Экстракция из биологических жидкостей

В настоящее время для обнаружения наркотических веществ в биологических жидкостях человека используют сочетание физико-химических и иммунохимических способов определения. В первой группе наибольшее распространение получили методы, основанные на различных хроматографических приемах, либо их сочетании с другими высокочувствительными способами анализа (газожидкостная, тонкослойная хроматография, хроматомасс-спектрометрия, высокоэффективная хроматография под давлением). Основное достоинство этих методов заюшчается в том, что они позволяют определять с высокой чувствительностью индивидуальные по структуре соединения, используя при этом стандартные эталоны веществ. Однако для проведения анализа данными методами требуется специальное дорогостоящее оборудование, обученный персонал, время определения значительно увеличивается за счет предварительной обработки исследуемых образцов, что связано с экстракцией биологической жидкости и получением легколетучих производных анализируемой пробы. Все это значительно усложняет процедуру проведения анализа и делает ее дорогостоящей. [c.198]

Хроматографии алкалоиды наносят на колонку главным образом в виде оснований, растворенных в обычных органических растворителях полярного или менее полярного характера (ацетон и др.). За исключением анализа чистых веществ, алкалоиды обычно выделяют из растительных материалов, различных медицинских препаратов, реакционных смесей (при синтезе) или биологических материалов. Почти во всех случаях пытаются провести предварительное отделение основных анализируемых веществ от сопутствующих примесей методом экстракции. В качестве сопутствующих веществ могут быть неорганические соли и вещества липофилБного характера. При анализе растительного материала растение сушат, тонко измельчают и экстрагируют сначала петролейным эфиром для извлечения липидов. Затем материал подщелачивают и алкалоиды экстрагируют диэтиловым эфиром, хлорофор ом или другими растворителями в отличие от неорганических солей или веществ кислотного характера алкалоидные основания переходят в экстракт. Если анализируют растворы (например, растворы для инъекций, реакционные смеси или биологические жидкости), обычно достаточно подщелочить растворы и экстрагировать алкалоиды растворителями (хлороформом, диэтиловым эфиром и т. д.). В некоторых случаях предварительную очистку можно проводить ионным обменом. Для экстракции используют водные растворы минеральных кислот. Экстракты, содержащие соли алкалоидов наряду с сопутствующими примесями, пропускают через подходящий катионит алкалоиды сорбируются, и после удаления из колонки кислот их элюируют смесью низших алифатических спиртов с аммиаком. [c.101]

ЭКСТРАКЦИЯ ИЗ БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЕЙ [c.240]

С точки зрения синтеза практически более полезным представляется метод, в котором индикаторный изотоп вводится в ангидрид. Однако при использовании подходящего способа метки радиоактивными можно сделать и определяемые стероид или стерин. Возможность определения степени превращения по реакции с помощью меченых веществ отмечалась в ранних работах, посвященных использованию радиоизотопных методов в анализе аминокислот [90, 91]. Стероиды и стерины трудно количественно экстрагировать из биологических жидкостей добавление к этим жидкостям радиоактивных субстратов в качестве индикаторов дает удобный способ измерения выхода. Если радиоактивный субстрат добавить в жидкость перед экстракцией, то по относительной радиоактивности выделенного вещества можно точно оценить полные потери целевого соединения в ходе анализа, включая и потери, обусловленные неполным ацетилированием. В работе [92 описано использование в таких анализах стероидов, меченных тритием, имеющих высокую удельную радиоактивность. Приготавливали такие стероиды методом Вильсбаха. В настоящее время большое число стероидов, меченных изотопом С, имеется в продаже. [c.72]

Обычно связанные стероиды предварительно освобождаются ферментативным или кислотным гидролизом. Но и после этой операции содержание стероидов в биологических жидкостях обычно в 10 —10 раз меньше содержания других веществ, которые в них находятся. При анализе веществ из биологических объектов повышение чувствительности определения лимитируется в настоящее время уже не столько возможностями аппаратуры, сколько так называемым компонентным шумом, который обусловлен наличием в стероидном экстракте других органических веществ. Компонентный шум в той или иной степени снижает чувствительность определения, а также уменьшает достоверность получаемых результатов. Для уменьшения компонентного шума применяют различные способы выделения стероидов из биологического материала, прежде всего селективную экстракцию, а также тщательную очистку стероидного экстракта и его фракционирование, причем степень выделения и очистки стероидного экстракта во многом зависит от уровня содержания анализируемых соединений в исследуемой пробе. [c.83]

Процесс извлечения летучих компонентов раствора пузырьками проходящего через него газа — процесс непрерывной газовой экстракции — может быть описан различными уравнениями в зависимости от условий его осуществления и открывает новые многообразные возможности практического использования АРП. Из этих новых перспектив первой следует назвать возможность определения компонентов в сложных системах с неизвестными коэффициентами распределения. К таким системам относятся, например, пластовые и сточные воды, биологические жидкости и ткани организмов. [c.10]

Ион-парная хроматография давно находила применение в жидкостной хроматографии и экстракции для извлечения лекарств и их метаболитов из биологических жидкостей в органическую фазу. Как самостоятельный раздел ВЭЖХ ион-парная хроматография, называвшаяся также экстракционной, парно-ионной, хроматографией с использованием ПАВ, хроматографией с жидким ионообменником, стала развиваться с середины 70-х годов. Метод занимает промежуточное положение между ионообменной хроматографией и адсорбционной, распределительной или обращенно-фазной. Недостатки ионообменных материалов, а именно невоспроизводимость от партии к партии, меньшая активность и стабильность по сравнению с другими сорбентами и небольшой выбор наполнительного материала, исключающий изменение селективности за счет сорбента, привел к некоторому ограничению применения ионообменной хроматографии. В ион-парной хроматографии большинство этих недостатков можно преодолеть. Метод ион-парной хроматографии характеризуется универсальностью и обладает преимуществом по сравнению с классической ионообменной хроматографией, в котором активные центры фиксированы. Вследствие более быстрой массопередачи в ион-парной системе хроматографическое разделение более эффективно, чем на ионообменнике с фиксированными и активными зонами. [c.74]

В сочетании с методом простой вакуумной экстракции газовую хроматографию можно применять и для определения малых количеств постоянных газов, содержащихся в биологических жидкостях. Таким способом можно определять содержание кислорода в 1 мл плазмы человека [7]. [c.442]

Примечания. 1. При определении аспарагиновой кислоты в тканевых фильтратах или биологических жидкостях, содержащих янтарную и фумаровую кислоты, необходимо до метилирования произвести предварительную экстракцию растворимых в эфире кислот из подкисленного раствора. [c.384]

Для экстракции порфиринов из биологических жидкостей, животных и растительных тканей наиболее часто применяют ацетон, содержащий небольшое количество (1—5 объем . %) концентрированной соляной кислоты, или омесь этилацетата с уксусной кислотой (3 1 по объему) [11]. [c.111]

Данная книга посвящается методам подготовки проб для газохроматографических анализов. В начале книги обсуждаются методы ввода проб, более детально рассматривается анализ равновесной паровой фазы с использованием охлаждаемых ловушек и без них. Далее речь идет о методах выделения и концентрирования, применяемых для подготовки проб в этом аспекте в книге обсуждаются адсорбция, абсорбция, экстракция, дистилляция, конденсация, концентрирование замораживанием и зонная плавка. Рассматриваются специальные проблемы, возникающие при анализе воздуха и биологич,е-ских объектов (включая выделение жирных и желчных кислот, а также аминокислот из биологических жидкостей и тканей), при анализе пищевых продуктов и входящих в иХ состав пахучих веществ, эфирных масел, осадков и водных проб, анализов, применяемых в судебной экспертизе. [c.6]

Разработаны методы определения цинка в золах растений [15], в почвах [17], в фосфористых бронзах [190], в винах [205], в меди, алюминии, цирконии, сплавах на их основе [8, 36], в цирконии [210], в кадмии [175], в металлах [248] в биологических объектах [125, 175], в сталях [175], в металлургических образцах [8, 9] в металлическом золоте [246] методы определения цинка и кадмия в рудах, свинце, ионно-обменных смолах, электролитических растворах [175] методы определения кадмия в биологических жидкостях [125], в цинке и цинковых рудах [69, 175], в цирконии с использованием экстракции [36] методы определения ртути в различных объектах [70, 125, 151, 175, 197, 211, 212, 213]. [c.145]

Летучие жирные кислоты можно извлечь из тканей или биологических жидкостей любым из описанных в разделе А общих методов, включая экстракцию растворителями и перегонку. Их можно отделить от аминов и нейтральных летучих веществ путем перевода в раствор в виде солей щелочных металлов и испарения растворителя. Нейтральные и основные компоненты смеси удаляются вместе с растворителем, а остающийся осадок состоит из солей жирных кислот. [c.245]

Отличительной особенностью ироведения количественного анализа в фармакокинетическом эксперименте в условиях in vivo является необходимость определения крайне низких концентраций тестируемого вешества, часто не превышающих десятка нг/мл в сложных смесях, каковыми являются биологические жидкости (кровь, моча, слюна и пр.). При этом также возникает задача разделения фармакологически активного вещества в неизменном виде и его метаболитов. С этой целью в качестве предварительных этапов ан 1лиза используются экстракция и концентрирование тестируемых веществ, получение их дериватов и другие химико-аналитические методологические подходы. [c.26]

Определение в организме А. С. и продуктов их превращения. А. С. в биологических жидкостях. Осаждение белков трихлоруксусной кислотой, прибавление к фильтрату раствора свежеперег-нанного фурфурола и колориметрия в кислой среде (Хаггард и соавторы). А. С. в выдыхаемом воздухе. Выдыхаемый воздух проходит через трубки, содержащие пятиокись иода при температуре 148°. При сгорании А. С. освобождает иод, который собирается в 1% раствор иодистого калия и титруется гипосульфитом (Хаггард и соавторы). Определение высших кетонов в биологи-ч еских жидкостях и в выдыхаемом воздухе. Реакция с 2,4-динитрофенилгидразином с образованием гидразона, экстракция последнего и колориметрия (Хаггард и соавторы, модификация метода Гринберга и Лестера). Определение альдегидов в крови. См. Ацетон (метод Гринберга и Лестера). [c.226]

Если рНпробы>8, надо подкислить пробу. При анализе биологических жидкостей бывают необходимы осаждение, экстракция, фильтрация и т.д. [c.38]

При работе с образцами особо сложного состава (например, биологическими жидкостями) подготовка к анализу, как правило, многостадийная. Она может включать операции по осаждению, центрифугированию, фильтрованию, экстракции. Прп этом успех анализа в большей степени зависит от качества подготовки проб, чем от выбора условий хроматографирования. В последние. годы ряд фирм освоили выпуск пластмассовых хроматографических патронов для очистки и концентрирования образцов. Эти патроны (объем 1—20 мл) заполняются крупнозернистыми сорбентами, по химии поверхности совершенно аналогичными тем сорбентам, которые используются в ВЭЖХ. Принцип их использования следующий. Изучаемый объект растворяют в растворителе, обладающем незначительной элюирующей силон по отношению к анализируемым веществам. Полученный раствор пропускают через патрон, при этом более подвижные компоненты пробы в нем не задерживаются, а определяемые соединения накапливаются в верхней части слоя сорбента. Таким образом через патрон можно пропустить довольно большой объем образца, во много раз превышающий объем сорбента в нем. По окончании этой операции колонку промывают небольшим объемом растворителя, обладающего значительной элюирующей силой по отношению к определяемым соединениям (й яаЮ ). В результате такой процедуры из образца удаляются механические примеси, слабо и необратимо сорбирующиеся вещества. Получают фракцию небольшого объема, содержащую помимо определяемых соединений лишь фоновые компоненты с близкой хроматографической подвижностью. [c.212]

Широкое применение экстракционных методов в химической технологии в последние годы привело к появлению нового направления экстракции различных веществ из биологических жидкостей. Показана принципиальная возможность очистки крови экстракцией из крови и плазмы биохимических компонентов — холестерина, мочевины и др. [260]. Эти компоненты практически не экстрагируются неспецифическими экстрагентами, такими, как масла, насыщенные углеводороды, хлороформ и т. д. В то же время для экстракции мочевины можно использовать кислые экстрагенты, а холестерин извлекается основными экстрагентами, например экстракцией триоктиламином дможно снизить содержание холестерина в крови примерно в 1,5 раза. [c.240]

Например, для отработки методик выделения определённого пептида из биологических жидкостей необходимо получить его тритиймеченый аналог, при использовании которого можно проследить эффективность выделения данного пептида на разных стадиях очистки. Показано, что пептидный пул более высокой степени очистки можно получить, используя твердофазную экстракцию, когда биологический материал дополнительно очищают, адсорбируя его на патроне с соответствущим сорбентом и селективно смывая искомую фракцию. Таким методом концентрацию тафцина (Thr-Lys-Pro-Arg) определяли в плазме человеческой крови или ликворе [62]. При использовании твердофазной экстракции удаётся отделить данный пептид от неорганических солей, белков, клеток и клеточных мембран. [c.532]

Беренблюм и Чайн [10] использовали метод Дениже для определения фосфора в биологических жидкостях и органических средах. Определение фосфора выполняли в 10 мл общего объема жидкости, полученной экстракцией гетерополи-кнслоты изобутанолом. Гетерополикислоту восстанавливали в органической фазе. Измерение оптической плотности растворов проводили в обычном колориметре. Эти авторы, кроме того, предложили проводить микроопределение фосфора [c.47]

Определение в биологических жидкостях. Метод основан на реакции А. с 2,4-динитрофенилги дразином с образованием гидразона, отделении последнего экстракцией с ССЦ и колориметрии в этой жидкости (Гринберг и Лестер). [c.303]

Газы, растворимые в небольших количествах биологических жидкостей, можно извлечь вакуумной экстракцией в аппарате для газового анализа Ван-Слайка (см. раздел А, П1, а, 2). В газовую пипетку вводят около 1 мл плазмы и, опуская заполненный ртутью уравнительный сосуд, создают разрежение (см. фиг. 45). В течение нескольких минут прибор механически встряхивают, после чего выделившиеся газы, поднимая уравнительный сосуд, вводят через капиллярную трубку в газовый поток хроматографа. Этот метод использовали для измерения напряжения кислорода в воде и плазме с помощью колонки, заполненной молекулярным ситом (см. раздел Б, И, а, 1). Время, необходимое для извлечения газов из пробы, составляет менее 5 мин, а время элюирования из колонки — менее 2 мин. За эти 2 мин можно извлечь другую пробу [62]. Многие определения, ранее осуществлявшиеся с помощью методов Ван-Слайка, Холдейна, Сколендера и Варбурга, можно теперь проводить газохроматографически с такой же или лучшей точностью, с меньшей затратой труда и за более короткое время. [c.142]

Определение ртути в биологических жидкостях произво-д)1тся п тем экстракции для калибровки к образцу добавляется ЪО мкг ртути. Используется шкала, расширенная в 3 раза. Отклонение в 9 мка получено для экстракта с содержанием 0,5 мг л [125]. [c.153]

При определении висмута в биологических жидкостях экстракция проводится пирролидиндитиокарбаматом аммония и метил-н-амнлкетоном для калибровки к каждому образцу добавляется 40 мкг В1 градуировочные кривые в координатах поглощение — концентрация прямолинейны до 0,4 мг/л. Небольшое осложнение при определении висмута атомно-аб-горбциониым методом заключается в том, что при длине вол- [c.167]

Концентрирование примесей из жидких фаз на адсорбенте. В этом случае подбирают такой адсорбент, который бы хорошо адсорбировал растворенные примеси и слабо адсорбировал основное жидкое вещество — растворитель. В большинстве случаев подобные извлечения проводятся из водной среды. Это, в первую очередь, анализ органических примесей в сточных водах, анализ микропримесей в биологических жидкостях, анализ углеводородов в морской воде. Для концентрирования примесей в этих случаях используются в основном неспецифические адсорбенты, в частности активированные угли, карбосита, а также пористые полимеры [7, 9], так как на этих адсорбентах растворитель — вода — адсорбируется значительно слабее органических веществ. Сконцентрированные примеси удаляют с адсорбента предварительной экстракцией растворителем [17] или десорбцией при нагревании и направляют непосредственно в аналитическую колонну хроматографа [9]. [c.187]

Определение никеля в биологических жидкостях рассмотрено в [125] подтверждено, что линия 2320 А более чувствительна, чем линия 3415 А, но характеризуется низким отношением сигнал шум и искривленностью калибровочного графика. Для повышения чувствительности определения применена экстракция комплекса никеля с пирролидиндитиокарбаматом аммония в метил-п-амилкетон. Для калибровки к образцу добавляется 10 мкг никеля. [c.171]

В течение ряда лет эмиссионные пламеннофотометрические методы применяли для определения натрия, калия и кальция в биологических пробах. Все эти элементы присутствуют в биологических жидкостях в сравнительно больших концентрациях, особенно натрий и калий, содержание которых достигает 0,4% в зависимости от типа гкидкости. Концентрация кальция обычно составляет 0,01—0,02%. Благодаря высокой чувствительности эмис-сиоиного метода им можно определять большие концентрации этих элементов в крайне неболыпих пробах. Магний также определяется в обычных анализах. На использование экстракции для определения меди в моче, крови и плазме указывается в работе [54] существуют также методы определения железа, стронция [2, 3] и таллия в моче [55]. [c.198]

Меллет и Вудс [166] разработали чувствительный фотофлуорометрическин метод количественного определения ТЭФ в биологических жидкостях. В отличие ют обычных методов определения этиленимина этот метод специфичен для неизмененного ТЭФ и может использоваться для определения ТЭФ и тиоТЭФ как порознь, так и в присутствии друг друга. При необходимости одновременного определения равные количества образца подвергают анализу на ТЭФ и тиоТЭФ. Методика, описанная для ТЭФ, позволяет определить оба соединения, и, таким образом, результат дает общее содержание алкилирующих веществ. Вторая методика специфична для тноТЭФ, и по разнице определяют содержание ТЭФ. Вкратце метод для определения ТЭФ сводится к экстракции 10% (по объему метанолом в хлороформе, реакции с бета-нафтолом, после чего следует серия экстракций водными и органическими растворителями с определением интенсив-яости флуоресценции конечной кислой вытяжки. При смешивании ТЭФ с мочой и плазмой этим методом определялось 88 15% первоначального количества. [c.164]

Группоспецифические мукополисахариды крови человека обычно получают экстракцией 90- или 95%-ным фенолом лиофнлизованных биологических жидкостей, таких, как слюна, желудочный сок, жидкость кисты яичника, меконий, а также тканей, обработанных протеолитиче-скими ферментами. Большинство активных веществ нерастворимо в этом растворителе. Если же они оказываются растворимыми, как, например, вещества, выделенные из тканей, обработанных пепсином при pH 1—2, то их легко можно осадить прибавлением небольших количеств спирта. Мукополисахариды, полученные этим путем, в основном свободны от песпецифических белков и жиров, содержащихся в нативных выделениях и экстрактах тканей, и представляют собой материал, который после дальнейшей очистки фракционным осаждением из водных растворов подходящим органическим растворителем наиболее часто употребляется для химических и серологических исследований (см. Кабат [1] и Морган [2]). [c.336]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология