Разделение хроматографическое стероидов

Хроматографическое отделение целевого радиоактивного производного от других компонентов реакционной смеси проводили как с добавлением нерадиоактивного производного (носителя), так и без него. При использовании носителя его количество следует выбирать с учетом возможностей применяемого способа выделения продукта реакции. Если метка индикаторным изотопом не используется, то все операции по удалению из обработанной пробы избытка реагента должны осуществляться количественно. Аликвотную часть конечного раствора подвергают хроматографическому разделению для получения ацетата и определяют его радиоактивность с помощью жидкостного сцинтилляционного счетчика. Для стандартизации этого метода можно провести количественное ацетилирование известной навески анализируемого субстрата тем же самым количеством ангидрида, после чего выделить и проанализировать определенную часть полученного продукта. Количество стероида или стерина М. (в миллимолях) в анализируемой пробе жидкости или экстракта выражается формулой [c.73]

Другую сторону мембраны в течение 5—10 с обрабатывают 4,5 %-ным раствором соляной кислоты. На стороне целлофановой пленки, обращенной в сторону силикатного раствора, сразу образуется тонкая пленка силикагеля. Мембрану с пленкой силикагеля промывают водой и спиртом, затем разрезают на полоски нужных размеров. Мембраны можно укрепить желатином или фиксировать па твердой бумаге. При хроматографическом разделении на таком слое длина пробега фронта растворителя составляет 2—3 см. На таких микрослоях хорошо разделяются некоторые стероиды и красители. Приготовление высокоэффективных пластинок с силикагелем описано также в работе [179]. [c.114]

При обстоятельном исследовании разделения стероидов на свободно насыпанных слоях окиси алюминия или силикагеля с добавкой флуоресцирующего вещества, но без связующего материала были также проведены количественные определения [4]. На почти горизонтальной пластинке, помещенной в хроматографическую камеру, вещества были разделены и затем локализованы в УФ-свете, экстрагированы и взвешены (ср. табл. 2 и стр. 256). Поскольку свободно насыпанные слои сорбента весьма чувствительны к толчкам и их опрыскивание реактивами можно проводить только во влажном состоянии, применение свободных слоев- не рекомендуется. [c.63]

На стр. 250 уже было рассмотрено поведение стероидов при распределительной хроматографии на бумаге с использованием различных систем, а также при адсорбционно-хроматографическом разделении на различных сорбентах в колонках. Используя данные табл. 42, следует вывести закономерности, наблюдаемые в тонкослойной хроматографии. [c.261]

В настоящее время имеется огромное количество работ, в которых описывается или упоминается применение колоночной хроматографии для разделения стероидов. В связи с этим интересно было бы оценить процент работ, посвященных стероидам, в которых бы не упоминалась хроматография. Принимая во внимание то, что число разнообразных стероидов так же велико, ясно, что в данном обзоре невозможно рассмотреть все приложения (или даже большую их часть) колоночной хроматографии в области стероидов. Все, что можно здесь сделать,— это свести обзор к наиболее поздним работам, указать различные хроматографические методы, сравнить их (если они поддаются сравнению) и попытаться рекомендовать определенные хроматографические методы, применимые для разделения определенных типов стероидов. [c.211]

Гель-хроматография как бы дополняет другие хроматографические методы разделения стероидов. Низкая химическая активность гелей и, в случае липофильных гелей, возможность применения неполярных растворителей делают эти гели в высшей степени удобными для распределения легко гидролизуемых про- [c.222]

С пористыми стенками, на которые нанесен твердый носитель, однако в них наблюдается размывание задней границы хроматографических пиков (образование хвостов ) из-за адсорбции полярных соединений на неполярных фазах. Капиллярные колонки с внутренним диаметром 0,76 мм применяются редко, однако для них отношение размера пробы к скорости потока гелия может быть довольно большим. Увеличивая длину такой колонки, можно добиться такого же разделения, как и на колонках меньшего диаметра. Для анализа высококипяш их соединений, таких, как стероиды, а также для анализа соединений в количествах порядка 10 7о или менее лучше использовать насадочные колонки. [c.204]

Стероиды успешно анализируются на обоих типах жидко-жидко-стной распределительной системы. Во многих случаях для разделения одной и той же смеси компонентов может быть использована любая система. Возможность изменять хроматографическую систему особенно важна при определении стероидов в маслах, помадах и кремах, в которых составные компоненты могут мешать определению тех стероидов, концентрация которых низка. В наиболее [c.284]

За последние пятнадцать лет тонкослойная хроматография стала одним из практически универсальных, точных и чрезвычайно полезных методов. Техника выполнения хроматографического разделения относительно проста, а требуемое оборудование недорого. Тонкослойная хроматография пригодна для исследования как летучих, так и нелетучих соединений и применяется для анализа витаминов, стероидов, лекарственных веществ, синтетических органических материалов, красок, эфирных масел, смол, пестицидов и т. д. Во многих случаях только этот метод дает ключ к практическому решению запутанных проблем. В настоящее время многие исследователи используют сочетание тонкослойной хроматографии с другими методами, в частности с газовой хроматографией. [c.10]

В курсе приведены многочисленные примеры практического применения главным образом газовой и молекулярной жидкостной хроматографии на адсорбци-онно или химически модифицированных адсорбентах для анализа углеводородов, их производных и гетероциклических соединений. Особое внимание уделено анализу вредных примесей, разделению углеводов, стероидов, гликозидов, азолов, азинов, а также таких важных галогенпроизводных, как фреоны и пестициды. Адсорбция микотоксинов, представляющих собой одну из серьезнейших пищевых и кормовых проблем, рассматривается как в аспекте хроматографического их анализа, так и в аспекте хроматоскопического исслв1Дования структуры их молекул. В конце курса приведены примеры адсорбции и хроматографии синтетических и природных макромолекул. Здесь рассматривается иммобилизация некоторых ферментов и клеток (например, для осахарнвания крахмала, изомеризации глюкозы, для решения проблем искусственной почки), а также вопросы хроматографической очистки вирусов, в частности, вирусов гриппа и ящура. [c.4]

Известно, что определенные функциональные группы или комбинации функциональных групп термически нестабильны и разрушаются в условиях, существующих в газохроматографйческих колонках. Проверка того, разложилось нужное соединение или нет, была одной из первых причин сбора хроматографически разделенных соединений. На рис. 9.1 приведена хроматограмма- разделения смеси стероидов, взятой в количестве, измеряемом миллиграммами. Это разделение проводили на неселективной жидкой фазе 5Е-30, и соотношение между временами удерживания показывает, что во время разделения не происходило изменений структуры разделяемых веществ. Точки плавления и инфракрасные спектры полученных веществ хорошо совпадали с соответствующими данными для эталонных веществ правда, некоторые из собранных фракций имели более резко выраженные точки плавления, чем исходные вешества. [c.286]

При помощи хроматографии удалось выделить фракции нефти, в которых вращение оказалось повышенным до 28°, и показать, что оптически активное вещество имеет сложную полиметилено-вук1 структуру, содержащую от трех до пяти колец в молекуле. Раньше оптически активному компоненту приписывалось строение стероидов, обладающих характерным ультрафиолетовым спектром, однако хроматографическое разделение фракций показало, что вещества стероидной структуры концентрируются во фракциях, не обладающих оптической активностью. Ближайшая природа оптических компонентов и в настоящее время еще не установлена. По-видимому, в нефтях находятся оптически активные вещества, различающиеся деталями структуры, разбросанные по всем высшим фракциям нефти и имеющие, следовательно, раз [ичные молекулярные веса. Возможно, что все они имеют происхождение от одного и того же начального вещества, так как в сложных циклических молекулах содержится иногда несколько ассиметрических атомов углерода и частичное разрушение исходной структуры едва ли может перевести всю молекулу в неактивную форму. [c.17]

Разделение в последних системах происходит за счет комбинации механизмов разделения и адсорбции, хотя до конца они не поняты. Даже шривитые фазы, такие, как is, хорошо адсорбируют некоторые количества органических растворителей из водно-органической подвижной фазы, образуя жидкую неподвижную фазу in situ [40, 54, ПО, 111]. Природа таких адсорбированных слоев может изменяться с изменением концентрации органического растворителя в подвижной фазе. Так, компоненты смеси стероидов, предварительно разделенные традиционной распределительной жидко-жидкостной хроматографией после введения в колонку, заполненную фазой is, элюируются в нормально-фазном порядке при использовании элюента метанол—вода (60 40), но р обращенно-фазном порядке, если отношение метанол —вода меняется на 40 60 [115]. Такое обращение порядка элюирования было бы маловероятным, если бы единственным механизмом, действующим в этой хроматографической системе, была твердофазная адсорбция (гидрофобное взаимодействие). [c.74]

Хроматографические бумаги, которым придана гидрофобность химиче обработкой (например, ацетилированием) или пропитыванием гидpoфoбны ществом (например, силиконом). Используются для жидкостной распределит ной хроматографии с обращенными фазами, разделения липофильиых вещ( липидов, стероидов, витаминов, аминов и др. [c.152]

Как радиоактивный реагент (радиореагент) для определения первичных и вторичных гидроксильных групп уксусный ангидрид имеет много преимуществ. В пиридине реакция ангидрида (в избытке) с этими группами протекает быстро и часто количественно при комнатной температуре при повып1енных темперагурах мож-1Ю обеспечить по существу полную этерификацию. Избыток ангидрида можно удалить путем гидролиза и последующей экстракции водным раствором щелочи или с помощью хроматографического разделения. Полученное соединение можно метить как изотопом так и тритием, что особенно ценно при использова[ши метода с двумя изотопами. При этом для реагентов, меченных тритием и изотопом можно получить удельные активности более 2 Ки/мМ (кюри на миллимоль) и до ОД Ки/мМ соответсгвеино, что обеспечивает высокую чувствительность метода. Помимо этого с помощью перегонки полученное соединение можно легко отделить от нелетучих примесей. Меченый уксусный ангидрид является ценным реагентом для определения стероидов и стеринов в микро- и макроколичествах, а гакже макроколичеств многих других соединений с гидроксильны ш группами. [c.71]

Образующиеся продукты характеризуются иными временами удерживания по сравнению с исходным соединением, что приводит к появлению на хроматограмме новых пиков и используется для идентификации анализируемых соединений. Степень превращения анализируемых соединений (алкалоидов и стероидов) изменяется в широких пределах, возрастая с увеличением пробы ацели-рующего агента (ангидрида). В работе показано, что можно использовать пробы ангидрида до 50 мпл без существенного образования < хвостов хроматографических зон. Более сильным ацелирующим агентом является пропионовый ангидрид. Величина анализируемой пробы изменялась в пределах 0,5—8 мкл 0,5%-ного раствора. Разделение и образование производных проводили на колонке с метилсиликоновым полимером 8Е-30 (2% на твердом носителе газ-хроме 3) при различных температурах. Авторы показали также возможность образования трифторацетатов и триметилсилильных эфиров непосредственно в колонке при использовании аналогичного метода. [c.65]

Вариант метода получения ацильных производных в хроматографической колонке в ходе хроматографического разделения с целью идентификации ряда аклалои-дов и стероидов был предложен Андерсеном и Ман-нерингом [76]. [c.42]

Некоторые смеси стероидов могут быть разделены (и были разделены) несколькими принципиально различными хроматографическими методами. В качестве иллюстрации достаточно привести высказывание из работы [1], в которой автор подчеркивает, что одинаковые результаты могут быть получены применением различных хроматографических методов. Авторы использовали колонку, заполненную кремневой кислотой (ср. рис. 28.2 и 28.3), и для элюирования применяли смесь диэтилового и петролейного эфиров переменного состава. Однако в этой же работе авторы утверждают В последней работе Фернандеса и сотр. [2 описано разделение прогестинов и эстрогенов с применением колоночной хроматографии на сефадексе ЬН-20 и смеси метанол—вода (85 15) в качестве элюирующей жидкости. Мы получили результаты, сравнимые с результатами этой работы, но в нашем методе разделение различных прогестинов оказалось лучшим . [c.211]

Установлено, что вещества обычно разделяются методами газовой хроматографии при условии, если их точки кипения не больще чем на 50—100° превышают рабочую температуру колонки. Вещества с меньшей летучестью можно проанализировать хроматографически при специальном подборе параметров работы колонки. При этом увеличивают рабочую температуру или уменьшают рабочее давление. Исследования можно проводить с небольшими пробами, снижая концентрацию вещества в газе-носителе. Увеличение температуры хотя и приводит к повышению давления паров веществ, анализируемых хроматографически, тем не менее ограничено стабильностью и летучестью применяемой неподвижной фазы. В настоящее время максимальная температура составляет обычно 300—350°, хотя ароматические углеводороды подвергались разделению при 445° [1]. При хроматографическом разделении веществ с более высокими точками кипения не допускается уменьшение рабочего давления из-за высокого перепада давления по колонке. Однако его снижали примерно до 200—300 мм рт. ст. при анализе сложных эфиров жирных кислот [2]. С созданием высокочувствительных ионизационных детекторов стало возможным разделять вещества со значительно меньшими давлениями пара и таким образом анализировать смеси веществ с точками кипения, на 150—200° превышающими температуру колонки. В связи с этим методы газовой хроматографии стали применяться для анализа некоторых термически неустойчивых веществ. Например, используя эти детекторы, удалось разделить терпены и стероиды при 200° [3]. [c.497]

По хроматографическим свойствам силикаты магния близки к силикагелям (см. разд. 1). Применяют их для разделения липидов, гликозидов, ацетилиро-ванных сахаров, азотсодержащих веществ, алкалоидов, нуклеотидов, углеводородов, терпенов, стероидов, витаминов, пестицидов, канцерогенных веществ идр. Наибольшую популярность приобрел флорисил — силикат магния со сравнительно низким содержанием окиси магния. Элюотропный ряд растворителей для адсорбционной хроматографии на флорисиле дан в разд. 166. [c.29]

Тяжелые фракции эфирных масел обычно содержат высококипящие вещества, например дитерпены. Высококипящие вещества очень трудно разделять с помощью препаративной ГХ. Стероиды можно с успехом разделять с помощью аналитической ГХ, однако с увеличением объема пробы осуществить такое разделение становится все более трудно. Об этой трудности уже упоминалось в начале этой главы. Дело здесь не только в недостаточной термической стабильности вещества, но и в том, что при больших значениях коэффициента распределения к все большую роль играют эффекты, связанные с адсорбцией разделенных веществ на носителе, которые вызывают дополнительное размывание хроматографических полос. Если уменьшить адсорбцию, то можно улучшить качество газохроматографического препаративного разделения высококипящих соединений. Такое улучшение наступает, когда в качестве носителя используют стеклянные шарики. Примером этому служит хроматографическое разделение жасминового эфирного масла. Сначала это разделение проводили на колонке с носителем хромосорб А. Полученная при этом хроматограмма приведена на рис. 7.22, с. На этой хроматограмме видно недостаточное разделение тяжелой фракции. Разделение той же самой смеси на носителе из стеклянных шариков дало хроматограмму, показанную на рис. 7.22, б. В этом случае степень разделения высококипящих [c.238]

В этой главе приведен список монографий по хроматографии, электрофорезу и противоточному распределению, опубликованных с 1962 по середину 1978 г., и периодических изданий по хроматографии. Более двухсот монографий, посвященных этим вопросам, можно найти в hemi al Abstra ts с 1962 по 1972 г. Вначале приводятся только те книги, в которых рассматривается лабораторное применение методов, а затем приводятся монографии, в которых обсуждается более широкий круг вопросов. В список не включены узкоспециализированные монографии, посвященные анализу какой-либо одной группы соединений, например аминокислот, антибиотиков, белков, стероидов и т. п., сборники хроматографических данных, а также некоторые руководства, написанные в учебных целях. Среди монографий по ионному обмену указаны только книги, посвященные методам разделения. [c.356]

Как отмечали Новотны и сотр. [1], в силу чрезвы-чайной сложности смесей летучих соединений, определяющих запах пищевых продуктов, загрязнений воздуха, табачного дыма и физиологических жидкостей, для их достаточно эффективного разделения требуются высокоэффективные капиллярные колонки. Кроме того, многие компоненты таких смесей (а также некоторые пестициды, производные наркотиков, фармацевтические вещества, аминокислоты., стероиды и сахариды) при анализе в обычной газохроматографиче-ской системе сильно разрушаются или совсем не доходят до детектора. В связи с этим иногда пытаются использовать для подобных специфических анализов более инертные и высокоэффективные стеклянные открытые хроматографические колонки. Некоторые из этих попыток были связаны с подробным анализом соединений определенного класса, другие сводились к поверхностному анализу для демонстрации преимуществ этих хроматографических систем. [c.158]

При использовании систем Заффарони хроматографическую бумагу пропитывают формамидом (лучше всего 30%-ным раствором в этилацетате) или пропиленгликолем и в соответствии с полярностью стероида или тритерпеноида подбирают подвижный растворитель из ряда, в который входят в перечисленном порядке гексан, толуол, бензол, хлороформ и этилацетат. В табл. 3.15 дан список систем Заффарони, пригодных для разделения различных групп стероидов, а именно кортикоидов, половых гормонов, сердечных гликозидов, сапогенинов, экдизонов и т. д. [c.119]

При термической деструкции анализируемых веществ, разделенных на тонком слое сорбента, для ускорения и достижения большей полноты извлечения детектируемых веществ из сорбента в ряде случаев в хроматографическую систему вводят окислители или восстановители [31]. Этот прием широко используют в элементном анализе. Мукхер-жье с сотр. [32] экспериментально показал, что ряд веществ (например, некоторые эфиры, стероиды и терпены) пе ниролизуются нолностью даже при 800—900°С, частично оставаясь в слое сорбента. Устранить это нежелательное явление можно введением в сорбент катализаторов разложения, например окиси меди. Однако применение подобных катализаторов ограниченно, так как они могут влиять па процесс хроматографического разделения и прп нагревапни вступать в реакции с сорбентом. [c.68]

Смотреть страницы где упоминается термин Разделение хроматографическое стероидов: [c.274] [c.169] [c.472] [c.169] [c.32] [c.597] [c.101] [c.520] [c.12] [c.12] [c.47] [c.144] [c.20] [c.228] [c.243] [c.339] [c.343] [c.201] [c.293] [c.302] [c.182]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология