Гелий коэффициенты распределения

Если при использовании одного типа геля коэффициенты распределения двух веществ равны соответственно К и Ка, то необходимые для их вымывания объемы различаются на величину Ув [c.477]

Раствор, фильтруемый через набухший гель, заполняющий высокую и узкую колонку, распределяется между свободным растворителем и растворителем, находящимся в геле. Коэффициент распределения, как показали многочисленные опыты, определяется молекулярным весом фильтруемого вещества. [c.489]

В гомологическом ряду размеры молекул возрастают с увеличением молекулярного веса. Для видов молекул, более или менее свободно проникающих в структуру геля, коэффициент распределения имеет величину i > Ка> О, поэтому можно полагать, что внутри определенного интервала молекулярных весов будет происходить фракционирование по молекулярному весу. Следствием процесса поперечной сшивки является широкий набор размеров ячеек трехмерной сети, что объясняет плавное изменение значений К в довольно большом интервале молекулярных весов. [c.274]

Если размеры молекул вещества значительно меньше пор гранул геля и они беспрепятственно проникают внутрь пор, то для таких молекул коэффициент распределения /Со=1. Молекулы вещества, по своим размерам занимающие промежуточное положение, могут проникать в поры ограниченно, т. е. для них доступны ие все поры и, следовательно, не весь внутренний объем гранул. Для них 0константой вещества и зависит только от размеров и конформации молекул данного вещества. [c.238]

По данным гель-хроматографии строят график = f(V) и рассчитывают коэффициент распределения Ко по уравнению (3.22), число теоретических тарелок N и критерий разделения R для арсеназо и нитрофенола — по формулам (3.3) и (3.7). [c.241]

При ПОМОЩИ металлической трубки через колонку с постоянной скоростью пропускается газ-носитель (водород, гелий, азот, аргон, двуокись углерода), в который в головке колонки впрыскивается смесь веществ, подлежащих разделению с потоком газа-носителя вещества проходят через колонку, где они распределяются в соответствии с их коэффициентом распределения между газом и жидкостью. На выходе из колонки при помощи той или иной системы [c.96]

В распределительной жидкостной хроматографии коэффициент разделения называют коэффициентом распределения, в хроматографии исключения (ситовой хроматографии)—коэффициентом исключения, в адсорбционной жидкостной хроматографии — коэффициентом адсорбции, в ионообменной хроматографии и гель-про-никающей хроматографии — коэффициентом разделения. [c.8]

Коэффициент К соответствует коэффициенту распределения, который в гель-хроматографии может принимать значение от О до 1 [c.288]

Однако объема ое недостаточно для характеристики поведения растворенного вещества. Необходимо также знать общий объем (Ко) геля и то, как заполняется колонка. По аналогии с распределительной хроматографией через Уе — объем элюции, Уо — мертвый объем, называемый также объемом исключения, т. е. объем элюции крупных молекул, которые не могут проникнуть в гель, и /5 — объем неподвижной фазы, т. е. объем растворителя в сетке геля, определяют коэффициент распределения [c.85]

Было найдено, что коэффициенты распределения ионов различных элементов между гелем и раствором сильно увеличиваются с ростом pH. При одинаковой кислотности сорбция уменьшается в ряду 2г(1У)>и(1У) =5 Ри(1У)>и(У1)>Са= Ва= Ыа. Скорость сорбции зависит от заряда иона для Ри +, и + она медленнее, чем для иоГ, Са + и Ыа+. Авторы работ [263, 264] показали, что А йРи(1У) при концентрации НЫОз, равной 0,1 М, значительно выше, чем в растворах 0,5 М. НЫОз. Раствор 4,5 М НЫОз количественно вымывает Ри(1У), а цирконий сорбируется силикагелем из этой среды. 2г(1у) удерживается сорбентом при промывании его 5 М НЫОз. Различия в поведении Ри(1у) и 2г(1У) достаточны для разделения этих элементов, и(VI) не,, сорбируется из 0,1 М НЫОз, но поглош,ается из слабокислых растворов (рН 3). [c.369]

Распределение вещества между двумя фазами (т. е. между растворителем, находящимся внутри и вне зерен) можно описать при помощи коэффициента распределения Кй- Значение Ка зависит от молекулярной массы распределяющегося вещества и от типа используемого геля. Для больших молекул, которые не могут проникать в поры, /С<г=0, для маленьких молекул или ионов, свободно проникающих в объем геля, Ка= = 1. Значения Ка для молекул промежуточного размера находятся в пределах от О до 1 в зависимости от их размера. [c.477]

Для расчета коэффициента распределения в этих условиях удобно воспользоваться следующей моделью. Предположим, что набухший гель неоднороден по плотности распределения в нем полимерных сегментов. Его неплотные области можно рассматривать как поры, а плотные — как стенки этих пор. Вероятность попадания макромолекул в такие поры определяется в соответствии с молекулярно-ситовым эффектом как функция их гидродинамического размера, а исключение из плотных областей — в соответствии с эксклюзионным эффектом, как функция термодинамической совместимости макромолекул с гелем. [c.123]

Наряду с традиционными порометрическими методами, гель-проникающая хроматография может с успехом использоваться для характеристики норовой структуры сорбента. Так, например, для сорбентов с узким -распределением по размерам пор, средний радиус пор может быть определен с помощью зависимости коэффициента распределения линейных гибкоцепных макромолекул К к от отношения их среднеквадратичного радиуса инерции к среднему радиусу пор г (рис. IV.33). Найдя из ГПХ-эксперимента коэффициент распределения Кй какого-либо [c.184]

Для разделения замещенных амидов применяли также гель-хроматографию. Стационарной фазой служили биогели Р-2 и Р-6, подвижной фазой — 0,01 М раствор хлорида натрия. Коэффициенты распределения приведены в табл. 31.2 [8]. [c.300]

Коэффициенты распределения аминокислот при гель-фильтровании на сефадексе G-10 в десяти системах растворителей [c.350]

В распределительной хроматографии фракционирование осуществляется на колонках с фиксированной полярной (обычно водной) фазой. Разделяемые пептиды продвигаются в потоке подвижной фазы с разной скоростью в соответствии с коэффициентом распределения. В качестве носителя полярной фазы используют всевозможные гели и целлюлозу. В настоящее время метод находит ограниченное применение. [c.390]

При условии, что разделяемые вещества не сорбируются частицами геля, процесс, происходящий в колонке, можно рассматривать как частный случай жидко-жидкостной хроматографии. При прохождении через колонку общим объемом Уг вещество распределяется между растворителем, окружающим гранулы геля (с объемом Уо) и растворителем, заключенным внутри гранул (объемом После прохождения столбика сорбента вещество элюируется в объеме Уе. Поведение белков может быть охарактеризовано с помощью коэффициента распределения [c.423]

Эккере [33] применил этот принцип к гель-хроматографии и предложил для очень пористых гелей механизм ограниченной диффузии. (В отличие от других типов геля для сефадекса 0-200 коэффициент распределения между фазой геля и элюентом в равновесном состоянии значительно отличался от значения Кв., определенного на колонке.) Согласно новому принципу, объемы выхода макромолекул (белков) с гранулированного геля агара или сефадекса 0-200 определяются скоростью их диффузии в фазу геля. Вследствие медленной диффузии крупные молекулы проникают в гель не столь глубоко, как мелкие, н поэтому вымываются с колонки гораздо раньше. Вновь применив уравнение Ренкина [32], Эккере связал величину /(( , характеризующую поведение макромолекул в геле, с величиной г Я, где г — радиус частиц белка [c.120]

Исследуе- Подвкжиьп раствори гель Коэффициент распределен ИЯ [c.170]

По данным гель-хроматографии строят график с = 1(У), рассчитывают 1 0, коэффициент распределения Ко, КаУ и число теоретических тарелок для глицнпа. Записывают содержание (в мг) гемоглобина и глицина в журнал. [c.245]

В работе [17] исследовали гидролиз о-нитрофенилового эфира р-О-галактопиранозида под действием р-галактозидазы (мол. вес 540000), иммобилизованной в 15%-иом геле полиакриламида. Эксперимент проводили следующим образом в раствор субстрата ([3]о= 1,66-10 2 М) помещали пластинку определенной толщины, вырезанную из куска геля, с равномерно распределенным в ней ферментом, и регистрировали реакцию по образованию в растворе о-нитрофенолят-иона. Ферментативная реакция, катализируемая ферментом в гомогенном водном растворе, характеризуется значениями /гкат = 273 сек- Лт(каж)= 1,73-Ю М. Коэффициент распределения субстрата между водой и гелем равен единице, коэффициент диффузии субстрата в геле равен 1-10 см /сек. [c.274]

По данным гель-хроматографии строят график с = 1С /), рассчитывают Уо, коэффициент распределения Кв, КаУ и числотеоретических тарелок для глицина. Записывают содержание (в мг) гемоглобина и глицина в журнал. [c.245]

Распределительная хроматография основана на различной растворимости разделяемых веществ в заданном растворителе. Природа сил межмолекулярно-го взаимодействия та же, что и в адсорбционной хроматографии, но в первую очередь обусловлена ван-дер-ваальсовыми силами. Поскольку разделение протекает на границе двух несмещивающихся между собой фаз — неподвижной (жидкости) и подвижной (жидкости или газа), процесс разделения веществ определяется различием их коэффициентов распределения между обеими фазами. Одна из фаз, используемых в распределительной хроматографии, богаче ор-га [ическим растворителем, другая — водой. Водная фаза обычно закрепляется на твердых гидрофильных носителях, например силикагеле, диатомовой земле, крахмале, гидрофильных гелях, измельченной в порошок целлюлозе, фильтровальной бумаге. Органическая фаза обычно выполняет роль подвижной фазы. [c.221]

Т. е. коэффициент объемного распределения равен отношению части внутреннего объема геля, которая доступна для макромолекул данного размера, ко всему внутреннему объему. Согласно уравнению (П1.14), для полностью исключенных молекул Кс1=0, так как Уе = Уо- На этом основано определение значения Уо по элюирующему объему макромолекул достаточно большого размера. Для самых малых макромолекул /Сй=1, так как Уе = = Уо + Коэффициент распределения не зависит от размеров колонки, но зависит от любого фактора, вызывающего изменение размера пор в гранулах геля, т. е. от типа геля, природы растворителя и температуры. [c.97]

В некоторых специальных случаях вводят другие, похожие по смыслу коэффициенты. Так, если вещество в неподвижной фазе находится целиком в растворе, как это имеет место при гель-фильтрации и распределительной хроматографии, то нередко пользуются величиной отношения концентраций (partition oeffi ient), которую тоже принято называть коэффициентом распределения Кц = J , где g и Сот — концентрации вещества в неподвижной и подвижной фазах соответственно. [c.17]

Неподвижная фаза при гель-фильтрации представлена жидкостью, находяш ейся внутри пористых, хорошо смачиваемых гранул, заполняющих хроматографическую колонку. Если на такую колонку подается растворенная в элюенте смесь молекул различных размеров, то крупные молекулы, неспособные проникнуть внутрь гранул, будут двигаться вдоль колонки вместе с подвижной фазой для них коэффициент распределения К = 0. В то же время наиболее мелкие молекулы, размеры которых заведомо меньше диаметра пор в гранулах, будут равномерно распределяться между подвижной и неподвижной фазами. Для них будет осуществляться хроматографический процесс с присущим ему замедлениехм миграции хроматографической зоны значение К прп этом близко к единице. Для молекул промежуточной величины благодаря статистическому распределению размеров пор окажется доступной только часть объема неподвижной фазы. Для них О < < 1, поэтому зона или зоны таких молекул будут мигрировать вдоль колонки быстрее, чем мелкие молекулы, но медленнее, чем крупные. В результате произойдет фракционирование исходной схмеси молекул на зоны в зависимости от их размеров. Зоны выходят из колонки в порядке убывания этих размеров (рис. 56). [c.109]

В главе 1 понятие коэффициента распределения — основного параметра хрохматографического процесса — было введено через равновесное отношение масс вещества, находящихся в неподвижной (Ms) и подвижной (Mm) фазах К = MJMm- Для идеального процесса гель-фильтрации (в отсутствие какой-либо сорбции молекул вещества) его концентрация в обеих фазах одинакова, так что коэффициент распределения можно представить отношением объемов неподвижной и подвижной фаз в пределах хроматографической зоны К = VJVjn- [c.110]

Коэффициент распределения является важной характеристикой для сравнения различных сорбентов. Волее того, на основании зтой величины все фундаментальные теоретические предпосылки, описанные в разд. 5.1, могут быть перенесены на гель-хроматографию. [c.288]

Сефадексы используют в качестве молекулярных сит при жидкостной хро-) матографии методом гель-фильтрации (синонимы гель-хроматография, гель-проникающая хроматография, молекулярно-исключакщая хроматография, экс-клюзиониая хроматография). Вещества с размерами молекул больше, чем размер пор геля, проходят через колонки с сефадексами без проникновения внутрь частиц геля, и элюируемый объем равен свободному, т. е. не занятому частицами геля объему колонки (обычно 38—42%). Мо/.екулы размером меньше, чем размер пор геля, будут проходить через зерна геля по этим порам, и в результате увеличения сечения колонки, проницаемого для таких молекул, их движение по колонке будет более медленным (элюируемый объем таких веществ будет больше свободного объема колонки). Другими словами, скорость движения отдельных веществ в колонках связана с коэффициентами распределения этих веществ между гелем и данным элюирующим раствором, чем больше коэффициент распределения, тем медленнее элюирование и тем больше величина элюируемого объема. [c.161]

Время удерживания несорбирующегося газа характеризует мертвый объем системы. По определению, в качестве несорбирующегося газа целесообразно использовать газы типа гелия, аргона при работе с катарометром не возникает никаких осложнений в использовании подобных газов. Однако пламенноионизационный детектор реагирует только на вещества, в состав молекул которых входит углерод. Наиболее низкомолекулярным из таких соединений является метан этот газ можно применять при температурах выше 100°С для измерения мертвого объема системы [29]. Но для более низких температур следует учитывать растворимость метана в неподвижной фазе, например при 70°С коэффициент распределения метана в сквалане составляет 0,16. Если использовать колонку длиной 1—2 м, содержащую 20% сквалана на носителе, при применении метана для измерения мертвого объема системы ошибка измерения чистого объема удерживания этана составляет 54,3%, н-бутана — 11,4%, к-пентана — 4,6%, к-октана — 0,3%, стирола — 0,2%, н-ионана — 0,1% [30]. [c.58]

Андерсон и Нейпиер [4 ] рассмотрели три метода определения величины У . Первый метод заключается в измерении разности между общим объемом колонки (определяется путем взвехнивания количества ртути, необходимого для полного заполнения пустой колонки) и объемом жидкой и твердой фаз (определяется по плотностям этих материалов при температуре колонки). Второй метод основывается на теории газового потока, проходящего сквозь пористые материалы. Третий метод основывается на скорости потока газа-носителя и удерживаемом объеме низкокипящего неорганического газа, например гелия или водорода, имеющего очень низкий коэффициент распределения и проходящего поэтому через колонку почти без задерживания жидкой фазой. Портер и другие [32] успешно применяли первый метод, Андерсон и Нейпиер считают, что третий метод дает более надежные результаты, так как измерение объема твердой фазы, требуемое первым методом определения У , представляет значительные трудности. [c.383]

Рис. 111.31. Зависимость коэффициента распределения от гидродинамических размеров макромолекул (на полиакриломорфолиновых гелях)

Рэнджел [45, 46] определил константы фазового равновесия метана и пропана, растворенных в декане, и показал возможность хроматографического исследования растворимости веществ в летучих жидкостях, что было осуществлено в целом ряде работ, посвященных изучению фазового равновесия при повышенном давлении. На рис. 7 приведен график зависимости между коэффициентом распределения бутана (см. соотношение (1.15)) в системе гелий — додекан и давлением [47]. Хотя расчет проводился без введения поправок на неидеальность газовой фазы, данные находятся в хорошем соответствии с результатами статических измерений. Это, по-видимому, обусловлено тем, что давление в колонке не превышало 2,8 атм. [c.41]

Высшие спирты были разделены на колонке, наполненной дауэксом 50-Х8 (Н+) (200—400 меш), путем постепенного элюирования уксусной кислотой возрастающей концентрации (1—Зн.) [7] (табл. 18.3). Шерма и сотр. [8] также изучали возможность, разделения высших спиртов на дауэксе 1 (СНзСОО ) при элюировании водноорганическими солевыми растворами. При этих разделениях важное значение имеет как высаливание, так и растворимость, и, следовательно, зависимость логарифма коэффициента распределения выделенного вещества относительно концентрации электролита не всегда линейна. Эти работы показывают, что возможно неполное разделение высших спиртов (к-гексанола, н-гептанола и н-октанола) с использованием в качестве элюента 4 М раствора ЫС1 в метаноле. Однако наблюдалось существенное расширение кривых элюирования. Шерма и Лаури [9] изучили хроматографию на основе солюбилизации на макропористых ионообменных смолах. Разделение гомологического ряда алифатических спиртов с помощью хроматографии на основе солюбилизации на макропористых ионообменных смолах амберлист 15 было проведено не так успешно, как на гелях обычных смол. [c.27]

При более тонком разделении группы белков коэффициент распределения Kav принимает значения 0,1—0,3. Тонкое разделение проводят на таком геле, который исключает преждевре- [c.424]

Для точного определения молекулярной массы нужно иметь набор соответствующих стандартов, на основании которых будет построена калибровочная кривая, отражающая зависимость Уе, или коэффициента распределения от lgЛI (см. табл. 35.1). Чтобы избежать ошибок, связанных с различным поведением линейных и глобулярных белков при ГПХ, при анализе глобулярных белков в качестве стандартов можно использовать только глобулярные белки. Определение молекулярной массы в широком диапазоне может быть проведено на колонке с агарозой в присутствии денатурирующих агентов [7]. Для определения молекулярной массы и разделения белков с М 10 —10 дальтон применяются гели сшитого декстрана, например сефадексы 0-75, 0-100, 0-150 и 0-200, и полиакриламидные гели, например биогели Р-30—Р-300. Более высокомолекулярные белки, с М 10 —10 дальтон, фракционируют на гелях агарозы типа сефароза 2В—6В или биогелях А-0,5—А-0,150. Подробные характеристики этих материалов приводятся в гл. 5. [c.425]

При разделении оснований, нуклеозидов и нуклеотидов используют различия в константах диссоциации рКа, табл. 37.5), коэффициентах распределения, в форме и размерах молекул. В качестве сорбента обычно используют синтетические иониты [32, 33] в сочетании с градиентным элюированием [34, 35]. При анализе последовательности нуклеотидов в нуклеиновых кислотах олигонуклеотиды—-продукты ферментативного гидролиза нуклеиновых кислот — разделяют на ионитах на основе целлюлозы или геля декстрана [36, 37] в градиенте pH и ионной силы в присутствии мочевины [38]. [c.40]

На пористых ионообменниках удается разделять также и нейтральные вещества. Правда, согласно Уитону и Бауману [45], коэффициенты распределения нейтральных низкомолекулярных соединений на да-уэксе 50 довольно слабо коррелируют с их молекулярным весом. Тем не менее Кларку [46] при помощи хроматографии на колонке (2,5X240 см) с дауэксом 50Х-2 удалось полностью разделить смесь сорбита, глицерина и гликоля, ти вещества элюировались с колонки в порядке уменьшения молекулярного веса в соответствии с общими принципами гель-хромато-графии. [c.23]

Признания принципа эксклюзии как единственной новы гель-хроматографии явно недостаточно для 1интерпретации всех экспериментальных данных. В некоторых случаях для объяснения эффекта разделения приходится рассматривать взаимодействие анализируемых веществ с фазой геля. Уже неоднократно отмечалось, что фаза геля с высокой концентрацией полимера существенно отличается по своим свойствам от подвижной фазы. Явления, которые нельзя объяснить, основываясь на концепции эксклюзии, чаще наблюдались при хроматографировании на плотных гелях. На это мы уже ссылались в предыдущем разделе при рассмотрении тех случаев, когда логарифм коэффициента распределения оказывался прямо пропорциональным молекулярному весу. Тогда речь также шла о хроматографировании относительно низкомолекулярных веществ на сравнительно плотных гелях. г [c.125]

Разделение по размеру молекул в ЭХ является результатом распределения образца между растворителем внутри пор и между частицами геля. Это распределение можно описать коэффициентом распределения Л зх,который отражает отношение средней концентравди образца в порах к кощентрации его между частицами геля. В результате эффекта исключения не весь объем пор геля К доступен для всех молекул, и в общем случае доступный объем подвижной фазы в колонке будет Уо+ 1 эх 1- [c.72]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология