Определения, основанные на измерении поглощения света

Методы спектрофотометрического анализа основаны на качественном и количественном изучении спектров поглощения различных веществ в инфракрасной области спектра (невидимые электромагнитные колебания с длиной волны от 0,76 до 500 мк), видимой (от 0,76 до 0,4 мк) и ультрафиолетовой (от 0,4 до 0,01 мк). Задача спектрофотометрического анализа — определение концентрации вещества путем измерения оптической плотности на определенном участке видимого или невидимого спектра в растворе исследуемого вещества. Например, при определении хрома исследуют оптическую плотность раствора хромата желтого цвета, поглощающего свет в сине-фиолетовой части видимого спектра. При проведении фотометрического анализа необходимо создать оптимальные физико-химические условия (избыток реактива, светопреломление растворителя, pH раствора, концентрацию, температуру). Фотометрический анализ применяют для определения соединений различных типов окрашенных анионов кислот, перманганата, гидратированных катионов меди (II), никеля (II), роданидных комплексов железа (III), кобальта (II), различных гетерополикислот фосфора, мышьяка, кремния, перекисных соединений титана, ванадия, молибдена, лаков различных металлов с органическими красителями и др. Экстракционные методы разделения химических элементов основаны на различной растворимости анализируемого соединения в воде и каком-либо органическом растворителе. При этом происходит распределение растворенного вещества между двумя растворителями (закон распределения, 25). Для извлечения из водных растворов чаще всего применяют различные эфиры (диэтиловый эфир), спирты (бутиловый, амиловый спирт), хлорпроизводные (хлороформ, четыреххлористый углерод) и др. Иод можно извлечь бензолом, сероуглеродом, хлорное железо — этиловым или изопропиловым эфиром. [c.568]

Реакции в растворах также прослеживаются с помощью физических или физико-химических методов, например из измерений электропроводности (применяются для исследования кинетики ионных реакций, в результате меняется общее число ионов), из измерений поглощения света (в соответствии с законом Ламберта — Бера поглощение света пропорционально концентрации вещества). Различие в оптической активности исходных веществ и продуктов реакции также может быть использовано для определения концентрации (например, при исследовании инверсии сахарозы). Применение полярографических методов анализа основано на том, что предельный ток диффузии пропорционален концентрации. [c.167]

Способность к избирательному поглощению электромагнитного излучения является одним из физических свойств веществ, которое широко используется для целей исследования строения, идентификации веществ и количественного анализа. Определения, связанные с измерением поглощения света, основаны на двух законах. Закон Бугера — Ламберта связывает поглощение с толщиной слоя поглощающего вещества и выражается соотношением [c.778]

Подобные кюветы значительно расширяют возможности метода ультрацентрифугирования, поскольку, применяя их, можно добиться образования резкой исходной границы седиментации в центре столба жидкости. Существует несколько вариантов конструкции таких кювет, каждый из которых применяют для проведения экспериментальных исследований определенного типа. Недавно была создана многоканальная кювета для одновременного ультрацентрифугирования четырех столбиков жидкости. Для ряда специальных задач описаны другие кюветы, хотя большинство из них пока не нащли широкого применения в исследовании полимеров. Все оптические методы, применяемые для регистрации границ седиментации в ультрацентрифуге, основаны на поглощении или преломлении света, проходящего через раствор полимера. Абсорбционные оптические системы регистрации нашли довольно ограниченное применение в исследованиях полимеров, поскольку большинство полимеров не поглощает свет в ультрафиолетовой части спектра . Но если полимер обладает сильным поглощением в указанной области спектра, то абсорбционный метод позволяет проводить весьма точные измерения при крайне низких концентрациях полимера [9]. Методы регистрации, основанные на разности показателей преломления раствора и растворителя, как правило, применяются в системе скрещенных диафрагм или в интерференционной оптической системе . Система скрещенных диафрагм регистрирует градиент показателя преломления (dn/dr) в зависимости от расстояния (г) до центра вращения, как показано на рис. 8-1 для скоростной седиментации полистирола в циклогексане. Интерференционные регистрирующие системы позволяют получать зависимость показателя преломления от расстояния г, на рис. 8-2 подобная регистрация представлена для низкоскоростной седиментации полистирола в циклогексане. Кривые изменения показателя прелом-. Ленин можно преобразовать в кривые изменения концентрации, определив постоянные такого преобразования по изменению показателя преломления стандартных растворов с помощью кюветы с искусственной границей. Возможности применения интерференционных методов регистрации основаны на большом различии показателя преломления растворителя и показателя преломления исследуемого полимера. [c.221]

Определение основано на поглощений света окрашенным раствором перманганат-иона, Сущность работы заключается в окислении ионов марганца (II) до марганцевой кислоты с последующим измерением оптического плотности полученного раствора относительно раствора сравнения, содержащего перманганат-ион. [c.365]

Сущность работы. Определение фенола и его метилпроизводных (о-, м- и л-крезолов) основано на измерении оптической плотности щелочных водных растворов, поглощающих свет в области 210-290 нм с максимумом при 235 нм. Избирательность определения достигается использованием батохромного сдвига спектральных полос поглощения щелочных растворов (pH я 13) относительно нейтральных растворов (pH 7). Такой сдвиг (рис. 15.17) обусловлен образованием фенолятов в щелочной среде. Светопоглощение в щелочной среде пропорционально содержанию не только основного компонента, но и количеству возможных примесей. Светопоглощение того же раствора, нейтрализованного до pH = 7, обусловлено только содержанием примесей. Таким образом, по разности оптических плотностей щелочного и нейтрального растворов можно найти содержание фенола в ана/[изируемом объекте. [c.171]

Определения, связанные с измерением поглощения света, основаны на двух физических законах. [c.183]

Колориметрические определения основаны на сравнении поглощения или пропускания света стандартным и исследуемым окрашенными растворами. В практике преобладают фотоколориметрия, где для измерений используются фотоэлементы, так как визуальные измерения менее объективны. [c.373]

Практически все методы определения основаны на зависимости к.-л. доступных измерению свойств в-в от их состава. Поэтому важное направление А.х.-отыскание и изучение таких зависимостей с целью использования их для решения аналит. задач. При этом почти всегда необходимо найти ур-ние связи между св-вом и составом, разработать способы регистрации св-ва (аналит. сигнала), устранить помехи со стороны др. компонентов, исключить мешающее влияние разл. факторов (напр., флуктуации т-ры). Величину аналит. сигнала переводят в единицы, характеризующие кол-во или концентрацию компонентов. Измеряемыми свойствами могут быть, например, масса, объем, свето-поглощение. [c.159]

Оптические методы. В связи с быстрым развитием ВЭТСХ, которая позволила стандартизировать многие стадии хроматографического процесса и привела к получению воспроизводимых результатов, стало возможным использовать точные количественные методы оценки разделенных веществ на тонкослойных хроматограммах. Этому также способствовали создание и выпуск рядом фирм специальных приборов для количественных определений в ТСХ. Оптические сканирующие методы основаны на измерении исходного излучения, прошедшего через слой сорбента (поглощение), отраженного от него (отражение), сочетании поглощения и отражения, флуоресценции, гашении флуоресценции. Возможно измерение пропускания света с длиной волны только больше 325 нм, так как стекло (подложка) и слой адсорбента поглощают УФ-излучение. Измерение по методу отражения можно проводить по всей области спектра от 196 до 2500 нм (ив области УФ-излучения). [c.370]

Для определения поглощения в областях различных длин волн инфракрасного света пользуются установками, в которых измерение поглощения в различных областях монохроматического света производится при помощи термоэлементов или болометров (устройство последних основано на зависимости сопротивления проводника от его температуры). [c.57]

Фотометрические методы определения концентрации растворов основаны на сравнении поглощения или пропускания света стандартными и исследуемыми растворами. Степень поглощения света фотометрируемым раствором измеряют с помощью фотоколориметров и спектрофотометров. Измерение оптической плотности стандартного и исследуемого окращенных растворов всегда производят по отнощению к раствору сравнения (нулевому раствору). В качестве раствора сравнения можно использовать аликвотную часть исследуемого раствора, содержащего все добавляемые компоненты, кроме реагента, образующего с определяемым ионом окрашенное соединение. Если добавляемый реагент и все остальные компоненты раствора сравнения бесцветны и, следовательно, не поглощают лучей в видимой области спектра, то в качестве раствора сравнения можно использовать дистиллированную воду. [c.204]

Метод абсорбционного анализа подразделяется на спектрофотометрический, колориметрический и фотоэлектроколориметриче-ский. Спектрофотометрия основана на измерении степени поглощения монохроматического излучения (излучения определенной длины волны). В фотоэлектроколориметрии и колориметрии используется немонохроматическое (полихроматическое) излучение преимущественно в видимом участке спектра. В колориметрии о поглощении света судят визуальным сравйением интенсивности окраски в спектрофотометрии и фотоэлектроколориметрии в качестве приемника световой энергии используют фотоэлементы. Все названные методы фотометрического анализа высоко чувствительны и избирательны, а, используемая в них аппаратура разнообразна и доступна. Эти методы щироко используют при контроле технологических процессов, готовой продукции анализе природных материалов в химической, металлургической промышленности, горных пород, природных вод при контроле загрязнения окружающей среды (воздуха, воды, почвы) при определении примесей (10 — 10 %) в веществах высокой чистоты. Фотометрические методы используются в системах автоматического контроля технологических процессов. [c.7]

Следует напомнить, что при прохождении через вещество, обладающее круговым дихроизмом, первоначально плоско поляризованный свет постепенно становится все более эллиптичным [см. уравнение (1)1 Измерение эллиптичности сыграло определенную роль в классических исследованиях, например в работе Куна [22]. Не так давно [23, 24] были предложены методы, основанные на измерении эллиптичности (с помощью компенсации). Тем не менее использующиеся в настоящее время методы основаны на измерении разности поглощения света, поляризованного по кругу вправо и влево, и мы ограничимся рассмотрением этих методов. [c.94]

Предложены методы определения остатков ДДТ после опрыскивания пищевых продуктов [323]. Для анализа обмывают поверхность фруктов, овощей или кормовых трав и определяют хлор (после разложения металлическим натрием в изопропиловом спирте) этот метод пригоден только в тех случаях, когда точно известны условия опрыскивания. Для идентификации малых количеств ДДТ рекомендуется нитрование и образование синей окраски с метилатом натрия. Спектрофотометрическое определение гексахлорциклогексана основано на омылении раствором щелочи и измерении поглощения в ультрафиолетовом свете (при 286 т< ) [c.181]

В отличие от рассмотренных выше элементов определение общего содержания ртути методом ААС основано на измерении поглощения света ее парами, которые вьщеляются потоком воздуха из водного раствора после восстановления ионов до атомного состояния, при длине волны 253,7 нм в газовой кювете при комнатной температуре ( метод холодн()го пара ). В качестве восстановителей применяют хлорид олова, станнит натрия, аскорбиновую кислоту и др. [3,8]. Предел обнаружения состав.гтя-ет 0,2 мкг/л, диапазон измеряемых концентраций 0,2 - 10 мкг/л [И] Для устранения мешающего влияния органических веществ, поглощаюшцх свет при данной длине волны, к пробе добавляют кислый раствор перманганата или бихромата калия. [c.249]

Для определения в тканях НК существует много способов. Все они основаны на использовании специфических реакций на рибозу, дезоксирибозу и фосфорную кислоту или на измерении специфического поглощения НК в ультрафиолетовом свете за счет азотистых оснований. Непосредственному олределению НК предшествует ряд подготовительных операций. Обычно анализ на содержание НК в тканях осуществляется в три этапа. [c.25]

Спектрофотометрия (спектроскопия в видимой и УФ-областях спектра) основана на измерении интенсивности поглощения того или иного соединения. Органические вещества определяют по собственной окраске или по поглощению света продуктами их аналитических реакций. Электронные спектры, как правило, не являются характеристичными, и часто полосы поглощения соединений разных классов лежат в одной области. При анализе объекта, содержащего только одно соединение, или при определении вещества, обладающего весьма отличными от других характеристиками, спектрофотометрия очень удобна вследствие ее простоты и высокой чувствительности. Однако при исследовании смесей веществ нехарактеристичность электронных спектров осложняет применение метода. Очевидно, что эти трудности гораздо больше при определении веществ по пх собственной окраске. Можно го- [c.243]

Фотометрические методы анализа основаны на превращении анализируемого вещества в окрашенное или нерастворимое соединение и последующем измерении светопоглощения раствора или суспензии. Методы, связанные с измерением интенсивности окраски, подразделяются на фотоколориметрию (поглощение в сравнительно широкой области спектра) и спектрофотометрию (поглощение в узких участках спектра). Методы, связанные с измерением ослабления светового потока при светорассеянии взвешенными частицами делятся на нефелометрию (измерения в отраженном свете) и турбидиметрию (измерения в проходящем свете). Фотометрические методы отличаются высокой чувствительностью и используются, главным образом, для определения малых количеств примесей в основном веществе. В химии лаков и красок эти методы находят широкое применение в анализе примесей в минеральных пигментах, мономерах, смолах и вспомогательных веществах [c.79]

О росте микроорганизмов в естественных субстратах или в питательных средах судят по количеству их клеток или биомассе в единице объема. Методы определения этих показателей могут быть прямыми (подсчет клеток под микроскопом, взвешивание на весах) или косвенными. Косвенные методы основаны на измерении параметров, величина которых зависит от количества или биомассы микроорганизмов (число колоний, выросших после высева суспензии клеток на питательную среду, рассеяние или поглощение суспензией клеток света, содержание в ней белка и др.). Выбор метода зависит от целей исследования, свойств питательной среды или субстрата, а также особенностей роста и морфологии микроорганизмов. Так, многие методы, используемые для определения числа одноклеточных микроорганизмов, не приемлемы при подсчете многоклеточных (нитчатых, мицелиальных и др.) форм. [c.117]

Содержание ненасыщенных К. или их эфиров м. б. определено с помощью галогенирования (бромирова-ния) при этом следует, однако, учитывать возможность протекания реакции замещения. Для определения соединений с изолированной двойной связью (виниловых эфиров и др.) применяют бром-бромидный метод. Важное место при анализе галогенангидридов, ангидридов, эфиров, азидов и амидов занимает реакция с гидроксил-амином, приводящая к образованию гидроксамовых к-т. Последние образуют комплексы красного цвета с ионами трехвалентного железа. Количественное определение гидроксамовых к-т основано на измерении интенсивности поглощения света в области 530—540 нм для алифатических и 550—560 нм для ароматических [c.511]

Оптнч. сенсоры основаны на измерении поглощения или отражения первичного светового потока, люминесценции или теплового эффекта при поглощении света. Такие С. х. имеют чувствительный слой, роль к-рого может вьшолнять пов-сть волокна световода или иммобилизованная на световоде фаза, содержащая подходящий реагент. Волоконно-оптич. световоды на основе кварца, гсрманатных, фторид-ньгх, халькогенидных стекол, кристаллов галогенидов таллия, серебра или цезия и полимерных материалов позволяют работать в ИК. видимой и УФ диапазонах спектра. Созданы оптическис С. х. для определения рП р-ров, ионов К и Na, СО,, О,, глюкозы н д . в-в. [c.318]

Возможность определения фурфурола в водных растворах спектрофотометрическим методом основана на интенсивном избирательном поглощении света в ультрафиолетовой области при характерной длине волны А,=278 ммк. Для определения фурфурола в дистилляте по этому методу пипеткой отмеряют 10 мл ранее отогнанного раствора фурфурола в мерную колбу на 500 мл и раствор разбавляют водой до метки. Раствор тщательно перемешивают и определяют оптическую плотность раствора при А,=278 ммк в сравнении с оптической плотностью воды при той же величине К. Содержание фурфурола находят по калибровочному графику. Для измерения оптической плотности применяют кювету с толщиной рабочего слоя 10 мм. Такая подготовка к анализу приемлема в том случае, если содержание пентоз в исследуемом материале находится в пределах 2—10%. При более высоком содержании пентоз уменьшают концентрацию фурфурола соответствующим разведением раствора. При этом, определив по калибровочной кривой содержание фурфурола, результат увеличивают во столько раз. во сколько раз была уменьшена концентрация фурфурола в растворе для анализа. Для построения калибровочной кривой приготовляют растворы фурфурола с концентрацией от 5 мг1л до 1 мг/л. Оптическую плотность растворов определяют аналогично вышеизложенному. По полученным данным строят график, откладывая на оси абсцисс концентрацию фурфурола, а на оси ординат оптическую плотность растворов. Содержание потенциального фурфурола вычисляют по формуле [c.61]

Фотометрическое определение неорганических веществ с помощью органических реагентов чаще всего основывается на реакциях, которые приводят к образованию продуктов, поглощающих (или испускающих) излучение с частотами, соответствующими электронным спектрам. Так, в спектрофотометрическом, колориметрическом или турбидиметрическом вариантах измеряется поглощение излучения в ультрафиолетовой и видимой областях спектра. Флуориметрические (фосфориметрические) методы основаны на измерениях флуоресценции или фосфоресценции. Нефело-метрические методы, опирающиеся на измерение интенсивности света, рассеиваемого коллоидными частицами, употребляются реже. [c.348]

Фот.ометрические методы основаны на измерении пропускания, поглощения или рассеяния света частицами загрязнений Наибольшее распространение получили два фотометрических метода турбодиме-трия и нефелометрия. Турбодиметрией называют определение количества и дисперсности взвешенных частиц в жидкости по поглощению света. Нефелометрия — определение тех же показателей по интенсивности рассеивания света. Фотометрический анализ может проводиться в ультрафиолетовой, инфракрасной и видимой областях спектра. [c.160]

И. к. имеют максимум поглощения в УФ-свете при 249—250 ммк (в кислой среде) спектры ИМФ, ИДФ и ИТФ в УФ-свете близки между собой. Коэфф. молярной экстинкции И. к при pH 2 и 250 ммк равен 10 900. И. к. дают цветные качественные реакции на гипоксантин, рибозу и органически связанный фосфат. Количественные определения И. к. основаны на тех же цветных реакциях, а также на измерении поглощения И. к. в УФ-свете. Для качественных и количественных определений пользуются также методами хроматографии и ионофореза. И. к. содержатся в животных и растительных организмах. Являясь макроэргич. соединениями, ИТФ и ИДФ принимают участие в таких ферментативных процессах, как, папр., нуклеотидфосфокипазные реакции и декарбоксилиро-вание щавелевоуксусной к-ты до фосфоенолпировиноградной к-ты. [c.136]

Фотокол ори метрический и спектрофотометрический методы относятся к абсорбционной спектроскопии и основаны на измерении избирательного поглощения света растворами реагентов или соединениями, образующимися при взаимодействий растворов реагентов со специально добавленными реактивами. Поглощение в ультрафиолетовой и видимой областях спектра связано с электронными переходами в поглощающих соединениях. При фотоколориметрических определениях измеряется поглощение белого или частично монохроматизированного [пнрокополосными светофильтрами видимого света. [c.289]

Фотоколорнметры и нефелометры (табл. 1) служат для определения концептрации веществ в растворах, поглощающих или рассеивающих свет в видимой области спектра, для объективной оценки цветности веществ, определения оптической плотности и коэффициентов пропускания растворов, измерения светорассеяния коллоидных систем, определения численной концентрации микрочастиц в суспензиях. Их действие основано на изменении интенсивности светового потока при прохождении через раствор в зависимости от толщины слоя, степени окраски и концентрации. Мерой концептрации является оптическая плотность или светопропускание раствора. Нефелометры измеряют интенсивность светового потока, рассеянного и поглощенного диспергированной фазой коллоидной системы. [c.219]

Указанное значение для среднего диаметра устьица (d= = 10 мкм) весьма приблизительно и основано на измерении [255] длины и ширины эллиптических отверстий на фиксированных препаратах, приготовленных методом Ллойда [204] вполне возможно, что это значение завышено [140] и действительно такую величину получают лишь в условиях дефицита СОг, например в неподвижном воздухе при наличии интенсивного фотосинтеза. Для получения 2 использовалось среднее расстояние от некой внутренней точки нижнего эпидермиса до середины палисадного слоя ( 150 мкм). При определении Ьз принимали, что расстояние от стенки клетки до хлоропласта равно 2,4 мкм в воде, что эквивалентно 2,4 см в воздухе. При слабом освещении и низкой температуре, когда химические реакции замедлены, химическое сопротивление будет значительным и концентрация СОг на поверхности хлоропласта будет заметно больше нуля. Даже при благоприятных условиях освещения и температуры химическое сопротивление, по мнению Максвелла, равно сопротивлению гидродиффузного пути в этой главе мы будем считать, что это именно так, хотя другие исследователи [110] полагают, что на сильном свету концентрация СОг на поверхности хлоропласта равна нулю. У данной разновидности Р. zonale на верхней стороне листа число устьиц обычно в 10 раз меньше, чем на нижней поэтому для простоты мы будем пренебрегать поглощением СОг через верхнюю поверхность. Если принять величину 0,40 в вместо лО/8 для неподвижного воздуха (стр. 62) и уменьшить коэффициент I -j- nd/4) на 10%, то [c.71]

Флуоресценция — это испускание света флуорофо-)ом, который поглощает свет при меньшей длине волны. Тоскольку измерение основано на сравнении энергии излучения в измеряемой пробе с очень низким уровнем излучения в контрольном образце, отношение сигнала к шуму очень высоко и, следовательно, флуориметричес-кие измерения более чувствительны, чем абсорбционные. Например, определение ЫАОН, основанное на флуоресценции, приблизительно в 100 раз чувствительнее, чем спектрофотометрический метод. Интенсивность флуоресценции зависит как от концентрации флуорофо-ра, так и (в отличие от поглощения) от интенсивности возбуждающего излучения. Поскольку возбуждение и излучение флуоресценции возникают при различных длинах волн, прибор должен быть устроен так, чтобы энергия возбуждения не доходила до фотодетектора. Это обычно достигается путем помещения детектора под углом 90° к световому пучку, возбуждающему излучение. Светорассеяние как в растворе, так и от поверхности может создавать большие трудности, но его можно свести к минимуму с помощью граничных фильтров с крутым фронтом, пропускающих энергию флуоресценции, но задерживающих энергию возбуждения. [c.179]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология