Пятна на хроматограмме форма

Щелочные металлы обнаруживают, например, с помощью виолуровой кислоты или нитрата серебра, если они были разделены в форме хлоридов нитратов. Виолуровую кислоту используют в виде 0,1%-ного раствора после опрыскивания хроматограмму нагревают при 333 К. При этом пятна натрия и калия окрашиваются в фиолетовый цвет, пятна лития—в красно-фиолетовый. Этот реагент окрашивает также пятна других металлов. Обнаружение с помощью нитрата серебра носит косвенный характер, образующийся хлорид серебра темнеет на свету. [c.241]

При испытаниях на чистоту примеси и основное вещество в условиях хроматографирования должны иметь разные значения R . При этом условии можно судить о степени чистоты анализируемого вещества по величине и интенсивности окраски обнаруживаемых на хроматограмме пятен примесей. Содержание примесей может быть определено полуколичествен-но. Для этого на одном листе бумаги одновременно получают хроматограмму определенного количества анализируемого вещества и несколько хроматограмм образца определяемой примеси (свидетеля), взятого в различных, точно отмеренных количествах. Содержание примеси в анализируемом образце оценивают, сравнивая ее пятно на хроматограмме по совокупности величины и интенсивности окраски с пятнами свидетеля. При достаточном сходстве пятен примеси по форме и окраске с пятнами основного вещества, взятого в том же количестве, допускается использование соответствующих количеств основного вещества в качестве свидетелей при хроматографировании. Количественное определение веществ после хромато- [c.99]

Существенный недостаток количественных методов анализа тонкослойных хроматограмм, основанных на измерении пропускания света, был связан с нелинейной зависимостью сигнала оптического детектора от количества вещества в хроматографическом пятне. Эта нелинейность обусловлена специфическим законом прохождения света в рассеивающей среде, описываемым уравнением Кубелки — Мунка, и неоднородностью пластины по толщине слоя адсорбента. Последнюю можно учесть, измеряя оптические свойства подложки непосредственно в хроматографическом пятне. Использование двухволнового метода спектрофотометрического детектирования, когда излучение одной волны Л поглощается и веществом, и адсорбентом, а другой волны Лг — только адсорбентом, позволяет выделить сигнал, связанный с поглощением излучения только анализируемым веществом. Дальнейшая обработка сигнала детектора в соответствии с уравнением Кубелки — Мунка позволяет линеаризовать зависимость оптического сигнала от количества вещества в ТСХ. Поглощение света адсорбентом может быть учтено также при спектрофотометрическом сканировании пластины на просвет и отражение. Эти принципы реализованы в лучших современных зарубежных денситометрах — флуориметрах. Менее точным, но более простым решением является линеаризация зависимости сигнал — вещество с помощью двойного логарифмирования (с использованием ЭВМ). В результате этих усовершенствований воспроизводимость результатов в современной количественной ВЭТСХ приближается к 1%. Использование двухкоординатного сканирования в случае эллипсовидных пятен (двумерное размывание зон в ТСХ) и многошагового сканирования пятен неправильной формы (дву- [c.370]

Выбор системы растворителей и некоторые осложнения при хроматографировании кислот были рассмотрены в введении. В отличие от низших жирных кислот для этой группы в основном применимы кислые системы растворителей, содержащие, в частности, муравьиную, уксусную и пропионовую кислоты. Последние после разделения анализируемых кислот должны быть удалены с бумаги. Вас применил сернистую кислоту, отличающуюся от вышеназванных кислот более высокой константой диссоциации и быстрее улетучивающуюся с бумаги. В этих системах органические кислоты, за исключением щавелевой кислоты, образуют на хроматограмме пятна круглой формы. Щавелевая кислота, как более сильная по сравнению с кислотами растворителя, дает пятна продолговатой формы, что, однако, не влияет на разделение, так как из этой группы кислот щавелевая имеет наинизшую величину Е/. Определенные трудности, связанные с удалением с хроматограмм кислот, содержащихся в растворителях, принудили Шефтель и сотрудников [1—3] изыскать системы растворителей, содержащие легко летучие компоненты, ускоряющие улетучивание с бумаги ранее названных кислот. К таким компонентам относятся метилбензоат, эвкалиптол и др. Эти вещества испаряются с хроматограммы вместе с летучими кислотами при высушивании на воздухе в течение нескольких часов. В таких системах подлежащие разделению кислоты слабо растворимы для повышения их растворимости добавляют низшие спирты. [c.244]

После завершения хроматографич. процесса устанавливают положение зои на хроматограмме разл. способом, напр, опрыскиванием окрашивающими реагентами или облучением УФ светом. Идентификацию компонентов смеси проводят по окраске зон или по величине Rj, к-рая равна отношению пути, пройденного компонентом, к пути, пройденному элюентом. Кол-во компонента в зоне определяют по высоте или объему зоны в колоночной ОХ, по площади пятна или интенсивности его окрашивания - в плоскостной. Для количеств, анализа применяют также разновидность плоскостной ОХ-т. наз. пиковую ОХ, в к-рой хроматографич. зона проявляется на плоскости в форме пика тогда кол-во в-ва в зоне пропорционально высоте или площади этого пика. [c.413]

При вторичном проявлении растворитель сначала увлекает вещества с низкими значениями Rf, тогда как к веществам, переместившимся во время первого проявления на большее расстояние, фронт растворителя подойдет несколько позднее. Если при каждом проявлении не давать растворителю дойти до нижнего края бумаги, то все компоненты разделяемой смеси останутся на хроматограмме. После многократного проявления обычно достигают очень эффективного разделения (см. рис. 413). Для описанной методики характерно еще одно явление, улучшающее разделение. Так как растворитель при каждом последующем проявлении достигает верхней границы пятна раньше, чем нижней, пятно вещества при каждом проявлении сужается. Этот эффект особенно важен в тех случаях, когда после простого проявления пятна имеют вытянутую и нечеткую форму. [c.456]

На рис 36, представлены различные виды изотерм распределения для хроматографии на бумаге. С-Прямолинейной изотерме распределения соответствует круглая форма пятна на хроматограмме, а криволинейным-каплеобразная форма. [c.68]

Обе хроматограммы характеризуются постепенным увеличением размеров зон по мере увеличения длины пробега по пластине. При этом на пластине с более крупным силикагелем пятна, находящиеся в средней части пластины, имеют вытянутую эллиптическую форму, которая постепенно переходит в круглую по мере приближения к верхнему краю пластины. На пластине с мелким силикагелем пятна на всем протяжении имеют круглую форму. Эти хроматограммы наглядно демонстрируют двойственный характер механизма размывания зон как за счет факторов, не зависящих от размера частиц сорбента и действующих в продольном и поперечном направлениях, так и за счет факторов, действующих только вдоль направления движения элюента и зависящих от размера частиц, причем сила действия их увеличивается от нижнего и верхнего краев пластины к середине. [c.339]

Слой в форме буквы 2 изображен на рис. 42. С исходной хроматограммы удаляют заштрихованную часть слоя, остается слой сорбента упомянутой выше формы. Длина пробега растворителя на такой пластинке увеличивается. В суженных местах перегиба слоя движение пятен разделенных веществ ускоряется, тем самым увеличивается расстояние между пятнами [49]. [c.114]

Предположим, что для случая тонкослойных и бумажных хроматограмм при условии точечного нанесения пробы и эллиптической формы пятна [80] [c.125]

Для количественного определения после разделения применяют различные приемы. Иногда после проявления разрезают полоску на отдельные кусочки соответственно пятнами компонентов, затем переводят компоненты в раствор и определяют фотометрическим или другим методом. Существуют условия для получения пятен строго правильной формы в этом случае количественное определение возможно непосредственно на хроматограмме. Для этого хроматограмму проявляют достаточным избытком реактива так, чтобы определяемый компонент полностью перевести в окрашенное соединение. Далее измеряют диаметр пятна, а также коэффициент отражения света определенной длины волны. Последнее выполняется при помощи различных приборов, например фотометра Пульфриха. [c.57]

В последнее время применяют метод, основанный на измерении коэффициента отражения пятен хроматограммы. Однако этот вариант трудно осуществить в условиях учебной лаборатории, так как необходимо получить пятна очень правильной формы, что требует большого опыта. Поэтому можно пользоваться вариантом, не требующим предварительной подготовки. Для этого вырезают окрашенные пятна, переносят кусочки бумаги в пробирки и заливают 50%-ным спиртом. При слабом нагревании окрашенное соединение переходит в раствор, который можно фотометрировать, сравнивая со стандартами известного содержания. [c.67]

Ход определения. Сначала находят, как и при анализе методом А , значения отдельных фенолов. Для этого на стартовую линию увлажненной бумаги наносят калиброванной пипеткой капли растворов отдельных фенолов. Бумагу свертывают в цилиндр и закрепляют в этой форме, соединяя язычки вверху и внизу обычными канцелярскими скрепками. Затем цилиндр помещают в камеру и проводят хроматографическое разделение при 5—7 °С, для чего камеру помещают % холодильник. Через 45—60 мин растворитель достигает верхней линии. Тогда хроматограмму извлекают из сосуда, быстро подсушивают на воздухе и сразу же опрыскивают раствором диазотированного п-нитроанилина, пользуясь распылителем, показанным на рис. 21. Появляются окрашенные пятна. Разделив расстояния от стартовой линии до пятен на путь, пройденный растворителем, получают значения отдельных фенолов. [c.236]

На подготовленный лист хроматографической бумаги марки М наносили этанольный раствор суммы алкалоидов. Хроматографирование проводили восходящим способом в системе растворителей хлороформ — изопропиловый спирт (20 1), насыщенной форма-мидом. Пятно серпентина на хроматограмме было обнаружено в У(] -свете по интенсивной сине-фиолетовой флуоресценции. [c.239]

Если процессе имеет место только раопределение, то на хроматограмме появляются небольшие пятна, центр симметрии которых совпадает с максимумом концентрации. Форму и размеры пятна можно охарактеризовать при помощи значений Rf для фронтальной (Rfl) и тыловой ( /г) границ пятна. Если невелико и —кп=Рп— можно считать, что разделение происходит за счет распределения однако часто Rfl—Rf меньше, чем Rf—Rf2, что свидетельствует о том, что пятно имеет удлиненную форму (или хвост ), а это является признаком того, что наряду с распределением некоторый вклад вносит и адсорбция. [c.236]

В поверхностном слое концентрация вещества в центральной части пятна изменяется в направлении развития хроматограммы, причем распределение равномерно падает по направлению к краю пятна. Однако большая концентрация бывает со стороны фронта пятна, как показывает форма кривых, полученных при сканировании пятен в отраженном свете как вдоль направления развития хроматограммы, так и перпендикулярно ему (рис. 10). [c.97]

В нашей работе [12] было показано рост-стимулирующее действие феруловой (4-окси-З-метоксикоричной) кислоты и отмечено, что применявшийся препарат является т/ а с-формой со следами иримеси г/мс-формы. В настоящей работе мы попытались сравнить биологическую активность транс- и г мс-изомеров феруловой кислоты. Для этого необходимо было иметь оба изомера. Однако все имеющиеся препараты являются г аис-формами. Обнаруженная нами ранее [12] примесь г мс-формы в препарате феруловой кислоты оказалась следствием ее изомеризации на свету. При работе в условиях, исключающих действие света сохранялась исходная гракс-форма. Такое положение наблюдается и в отношении других оксикоричных кислот — кофейной и д-кумаровой. Как видно на схеме хроматограммы (рис, 1), в темноте каждая оксикоричная кислота дает при хроматографировании по одному пятну, а на рас- [c.248]

Для количественного определения компонентов полифосфорной кислоты хроматограммы разрезают в горизонтальном направлении и собирают из нескольких хроматограмм пятна, соответствующие одной форме фосфата. Такие полоски режут на мелкие кусочки и помещают в конические колбы емкостью по 25 мл. Для получения необходимой холостой [c.211]

Двумерная хромато1 рафия с применением в обоих направлениях одной и той же системы pa TBopirre.ieu. Способ РРР (разделение, реакция, разделение) служит для определения однородности веществ [10]. В некоторых случаях на хроматограмме появляются два пятна и неясно, является ли второе пятно другой формой того же вещества или оно соответствует продукту превращения этого веш,ества во время разделения на пластинке с сорбентом (напрпмер, окисления, изомеризации и т. д.). Если [c.42]

Под действием кислого растворителя самое верхнее положение на хроматограмме занимает пятно, соответствующее аниону Р0 , ниже располагается пятно иона Р2О7 , еще ниже — пятно иона Р3О10 II т, д. Пятно орто-формы имеет характерный желтый цвет. [c.126]

Проявление проводят в течение 35—45 мин, после чего хроматограмму высушивают на воздухе в течение 10—15 мин и линейкой измеряют высоты пиков. Из результатов параллельных опытов определяют средние высоты пиков, по которым строят градуировочные графики. Высоту зоны иодид-ионов измеряют от центра нанесения пятна до верхнего края желтой зоны. Окраска AgBr светло-сиреневого цвета, ее интенсивность несколько увеличивается, если хроматограмму в течение нескольких минут подержать на солнечном свету. Высоту зоны бромид-ионов измеряют от конца зоны иодид-ионов (желтой) до конца зоны бромид-ионов (сиреневой). По градуировочным графикам и средним значениям высот пиков исследуемого раствора определяют ко1щентрацию бромид- и иодид-ионов. Полученные данные представляют в виде таблицы по форме, приведенной в работе 17. [c.348]

В работе Халленгера [9] описано получение /-2-амино-4-(ме-тилтио-С )-масляной кислоты по этому методу с изотопным выходом 48%. При проявлении бумажной хроматограммы 80%-ным фенолом или смесью бутиловый спирт — уксусная кислота — вода получаются два пятна, окрашиваемых нингидрином. Они соответствуют метионину и его сульфоокиси, которая получается в результате реакции окисления в процессе хроматографирования. Как d-, так и /-формы получаются из соответствующих оптически активных исходных веществ в 1 % -ном водном растворе [а]о +7,75° и —7,6°. Полученные вещества анализировались в виде пикратов. [c.211]

Использование различных видов хроматографии (ВЭЖХ, ГЖХ, тех) для разделения и идентификации компонентов лекарственной формы. Например, в ТСХ-анализе применяют пластинки Силуфол УФ-254 . На них наносят раствор или хлороформную вытяжку из лекарственной формы и раствор стандартного образца вещества-свидетеля. После хроматографирования в предварительно подобранных условиях пятна на хроматограмме проявляют с помощью цветных реакций или УФ-света. Такие методики применимы в анализе мазей и аэрозолей, содержащих [c.148]

После того как растворитель поднимается по слою сорбент на 10 см, пластинку вынимают из камеры и оставляют на несколько минут на воздухе для испарения растворителя, зате>1 помещают горизонтально в камеру для опрыскивания и хроматограмму опрыскивают из пульверизатора одним из проявляющих реактивов. При этом необходимо следить за тем, чтобы опрыскивание проводилось достаточно мелкими каплями проявителя, без нарушения слоя сорбента и формы пятна. Смесь проявляющи.х реактивов № 2, 3, 4 готовят перед употреблением. [c.71]

Бумажную хроматограмму можно получить и на листе фильтровальной бумаги, имеющем форму круга, — круговая хроматография. При этом методе вещества, подвергаемые анализу, разделяются не полосами и пятнами, а круговыми зонами. Для этого из диска фильтровальной бумаги по радиусу вырезают фитиль , погружаемый в растворитель после того, как на место сгиба была нанесена капля исследуемого вещества. Бумажный диск помещают между двумя стеклянными половинами чашки Петри, в нижнюю из которых наливают растворитель (рис. 161). Капиллярными силами растворитель поднимается вверх по фитилю . Скорость хроматографирования О- [c.317]

Ход разделения. На стартовую линию пластинки наносят раствор до 450 мкг пробы в метаноле (I) или полосой раствор 120— 150 мг пробы в метаноле объемом до t,5 мл (II). Элюируют по вое-ходяш,ему способу смесью м-гексан—aцeтoн, подсушивают при комнатной температуре и помещают в камеру, насыщенную парами ода. На пластинке с силикагелем в случае (I) проявляются четко отделенные в виде двух круглых пятен спирты и гликоли. Углеводороды располагаются в виде растянутого пятна у линии фронта смеси растворителей. При увеличении пробы форма пятен спиртов и гликолей меняется и на хроматограмме появляются хвосты. При- [c.104]

Из двух последних уравнений наибольший интерес представляет (VIII.25), так как для его использования требуется лишь одна хроматограмма и, следовательно, отсутствуют погрешности, связанные с неточностью нанесения на пластинку рассчитанных количеств полимера и (За и с концентрационными эффектами, искажаюш,ими форму хроматографического пятна. Для использования уравнения (VIII.25) необходимо знание 1)гр и >гр. С этой целью был разработан эквидепситный способ получения изображений хроматографического пятна, основанный на хорошо известном в фотографии явлении Сабатье [86], которое заключается [c.324]

Точность измерения. В случае асимметричных пятен возникают трудности с определением действительного положения центра массы. К счастью, пятна почти всех соединений, кроме очень полярных и хемосорбирующихся веществ, обычно имеют симметричную форму. Расстояние, пройденное пятном и подвижной фазой, обычно измеряют линейкой, калиброванной в миллиметрах. Ошибка каждого изме-рения составляет примерно i 0,5 мм. Поэтому для хроматограмм, [c.156]

Одновременно с исследуемым раствором следует анализировать и соответствующие стандартные растворы. При одномерном развитии хроматограмм и исследуемый, и стандартные растворы могут быть нанесены на один и тот же лист бумаги при двумерном способе развития их следует наносить на разные листы одной партии хроматограмм. Размер наносимых на хроматограмму пятен исследуемого и стандартного растворов должен быть совершенно одинаковым. Это одно из основных условий, обеспечивающих высокую точность определения. В процессе развития хроматограмм зоны становятся все более диффузными, происходит как бы уменьшение концентрации вещества в единице поверхности бумаги, что оказывает сильное влияние на количество производного, образующегося впоследствии при проявлении хроматограмм. Таким образом, стандартизация условий диффузии вещества в зоне имеет первостепенное значение. Для нанесения на бумагу начальных пятен правильной формы весьма перспективен прибор, сконструированный Бриджером Релфом. Трудности могут возникнуть в тех часто встречающихся в практике случаях, когда концентрация анализируемых веществ в исходном растворе мала. Тогда для получения в начальном пятне доста- [c.42]

Не наблюдается [24] прямой зависимости между количеством вещества в пятне и размером пятна, причем вариации обусловлены характеристиками индивидуальных веществ и толщиной слоя. Тем не менее количество наносимого на пластинку вещества является решающим фактором и влияет как на форму, так и на положение пятна после развития хроматограммы. При сверхзагрузке пятна получаются в виде верти- [c.58]

Идентификация а-кетокислот в биологическом материале сопряжена с трудностями вследствие нестабильности многих а-кетокислот. Хорошие результаты дает разделение гидразонов а-кетокислот при помощи хроматографического метода. Однако 2,4-динитрофенилгидразон а-кетокислоты в ряде случаев дает на хроматограммах 2 пятна, которые, по-видимому соответствуют син- и анты-формам гидразона [c.103]

Ошибки обычно вызываются неточностью при нанесении малых объемов растворов. Как правило, встречаются существенные трудности в отделении микроли-тровых объемов от кончика иглы шприца при этом повреждается поверхность адсорбента. Полученные отверстия приводят к искажению формы пятна и последующему образованию серпообразных пятен на развитой хроматограмме. [c.272]

Сущность метода. Для детектирования пятна анилина на хроматограмме испельзуют реакцию д авот рования. При этом пятна анилина скрашиваются в оранжевый цвет. С целью достижения наилучшей формы пятен соответствующим образом должны быть подебраны смесй pa fS6pи %лeй, зернистость адсорбента и [c.297]

Извлечение гербицида из растительных тканей проводят, как описано выше. Водную вытяжку делят пополам. Одна половина служит для определения свободного феназона, другая гидролизуется с 0,2 н. НС1 на кипящей бане в течение 30 мин. После гидролиза вытяжку доводят до pH 7 добавлением насыщенного раствора NaOH, а затем дважды экстрагируют хлороформом. Далее поступают так же, как и при определении свободного феназона. Если в пробе имеется гербицид в связанной N-глюкозндной форме, то в результате гидролиза происходит высвобождение его молекулы в неизмененном виде (совпадают Rf и окраска с пятном феназона-свидетеля). При более глубоком превращении молекулы гербицида с отщеплением МНа-грунпы цветная реакция при диазотировании и сочетании с а-нафтолом на хроматограммах отсутствует. [c.168]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология