Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Культура отдельных клеток

    Онкогенез, вызываемый у животных ДНК-вирусами. Исследования канцерогенеза у животных нередко проводятся на культурах тканей. Если перенести клетки животных, например из органов кур или хомячков, или фибробласты человека в подходящую питательную среду, то на внутренней стенке культурального сосуда они начнут размножаться. Обычно клетки продолжают расти лишь до тех пор, пока не начнут соприкасаться между собой. Из-за контактного торможения образуется только однослойный клеточный газон. Если же эти нормальные клетки инфицировать опухолеродным вирусом, то контактное торможение снимается, клетки продолжают размножаться и начинают надвигаться друг на друга. Многослойный рост наблюдается только у клеток, претерпевших опухолевую трансформацию. Из клеточной массы легко выделить отдельные клетки и таким путем получить чистые линии (клоны) трансформированных клеток. [c.153]


    Изменчивостью микроорганизмов называется такое явление, когда в чистой культуре того или иного микроорганизма появляются отдельные клетки, отличающиеся по величине, форме, способности образовывать антибиотик, по устойчивости к фагу, скорости сбраживания субстрата и другим признакам. [c.15]

    При действии на клеточную культуру эпоксидной композиции через 2 суток после приготовления выявили в основном два вида клеток круглые и веретенообразные. Клетки соединены друг с другом, образуя небольшие группы. Ядра клеток округлой и сигарообразной формы с несколькими ядрышками и мелкой зернистостью. В отдельных клетках наблюдался пикноз ядер. [c.125]

    В экспериментах, измеряющих поглощение ионов целым растением в течение нескольких недель, получается мало информации о механизме прохождения через стенки отдельной клетки. Однако этот метод дает информацию о взаимодействии элементов при продолжительном процессе накопления и о продолжительном влиянии таких факторов, как аэрация питательной культуры, интенсивность света, скорость испарения и т. д., на накопление любого элемента. [c.63]

    Для сельскохозяйственной биотехнологии наибольший интерес представляет регенерация в культуре тканей из отдельной клетки целого растения. Иногда этот путь лежит через образование отдельных органов. [c.96]

    При вегетативном размножении дрожжевых клеток время клеточной генерации (от одного деления до следующ его) несколько различается у клеток разного систематического положения, а также в разных условиях культивирования. В оптимальных условиях, т. е. в условиях полноценной питательной среды, оптимальной температуры и достаточно низкой исходной концентрации клеток, средняя продолжительность первой генерации для большинства видов дрожжей составляет 3—5 час. Процессы, протекающие в течение митотического цикла, естественно, могут быть исследованы только в синхронизированных культурах или же в течение первого митотического цикла, который, как правило, проходит с достаточно высокой степенью синхронизации во всех клетках культуры. Незначительная начальная асинхронность процессов в отдельных клетках при дальнейшем культивировании увеличивается и синхронность нарушается. [c.3]

    Рост микробиальной клетки — это увеличение размера и веса одной особи между двумя делениями. Обычно под ростом подразумевается рост не только отдельной клетки, но и культуры микро-организмов, т. е. общее увеличение числа клеток. [c.65]


    Количество живых клеток в бактериальной культуре можно приблизительно подсчитать, если развести определенным образом культуру и фиксированный объем суспензии высеять в чашку Петри на поверхность твердой питательной среды (с агар-агаром) (рис. 4.1). Если культура разведена достаточно для того, чтобы отдельные клетки оказались на значительном расстоянии друг от друга, то при инкубации чашки Петри в подходящих условиях каждая бактерия начинает быстро делиться и формирует на поверхности агара различимую невооруженным глазом колонию. Количество таких колоний можно подсчитать и, умножив полученную величину на коэффициент разведения, определить число клеток в исходной культуре (см. рис. 4.1). Этот способ дает возможность изучать потомство любой отдельной клетки. Например, можно получить чистую культуру любой мутантной бактерии, присутствовавшей в исходной суспензии клеток путем ее разведения и посева в чашке Петри. Этот простой метод лежит в основе всех исследований по генетике бактерий и использовался во всех обсуждаемых ниже экспериментах. [c.91]

    Механизмы, лежащие в основе клеточного цикла, трудно изучать в сложных и недоступных тканях интактного животного. Легче работать с клеточными культурами. Например, с помощью цейтраферной съемки (разд. 4.1.5) можно наблюдать, как отдельная клетка претерпевает митоз, растет, затем опять входит в стадию митоза это делает воз- [c.396]

Рис. П-10. График, показывающий разброс по длительности клеточного цикла, обычно наблюдаемый при росте однородной популяции клеток в культуре. Эти данные получены путем наблюдения за отдельными клетками в микроскоп и прямого измерения времени между их последовательными митозами. Рис. П-10. График, показывающий разброс по длительности <a href="/info/99875">клеточного цикла</a>, обычно наблюдаемый при росте однородной популяции клеток в культуре. Эти данные <a href="/info/135871">получены путем</a> наблюдения за <a href="/info/870819">отдельными клетками</a> в микроскоп и <a href="/info/21608">прямого измерения</a> <a href="/info/1550790">времени между</a> их последовательными митозами.
    Однако при соблюдении всех этих условий процент разделившихся клеток остается очень низким. Более эффективны методы кормящего слоя (рис. 10) или ткани-няньки . Для создания кормящего слоя берут суспензию клеток того же вида растения, что и одиночная клетка, или близкого вида. Клеточная суспензия должна находиться в ранней экспоненциальной фазе ростового цикла. Каллусная культура, служащая тканью-нянькой , также должна быть в состоянии активного роста. При достижении колонией, возникшей из отдельной клетки, 0,5—1 мм клон может быть перенесен для дальнейшего выращивания на агаризованную питательную среду непосредственно или на фильтр, помещенный на поверхность агара. Использование кормящего слоя , ткани-няньки и минимального объема среды, в которую помещается отдельная клетка, связаны с феноменом, называемым действие фактора кондиционирования . Несмотря на многочисленные попытки определить химическую природу веществ (или вещества), индуцирующих, деление отдельной клетки, и механизм действия фактора кондиционирования, ясности здесь пока нет. Пожалуй, уверенно можно сказать только то, что фактор этот химической, а не физической природы и включает низкомолекулярные вещества (М. К- Павлова, Р. Г. Бутенко, 1965). [c.29]

    Малые гомогенные эксплантаты могут быть представлены как отдельными клетками или протопластами, так и встречающимися в суспензионных культурах небольшими клеточными агрегатами, образованными различным числом клеток. Популяции таких эксплантатов можно использовать в экспериментах по трансформации, а для манипуляций с ними применять методы, разработанные для бактерий. Эта технология часто упоминается как метод совместного культивирования и включает инкубацию агробактерий совместно с многочисленными попу- [c.140]

    Более того, клетки нервного гребня сохраняют способность реагировать на локальное окружение даже на очень поздних стадиях развития. В условиях изоляции в культуре отдельные клетки симпатических ганглиев новорожденного мышонка созревают в нейроны, синтезирующие норадреналин. Если же они растут по соседству с некоторыми типами клеток из других тканей (например, мьппечными), они дифференцируются в нейроны, синтезирующие ацетилхолин. При изменении условий культуры отдельные нейроны могут переключаться с одного фенотипа на другой, и в этом переходе есть фаза, когда клетка синтезирует одновременно оба нейромедиатора. Влияние других клеток на выбор нейронами нейромедиатора может осуществляться и без прямого межклеточного контакта. Синтез ацетилхолина в изолированных клетках ганглиев можно вызвать и просто с помощью феды, в которой росли клетки других тканей. Это позволяет предполагать, что такое переключение происходит под влиянием какого-то растворимого вещества, вьщеляемого в феду тканью-нндуктором. [c.125]


    В работе [367] показано, что отдельные клетки культуры ткани мохшо высушить в эксикаторе с помощью фреона-113 при комнатной температуре. Клетки, укрепленные на покровных стеклах, фиксируются и проходят обезвоживание в 100%-ном этаноле, а затем проходят через постепенные изменения концентрации фреона-113 вплоть до 100%- Образцы, погруженные в фреон-113, переносятся в эксикатор, содержащий Drierite, и откачиваются до давления 3 Па (3 10 Торр). Жидкая фаза фреона-113 испаряется в течение нескольких минут, оставляя клетки, ультраструктура которых сравнима со структурой клеток, высушенных методом сушки в критической точке (рис. 11.22). Дальнейшие исследования должны показать, может ли эта методика быть эффективно использована для кусочков тканей. В работе [368] разработан метод, который позволяет высушивать образцы от этанола в струе сухого аргона без использования сушки в критической точке. Методика дает столь же хорошие результаты, как и другие методы, хотя на чувствительных образцах, таких, как мерцательный эпителий, метод сушки в критической точке дает лучшие результаты. [c.250]

    Для изолирования культур используют также метод Линдне-ра. Согласно этому методу на покровное стекло кончиком пера наносят ряды капель культуры различного разведения и рассматривают в микроскоп каждую каплю. Каплю, где находится только одна клетка, с помощью кусочка стерильной фильтровальной бумаги переносят в стерильную среду. Отдельную клетку из препарата под микроскопом можно изолировать манипулятором. [c.67]

Рис. 143. Использование тка-ни-"няньки" (суспензионная культура) при выращивании колоний из одиночных клеток кукурузы или протопластов (схема) 1 — качалоч-ная колба, 2 — колония, возникшая из отдельной клетки, 3 — фильтровальная бумага, 4 —металлическая сетка, 5 — суспензия клеток "кормящего слоя", 6 — подложка (пенополиуретан), 7 — питательная среда. Рис. 143. Использование тка-ни-"няньки" (<a href="/info/510742">суспензионная культура</a>) при выращивании колоний из одиночных клеток кукурузы или протопластов (схема) 1 — качалоч-ная колба, 2 — колония, возникшая из <a href="/info/870819">отдельной клетки</a>, 3 — <a href="/info/7778">фильтровальная бумага</a>, 4 —<a href="/info/337842">металлическая сетка</a>, 5 — суспензия клеток "кормящего слоя", 6 — подложка (пенополиуретан), 7 — питательная среда.
    Основным препятствием для получения бактериально чистых культур синезеленых водорослей является образование слизи, плотным чехлом окружающей их клетки и защищающей от различных неблагоприятных воздействий. Применение разнообразных методов (стерилизация химическими веществами ультрафиолетовое облучение, частые пересевы, фильтрование через плотные фильтры для отделения слизи и др.) показало, что большииство приемов очистки дает возможность получить бактериально чистые культуры отдельных представителей" гормогониееых синезеленых водорослей. Однако это практически пока не приносит пользы при работе с представителями протококковых, синезеленых водорослей, вызывающих цветение воды. Полная очистка этих видов от бактерий с сохранением жизнеспособности водорослей пока не удается (Gorham, 1964). [c.198]

    При изучении влияния токсиканта на фитопланктон в сосуды (чашки Бовери) с 10—15 мл стерильной морской воды и различным содержанием нефтепродукта вносится примерно одинаковое количество водорослей. Более крупные формы помещаются отдельными клетками или цепочками, мелкие предварительно просчитываются при помощи штемпель-пипетки и в чашки вносится определенный объем просчитанной культуры. После этого сосуды закрывают стеклянными крышками и содержат в условиях равномерного освещения и температуры, равной температуре морской воды в море. Последующие подсчеты проводятся через сутки, а затем на третьи и пятые сутки. Количественный учет водорослей проводится обычным методом прямого счета в 0,1 мл, а иногда во всем объеме исследуемой воды. С одной концентрацией нефтепродуктов ставится параллельно 3—5 чашек (Миронов, Ланская, 1968). При постановке опытов с временным содержанием клеток водорослей в растворе с токсикантом в сосуды вносится некоторое количество клеток испытуемой водоросли. Затем через определенное время (5, 10, 30 мин. и т. д.) часть клеток отбирается тонким капилляром и переносится в стерильную морскую воду. Отбираются только клетки без видимых морфологических изменений. Отмывание клеток проводится пятикратно с последующей сменой свежей стерильной морской воды и капилляра. После этого сосуды, в которые помещаются отмытые от нефтепродуктов водоросли, оставляются в упомянутых выше условиях для дальнейшего наблюдения за их развитием. [c.280]

    Количественные работы и успехи генетических исследований. Методы, с помощью которых можно выращивать в лаборатории микроорганизмы, разработали О. Брефельд, Р. Кох и его школа в прошлом веке. Введение в практику прозрачных питательных сред, уплотненных желатиной или агаром, позволило изолировать отдельные клетки, следить за их ростом в колонии и получать чистые культуры. Разработка стандартных методов стерилизации и приготовления питательных сред привела к быстрому развитию медицинской микробиологии. Хотя еще Кох описал количественные методы, их преимущества при работе с микроорганизмами были поняты только в последние 50 лет. Малые размеры микроорганизмов позволяют получать в одной пробирке или чашке Петри и исследовать популяции, состоящие из 10 -10 отдельных клеток, и благодаря этому выявлять такие редкие события, как мутация или передача приобретенного признака, не нуждаясь в сложных вспомогательных средствах и довольствуясь малым пространством. Огромные успехи биохимических и генетических исследований не в последнюю очередь достигнуты благодаря легкости обращения с бактериями. [c.21]

    Некоторые культуры дрожжей (Кр-9, Л-2, СД-5) рода andida размножаются в виде сильно разросшихся пучков или веточек, состоящих из большого числа клеток. При разбавлении пробы водой они не распадаются на отдельные клетки, поэтому колонии таких дрожжей вырастают на агаре не из одной клетки, как другие, а из нескольких клеток. При определении степени зараженности по относительному количеству колоний в этом случае можно сделать ошибку. Если высев на сусло-агар показал наличие в дрожжерастильных чанах посторонних дрожжей или грибов, то их выделяют из колоний высевая на солодовое сусло или повторяя высев на сусло-агар, и проводят с ними специальные исследования. [c.195]

    В настоящее время одним из лучших в этом отношении объектов являются культуры животных клеток. Эти в некоторой степени искусственные системы представляют собой отдельные клетки, выделенные из тканей какого-либо животного, которые в процессе адаптации к условиям существования in vitro претерпевают дедифференцировку с потерей специфических функций. Вместе с тем такие микрообъекты приобретают способность к стабильному самостоятельному росту, характер которого определен общими законами роста и развития популяции. Существует большое число таких перевиваемых клеточных линий, достаточно полно охарактеризованных и сохраняющих на протяжении многолетних наблюдений свои свойства. Что касается питательных сред, то, являясь в большинстве своем полусинтетическими, они компонуются на основе индивидуальных аминокислот и витаминов, растворяемых в глюкозо-солевом растворе при добавлении некоторого количества сыворотки крови (чаще всего крупного рогатого скота). Прописи используемых в настоящее время питательных сред созданы путем исключения тех компонентов в исходных, достаточно сложных питательных средах, которые не принимают участия в процессе роста популяции. Широко используемая в подобного рода исследованиях так называемая минимальная среда Игла или ее модификация—среда ПС [144] представляет собой минимальный набор компонентов, действительно необходимых для роста и размножения животных клеток. [c.230]

    В этой группе имеются грибы, вызывающие болезни насекомых. Они имеют мицелий, иногда редуцированный или же образующийся только при особых условиях. Сумки различной формы, с неопределенным количеством спор. В семействе собственно дрожжей — Sa haromy eta eae имеются роды, у которых отдельные клетки преобразуются в сумки с 8 или менее аскоспорами. В подсемействе Nematosporoideae имеются виды с нитевидными мицелием и дрожжевыми клетками на поверхности и в глубине культуры на питательной среде. Размножаются мультиполярным почкованием. Сумки образуются в результате изогамной конъюгации или партеногенетически они содержат игловидные или веретеновидные аскоспоры, с подвесками или без них. В данную группу входят два энтомопатогенных вида. [c.338]

    После воздействия на клеточную культуру эпоксидной композиции с декамином через 2 суток после ее приготовления отмечалось увеличение размеров клеток и их ядер, появлялись единичные крупные многоядерные формы. Клетки были различного строения, с вакуолизиро-ванной цитоплазмой, располагались группами. В отдельных клетках отмечался пикноз ядер. [c.126]

    Выросшие культуры сливались в 68-литровые полипропиленовые резервуары-осадители, куда добавлялся сульфат алюминия. После сифонирования отделенный супернатант отбрасывался, а осадок клеток подвергался центрифугированию в литровых полиэтиленовых стаканах при 1350 g в течение 5 мин. Отдельные клетки с минимумом воды переносились в большие кюветы, замораживались и лиофилизировались при 12,5°. Лиофилизированные клетки пропускались через сито (40 меш.), после чего хранились в банках при комнатной температуре. Максимальная активность токсина в течение месяца варьировала, имея ЬОюо в пределах от 80 до 160 мг/кг живого веса. [c.154]

    Подобное явление, в частности, наблюдала О. Т. Болотина при исследовании влияния регенерации на активный ил. Было отмечено увеличение в активном иле числа жизнеспособных бактерий 7оо ]оеа гагп1 ега с 14 570 до регенерации до 22 320 после регенерации. Подобное увеличение может быть объяснено следующими причинами. Ранее было сказано, что в процессе очистки стопных вод в аэротенках-вытеснителях микроорганизмы активного ила проходят определенный цикл развития от молодости к старости . Известно, что микробы, которые проходят такой цикл развития, в конце его образуют особые покоящиеся или репродуктивные формы, которые при попадании в среду, богатую питательными веществами, дают начало новому поколению микробов. Однако, как указывал акад. Н. Д. Иерусалимский, необходимо учитывать, что состав бактериальной культуры никогда не бывает однородным и отдельные клетки могут оказываться на разной стадии развития. Поэтому в конце очистки некоторая часть микроорганизмов может еще не закончить своего цикла развития, и так как физиологическое развитие клеток необратимо, то при возвращении их в начало аэротенка на среду, богатую питательными веществами, т. е. не соответствующую их фазе развития, они отмирают. Введение регенератора, в котором отсутствуют питательные вещества, позволяет закончить таким клеткам цикл развития. В результате при той же массе активного ила число жизнеспособных микробиальных клеток оказывается большим, чем в нерегенерированном иле, что и ведет к повышению общей скорости окисления. [c.51]

    Гуминовые кислоты в виде солей аммония обладают физиологической активностью. В настоящее время накоплен обширный материал, подтверждающий положительные биологические свойства гуматов. Физиологическое и стимулирующее действие природных гуминовых кислот на высшие растения проявляются по разному гормональное воздействие улучшение проникновения минеральных элементов через корни растений в виде гуминоминеральных соединений участие в физиологических процессах роста. Как установлено рядом исследователей, гуминовые кислоты могут проникать не только в отдельные органы растений стебель, листья, корень), но также и в отдельные клетки, достигая их составляющих, вплоть до ядра. Гуминовые кислоты в виде растворимых солей усваиваются растениями, принимая активное участие в процессах жизнедеятельности растительных клеток, оказывая активное влияние на биоэнергетику растения, способствуют ускорению синтеза рибонуклеиновых кислот, а следовательно, и белка в целом. Участие гуминовых кислот в процессе жизнедеятельности растения приводят к ускорению и улучшению обмена веществ. Можно отметить также защитную функцию гуминовых препаратов, которые, усваиваясь растениями, повышают их устойчивость к выраженным факторам температурному воздействию, химическому, радиации и т. д. В работе показано стимулирующее влияние гуминовых кислот, веществ как на развитие растений, так и на использование ими азота при внесении в качестве стимуляторов гуминовых препаратов. Таким образом, гуминовые вещества являются необходимой составной частью почв и способствуют нормальному развитию растений. При обеднении почвы гумусовыми веществами возникает необходимость дополнительного их внесения, что дост аточно легко сделать, если их вносить в виде физиологически активных водорастворимых солей гуминовых кислот-гуматов, которые при концентрации тысячных долей процента оказывают стимулирующее действие на растительные организмы. Разнообразный исходный материал, используемый для получения гуматов, методы извлечения отражаются на конечном продукте, поэтому проводить сравнительную характеристику предлагаемого продукта с известными гуматами К и Ыа достаточно трудно. Для оценки физиологической активности препарата была предложена методика лабораторных испытаний в качестве стимулятора роста и развития растений, оп-робированная на кресс-салате. Испытание препарата в условиях защищенного грунта показали эффективность его применения для предпосевной обработки овощных культур. При такой обработке активизируется стартовое начало, что положительно сказывается в течение всего периода вегетации и на конечном урожае. [c.97]

    Для специальных целей можно также клонировать отдельные клетки. Такие методы получили название методы культуры тканей. Некоторые клетки, помещенные в подходящую среду, способны расти в течение бесконечно долгого времени. Клонированные клетки позволяют изучать воздействие на живые струкгуры таких химических веществ, как гормоны, лекарственные препараты, антибиотики, косметические продукты и фармацевтические препараты. Они служат полезной заменой лабораторных животных, например крыс, кошек и собак. [c.48]

    Микрорепродукцией называют размножение, или клонирование, растений с помощью культуры ткани. Приставка микро указывает на то, что в качестве исходного материала обычно используют мелкие объекты — либо отдельные клетки, либо маленькие кусочки ткани. Этот материал выращивают на специальных культуральных средах и поэтому называют культурой ткани. В основе культивирования лежат эксперименты, показавшие, что кусочки ткани, отделенные от растений, можно заставить расти в растворе, содержащем питательные вещества и некоторые растительные гормоны, в частности ауксины и цитокинины. Гормоны необходимы для поддержания непрерывного деления клеток. В настоящее время культуру ткани широко используют для сохранения выведенных сортов растений (рис. 21.11). [c.49]

    Присутствие осмотических концентраций электролитов в среде, где находятся корни, приводит обычно к значительному повышению концентрации электролитов в растении, что неблагоприятно сказывается на балансе ионов внутри клеток и тканей. Состав поглощаемых электролитов может достаточно полно отражать их соотношение в субст зате, однако устойчивость к засолению предполагает, по-видимому, значительную избирательность в поглощении ионов. Ван ден Берг [511 полагает, что устойчивость различных сельскохозяйственных культур к засолению связана с регулированием поглощения ионов. Многим авторам удалось показать, что устойчивость к ионам хлора и натрия определяется относительно низкой интенсивностью их поглощения [202, 274, 307]. Как и при нормальном-поглощении солей, первый заградительный барьер находится, по-видимому, в корне, так что концентрация ионов хлора и натр ия в ксилемном соке оказывается очень низкой, хотя в отдельных клетках надземной части растения эти ионы могут накапливаться [659]. [c.323]

    ЭТОТ газон перепечатывали с помощью бархата (гл. VI) на чашку с минимальным селективным агаром, поверхность которого была покрыта плотным слоем ауксотрофных Р -бактерий, неспособных расти на этой среде. Генетический состав F - и F -штаммов был подобран таким образом, чтобы сделать возможным возникновение таких генетических рекомбинантов, которые были бы способны расти на селективном агаре чашки-реплики. Часть редких Hfr-клонов среди F -бактерий исходной чашки, способных образовывать селектируемый рекомбинантный тип, захватывается бархатом и переносится на газон F -бактерий чашки-реплики. В результате на этой чашке возникают рекомбинантные колонии. Местоположение такой рекомбинантной колонии указывает, таким образом, зону на газоне F -бактерий исходной чашки, в которой возникли Hfr-бактерии. Эту зону газона отбирали, высевали на вторую чашку и повторяли один или два раза процедуру отпечатков для селективного обогащения культуры Hfr-клетками. Наконец, отдельные Hfr-колонии обогащенной популяции F -клеток проверяли на плодовитость и среди них находили чистые клоны Hfr-клеток. Изменяя генотип Р -клеток и селективные условия исходной чашки, Вольман и Жакоб выделили из одного и того же родительского Р+-штамма различные Hfr-штаммы, некоторые из которых, подобно HfrH, переносят с высокой частотой участок генома thr-leu, а другие — иные участки генома. Таким образом, было доказано, что плодовитость скрещиваний F Х F действительно определяется небольшим колн-4e TB0M Hfr-6aKTepHn, возникающих спонтанно во время роста F -куль-туры. [c.229]

    HO которым их можно было бы распознать. Чтобы идентифицировать и охарактеризовать стволовые клетки, нужен функциональный тест, иозволяюш,ий прослеживать судьбу потомства отдельных клеток. Как мы увидим, с этой целью можно просто изучать колонии, образуемые отдельными клетками в культуре. В случае кроветворной системы, однако, такие клеточные клоны можно распознавать и в интактном животном. [c.181]

    Вскоре и биохимические, и цитогенетические методы стали вместе использоваться в генетике соматических клеток. Появилась возможность выявлять специфические дефекты ферментов в отдельных клетках, растущих в культуре ткани. Разработка Генри Харрисом [254] и Эфрусси [247] методов гибридизации клеток человека с мышиными клетками позволила установить локализацию многих генов и построить хромосомные карты человека, которые уже соперничают в своей полноте с аналогичными картами для дрозофилы (разд. 3.4.3) и мыши (приложение 9). [c.32]

    Еще более простая тест-система основана на анализе хромосом, облученных in vitro. При Tai OM тестировании в большинстве случаев использовались культуры лимфоцитов человека. Именно на этой системе было показано, что общие правила индукции мутаций, сформулированные в экспериментальной генетике, применимы и к хромосомам человека (разд. 5.2.1.1). Для некоторых биохимических маркеров разработаны методы выявления точковых мутаций в отдельных клетках, культивируемых in vitro (разд. 5.1.5). Этот метод может быть использован для тестирования на мутагенность. С теоретической точки зрения он представляется очень изящным. [c.233]

    На заключительном этапе внутриклеточного развития фага включаются часы лизиса , т. е. функции фага, ответственные за разрушение бактериальных покровов и освобожде1ше зрелого фага. У разных фагов механизмы часов лизиса функционируют по-разному, у фагов, освобождающихся из клетки секрецией , такого механизма нет вообще. Обычно фаги (Т-четпые, Я) контролируют образование двух разных литических фермет ов, один из них разрушает клеточную мембрану, а другой — ригидный мукополимерный слой клеточной оболочки. У фагов Я, i 22 соответствующие гены расположены рядом в геноме и входят в состав одной и той же единицы транскрипции. У других фагов, например Т4, гены, контролирующие ферменты лизиса, регулируются, по-видимому, независимо, но согласованно. Обязательное условие лизиса — прекращение фосфорилирования и реакций, ведущих к укреплению мембраны инфицированных бактерий. Детальные механизмы включения часов лизиса все еще ие выяснены. Хотя лизис большинства клеток в одномоментно инфицированной культуре бактерий наступает в пределах достаточно узкого интервала времени, тем не менее отдельные клетки могут лизироваться с большим запозданием. Некоторые мутации фагов ускоряют наступление лизиса. [c.176]

    Отдельные клетки, небольшие группы или достаточно крупные агрегаты >50 клеток) выращивают во взвешенном состоянии в жидкой среде. Применяют разные аппараты и способы поддержания их в таком состоянии. Начальный момент получения суспензионной, клеточной культуры является событием рандоми-ческим. Зто означает, что только клетки, которые подряду причин способны к перестройке метаболизма и размножению с высоким коэффициентом в данных конкретных условиях суспензионного культивирования, образуют хорошие линии. Важными характеристиками таких линий является высокая степень дезагрегации (5—10 клеток в группе), морфологическая выравненность клеток (небольшие размеры, сферическая или слегка овальная форма, плотная цитоплазма), отсутствие трахеидоподобных элементов. На рис. 5 представлены клетки суспензионной культуры [c.21]


Смотреть страницы где упоминается термин Культура отдельных клеток: [c.266]    [c.449]    [c.427]    [c.243]    [c.54]    [c.91]    [c.339]    [c.95]    [c.184]    [c.40]    [c.345]    [c.105]    [c.345]    [c.11]    [c.68]   
Клеточная инженерия (1987) -- [ c.9 ]




ПОИСК







© 2025 chem21.info Реклама на сайте