Хроматография принципы методов

Принцип метода. Метод молекулярно-ситовой хроматографии (гель-хроматографии, гель-проникающей хроматографии или эксклюзионной хроматографии) —это вид твердо-жидкостной хроматографии, основанный на различной способности молекул веществ, отличающихся своими размерами, проникать внутрь заполненных растворителем пор неподвижной фазы и задерживаться там на различное время. Молекулы, имеющие большой размер, не проникают совсем или проникают только в часть пор носителя и вымываются из колонки раньше, чем маленькие молекулы, вследствие чего обеспечивается разделение по размеру молекул в растворе. [c.69]

Принцип метода аффинной хроматографии, историческая справка и применение [c.15]

Проблема анализа распределения компонентов остатков по размерам приобрела большое значение сравнительно недавно и в основном связана с развитием процессов их каталитического гидрооблагораживашм. Возможность получать какие-то определенные результаты появилась после разработки метода гель-хроматографического разделения. Метод этот — гель-проникающая хроматография (ГПХ) — впервые нашел широкое применение в биохимии и химии полимеров [31]. При ГПХ разделение органических веществ осуществляется совсем на иных принципах, чем при других хроматографических методах. Принцип метода заключается в том, что во время прохождения раствора исследуемого вещества через колонку, заполненную частицами твердого геля, происходит разделение молекул этого вещества за счет различной способности их проникать в поры геля. Поры в частице геля имеют различный размер. Молекулы образца также различаются по величине. Некоторые молекулы слшиком велики, чтобы войти даже в самые крупные поры, и исключаются из частицы геля. Поэтому они двигаются через слой геля между его частицами и первыми выходят из колонки. Другие молекулы так малы, что входят во все поры геля, полностью проникая в частицу. Эти соединения задерживаются в наибольшей степени и появляются на хроматограмме последними. Молекулы промежуточных размеров могут входить только в некоторые поры и двигаются по колонке со средней скоростью. При разделении смеси с ширркой областью молекулярных масс используют набор гелей с разными пределами исключения. Это позволяет расширить область фракционирования колонки. Использование различных гелей дает эффект только при последовательном соединении колонок с разными гелями. При разделении соединений, мало различающихся по размеру, используют гели с узкой областью [c.36]

Бумажную хроматографию применяют в основном для определения гидрофильных веществ. При проведении разделения на импрегнированной бумаге метод можно использовать для разделения липофильных веществ. При получении неудовлетворительных результатов разделения методом фракционного распределения даже с большим числом ступеней разделения применяют сочетание метода бумажной хроматографии с методами, основанными на других принципах разделения (адсорбции, ионного обмена). Область применения бумажной хроматографии можно расширить, применяя бумагу специальных сортов или импрегнируя обычную бумагу. [c.359]

Количественное определение нуклеиновых кислот. Принцип метода основан на выделении рибонуклеиновых (РНК) и дезоксирибонуклеиновых (ДНК) кислот и на дальнейшем их анализе прямыми и косвенными методами. К прямым методам относятся такие, которые включают гидролиз нуклеиновых кислот с последующим выделением из гидролизатов пуринов и пиримидинов и определение их хроматографическим методом. Хроматография позволяет производить точный микроанализ нуклеиновых кислот. Исследование пуринов и пиримидинов проводят в ультрафиолетовом свете, наблюдая флуоресценцию пятен на хроматограммах или в экстрактах, полученных из соответствующих участков хроматограмм. Кроме хроматографического метода, применяют также способ электрофореза на бумаге. [c.60]

Принцип метода. Сущность колоночного варианта жидкостной адсорбционной хроматографии состоит в разделении, основанном на различной адсорбции компонентов смеси из раствора поверхностью твердого адсорбента при прохождении потока подвижной фазы через колонку, наполненную адсорбентом. [c.53]

Принцип метода. В обычном варианте тонкослойная хроматография (ТСХ) представляет собой твердо-жидкостную адсорбционную хроматографию, в которой вместо заполненной адсорбентом колонки применяются пластинки с поверхностями, покрытыми тонким слоем адсорбента. [c.126]

Ю. Ю. Лурье и Н. А. Филиппова разработали метод определения серы в металлическом никеле при помощи ионообменной хроматографии. Принцип метода состоит в пропускании раствора, содержащего сульфат-ионы, через катионит и определении содержания серы в фильтрате весовым методом. [c.213]

Методика определения диэтиленгликоля в водах промысловых объектов газовой промышленности основана на использовании метода газовой хроматографии. Принцип метода заключается в выделении ДЭГ а на хроматографической колонке в изотермическом режиме хроматографирования пробы воды с последующим детектированием ДЭГ а на пламенно-ионизационном детекторе. Методика позволяет проводить оперативный количественный контроль диэтиленгликоля в сточных водах промысловых объектов газовой отрасли в диапазоне концентраций от 1,0 до 100 мг/л. [c.2]

Кроме адсорбционного и распределительного способов, рассмотренных выше, принцип метода высокого давления применим и к ионообменной хроматографии при условии, что имеются подходящие смолы в виде достаточно мелких, устойчивых к давлению частиц. [c.103]

Многие методы хроматографии, описанные в предыдущих разделах, применяют в сочетании с методом ионного обмена. В случае одних методов это обусловлено принципом осуществления метода (колоночная хроматография), в случае других — общими принципами методов хроматографии и реакций ионного обмена (разд. 7.3.1.1, 7.3.1.2) [25, 26]. Для ионообменных процессов, осуществляемых в колонках, часто применяют название ионообменная хроматография. Как будет показано ниже, термин хроматография (разд. 7.3.1) применим не ко всем методам ионного обмена. Применение [c.379]

Этот принцип разделения компонентов смесей молекулярно-дисперсных веществ и растворов электролитов лежит в основе хроматографии по методу фронтального анализа. [c.23]

Принцип метода. Приведенные в предыдущем разделе основные закономерности газовой адсорбционной хроматографии справедливы и для газожидкостной хроматографии, с той лишь разницей, что в последнем случае нужно рассматривать не процесс адсорбции и десорбции газа или пара на поверхности твердого вещества-адсорбента, а процесс растворения и выделения газа или пара в жидкой пленке, удерживаемой твердым инертным носителем. [c.101]

Принцип метода. Метод разделения веществ, основанный на различии в их коэффициентах распределения между двумя несмешивающимися жидкими фазами, одна из которых нанесена на бумагу, называется распределительной бумажной хроматографией. [c.113]

Большей точности анализа можно добиться при использовании метода вытеснительной хроматографии [431. Принцип метода заключается в следующем после создания определенной концентрации адсорбированных веществ в колонку подают газ-носитель, насыщенный парами летучей жид- [c.512]

Наиболее впечатляющие практические результаты получены пока в лигандообменной хроматографии аминокислот. Между тем ясно, что принцип метода — общий, применим для соединений различных классов, и следует ожидать, что число задач, решенных с его помощью, будет постепенно возрастать. [c.176]

Газовая хроматография — универсальный метод разделения смесей разнообразных веществ, испаряющихся без разложения. При этом компоненты разделяемой смеси перемещаются по хроматографической колонке с потоком газа-носителя. По мере движения разделяемая смесь многократно распределяется между газом-носителем (подвижной фазой) и нелетучей неподвижной жидкой фазой, нанесенной на инертный материал (твердый носитель), которым заполнена колонка. Принцип разделения — неодинаковое сродство веществ к летучей подвижной фазе и стационарной фазе в колонке. Компоненты смеси селективно задерживаются последней, поскольку растворимость их в этой фазе различна, и таким образом разделяются (компонентам с большей растворимостью требуется большее время для выхода из жидкой фазы, чем компонентам с меньшей растворимостью). Затем вещества выходят из колонки и регистрируются детектором. Сигнал детектора записывается в виде хроматограммы автоматическим потенциометром (самописцем) или же регистрируется компьютером. [c.3]

Основываясь на первом принципе, методы хроматографии можно разделить на четыре группы (табл. 1). [c.7]

Распределительная хроматография. Этот метод разделения основан на распределении вещества между более полярной стационарной фазой (обычно водой), находящейся на поверхности адсорбента, и менее полярной (органической) подвижной фазой, содержащей смесь разделяемых веществ. Основные принципы разделения и выбора системы растворителей такие же, как в методе противоточного распределения (см. стр. 24). Обычные адсорбенты — силикагель, кизельгур, крахмал и целлюлоза. [c.19]

Принцип метода. Ионообменная хроматография проводится в летучих буферных растворах, что позволяет избежать специальных стадий обессоливания фракций. [c.199]

Газовая хроматография применяется для разделения смесей газообразных или легкоиспаряемых жидких и твердых веществ. Принцип метода подобен жидкостной хроматографии. Разделяемую смесь разбавляют газом-носителем (Н2, N2, Не) и вводят в адсорбционные колонны. Газ-носитель является одновременно растворителем и элюентом. В качестве сорбентов используют тонкие порошки силикатных материалов, которые могут быть чистыми (газо-адсорбцион-ная хроматография) или покрытыми пленкой нелетучей жидкости (газо-жидкостная хроматография). Используют также капилляры, покрытые внутри пленкой нелетучей жидкости (капиллярная хроматография). Газ-носитель постепенно десорбирует компоненты [c.18]

Оформление работы. Принцип метода бумажной хроматографии коротко описывают в протоколе. Полученную хроматограмму вклеивают в тетрадь после расчета Rf аминокислот смеси и свидетелей на хроматограмму наносят названия аминокислот в смеси. [c.18]

В последнее время появилась возможность определять аминокислотный состав белков с помощью автоматических аминокислотных анализаторов. Когда в 1948 г. Мур и Стейн [551 в дополнение к классическим методам органической химии, а также манометрическому и бактериологическому анализу ввели ионообменную хроматографию, наступил поворотный момент в развитии химии аминокислот. В основу работы созданных сотрудниками Рокфеллеровского института современных автоматических аминокислотных анализаторов была положена ионообменная хроматография. Принцип работы этих приборов заключается в следующем. Исследуемый белок гидролизуют, затем гидролизат подвергают хроматографии на смоле типа дауэкс 50 х8 в Na-форме. Элюирование производят с помощью непрерывной подачи буферного раствора. Выходящий из колонки элюат попадает в пластмассовую ячейку особой формы, где он смешивается с раствором нингидрина. Подачу нингидрина осуществляет специальный насос, работающий синхронно с насосом, подающим буферный раствор на колонку. Затем смесь элюата с нингидрином проходит через тефлоновый капилляр, который погружен в кипящую баню. В этих условиях в растворах происходит нингидриновое окрашивание, интенсивность которого измеряется в проточной кювете спектрофотометрически. Поглощение света регистрируется самописцем. Применение сферических смол [80] позволило сократить время исследования одного образца примерно в четыре раза, а использование особых ячеек сделало вполне допустимыми для анализа очень малые количества исследуемого вещества — порядка 0,01—0,05 мкмоля [38]. Введение одноколоночной процедуры значительно упрощает метод [9, 29, 43, 60]. С помощью этой методики в одной и той же пробе можно определить кислые, нейтральные и основные аминокислоты, что не только экономит исследуемый материал, но и повышает точность и сокращает время исследования. Работая на стандартном аминокислотном анализаторе и пользуясь некоторыми модификациями известных методов, можно полностью закончить анализ одного вещества в течение 3 ч [91. [c.32]

Принцип метода. Метод основан на использовании газожидко стной хроматографии на приборе с пламенно-ионизационным детектором. Отбор проб без концентрирования. [c.50]

В предлагаемой работе дано кратное обобщение основных принципов метода распределительной хроматографии на бумаге. Рассмотрены особенности и возможности применения метода для относительного концентрирования и последующего аналитического определения элементов. [c.358]

В принципе для определения констант устойчивости может быть использовано измерение любого свойства, которое изменяется ири комплексообразовании. Однако важно, чтобы данное свойство количественно изменялось в зависимости от природы присутствующих в растворе соединений. Подобная количественная связь находит свое отражение в так называемом факторе интенсивности, примером которого могут быть молярный коэффициент погашения (спектрофотометрия в УФ- и видимой областях) и коэффициент распределения (газовая хроматография). Экспериментальные методы определения констант устойчивости разделяют на две большие группы. [c.106]

Метод газовой хроматографии как метод исследования кинетики химических реакций по сравнению с другими методами имеет то бесспорное преимущество, что в принципе скорость реакции может вычисляться по изменениям концентрации (с изменением температуры) любого из компонентов, что в свою очередь дает возможность произвести несколько независимых друг от друга проверочных расчетов определяемой величины по данным одного опыта. Константы скорости многокомпонентных жидкофазных систем измеряются с высокой воспроизводимостью — расхождение результатов не превышает 3% [18, 19]. [c.395]

Все без исключения промышленные хроматографы основаны иа способе проявительной газовой хроматографии, при которой анализируемая проба вводится в слой сорбента в дискретные 1м0,менты времени, транспортируется вдоль слоя потоком чистого и инертного в данной системе газа. Разделенные компоненты пробы вы.мываются из слоя сорбента и детектируются тем или инылг газоаналпзаторо.м. Другие варианты газохроматографического метода — фронтальный анализ, вакаитная хроматография, теплодинамический метод и т. д.— ие получили распространения в производственной хроматографии из-за определенных трудностей их реализации в промышленных вариантах приборов. В связи с этим любой промышленный хроматограф включает в себя следующие функциональные узлы (рнс. 144) устройства регулирования и стабилизации потока газа-иосителя, устройство ввода в поток газа-носнтеля пробы анализируемой смеси, хро.матографическую колонку с соответствующими электронными блоками поддержания ее температурного режима, детектор, фиксирующий результаты разделения компонентов смеси и, наконец, командный прибор для автоматического управления работой хроматографа. Различия. между отдельными типами приборов могут состоять в их назначении, принципе действия, в схемных и конструктивных решениях, а следовательно, и в параметрах как отдельных функциональных узлов, так и приборов в целом. [c.317]

Дальнейшим развитием метода Крейга является метод Мартина и Синджа, представляющий собой очень эффективный метод равномерной экстракции. Его осуществляют в вертикальной стеклянной трубке со стационарной фазой и носителем из инертного материала, пропуская через трубку сверху вниз вначале анализируемый раствор, а затем чистую подвижную фазу. Пленка подвижной фазы, образующаяся в этом случае на носителе, действует как элемент многоступенчатой распределительной батареи. Выходящую подвижную фазу собирают равными порциями и в каждой части определяют содержание разделяемых веществ. При построении зависимости содержания веществ от номера фракции получают характеристическую кривую распределения. Авторы назвали метод распределительной хроматографией. Принципы распределительной хроматографии являются основой хроматографических методов. [c.232]

Распределительная круговая хроматография аминокислот. При круговой хроматографий вместо пятен амииокис.г]от на бумаге получают концентрически расположенные кольца. В принципе метод остается таким же, как и в предыдугцей работе. Хроматографирование проводят в эксикаторах небольшого размера. [c.31]

Анализ остаточных количеств препарата и его метаболита проводят методом тонкослойной хроматографии. Принцип метода, разработанный М. А. Клисенко, Л. В. Сорокиной и А. И. Товстенко (ВНИИГИНТОКС), основан на экстракции продукта бензолом, очистке вымораживанием и определении методом тонкослойной хроматографии с использованием силикагеля КСК. Пятна эупарена на хроматограмме обнаруживают переводом фунгицида в бензол-диа-зониевую соль, проявляющуюся а-нафтиламином. [c.189]

Ионообменная хроматография. Этот вид хроматографии можно считать вариантом адсорбционной хроматографии. Принцип метода состоит в том, что ионо-обменник обратимо адсорбирует заряженные молекулы. Существует два типа ионообменников катиониты (несут отрицательные заряды, например 80 карбоксильные группы) и аниониты (заряд положительный, например, четвертичная аминогруппа, алифатические или ароматические аминогруппы). Матрицы бывают декстрановые, целлюлозные, акрильные, фенольные, используются смолы дауэкс и др. Мембранные белки (как и полисахариды) лучше разделяются на ионообменниках на основе целлюлозы, декст-рана и полиакриламида. [c.108]

Для получения чистых веществ методом препаративной газовой хроматографии в лабораторных условиях отечественной промышленностью, а также зарубежными фирмами выпускаются препаративные газовые хроматографы, принцип работы которых основан на применении проявительного метода. Выпускаются также специальные приставки к аналитическим хроматографам, позволяющие путем замены колонок и подключением устройства для сбора продуктов проводить препаративные выделения веществ в лабораторных условиях. Описания препаративных хроматографов можно найти в [87]. [c.159]

В последнее время предложен метод вакантохроматографии. Принцип метода состоит в том, что в поток непрерывно пропускаемой через колонку газовой смеси дозируется небольшой объем инертного газа в виде кратковременного импульса. Вначале по всей длине колонки устанавливается сорбционное равновесие между компонентами пропускаемой пробы сорбентом. При введении инертного газа равновесие нарушается, и эти нарушения (вакансии) движутся по колонке аналогично тому, как движутся зоны повышенной концентрации при проявительной хроматографии. Детектор регистрирует концентрационные вакансии так же, как в проявйтельном методе он отмечает концентрационные пики. [c.149]

Одной из первых работ в области качественного определения неорганических веществ посредством осадочной хроматографии на бумаге явилась работа Д. А. Вяхирева и Ф. Н. Кулаева [7Г], в которой описаны принципы метода и его возможности. Экспериментальные данные по размещению осадков на бумаге согласуются с данными, полученными в соответствующих колонках. [c.208]

Принцип метода. Распределительная колоночная хроматография, называемая также жидкожидкостной хроматографией (ЖЖХ), получила признание как эффективный метод разделения с 1941 г., когда она была предложена А. Мартином и Р. Синджем. Однако для аналитических целей этот метод применяется реже, чем методы газовой, тонкослойной или бумажной хроматографии. После усовершенствования изготовления колонок и разработки более современной хроматографической аппаратуры возродился интерес к этому методу. [c.62]

Перенеся используемый в газовой хроматографии принцип разделения энантиомеров на хиральных амидных неподвижных фазах, а именно принцип, многоточечного образования водородных связей, на жидкостную хроматографию Хара и соавт. [165—167] синтезировали серию хиральных селекторов для разделения энантиомеров. Они предположили, что образование водородных связей с жидкой неподвижной фазой в хиральной ГХ по методу Чарл а и др. [168] (см. разд. 6.1.1) можно реализовать и в ЖХ, если применить неполярную подвижную фазу. Предложенный принцип разделения через образование диастереомерных комплексов сорбат—лиганд, включающих две водородные связи, показан на рис. 7.16. [c.153]

Принцип метода. Разделение компонентов в газоадсорбционной хроматографии происходит в результате процессов адсорбции — десорбции на поверхности твердого носителя-адсорбента при прохождении газовой подвижной фазы. [c.83]

В настоящее время все большее распространение Находят приборы, совмещающие процессы однократного испарёния с хроматографическим определением состава пара. Этот способ очень удобен, так как для анализа требуется чрезвычайно малое количество вещества. Принцип метода заключается в том, что жидкость определенного состава заливают в ампулу, снабженную приспособлением для отбора проб и подсоединекную к манометру. После загрузки жидкости определенного состава иа системы удаляют воздух, после чего ампулу выдерживают а термостате при определенной температуре. Установление постоянного давления служит критерием достижения равновесия. Затем с помощью специального приспособления пробы газа направляют в хроматограф для анализа. [c.335]

В настоящее время наиболее распространенные методы масс-спектрометрического анализа вещества, элюируемого из жидкостного хроматографа, основаны на применении электро- и термораспыления. Принципы метода ионизации электрораспы- [c.45]

Поскольку обработка и интерпретация далных является столь жизненно необходимыми для всех видов химических экспериментов, в главе 2 детально описывается, как выразить точность и правильность аналитических результатов и как оценить погрешности в измерениях с цриложением строгих математических и статистических концепций к тому же этот материал обеспечивает прочные основы для обсуждения хроматографических разделений в более поздних главах. В главе 3 обсуждаются вопросы по Ведения раствор.енных веществ в водной среде и некоторые принципы химического равновесия, на которые опирается материал последующих разделов. Главы 4 и 5 охватывают кислотно-основные реакции в водных и неводных системах такой подход необходим для количественной оценки р астворимости осадков в различных растворителях и различных видов химических взаимодействий, возникающих в аналитических методах, которые основаны на комплексообразовании и экстракции. В главе 6 рассматривается теория и аналитическое применение реакций комплексообразования и основные положения использования этих общих представлений в таких аналитических методах, как прямая потенциометрия, кулонометрическое титрование, полярография и хроматография. Аналитические методы, основанные на образовании осадков, обсуждаются в главах 7 и 8. [c.19]

Идея хроматографического метода анализа — использование для разделения веществ давно известного явления избирательной сорбции — принадлежит русскому ботанику М. С. Цвету. В 1903 г. он сформулировал принцип метода и показал возможность его практического осуществления в жидкостно-адсорбционном варианте для разделения хлорофилловых пигментов листьев на составляющие с различной окраской. Отсюда происходит название метода — хроматография, т. е. цветопись. Однако сам Цвет высказал предположение, что метод применим не только к окрашенным, но и к бесцветным веществам. [c.117]

Принцип метода. Метод основан на переведении стирола в нелетучее ртутьоргаиическое производное при взаимодействии стирола с ацетатом ртути (И) и выделении полученного соединения на бумаге с применением способа нисходящей хроматографии. Производное стирола обнаруживается на хроматограмме в виде фиолетовых пятен . [c.53]

Техника изучения разделенных хроматографических зон нри помощи групповых химических реагентов была значительно усовершенствована Б. Казу и Л. Кавалот-ти [6], которые предложили простой автоматический прибор для функционального группового анализа хроматографических зон в газовой хроматографии. Принцип предложенного метода заключается в том, что сло11 сорбента, смоченный жидким реагентом на определенные функциональные группы, непрерывно перемещается со скоростью движения диаграммной ленты относительно выхода газа-носителя. Сравнивая хроматограмму и результаты химического исследования, можно легко определить тип соединения, соответствующего данному хроматографическому пику. В качестве примера на рис. 43 показана хроматограмма разделения смеси вместе с результатами исследования полосы сорбента со специфическим реагентом на спирты. Методика упрощает проведение качественного анализа в хроматографических зонах, выделенных после хроматографа. [c.170]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология