Активность растворителя в распределительной хроматографии

На рис. 7.8 приведена схема выбора фаз для адсорбционной хроматографии. При замене на схеме стационарных фаз с различными активностями рядом растворителей различной полярности, можно также подобрать фазы для распределительной хроматографии. При выборе условий разделения исходят из тех же соображений, что и в случае жидкость-жидкостной экстракции. Число растворителей, применяемых в качестве подвижной фазы, чрезвычайно велико. Число сорбентов или носителей ограниченно. [c.349]

В распределительной хроматографии рекомендуются носители силикагель, кизельгур, окись алюминия для хроматографии и др. Силикагель называют кислым носителем, окись алюминия — основным , подразумевая под этим не измеренное значение pH, а свойства сорбента по отношению к сильной кислоте или основанию, удерживаемым в точке старта вместе с нейтральным растворителем. Чтобы увеличить активность сорбента, на него воздействуют режимом сушки (воздушно-сухие слои, более длительное время экспонированные на воздухе, активные слои), а также с помощью специальных добавок. [c.90]

В процессе развития жидкостной распределительной хроматографии предлагались различные способы оценки относительной полярности растворителей. В качестве меры полярности, принят параметр Р, который позволяет заметно надежнее оценивать относительную активность растворителей, чем широко используемый ранее параметр растворимости Гильдебранда. Полярность растворителя определяет его элюирующую силу в адсорбционной и нормально-фазной распределительной хроматографии с увеличением полярности элюирующая сила растворителя возрастает, а в обращенно-фазной — снижается. Чем больше элюирующая сила подвижной фазы, тем меньше коэффициент емкости для данного вещества на данном сорбенте. [c.129]

Предыстория насадки. Обработка и простое приведение к фазовому равновесию как аналитических, так и препаративных насадочных материалов очень важны для успешного масштабирования и получения воспроизводимых результатов. Это особенно справедливо и позволяет сэкономить много времени в жидко-жидкостной распределительной хроматографии на поверхностно-активных веществах и в адсорбционных систе ах жидкость — твердое тело с использованием многокомпонентных подвижных фаз, содержащих одну или более минорных составляющих (меньше 1—5%, ср. разд. 1.6.2.2.3). Обычно при исследовании с целью дальнейшего масштабирования, если это возможно, берут или свежую колонку, или колонку, использованную с известным растворителем, после которого ее можно легко привести в равновесие в условиях, пригодных для препаративного разделения. Аналитическое ЖХ-разделение, разработанное на колонке, которая прежде использовалась во многих других разделениях с различными системами растворителей, при после- [c.57]

Г. Активность растворителя в распределительной хроматографии [c.101]

Зная природу исходного образца, мы прежде испытываем растворитель, который считаем близким к требуемому. При отсутствии данных для выбора начальных условий испытываем растворитель средней активности. Использу. полученные данные (предполагая, что он или высокоактивный или совсем неактивный), мы испытываем другой растворитель. Так, если различные компоненты образца движутся слишком быстро (значение к слишком мало) с нашим первым растворителем, мы выбираем из списка, где приведены относительные активности растворителей, второй, менее активный. Если значения к образца со вторым растворителем окажутся слишком большими, выбираем растворитель, занимающий промежуточное положение. Такая процедура требует некоторого упорядочения относительной активности различных растворителей. Группа растворителей, расположенных в порядке возрастания их хроматографической активности, называется элюотропной серией. В этом разделе проверяются элюотропные серии или относительные активности растворителей, используемых в распределительном (т. е. жидко-жидкостном) разделении. В следующем разделе мы будем рассматривать подобные серии для адсорбционной хроматографии. [c.102]

Элюотропные серии обнаруживают гораздо большее постоянство (т. е. меньшую чувствительность к типу образца) в адсорбционной хроматографии, чем в распределительной. Приведенные в табл. 4.2 значения г° определяют одну такую серию для адсорбции на окиси алюминия. Малоактивные растворители имеют низкие значения г°, а активные — большие значения г°. Абсолютные значения параметров активности растворителя меняются при переходе от одного сорбента к другому (например, при переходе от окиси алюминия к силикагелю), относительная активность при этом не меняется (см. обсуждение в работе [8]). В случае смешанных растворителей зависимость е° от состава в отличие от зависимостей 6, б<г, бо и т. д. имеет нелинейный характер. Внутри адсорбированной фазы обычно концентрируется активный растворитель, так что е° для смеси двух растворителей Л и В следует по закону, иллюстрированному на рис. 4.2. Как только концентрация более активного компонента —растворителя В —превысит 0%, е° начинает очень быстро расти с увеличением концентрации В (%В), через некоторое время рост е° замедляется. В адсорбционной хроматографии значениями е° можно руководствоваться при выборе растворителя нужной активности, так же как значениями б руководствуются при выборе растворителя в распределительной хроматографии. [c.110]

С практической точки зрения выбор растворителя требуемой активности в адсорбционной хроматографии гораздо проше, чем в распределительной. В адсорбционной хроматографии проще выявить требуемое значение е° для данного образца, кроме того, там исключается проблема отбора несмешивающихся неподвижной и [c.112]

Сорбент. Для окиси алюминия указывается в скобках ее активность по шкале Брокмана. В случае распределительной хроматографии за названием сорбента следует отделенное от него знаком название неподвижного растворителя. [c.228]

Успешное разделение специфических транспортных нуклеиновых кислот было достигнуто с помощью распределительной хроматографии на кремневой кислоте при использовании растворителя фосфатный буфер (содержащий ионы магния) — формамид — изопропиловый спирт. Получено хорошее разделение тирозин-, триптофан-, гистидин-, валин- и аланин-активных акцепторных РНК [c.367]

Описанный выше способ выбора растворителя методом проб и ошибок может быть достаточно сложным, если его проводить на колонке. Широко распространенный альтернативный метод — использование соответствующего разделения на открытой насадке, т. е. бумажная (или на целлюлозной пленке) хроматография для распределительной и тонкослойная хроматография для адсорбционной. При таком подходе для интересующего нас образца можно быстро подобрать близкий по требуемой активности растворитель и затем, используя его, попытаться провести разделение на колонке. Любая дальнейшая (обычно незначительная) корректировка активности растворителя делается на основе колоночного разделения. [c.102]

Элюотропные серии обнаруживают гораздо большее постоянство (т. е. меньшую чувствительность к типу образца) в адсорбционной хроматографии, чем в распределительной. Приведенные в табл. 4.2 значения е° определяют одну такую серию для адсорбции на окиси алюминия. Малоактивные растворители имеют низкие значения е°, а активные — большие значения е°. Абсолютные значения параметров активности растворителя меняются при переходе от одного сорбента к другому (например, при переходе от окиси алюминия к силикагелю), относительная активность при этом не меняется (см. обсуждение в работе [8]). В случае смешанных растворителей зависимость г° от состава в отличие от зависимостей [c.110]

При работе с тонкими слоями целлюлозы можно использовать те же растворители и те же методики, что и в бумажной хроматографии. Однако в качестве носителей неподвижной жидкой фазы в тонкослойной распределительной хроматографии могут применяться и другие материалы, например силикагель [205—211] и кизельгур [205, 212—215], характеризующиеся малой адсорбционной активностью. [c.162]

Открытая в 1903 г. русским ученым М. С. Цветом [1] хроматография является разновидностью динамического сорбционного процесса в двухфазной системе, где смесь веществ, движущаяся вместе с Потоком растворителя через пористую среду, разделяется на отдельные компоненты в соответствии с их сорбционной активностью. По типу подвижной фазы хроматография делится на газовую и жидкостную, а по разнообразию сорбентов, используемых в качестве неподвижной фазы, — на распределительную (жидкость наносится на инертный твердый носитель), адсорбционную (используется сорбент с развитой внутренней поверхностью), ионообменную (на ионитах) и гель-проникающую (на макропористых инертных сорбентах). Газовая хроматография (газо-адсорбционная, газо-жидкостная) применяется для разделения летучих веществ, жидкостная хроматография — для анализа и фракционирования термолабильных и нелетучих веществ. [c.10]

СМ (карбоксиметил)-целлюлоза. Активные группы —ОСНаСООН, слабокислотные (рК = 3,5—4). Рабочая область pH > 4—5, оптимальное значение pH 6. Применяют для разделения нейтральных и основных белков (альбуминов, гемоглобинов, ферментов), основных аминокислот и пептидов, нуклеиновых кислот, липидов, гормонов, а также клеток и их фрагментов. Используют также для распределительной хроматографии в полярных растворителях. [c.160]

Существенное значение имеет чистота растворителей, особенно при адсорбционной хроматографии (требования распределительной хроматографии, как правило, менее строги). Вода — наиболее распространенная примесь в органических растворителях. Многие углеводороды и почти все эфиры образуют при хранении, особенно под воздействием света, органические перекиси и другие продукты. Часто некоторое количество посторонних веществ — стабилизаторов — специально вводят в органические растворители при их изготовлении. Особенно нежелательно присутствие полярных примесей (воды, спиртов и т. п.) в относительно неполярных растворителях, так как они деактивируют адсорбент. Обезвоживание растворителей и удаление перекисей лучше всего проводить пропусканием через колонку с основной окисью алюминия (I степени активности). Наличие органических перекисей легко проверить реакцией с сульфатом ванадия (0,1 г V2O5 растворить в 2 мл концентрированной H2SO4 и разбавить водой до 50 мл). Наиболее распространенные растворители в разд. 162 выделены жирным шрифтом. [c.382]

Параметр растворимости Гильдебранда (корень квадратный из величины энергии Испарения, выраженной в ккал/см ) используют для характеристики полярности растворителей при распределительной хроматографии. Общий параметр б разлагается на составляющие по взаимодействиям 6д — по дисперсионным взаимодействиям, бор — по ориентационным (дипольным) взаимодействиям бпа и 5пд — по взаимодействиям с образованием водородных связей, соответ ствующим протоноакцепторной и протонодонорной способностям растворителя При разделении веществ, имеющих большие дипольные моменты (нитрилов нитросоединений и т. п.), наилучшей характеристикой хроматографической актив ности растворителя является параметр бор, т. е. по дипольным взаимодействиям Для веществ-акцепторов электронов (эфиров, аминов и т. п.) хорошим показате лем хроматографической активности служит параметр бпд, а для протонодонор ных чвеществ (спиртов, фенолов) — параметр бпа- Р астворители с высо-КИМ значением параметра бд проявляют некоторую специфичность по отно шению к ароматическим соединениям. [c.388]

Отбор из этой оставшейся группы растворителей требуемой активности необходим для всех ЖХ работ, за исключением экс-клюзионных методов. Основываясь на настоящем обсуждении, растворитель требуемой активности может быть выбран правильно для распределительной и адсорбционной хроматографий. Контроль активности растворителя в ионообменной хроматографии обсуждается в гл. 8. [c.98]

Сравнение шкал полярности табл. 4.1 и 4.2 показывает, что классификация различных растворителей в этих таблицах в основном одинакова, однако имеется несколько заметных расхождений. Например, ацетон (6=9,4) считается полярным по табл. 4.1, а С5г (6=10) неполярным. Эти и другие несоответствия в элюотроп-ных сериях этих двух таблиц в основном и препятствуют применению таких серий в распределительной хроматографии относительная полярность или хроматографическая активность двух растворителей может, как оказалось, значительно изменяться в зависимости от типа образца. Так, в распределительной хроматографии каждая элюотропная серия только ориентировочно постоянна для различных образцов и попытки предсказать, исходя из данных табл.4.1 или табл.4.2 (значение б), какой растворитель будет активнее, нередко приводят к ошибочным результатам. Причина [c.107]

Хотя фирмы выпускают силикагель возможно более узких фракций, все же товарный силикагель необходимо еще раз поделить на фракции посредством просеивания или седиментации, а затем, если необходимо, промыть разбавленным раствором гидроксида натрия, органическими растворителями, например хлороформом, метанолом, и водой и после этого высушить. Чтобы получить адсорбент с заданной активностью, надо добавить к сухому адсорбенту отмеренное количество дистиллированной воды. Можно проводить дезактивацию, добавляя такие спирты, как пропанол, этиленгликоль, глицерин, но чаще всего дезактивируют силикагель водой. Активность этого адсорбента обычно определяют с помощью азокрасителей [33] методика определения подробно описана в разд. 4.2.3. Соотношение между количеством введенной воды и полученной активностью адсорбента показано в табл. 4.4. В большинстве случаев для хроматографирования пригоден адсорбент, содержащий 10—12% воды. Если же содержание воды превышает 16%, то разделение идет по механизму, характерному для распределительной хроматографии (ЖЖХ). Далее мы обсудим способы приготовления силикагеля, его разделения на фракции, дезактивации, регенерации, а также пропитки нитратом серебра. [c.162]

При разделении веществ методом адсорбционной хроматографии на слабо активных сорбентах с использованием систем растворителей, содержапщх воду, одновременно происходит разделение веществ по типу распределительной хроматографии. При использовании метода распределительной хроматографии для разделения веществ, имеющих сродство к носителю, процессы распределительной хроматографии сопровождаются процессами адсорбционной хроматографии. [c.34]

В общем случае выбор колонок в жидкостной хроматографии значительно проще, чем в газовой хроматографии. Так же как и в ГХ, в жидкостной хроматографии используют ограниченный круг сорбентов. В распределительной хроматографии выбор условий разделения облегчается благодаря наличию обширных сведений об экстракционных свойствах различных систем растворителей. Ниже приводятся перечень наиболее широко используемых адсорбентов в порядке возрастания их адсорбционной активности и перечень растворителей, размещенный в порядке возрастания их сорбируе-мости [c.68]

В адсорбционной хроматографии (рис. 1 и 2) разделение компонентов смеси зависит от различий в сорбируемости их на твердом сорбенте, чаще всего активном угле и силикагеле. В распределительной хроматографии (рис. 3) разделение происходит вследствие различий в величине коэффициентов распределения отдельных компонентов разделяемой смеси между водой, удерживаемой носителем (волокнами бумаги, зернами силикагеля, окиси алюминия, стеклянными волокнами), и движущимся органическим растворителем, несмешива-ющимся с водой. [c.10]

Между полярным соединением, растворимым в элюенте, и носителем быстро устанавливается адсорбщюиное равновесие, поэтому такие вещества можно в больших или меньщих количествах наносить на неподвижную фазу. В конечном итоге можно разделительную колонку с активным адсорбентом сделать распределительной колонкой. Иногда это — единственный способ получить систему для распределительной хроматографии. Практически таким образ( 1 можно нанести на активную твердую фазу любую полярную разделяющую жидкость. Из тройных смесей при этом адсорбируются прежде всего полярные растворители, которые образуют неподвижную жидкую фазу (см. гл. VII). [c.117]

Распределительная хроматография занимает промежуточное положение между адсорбционной хроматографией и хроматографией на обращенных фазах. Распределительные системы предпочтительны при разделении членов гомологического ряда. Такое разделение можно провести и в системах с обращенной фазой. Методом адсорбционной хроматографии можно разделить только низшие члены гомологического ряда. Оптические изомеры удается разделить только в форме пар диасгереомеров (см. рис. VI.21), что в ( щем не представляет трудностей. Для расщепления рацематов в принципе пригодны оптически активные подвижные фазы. Подобные фазы для классической колоночной хроматографии известны только в форме производных целлюлозы [2, 3], для жидкостной хроматографии при высоком давлении они не пригодны. Область применения ионообменной хроматографии ограничена, так как использовать можно лишь чисто водные системы. В таких системах можно разделять те ионы или соединения, которые легко и обратимо образуют комплексы (обмен лигандов) с ионами, связанными с ионообменником. Кроме того, на органической матрице ионообменника может также происходить неионообменная сорбция. Если в системах с ионообменниками к водным элюентам добавляют органические растворители, то элюенты разделяются и образуется распределительная система. Если бы дополнительно учитывали обе эти возможности разделения на ионообменниках, то возможности использования этого метода были бы более многообразны, чем это следует из табл. Х.1. [c.218]

ТСХ-пластины для распределительной ТСХ с химически связанными фазами имеют преимущества перед импрегнирован-ными не требуется насыщения элюента неподвижной фазой, разделяемые вещества не загрязняются неподвижной фазой, характеризуются более воспроизводимыми величинами / /, меньше влияют на результаты остаточные силанольные группы. Пластины для тех с диольной химически связанной фазой по хроматографическим свойствам близки к пластинам с немодифицированным силикагелем. Однако адсорбционная активность гидроксилов, а следовательно, и удерживание на диольных пластинах слабее. Элюенты для ТСХ на диольных и обычных силикагелевых пластинах близки по составу. Это обычно органические растворители с добавками кислот или оснований. Пластины для ТСХ с нитриль-ными группами в зависимости от используемых элюентов могут быть применены как для прямофазной, так и для обращенно-фазовой с разным порядком элюирования разделяемых соединений. Эти сорбенты могут также применяться для ион-парной хроматографии. ТСХ-пластины с аминогруппами являются слабоосновным ионообменником. Эти пластины можно применять для разделения веществ с разными суммарными зарядами ионизированных групп и различающихся гидрофобностью заместителей [c.344]

Исторически первыми были открыты адсорбционные процессы, обусловленные межмолекулярным взаимодействием, физические процессы концентрирования растворенных или газо-парообразных веществ на поверхности, например, активного угля или силикагеля [1]. Несколько позже в почвах были открыты процессы ионообменные — гетерогенные обратимые химические реакции двойного обмена [2]. Эти процессы не только позволили понять механизм многих агрохимических процессов [3], но и послужили основой для создания синтетических ионообменных сорбентов, нашедших самое широкое применение в аналитической химии, водопод-готовке, гидрометаллургии и пр. [2, 4—7]. Наконец, позже была показана возможность и целесообразность использования сорбентов-носителей, пропитанных растворителем или химически активными растворами последние дали возможность осуществить, в частности, процессы распределительной [8] и осадочной [9] хроматографии. [c.312]

Несмотря на то, что ионообменные процессы были открыты еще в 60-х годах XIX в., иониты в хроматографических опытах (ионообменная хроматография) начали применять лишь в конце 30-х годов нашего столетия и особенно интенсивно — с момента развития работ в области атомной энергетики для анализа и выделения продуктов ядерных реакций [13]. В 40-х годах были предложены распределительная и осадочная хроматографии— процессы, связанные с использованием сорбентов, пропитанных раствором (распределительная) или химически-активным веществом, дающим осадки с компонентами смеси (осадочная). В 50-х годах были предложены газо-жидкостная хроматография [14] и ее вариант — хроматография капиллярная [15] и, наконец, сравнительно недавно — так называемая тонкослойная хроматография (см., например, [16]), отличающаяся не механизмом сорбционного процесса, а способом использования сорбента опыт проводится не па колонках сорбента, а в тонком слое измельченных веществ самой различной природы. Особый интерес для определения микропримесей представляет вакантная хроматография [17], в которой в анализируемую смесь, циркулирующую через сорбент, вводится порция растворителя или газа-носителя. [c.316]

Методы колоночной жидкостной хроматографии подразделяются на два типа в одном из них в качестве неподвижной фазы используют твердые материалы (адсорбенты) и во втором — распределительном— неподвижной фазой является жидкость, адсорбированная на твердом носителе. Наиболее широко для препаративного разделения экстрактов почвы перед определением инсектицидов применяются методы адсорбционной хроматографии, основанные на испоЛ ьзовании таких адсорбентов, как флорисил, оксид алюминия, силикагель, уголь [81, 82]. Активность адсорбента регулируют добавлением воды (активность обратно пропорциональна содержанию воды в адсорбенте). В качестве элюентов наиболее часто используют гексан или бензол с небольшим содержанием полярных растворителей, таких как эфир или ацетон [82]. Для элюирования какого-либо пестицида полярность элюента выбирают с учетом используемой полярной фазы. Бейнон и Элгар [82] предложили классификацию наиболее часто используемых адсорбентов в порядке возрастания их адсорбционной способности (см. табл. 1.7, разд. 1.3.2.5). [c.288]