделяемой смеси. Применяется в анализе природных и сточных вод, атмосферных осадков, газовых выбросов, технологических растворов и материалов, фармацевтических препаратов, биологических жидкостей, продовольствия и др. [16]. Анализируемыми объектами могут быть жидкие, твердые и газообразные образцы (в последнем случае требуется соответствующая подготовка пробы). Метод может применяться для определения как низких, так и высоких концентраций ионов. [c.53]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология