Мышечная ткань получение

Для получения гликогена удобно пользоваться мышечной тканью крысы или кролика. Животное предварительно в течение суток обильно кормят сахаром. Для обнаружения гликогена целесообразно использовать также печень животного. Содержание гликогена в печени значительно выше, чем в мышцах, и может доходить до 5—10%. [c.250]

Получение безбелкового экстракта мышечной ткани [c.191]

Экстракт мышечной ткани может быть получен одним из способов, описанных выше (с. 191). После упаривания на роторном испарителе сухой остаток растворяют в смеси НСООН—СНзСООН—Н2О (7 5 13) с таким расчетом, чтобы 1 мл раствора соответствовал [c.195]

Получение экстракта. Мышечную ткань (15—20 г) измельчают на льду ножницами и гомогенизируют 30—40 с 1 объемом раствора Бейли. К гомогенату добавляют еще 2 объема раствора Бейли и смесь оставляют на холоде на 15—20 мин, время от времени осторожно помешивая ее стеклянной палочкой. Гомогенат центрифугируют на центрифуге с охлаждением в течение 15—20 мин при 10 000—12 000 об/мин. [c.392]

Мышечную ткань (1 г) тщательно растирают в течение 3—5 минут в ступке с 10 каплями дистиллированной воды до получения гомогенной кашицы, затем добавляют 4 мл воды и тщательно растирают еще несколько минут. Содержимое ступки переносят в широкую пробирку и нагревают на голом огне до кипения. Выпавший осадок белка отделяют фильтрованием, а полученный фильтрат используют для обнаружения экстрактивных веществ креатина, карнозина и молочной кислоты. [c.255]

Получение безбелковой вытяжки из мышечной ткани и открытие экстрактивных веществ [c.255]

Работу по выделению фермента начинают с разрушения клеточной оболочки тканей, в результате чего фермент переходит в экстрагирующий раствор. Мышечную ткань можно разрушить с помощью мясорубки, а также гомогенизатора. Клеточную оболочку в ткани печени удобно разрушать обработкой ацетоном. Для этого ее помещают в гомогенизатор, заливают несколькими объемами ацетона, предварительно охлажденного до —20° С, и гомогенизируют на холоде 1—2 мин. Полученный гомогенат быстро фильтруют на воронке с отсасыванием. Осадок еще раз аналогично обрабатывают ацетоном, затем измельчают вручную (в ступке) при комнатной температуре и помещают в вакуум-эксикатор. Ацетоновый порошок может храниться в холодильнике несколько месяцев и использоваться по мере надобности. Обработка ацетоном не только разрушает клеточную оболочку, но также обезвоживает тка нь и освобождает ее в значительной степени от липидов. Одним из наиболее часто применяемых способов разрушения клеточной оболочки дрожжей является автолиз. Дрожжи предварительно можно высушить, что позволяет хранить их, как и ацетоновые порошки животных тканей, длительное время в холодильнике (в герметической упаковке). От условий высушивания дрожжей часто зависят выход фермента и его удельная активность. [c.198]

Мясо — это туша или часть туши, полученная от убоя крупного рогатого скота, представляющая совокупность мышечной, жировой, соединительной и костной тканей. Качество мяса определяется количественным соотношением тканей и их физико-химическими и морфологическими характеристиками, зависящими от вида скота, породы, возраста и пола. Количественное соотношение тканей в мясе примерно составляет мышечная ткань — 50... 70 %, жировая ткань — 3... 20 %, костная ткань — [c.98]

Многие природные полимеры, встречающиеся в животных и растительных тканях, находятся в ориентированном состоянии, что придает природным материалам высокую прочность в сочетании с гибкостью (волокна в стеблях растений, хлопок, шелк, волосы, паутина, сухожилия, мышечная ткань и т. д.). Изучение механических свойств таких биологических объектов важно для разработки новых, более совершенных методов получения высокоориентированных полимеров. [c.458]

Ход работы. 1. 0,5 г измельченной мышечной ткани помещают в пробирку с 5 мл раствора ТХУ и экстрагируют на льду в течение 10 мин, интенсивно перемешивая палочкой. Прибавляют в пробирку 5 мл дистиллированной воды. Полученный раствор фильтруют через бумажный фильтр. [c.127]

Основным резервным полисахаридом животных организмов является гликоген. Он обнаружен в большинстве животных тканей наиболее удобными источниками для его экстракции обычно слу- кат печень или мышечная ткань. Печень человека содержит до 10% гликогена (от сухой массы). В отличие от крахмала выделение и очистка гликогена — непростая задача. По классическому методу ткань нагревали в сильношелочном растворе при 100°С в течение 3 ч для ее растворения и затем осаждали гликоген этанолом. После обнаружения факта щелочного распада (см. разд. 26.3.2.5) была разработана другая методика. При экстракции холодным разбавленным раствором трихлоруксусной кислоты был выделен продукт, молекулярная масса которого была в 10 с лишним раз больше, чем у продукта, полученного традиционным методом [158]. В настоящее время разработаны методы, позволяющие еще надежнее исключить распад в процессе выделения [159] с их помощью можно определить действительную молекулярную массу выделенного полисахарида. Было найдено, например, что молекулярная масса гликогена из печени при общем нарушении процесса отложения в ней гликогена меньше нормальной. [c.257]

Мышечную ткань только что убитого животного быстро на холоду отделяют от костной ткани и непродолжительное время сохраняют на холоду, предотвращая тем самым возможный ферментативный распад гликогена. 1 г измельченной ножницами мышечной ткани (или 0,5 г печени) заливают в фарфоровой чашке 4 мл кипящей дистиллированной воды и кипятят на огне (на горелке с асбестовой сеткой) в течение 2—3 минут. Белки при этом свертываются, а ферменты разрушаются. Содержимое фарфоровой чашки переносят в фарфоровую ступку и ткань тщательно растирают пестиком до получения гомогенной массы. Кашицу, если нужно, разбавляют 1 мл дистиллированной воды, переносят обратно в фарфоровую чашку и кипятят на огне еще в течение 20—30 минут, все время подливая каплями воду по мере выкипания жидкости. Гликоген переходит в раствор. Для более полного осаждения белка кипящую жидкость подкисляют 5—10 каплями 1% раствора уксусной кислоты. Осадок белка отделяют фильтрованием через влажный бумажный фильтр и с фильтратом, содержащим коллоидный раствор гликогена, проделывают описанные ниже реакции. [c.250]

Из тканей и органов животных и растительных организмов многие ферменты, находящиеся в плазме клеток в растворенном состоянии, легко извлекаются водой, растворами солей, очень слабыми кислотами или щелочами, водными растворами глицерина и др. Органы животных (печень, мозг, слизистая оболочка желудка и т. п.), предназначенные для получения того или иного фермента, отмывают от крови и измельчают обычно на холоду для предотвращения разрушения части ферментов другими (протеолитическими) ферментами. После измельчения ткань экстрагируют той или иной жидкостью. Таким путем можно легко получить, например из мышечной ткани, весь комплекс ферментов гликолиза (см. стр. 265). Хорошим растворителем для большинства ферментов является глицерин. Глицериновые экстракты отличаются стойкостью, представляю Г Нало подходящую для развития бактерий среду и содержат лишь небольшое количество посторонних белковых примесей. Полученные путем настаивания с измельченными органами водные или глицериновые вытяжки отделяют затем от частиц ткани фильтрованием или центрифугированием. [c.133]

Адениловая кислота. — Это соединение было выделено Эмбденом в 1927 г. нз мышечной ткани. Оно является изомером З -адениловой кислоты, полученной из дрожжей. При щелочном гидролизе адениловая кислота из мышц дает аденозин, следовательно, отличается от дрожжевой только положением фосфатной группы. Б -Адениловая кислота, в отличие от 2 - и З -изомеров, способна образовывать комплекс с борной кислотой. Следовательно, цис-гликольная [c.722]

Мышечная ткань, а. Сырая мышца, взятая после трупного окоченения. Анализ, проведенный в предположении о 3- и 4-х процессах релаксации, указывает, что доминирующей ( ЭО о) является релаксация с Tзначениях параметров, полученных при двух этих процедурах, обусловлено различиями в анализе быстрой начальной стадии спада. В приближении 3-х процессов эта стадия описывается уравнением с одной экспонентой и Г2=1,7 мс, а в приближении 4-х процессов стадия включает два различных релаксационных процесса. [c.197]

Экстракт фильтруют через ватный тампон и полученную порцию фильтрата соединяют с первой фракцией, а затем пропускают через колонку, которую готовят так же, как и при исследовании мышечной ткани или крови. Колонку промывают 20 мл хлороформа. Когда весь экстракт опустится до адсорбента, колонку промывают последовательно 50 мл хлороформа и 20 мл ацетона. Зоокумарин элюируют 50 мл смеси ацетона и 2%-ного раствора гидроокиси натрия (47 3). Элюат собирают в фарфоровую чашку № 10, добавляют 0,2 мл ледяной уксусной кислоты и выпаривают досуха на кипящей водяной бане. При спектрофотометрическом определении зоокумарина уксусную кислоту не добавляют. [c.229]

Сделаем первый шаг — отделим мелкие растворимые частицы от нерастворимого остова, не разрушая сам остов. Это можно легко сделать, промывая полоску кроличьей мышцы в воде. Теперь введем перешедшие в раствор молекулы обратно в мышцу. Для этого мы положим мышцу в концентрат полученного раствора или, проще, в кипяченый экстракт некоторых других мышечных тканей. Что происходит Мышца сокращается Как показывают специальные измерения, сила этого сокращения такова, что мышца легко может поднять груз, вес которого в тысячу раз превышает ее собственный, т. е. сделать то, что делает нормальная л<ивая мышца. Несомненно, мы имеем перед собой не что иное, как сокращение мышцы. [c.231]

К рассматриваемому классу веществ, называемых полимерами, относятся все волокна — как натуральные, так и полученные искусственным путем. Такие волокна, как шерсть, волосы, щетина, хлопок, лен, джут, мышечная ткань животных, шелк, найлон, терилен, при всем разнообразии химической структуры сравнимы по прочностным характеристикам. Очевидно, что волокнообразующие свойства этих материалов должны определяться каким-то общим фактором. Аналогично натуральный каучук и все синтетические каучуки, сырьем для которых обычно служат продукты переработки нефти, состоят из больших молекул. Хотя механические свойства каучуков, обладающих высокой эластичностью, очень сильно отличаются от свойств волокон, в строении молекул этих двух типов веществ много общего. Несколько ниже будет показано, что различия между волокнами и каучуками не так уж велики, и часто один материал может быть превращен в другой путем довольно простой химической обработки. [c.8]

Навеску ( 5 г) измельченной мышечной ткани (получение см. на с. 49) гомогенизируют в стеклянном гомогенизаторе Поттера с тефлоновым пестиком с нарезкой. Тканевый гомогенат после 20-минутной инкубации при помешивании центрифугируют при 15 000 g в течение 20 мин. Супернатант после дентрифугирования представляет собой 14%-ную растворимую клеточную фракцию. Препарат фильтруют через 4 слоя марли и хранят при О °С в течение суток. [c.375]

Осаждение хлорной кислотой. Навеску мышечной ткани (3—5 г) освобождают от жира, соединительной ткани и измельчают ножницами на холоде. К кашице добавляют 5 объемов охлажденного 0,5 н. раствора НСЮ4, гомогенизируют или тщательно растирают в ступке. Суспензию центрифугируют (20 мин, 1000 g), надосадочную жидкость собирают, осадок вновь суспендируют в 1 —1,5 объемах хлорной кислоты. Промывные воды соединяют с центрифугатом. Хлорную кислоту удаляют в виде перхлората калия (с. 29). Полученный центрифугат упаривают на роторном испарителе при температуре 40—45° С. [c.191]

Экстракция. К 150—200 г охлажденной мышечной массы (получение см. на с. 221) добавляют равный (по отношению к весу ткани) объем 0,03 н. раствора КОН, содержащего 1 мМ ЭДТА и 0,2 мМ ДТТ, экстрагируют в течение 10 мин, после чего центрифугируют (20 мин, 10 000 г). Осадок повторно экстрагируют половинным объемом щелочи в течение 5 мин и вновь центрифугируют pH экстракта колеблется от 6,6 до 7,3. [c.274]

Полученным таким способом волокнам можно придать разную организацию, например, расположить их параллельными пучками, чтобы имитировать волокнистую структуру мышечной ткани. Однако необходимо соединить волокна между собой для получения продуктов с приемлемой текстурой. Когезии можно добиться термообработкой сырых волокон под давлением [32 , но чаще всего она достигается введением связующего вещества. Нередко для этого служит овальбумин, поскольку он коагулирует под действием тепла, но в состав связующих веществ могут входить и другие белки, такие, как желатин, казеин, белки сыворотки молока, клейковина, белки сои. Используются также крахмал и полисахариды типа альгината и каррагинана благодаря их загущающим и желирующим свойствам. Связующие вещества, помимо их склеивающей, когезионной роли, могут служить основой для введения пигментов, ароматизирующих добавок и липидов. Пропитку волокон можно проводить в ванне с раствором, содержащим связующее вещество. Закрепление связующего вещества происходит затем под действием прогрева, а более равномерное распределение в массе можно улучшить разделением волокон вибрацией [29] или заставив их циркулировать в противотоке связующего вещества в извилистом контуре [71]. Некоторые авторы [64] предложили технологический процесс, в котором связующее вещество не распределяется равномерно, [c.536]

В работе Зусмана и Чина [173] представлены данные исследования мышечной ткани трески с помощью спектрометра ЯМР высокого разрешения. Для получения препарата использовали цилиндрическую ячейку диаметром 5 мм с зубчатым режущим краем. Ввинчивая ячейку в рыбное филе, получали одинаковые по размеру образцы. Авторы провели измерения при разных температурах вплоть до —70 °С. В спектрах имеется один широкий симметричный пик, смещенный в слабое поле по отношению к сигналу от ТМС. Положение этого пика совпадало с сигналом от дистиллированной воды при той же температуре. Содержание жидкой воды определяли сравнением площади пика в ЯМР-спектрах образца и эвтектического 23,3%-ного раствора хлорида натрия в воде, зарегистрированных при одинаковой температуре. График зависимости содержания жидкой воды в мышечной ткани трески от температуры (рис. 8-12) имеет резкий излом в интервале температур от —5 до —15 °С, нулевое значение достигается при температуре —70 °С. Выстрозамерзающая вода названа авторами свободной водой, медленнозамерзающая — связанной . Следует отметить, что жидкая вода обнаруживается даже при температуре, близкой к —70 °С. [c.476]

Полученный экстракт сливают в две центрифужные пробирки, оставляя в ступке стеклянный песок. Пробирки попарно уравновешивают на центрифужных весах добавлением из пипетки 5%-ного раствора хлорида калия и помещают в центрифугу . Гомогенат центрифугируют в течение 15 мин при 4000 об/мин (точнее при 1500—20СЮ ). При этом осаждаются обломки клеток, неразрушенные целые клетки, волокна соединительной ткани. Надосадочную жидкость, содержащую белки мышечной ткани, сливают в чистую пробирку, [c.6]

Аналитическое применение катионоселективных стеклянных электродов поражает своим размахом и многогранностью. Эти электроды используют для потенциометрических титрований, исследования коэффициентов активности, измерений констант равновесия, непрерывного анализа и изучения кинетики процессов. Доступность стеклянных электродов и совершенство конструкции специальных миниатюрных и проточных электродов для определения натрия и калия, имеющих большую физиологическую важность, способствуют особо ценному применению этих электродов в медико-биологическом анализе. С их помощью можно измерять активности ионов натрия и калия в моче, сыворотке, спинномозговой жидкости, крови, плазме, желчи, коре головного мозга, почечных канальцах, мышечных тканях. Во многих случаях правильность результатов сравнима (если не лучше) с правильностью результатов, полученных методом пламенной фотометрии при этом измерения со стеклянным электродом подчас можно выполнить быстрее. Для экспрессного диагноза кистофиброза поджелудочной железы, для которого характерны аномально высокий уровень концентраций натрия в поту, определяют активность иона натрия на поверхности кожи. Можно привести многочисленные примеры применения натрий- или калийселектив-ных стеклянных электродов для анализа воды и экстрактов почв. Поскольку в будущем число катионоселективных стеклянных электродов будет, без сомнения, увеличиваться, следует ожидать и появления новых областей их применения. [c.382]

Ход работы. В 2 пробирки (контрольную и опытную) помещают по 0,5 г свегжеприготовленной мышечной кашицы и по 3 мл фосфатного буфера pH 8,0. В первую (контрольную) пробирку добавляют 2 мл 5% раствора метафосфорной кислоты для разрушения фера- ентов мышечной ткани и 1 мл дистиллированной воды. Во вторую пробирку (опытную) добавляют 1 мл 0,5% раствора гликогена или крах.мала. В обе пробирки наливают по 10 капель вазелинового масла для создания анаэробных условий. Пробирки помещают в термостат при температуре 37° на 1 час. Через час их вынимают и во вторую (опытную) пробирку добавляют 2 мл 5% раствора метафосфорной кислоты для прекращения действия ферментов. Содержимое пробирок фильтруют через бумажный фильтр в 2 чистые пронумерованные пробирки. К полученным фильтратам добавляют по 0,5 г гидроокиси кальция и по 1 мл полунасыщенного раствора сернокислой меди для осаждения углеводов, присутствующих в фильтратах, и в течение 15 минут время от времени взбалтывают. Выпавший осадок углеводов отфильтровывают и получают два прозрачных фильтрата контрольный и опытный. [c.175]

Ход работы. 1. Получение водной вытяжка (миоген). Мышечную ткань (0,5 г) растирают в фарфоровой ступке с 10 каплями дистиллированной воды в течение 3—5 минут до получения гомогенной массы. К растертоц мышечной кашице подливают при помешивании небольшими порциями (по 5—10 капель) дистиллированную воду (всега в количестве 3 мл). [c.249]

Водную вытяжку фильтруют через тройной слой марли.. Остаток мышечной ткани сохраняют для получения солевой, вытяжки, а с фильтратом проделывают биуретовую реакцию, (см., стр. 9), высаливание альбуминов сернокислым аммоли--ем (см. стр. 37) и гваяковую пробу на присутствие миоглоби-, на (см. стр. 52). [c.249]

Получение коллагена мышечной ткани. Для удаления следов глобулиновой фракции остаток ткани отмывают новыми порциями раствора хлористого калия до получения отрицательной биуретовой реакции. Промывную, жидкость выбрасывают. [c.249]

Ход работы. I. Для получения раствора, содержащего карнозин, 50 г хорошо измельченной мышечной ткани, взятой от только что убитого животного, трехкратно экстрагировать 250-ю мл воды при температуре 80°С (на водяной бане). Полученные экстракты соединить вместе, слабо подкислить уксусной кислотой и осадить белки кипячением, после чего отфильтровать осадок белков и слегка промыть водой. Экстракт и промывные воды довести осторожным добавлением 0,1 н. NaOH до нейтральной реакции (pH 7,0) и упаривать на водяной бане до объема 50 мл. Полученный концентрированный экстракт содержит все экстрактивные вещества мышечной ткани и среди них дипептид карнозин. [c.191]

II. Взять три колбы. В первую поместить 10 м,л полученного экстракта, 15 мл AI/15 фосфатной буферной смеси с pH 7,8, 5 мл раствора днпептидазы и 3—4 капли хлороформа. Во вторую колбу — такую же смесь, но с 5 мл предварительно прокипяченного раствора фермента. В третью — контрольную колбу — такую же смесь, за исключением 10 мл экстракта мышечной ткани. Все колбы закрыть пробками и поставить в термостат при 38° С ка 24 ч. После этого, все колбы охладить. В третью, контрольную, добавить 10 jMA экстракта мышц и сейчас же определить во всех трех аминоазот, пользуясь газометрическим методом (см. работу 111). [c.191]

Для идентификащ1и ПХБ (в атмосферных частицах, промышленных отходах, мышечных тканях рыб) можно воспользоваться и обратным приемом — не дехлорированием, а перхлорированием [152]. Продукты реакции (например, декахлорбифенил) экстрагируют гексаном и анализируют на хроматографе с ПИД. Предел обнаружения 0,01 нг. При анализе загрязнений воздуха пробу отбирают на стекловолокнистый фильтр, на котором ее можно без предварительной обработки фильтра подвергать действию реагентов. Для получения представительной пробы к фильтру при пробоотборе присоединяют стеклянную трубку с адсорбентом (улавливание паров). Сконцентрированные в трубке ЛОС десорбируют смесью бензола и изооктана. [c.335]

Спектрофотометрическое определение зооку марина в мышечной ткани и крови животных. Полученный после выпаривания остаток в фарфоровой чашке растворяют в 4 мл 2%-ного раствора гидроокиси натрия, фильтруют через бумажный фильтр в пробирку и измеряют оптическую плотность при 308 нм. Для сравнения используют пробу мышечной ткани или крови от того же вида здорового животного. [c.230]

С. входит в состав белка земляного ореха, найден в гидролизатах нек-рых антибиотиков — актиномице-тов. В свободном состоянии встречается в составе азотных экстрактивных веществ мышечной ткани. С. может быть получен синтетически, напр. [c.373]

Хьюз и Фрейз [221] изучали фосфолипиды, полученные из нормальных и пораженных болезнью мышечных тканей, а Фи-липпарт и Менкес [222] исследовали большую часть гликолипидов, взятых из селезенки, пораженной болезнью Гоше. Грэй [223], а также Керри и др. [224] исследовали фосфолипидный состав опухолевых тканей. [c.95]

Ход определения, а) Подготовка пробы. При анализе мышечных тканей или внутренних органов животных навеску образца 50 г помещают в смеситель и гомогенизируют с 200 мл ацетона и 50 г адсорбента. Смесь перемешивают 5 мин и фильтруют с отсасыванием через фильтровальную бумагу ватман № 3. Остаток помещают в гомогенизатор и экстрагируют 200 мл бензола определяемое вещество в течение 5 мин. После фильтрования бензольный и водно-ацетоновый растворы переносят в делительную воронку и тщательно встряхивают, отделившийся нижний водный слой отбрасывают. К бензольно-ацетоновому слою добавляют 5 г адсорбента и 200 мл хлороформа. После перемешивания и фильтрации отгоняют растворитель на паровой бане в струе воздуха. Остаток растворяют в 300 мл -гексана и обрабатывают тремя порциями ацетонитрила по 50 мл. Каждую ацетонитрильную фракцию промывают в свою очередь н-гексаном порциялги по 200 мл. Объединяют ацетонитрильные экстракты и растворитель отгоняют на паровой бане. Полученный остаток растворяют в 10 мл хлороформа. [c.348]

Из полученных данных следует, что отсутствие остатков ГХЦГ в жировой ткани указывает и на отсутствие их в печени, почках и мышечной ткани. [c.298]

Бателли и сотр. сделали наблюдение, что поглощение кислорода мышечными тканями в присутствии, янтарной кислоты задерживается синильной кислотой.Тунберг подтвердил это наблюдение и нашел, с своей стороны, что этот яд не оказывает влияния на обесцвечивание метиленовой сини мускульными тканями и янтарной кислотой. Исходя из предположения, что в обоих случаях он имеет дело с одним и тем же ферментом, он объясняет полученные им результаты тем, что синильная кислота задерживает действие кислорода, но не метиленовой сини. При современном состоянии наших знаний вряд ли необходимо подчеркивать, что синильная кислота отравляет не кислород, а катализатор (оксидазу или систему с железом по Варбургу). [c.532]

Для получения образца мышечной ткани проводится микробиопсия под местным обезболиванием над исследуемой мышцей делается разрез кожи и специальной иглой берется маленький кусочек мышцы объемом 2-3 мм . Полученный биоптат подвергается микроскопическому и биохимическому анализу. [c.245]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология