Аспарагин определение методом

Установлен ряд аминокислот по их комплексообразующей способности цистеин > гистидин > аспарагин > метионин > глицин, аланин, валин, фенилаланин. Определен состав твердых соединений, выделенных из золотосодержащих растворов гистидина и фенилаланина золото в них находится в состоянии окисления (I), состав соединений отвечает формулам с соотношением золота к аминокислоте 1 1. Методом ИК-спектроскопии установлены связь металла с карбоксильной и аминогруппами в соединении золота с фенилаланином и связь металла с аминогруппой и азотом имидазольного кольца в соединении с гистидином. [c.154]

Гидролиз белков кислотой обычно сопровождается разрушением (в результате окисления) большей части триптофана, окислением цистеина в цистин и некоторым распадом серина и треонина. Щелочной гидролиз имеет то преимущество перед кислотным, что триптофан в этих условиях более стабилен. Однако при щелочном гидролизе имеет место интенсивный распад серина, треонина, цистина, цистеина и аргинина. Кроме того, при щелочном гидролизе наблюдается рацемизация природных аминокислот. Гидролиз белка как кислотой, так и щелочью сопровождается дезамидированием глутамина и аспарагина. Эти амиды аминокислот и триптофан можно выделить из гидролизатов, полученных при помощи протеолитических ферментов. Однако ферментативный метод также страдает определенными недостатками в частности, гидролиз может быть неполным и сам фермент может распадаться с освобождением аминокислот. Выделение аминокислот из белков и получение их с количественным выходом представляет очень сложную задачу, которой занимались многие исследователи. Эта обширная область всесторонне рассмотрена в монографии Блока и Боллинг [98]. [c.24]

Установлено, что реакция синтеза глутамина обратима. На основании константы равновесия реакции (1) вычислено [561], что при стандартных условиях разность между величинами свободной энергии гидролиза глутамина и гидролиза АТФ составляет 4300 кал. Если принять, что свободная энергия гидролиза глутамина составляет —3500 кал (т. е. примерно столько же, сколько для гидролиза аспарагина), то величина стандартной свободной энергии АТФ должна быть близка к —7800 кал. Это значение несколько ниже величины, полученной в прежних определениях, т. е. —10 500 [562, 563], но согласуется с величинами, полученными позже при помощи самых различных методов [535, 564—566]. [c.270]

Мы изучали зависимость сорбции аминокислот (а-аланина и аспарагина) Ка+-формой сульфокатионита при pH, равном р1, от объема раствора в динамических условиях. Концентрации всех ионов в растворе и в сорбированном состоянии определяли теми же методами, что и для изотерм сорбции в тройных системах. Сорбированное количество аминокислоты ( ш) определяли только по десорбции аминокислоты со смолы, что, ввиду малых значений является более надежным методом, чем определение сорбированного количества обычным методом в динамических условиях (по анализу фракций раствора, выходящего из колонки). На рис. 5 показана зависимость сорбированного количества аминокислоты от объема раствора. Как видно, с увеличением объема раствора возрастает количество сорбированной аминокислоты и соответственно количество выделившихся в раствор ионов Ка, т. е. при сорбции аминокислоты Ка-формой сульфокатионита можно, при прочих равных условиях, получить такое же количество сорбированной аминокислоты, что и при сорбции Н-формой, только в случае сорбции Ка-формой необходимо пропустить большие объемы раствора аминокислоты. [c.135]

Дополнительные замечания. Следует ожидать, что количество амидного азота, найденное с помощью этого метода, должно быть близким к теоретически вычисленному. При анализе аспарагина и других трудно гидролизуемых амидов, экспериментально найденное количество азота всегда более занижено по сравнению с теоретически вычисленным чем при анализе глутамина, ацетамида, а также других малоустойчивых веществ. Имеются указания, что это относится также к анализу белков. Если анализируемый образец содержит большое количество мочевины, желательно предварительно выделить ее из раствора или ввести в результат анализа соответствующую поправку, которую вычисляют, определяя аммиак, образующийся в контрольном растворе, имеющем приблизительно такую же концентрацию мочевины. Вероятно, мочевину следует разлагать с помощью уреазы и удалять аммиак из раствора, пропуская через него пузырьки воздуха. Перед гидролизом раствор должен быть сделан щелочным путем добавления буры. Если в анализируемом образце содержится аммиак в виде ионов аммония, следует определить содержание азота аммиака и вычесть это количество из результата определения амидного азота. Кроме того, от аммиака, содержащегося в растворе в виде аммонийных солей, можно освободиться, добавляя к раствору щелочь и пропуская через него перед гидролизом струю воздуха. При этом следует иметь в виду, что при длительном нахождении амида в щелочной среде может иметь место также и его гидролиз, поэтому эту операцию следует проводить как можно быстрее и избегать избытка щелочи. [c.211]

Эта реакция не пригодна для отщепления С-концевых остатков пролина, так как они не образуют тиогидантоин, остатков аспарагиновой и глутаминовой кислот, которые образуют циклические ангидриды, а не тиогидантоины (аспарагин и глутамин, наоборот, дают тиогидантоины [301]), а также остатков серина, треонина, цистина, аргинина и лизина [19, 301], которые неустойчивы при циклизации или регенерации аминокислоты из тиогидантоинового производного. Таким образом, этот метод находит весьма ограниченное применение для прямого определения строения пептидов и белков. Для определения С-концевого остатка по разности [107] реакция может оказаться более полезной, но ее все же нельзя использовать для определения аспарагиновой и глутаминовой кислот и пролина. Однако путем микробиологического анализа [107], специфичного для остатков /-аминокислот, эти аминокислоты могут быть определены по потере оптической активности на 50% вследствие рацемизации в том случае, когда они являются С-концевыми. [c.247]

Как указывалось ранее, наряду с методами бумажной и ионообменной хроматографии для определения аминокислот из гидролизатов [65, 89, 118, 154, 162] существует ряд других методов, используемых в меньшей степени или находящихся еще в стадии разработки. Применялась также газовая хроматография для разделения этерифицированных аминокислот [9, 87] или продуктов окисления аминокислот [195]. Хотя этот метод очень чувствителен, применение его ограничено, так как некоторые аминокислоты не образуют достаточно летучие производные. Был сделан ряд усовершенствований для улучшения существующих методов. Колориметрический метод определения гистидина улучшен за счет дегазации раствора перед добавлением окрашивающего реагента — диазосульфаниловой кислоты [159]. Аспарагин и глутамин могут быть определены путем этерификации с последующим восстановлением боргидридом лития. После гидролиза эти амиды идентифицируются в виде соответствую1цих кислот, в то время [c.401]

Специфичность и точность метода. При помощи этого метдда определяется только /-аспарагиновая кислота -аспарагиновая кислота по этому методу не определяется, и ее присутствие не влияет на определение. Наличие других аминокислот не мешает определению. Благодаря наличию в бактериальном препарате активной аспарагиназы, с большой скоростью дезаминирующей аспарагин в аспарагиновую кислоту, определяется не только /-аспарагиновая кислота, но также и /-аспарагин. [c.385]

Лестровая Н. Н. Новый метод количественного определения аспарагина и глютамина. Вопросы мед. химии, 1952, 4, с. 249— [c.289]

Определение числа и природы С- и М-концевых аминокислотных остатков позволило добиться существенных успехов в выяснении структуры некоторых белков. Инсулин оказался первым белком, для которого полностью установлен порядок расположения всех аминокислот [102—107]. Сангер и его сотрудники путем окисления инсулина надмуравьиной кислотой получили два основных продукта, которые оказались пептидами, содержащими цистеиновую кислоту и состоящими из 21 и соответственно 30 аминокислотных остатков. Более короткая цепь (по обозначению Сангера — пептид А ) имеет Ы-концевой остаток глицина и С-концевой остаток аспарагина. В более длинной цепи (пептид В ) Ы-концевой аминокислотой оказался фенилаланин, а на С-конце цепи находится аланин. С помощью остроумных приемов, заключающихся в широком использовании метода получения динитрофенильных производных при помощи [c.27]

Аминокислоты можно получить из природных материалов или приготовить путем химического синтеза. В первом случае обычно получают Ь-изомеры аминокислот аминокислоты, полученные методами химического синтеза (за исключением глицина, р-аланина и т. п.), представляют собой рацематы. Способы выделения аминокислот многообразны, и этому вопросу посвящена весьма обширная литература. Некоторые белки служат хорошим сырьем для получения определенных аминокислот клейковина (глютен) пшеницы служит основным сырьевым материалом для производства Ь-глутаминовой кислоты глютен кукурузы — хороший источник для выделения Ь-лейцина и Ь-тирозина Ь-ар-гинин можно получить из желатины и из крови. Продажные препараты Ь-аспарагина получают из побегов спаржи (ср. [14]). [c.91]

Нет сомнения в том, что из гидролизатов белков могут быть получены высокоочищенные Ь-аминокислоты. Тем не менее продажные препараты аминокислот зачастую загрязнены аминокислотными примесями, которые могут быть источником экспериментальных ошибок. В связи с этим микробиологи при приготовлении сред для определения аминокислот посредством бактерий нередко предпочитают применять синтетические ВЬ-аминокислоты, а не Ь-изомеры, выделенные из белковых гидролизатов. Можно привести следующие примеры часто встречающихся загрязнений в полученных из белков препаратах лейцина и глутаминовой кислоты часто содержатся метионин, а в препаратах глутамина — аргинин и аспарагин препараты триптофана бывают загрязнены тирозином, а препараты тирозина — цистином. Выделенный из гидролизатов изолейцин обычно содержит лейцин, и наоборот. Развитие современных хроматографических методов в значительной степени упростило задачу выделения аминокислот, и повсеместное применение этих методов, несомненно, улучшит качество продажных препаратов аминокислот. [c.91]

Открыл (совместно с Л. Н. Вокленом) аспарагин 186, 199 Роджерс XRogers) Роберт (1813—1884)—американский химик. Разработал (совместно с братом Уильямом) новый способ получения хлора усовершенствовал процесс получения муравьиной кислоты и ее альдегида и метод определения углерода в графите изучал свойства карбонатов калия и натрия 186 Роджерс (Rogers) Уильям Бартон (1804—1882)—американский геолог. Разработал (совместно с братом Робертом) новый способ получения хлора 186 Розе (Rose) Валентин (1736—1771) —немецкий химик. Открыл сплав, носящий его имя 114 [c.292]

Гидразинолиз как метод определения концевых групп имеет такой серьезный недостаток, как низкие выходы аминокислот и полная потеря цистеина, цистина, аспарагина и глутамина, если эти аминокислоты занимают С-концевое положение [22]. Метионин превращается в метионинсульфоксид, часть аргинина — в орнитин, а аспарагиновая и глутаминовая кислоты частично разрушаются. В табл. 28 приведены выходы аминокислот в виде ДНФ-производных после 10-часового гидразинолиза (по данным Нью и Френ- [c.192]

В то время как сг-аминогруппы аминокислот и концевые л-аминогруппы пептидов очень быстро реагируют с азотистой кислотой, Е-аминогруппы лизина реагируют очень медленно. Прн действии азотистой кислоты медленно разлагается с образованием азота также аммиак, который при гидролизе соляной кислотой отщепляется от амидных групп аспарагина и глутамина [18]. Объем образовавшегося азота можно измерить либо при атмосферном давлении, либо манометрически — при пониженном давлении [20]. Метод Ван-Слайка дает прекрасные результаты с большинством аминокислот и пептидов. Необходимо, однако, принимать в расчет, что сама азотистая кислота под действием сильно восстанавливающих веществ (например, цистеина) разлагается с образованием азота [21]. При определении азота глицина и его пептидов также получаются данные, превышающие теоретически вычисленные величины [22, 23]. [c.26]

В работе с. Р. Мардашева и В. В. Мамаевой (С. Р. Мардашев и В. В. Мамаева, Биохимия, 15, 465, 1950) описан метод количественного определения аспарагина, который, по данным авторов, позволяет достаточно точно определять содержание аспарагина в различных животных объектах. В экстрактах печени, освобожденных от белков, авторы нашли 3,6 мг% аспарагина по отношению к весу свежего органа в почках же содержание аспарагина равно 7,3 мг%. Определение аспарагина в ферментном гидролизате казеина показало, что около половины аспарагиновой кислоты, входящей в состав этого белка, находится в молекуле в виде аспарагина. — Прим. ред. [c.37]

Использование методов хроматографии в исследованиях первых продуктов усвоения растениями минерального азота позволило установить, что аминокислоты являются первыми устойчивыми соединениями при превращении аммиака в растениях. В корнях растений уже через 30 минут после внесения азотной подкормки происходит значительное возрастание содержания аминокислот. Синтез отдельных аминокислот за счет поступившего в растения аммиака осуществляется в определенной последовательности первым синтезируется аланин, затем днкарбоновые аминокислоты. Синтез основных и ароматических аминокислот происходит значительно позже, по-види-мому, в результате процессов переаминирования. При избытке аммиачного азота в растениях происходит интенсивный синтез аспарагина. [c.185]

Задача определения азота, входящего в состав амидов, содержащихся в физиологических жидкостях (и тканях), отличается от задачи определения содержания амидного азота в молекуле белка. В физиологических жидкостях, вследствие присутствия мочевины, а также других соединений, содержащих азот, метод полного гидролиза исследуемых соединений использован быть не может. Поэтому анализируемый образец подвергают гидролизу в мягких условиях, в результате которого только амиды, входящие в состав образца, превращаются в аммиак. При анализе некоторых жидкостей, например мочи, серьезной помехой является аммиак, поскольку он присутствует в количествах, значительно превосходящих количество амидов, и определяется с помощью любого метода, который может быть использован для определения аммиака, образующегося в результате гидролиза амидов. Борсук и Дубноф [5] в общих чертах описали ультрамикрометод определения амидов. Однако они не привели никаких данных относительно пределов применения этого метода, его надежности, а также воспроизводимости получаемых с его помощью результатов. Исследования этого метода в лаборатории автора показали, что при анализе таких веществ, как аспарагин, глутамин и ацетамид, он дает несколько заниженные и плохо воспроизводимые результаты. [c.209]

Так, 100 лет тому назад агрохимик Буссенго дал такие работы по дыханию и ассимиляции, что к нему ездили учиться методике биологии (Тимирязев) тот же Буссенго впервые провел параллель между обменом азотистых веществ в растительном и животном организмах (аналогия между аспарагином и мочевиной). Не кто иной, как агрохимик Адольф Майер установил наличность большой кривой дыхания , агрохимик Э. Шульце дал методы выделения ряда азотистых веществ и изучил процессы распада этих веществ при прорастании агрохимик Толленс изучил превращения (и дал методы определения) углеводов, Годлевский "и Лясковский изучали превращения жиров при прорастании, да и все ходовые методы определения белков, углеводов и жиров родились в агрохимических лабораториях у нас в последнее время Шмуком и Смирновым даны такие работы по биохимии табака, что их книги становятся справочниками по методам, которыми пользуются представители общей биохимии. [c.390]

Анализ аминокислотного и углеводного состава гликопептида, полученного этим методом, показал, что в гликопептиде содержится аспарагиновая кислота, К-ацетилглюкозамин и манноза в молярном отношении 1 3 5 возможны примеси следовых количеств других аминокислот [76, 69]. Можно было бы ожидать, что гликопептид такого состава имеет молекулярный вес 1551. На основании определения количества N-aцeтильнoгo содержимого в полностью К-ацетилированном гликопептиде (10,64%) [51] был получен молекулярный вес, равный 1579 близкая величина, равная 1570, была вычислена на основании данных, полученных при спектрофотометрическом измерении бензилоксикарбонильного гликопептида [80]. Термоэлектрические измерения дали величину, равную 1580 [76] и 1560 [60]. Изопьестическим методом была найдена несколько меньшая величина молекулярного веса гликопептида (1450—1500 [73]), но это расхождение, вероятно, было обусловлено присутствием незначительных количеств примесей с низким молекулярным весом. Гликопептид содержит одну свободную аминогруппу и одну свободную карбоксильную группу, которые входят в состав аспарагина [73, 59]. [c.14]

Методы выделения и идентификации мономеров дают информацию о молекулярной массе олигомера и его субъединиц, их количестве и свойствах, позволяют получать препараты для определения первичной структуры. Если удается получить белок в виде кристаллов, изучение первичной структуры удобно вести параллельно с помощью секвенирования и физических методов (например, рентгеноструктурного анализа), поскольку сопоставление получаемой информации существенно ускоряет ход анализа [158]. Однако такая возможность представляется редко. Часто именно получение достаточно чистых препаратов белка или субъединиц, пригодных для проведения аминокислотного анализа, и составляет одну из главных проблем, поскольку исследуемый белок может присутствовать лишь в незначительных количествах в сложной смеси сопутствующих белков и продуктов их деградации или же исходная смесь может содержать белки с очень близкими свойствами. Если белок плохо растворим и требует более жестких условий для солюбилизации, гетерогенные препараты могут быть получены уже на начальном этапе выделения. Причиной появления гетерогенности можег быть, по-видимому, изменение суммарного заряда из-за дезамидирования амидных групп аспарагина и глутамина, карбами-лирование е-аминогрупп некоторых остатков лизина ионом цианата, присутствующим в растворах мочевины [38], неспецифическая модификация остатков метионина и гистидина при алкилировании цистеина. [c.16]

Метод определения аспарагиназной активности основан на учете количества аммиака, освобождающегося при гидролизе аспарагина в почве. [c.342]

Смотреть страницы где упоминается термин Аспарагин определение методом: [c.350] [c.314] [c.259] [c.314] [c.66] [c.151] [c.37] [c.266] [c.269] [c.340] [c.37] [c.314] [c.264] [c.266] [c.269] [c.291] [c.151] [c.311] [c.226] [c.216]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология