Определение эфиров холестерина

При исследовании особенностей нарушения обмена липидов при ряде заболеваний важная роль принадлежит определению метаболитов липидного обмена. Для этих целей в лабораториях определяют концентрацию метаболитов липидного обмена в сыворотке крови. В крова содержатся все фракции липидов, которые находятся в тканях человека. Наиболее часто для целей лабораторной диагностики пользуются определением общих липидов крови, триглицеридов, жирных кислот, холестерина и его эфиров и некоторых других показателей липидного обмена. Содержание некоторых фракций липи дов в сыворотке здорового человека представлены в таблице [c.148]

Определение эфиров холестерина [c.223]

Свойствами жидких кристаллов обладают в определенном температурном интервале некоторые индивидуальные органические соединения — сложные эфиры холестерина, фосфатиды, цереброзиды, а также и растворы многих биологически важных соединений. [c.49]

В печени холестерин может взаимодействовать с жирными кислотами (в виде ацил-КоА) с образованием эфиров холестерина. Синтезированные в печени эфиры холестерина поступают в кровь, в которой содержится также определенное количество свободного холестерина. [c.558]

В заключение сделаем замечание о порядках величин. Экспериментально определенная величина естественного кручения в молекулярном масштабе всегда мала (до или 10- , где а —. длина молекулы). Это означает, что в целом стерическое различие между молекулой и ее зеркальным изображением довольно мало. Например, если рассмотреть трехмерную модель эфира холестерина (фото 1), мы найдем, что его форма не очень отличается от простого стержня и, таким образом, близка к своему зеркальному изображению [c.26]

Определение содержания жирных кислот методом газовой хроматографии в ткани печени здоровых людей и при циррозе. (В случае цирроза уменьшено содержание линолевой и арахидоновой к-т во фракции эфиров холестерина.) [c.194]

Прекрасная методика определения общего состава липидов плазмы или сыворотки с использованием ТСХ включает двухступенчатое элюирование сначала смесью петролейный эфир — диэтиловый эфир (9 1) и затем смесью петролейный эфир — диэтиловый эфир — уксусная кислота (400 100 1) в одном и том же направлении (элюирование второй системой начинают после прохождения фронтом растворителя первой системы 5 см). В этом случае полярные липиды, остающиеся на старте, состоят почти полностью из фосфолипидов [678, 679]. Содержание эфиров холестерина, триацилглицеринов, свободных жирных кислот и холестерина, а также фосфолипидов определяли карбонизацией с последующей денситометрией [680, 681]. [c.205]

Знание отношения количеств холестерина и холестериновых эфиров в органах и внутритканевых жидкостях организма важно для медицинского диагноза определенных болезней и может быть определено различными методами. Для сыворотки обычно принято отношение 1 3,5, т. е. 70—75% холестерина связано в виде эфиров. Поскольку холестерин примерно на 75% [c.254]

Описанные в литературе методы экстракции дают различное содержание холестериновых эфиров, которое легко можно определить методом ХТС. Из табл. 39 далее видно, что при фотометрическом определении (общее содержание холестерина и холестериновых эфиров) также получают отличное значение. [c.255]

Сравнение различных методов определения холестерина и его эфиров [c.255]

Открытие Шевреля (1811 г,) сделало возможным химическое определение понятия жирных масел как сложных эфиров глицерина, в котором все три гидроксила этерифицированы кислотами. Такое определение исключает из группы жиров воска, лецитины и холестерины, которые по физическим свойствам более или менее близки к жирам. Хотя это определение является общепринятым, в действительности жирные масла представляют собой смеси п поэтому не поддаются строгой химической характеристике. [c.309]

Для определения содержания холестерина и его эфиров применялись различные методы. Перди и Трутер [70] использовали свои методы количественного анализа (основанные на измерении площади пятен см. т. 1, гл. XI, разд. 3) эфиров холестерина и количественного определения холестерина среди спиртов, выделенных из восков шерсти. Чтобы исключить возможность перекрывания пятен определяемых соединений и других алифатических спиртов, входящих в экстракт, пластинки опрыскивали реагентом Либермана—Бухарда, который готовили, добавляя 10 мл охлажденной льдом серной кислоты к холодной смеси 50 мл хлороформа и 50 мл уксусного ангидрида. [c.296]

Холестерин, один из наиболее распространенных стероидов, в чистом виде представляет собой бесцветное кристаллическое вещество (ромбические пластинки) с температурой плавления 150° С. В холестерине имеется вторичная спиртовая группа у третьего атома и двойная связь у пятого атома углерода (см. формулу на стр, 267). Химические свойства холестерина определяются этими функциональными группами. Например, холестерин образует сложные эфиры с жирными кислотами, находящимися в тканях, присоединяет водород, осаждается из растворов дигитонином. Йодное число холестерина составляет 65,8. Для определения холестерина в качественном и количественном анализах применяется несколько цветных реакций. Например, по методу Салковского раствор холестерина в хлороформе встряхивают с серной кислотой, при этом хлороформный слой окрашивается в красный цвет, а кислый слой приобретает зеленую флуоресцирующую окраску. [c.273]

Определение неомыляемых сводится к омылению жира и извлечению не-омыляемой части петролейным или диэтиловым эфиром. Полученные после омыления спиртовые растворы разбавляются водой перед экстракцией петролейным эфиром так, чтобы концентрация спирта составляла 50%. В большинстве случаев извлечение петролейным эфиром, имеющим низкую температуру кипения, обходится без образования эмульсии. Затруднения возникают только в тех случаях, когда исследуемый жир содержит много холестерина, как, например, рыбий жир. [c.361]

Для сравнительного определения холестерина на пластинку с силикагелем Г наносят по 20 и. экстракта одновременно с постепенно увеличиваю-щршся количеством 0,01 %-ного стандартного раствора холестерина. В качестве растворителя используют хлороформ. Для определения эфиров холестерина наносят по 10 цл экстракта и постепенно возрастающее количество [c.255]

Такие фармакологические активные вещества, как кофеин, стрихнин, морфин, барбитуровая кислота и фенацетин, введенные с помощью инъекции животным, могут быть выделены из центральной нервной системы при помощи сублимации [269, 270]. Жирные кислоты, холестерин и эфиры холестерина могут быть сублимированы из крови, мозга и т. д. В некоторых случаях может оказаться необходимой предварительная подготовка материала. Например, при определении ванилина в ванильных палочках [271] с помощью вакуумсублимации вещество экстрагируется растворителем, и после испарения растворителя остаток сублимируется. Этот метод может быть с успехом применен при определении кофеина в кофе. Подобного же рода методика применяется при определении сахарина в продуктах питания [272], например в мороженом экстракция с помощью диэтилового эфира и испарение последнего дают материал, из которого может быть сублимирован сахарин. Подобным же образом может быть определена в кетчупе бензойная кислота. Сублимация льда является удобным способом [273—281 ] для высушивания веществ при низкой [c.538]

Бумажки с кровью после извлечения петролейным эфиром, как указано, помещают в 92°-ный спирт на 24 часа, после чего их извлекают стеклянным крючком, ополаскивают небольшим количеством спирта в ту же пробирку и бумажку выбрасывают. К спирту в пробирке прибавляют 1 каплю 25%-ной КОН и выпаривают досуха. Для более ровного кипения удобно прибавить кусочек обезжиренной фильтровальной бумаги (2X2 см). Фосфатиды и эфиры холестерина омыляются щелочью, и холестерин освобождается. Свободный холестерин растворим в петролейном эфире. Поэтому к сухому остатку прибавляют 8— 10 мл петролейного эфира, закупоривают корковой (не резиновой ) пробкой и оставляют на 24 часа. Холестерин переходит в раствор, который сливают через обезжиренный фильтрик в чистую пробирку и фильтрик обмывают туда же небольшим количеством петролейного эфира. Зате.м большую часть эфира отгоняют на песчаной бане, добавляют 1 мл 1%-ной щелочи, отгоняют остатки эфира, прибавляют раствор двухромовокислого калия и определение кончают, как описано выше. Расчет количества мг холестерина тот же. Содержание холестерина в его эфирах равно приблизительно 56%. Чтобы узнать вес эфиров холестерина, нужно полученные цифры разделить на 0,56. Остаток после извлечения спиртом высушивают (чтобы удалить следы [c.223]

Определение жирных к-т — компонентов фосфолипидов, триглицеридов и эфиров холестерина найдены олеиновая, стеариновая, эйкозатриеновая и др. к-ты. [c.186]

В разработанных несколькими группами исследователей [4, 37, 57] ферментных электродах для определения свободного холестерина использовали холестериноксида-зу (СОВ, ЕС 1.1.3.6), иммобилизованную на поверхности коллагеновой мембраны или на найлоновой сетке. Концентрацию свободного холестерина определяли с погрешностью 5-25%. Для определения общей концентрации холестерина сыворотку выдерживают в растворе Тритон Х-100 или дезоксихолатсодержащих растворах с добавкой гидролазы эфиров холестерина (СЕН, ЕС 3.1.1.13). Ту же реакционную схему используют в липидном анализаторе 1СА-ЬО 400 фирмы Тоуо 1ого (Япония). Для получения свободного холестерина пробу сыворотки (30 мкл) предварительно обрабатывают 7,5 мкл раствора СЕН в течение 11 мин при 37 °С. Концентрацию холестерина находят с помощью СОВ, иммобилизованной на кислородном электроде. Быстрый отклик электрода (всего 15 с) обусловлен использованием скоростного метода измерения расхода кислорода. В получаемую величину вносят поправку на сигнал кислородного датчика без фермента. Одновременно с холестерином определяют также концентрацию триглицеридов и фосфолипидов (см. ниже). Производительность анализатора-40 проб в час. Аскорбиновая кислота и билирубин не мешают определению. Уравнение корреляции с данными неспецифического стандартного метода анализа для общего содержания холестерина имеет вид у = 1,03х — 0,15 ммоль/л г = 0,985 (и = 50). [c.272]

Этиловый спирт относится к тем немногим органическим соединениям, которые были хорошо известны п течение столетий. Представим себе, однако, что он до сих пор не известен тогда даже весь огромный объем сведений о свойствах других низших спиртов не позволил бы кому-либо предсказать а priori его воздействие (полезное или разрушительное — в зависимости от дозы ) на человеческий организм, не говоря уже о его роли в исторических событиях (таких, как, скажем, пивной путч D Мюнхене или революция 1917 г. в России). Нередко случается и так, что впервые полученные или даже хорошо известные соединения не привлекают внимания, пока, благодаря тому или иному случайному наблюдению, не становятся исключительно важными. Так, ни способность диэтилового эфира служить стабилизирующим растворителем для магнийорганических соединений, ни анестезируюшие свойства хлороформа, ни образование жидких кристаллов бензоатом холестерина, ни уникальный набор физических и химических свойств политетрафторэтилена (тефлона) не могли бьггь в свое время предсказаны только на основе анализа их структур [30]. Таким образом, остается невероятно трудной проблемой разработать общие принципы молекулярного дизайна новых структур, обеспечивающих вешеству заданный набор свойств. Тем не менее для определенных классов задач предсказание свойств на основании знания структуры соединения все же возможно. Такой рациональный подход, основанный на идеологии молекулярного дизайна, доказал свою дееспособность, что мы и постараемся продемонстрировать приводимыми в этом разделе примерами. [c.460]

ГДольнер с сотрудниками [95, 96], занимавшиеся разделением методом ХТС холестериновых эфиров, пытались идентифицировать отдельные пятна и осуществить количественное определение. В своих ранних публикациях авторы [94] наносили для этого на пластинки с силикагелем Г 0,04 лед сыворотки в виде полосы шириной 1 еле и трижды хроматографировали четыреххлористым углеродом. Зоны были соскоблены, и холестерин определен по Заку и др. [92]. В более поздней работе [96] вещества наносили на более узкие и более тонкие слои. Растворителем служил петролейный эфир [c.256]

После завершения опытов и удаленна трития камеру для разряда откры вали и твердые продукты растворяли в спирте. Аликвоты этих растворов анализировали жидкостным сцинтилляцнопным счетчиком на определенне общего количества введенного трития. Тритий определяли но потере активности после отгонки спирта. Пальмитиновую кислоту очищали рекристаллизацией из ацетона методом хроматографии по Норнту, а во втором опыте — путем превращения ее в эфир и-бромистого фенацнла. Бензойная кислота очищалась до постоянной активности путем неоднократной рекристаллизации из воды и гексана. Исходные растворы бензойной кислоты и холестерина обесцвечивали углем. Холестерин частично очищали неоднократной рекристаллизацией из спирта и гептана. Полная очистка холестерина достигалась путем синтеза его в дибролшд и рекристаллизации этого продукта из смеси эфира и спирта. [c.93]

Высокая летучесть силильных производных дает возможность проводить газохроматографическую идентификацию и определение многих сложных и нестабильных молекул в различного рода биологических субстратах после превращения их в метиловые эфиры. Примером может служить разделение и идентификация ТМС-производных стероидов в моче (рис.УП.4), а также холестерина и родственных ему соединений (рис. УП.5). В последнем случае можно, в частности, определять холестерин (С27Н45ОН) в молочном жире [35]. Жиры предварительно омыляют (метанол и КОН), экстрагируют продукты реакции растворителем с последующим превращением стеролов в ТМС-производные, которые разделяют на кварцевой капиллярной колонке (30 м X 0,22 мм) с силиконовой НЖФ при 280°С. [c.291]

При установлении структуры холестерина первой стадией было определение молекулярной формулы. В 1859 г. холестерину была ошибочно приписана формула С26Н44О, а в 1888 г. определена правильная формула Са,Н4бО. Точность, требующаяся для того, чтобы различить эти две формулы, очень высока в С26Н44О содержится 83,82% С и 11,90% Н, тогда как в С ЛвО — 83,87% С и 11,99% Н. В 1859 г. было показано, что холестерин представляет собой спирт, поскольку он образует сложные эфиры, а в 1868 г. в нем было уста- [c.559]

Определение методом зеленой флюоресценции. 1 мл сыворотки смешивают с 3 мл 96°-ного спирта, хорошо размешивают стеклянной палочкой и центрифугируют до осаждения белка. Центрифугат сливают в чашку для выпаривания (чашку Петри). К осадку прибавляют 3 мл спирта, размешивают, снова центрифугируют и центрифугат сливают в ту же чашку Петри. Выпаривают при температуре 30—50°. Сухой остаток тонким слоем покрывает дно чашки, в виде пленки, плотно присохшей ко дну. Добавляют 5 мл серного эфира и каждые 1—2 минуты покачивают чашку, делая вращательные движения для лучшей экстракции холестерина. Через 5 минут эфир сливают и экстракцию повторяют еще два раза таким же образом. В чашку, трижды промытую серным эфиром (для удаления холестерина), приливают 4 мл концентрированной серной кислоты, в которой полностью растворяется осадок. Кислоту переводят в пробирку нефлюоресцирующего стекла с диаметром 1 см и емкостью в 5—6 мл и оставляют до следующего дня, после чего измеряют флюоресценцию. В качестве стандарта берут ряд разведений основного раствора гликохолевокислого натрия в серной кислоте 0,1—0,12—0,15—0,18—0,20—0,25—0,30 мл н до 4 мл серной кислоты. С этими эталонами сравнивают полученный раствор экстракта крови в серной кислоте. Если нужно, раствор экстракта разводится той же серной кислотой до флюоресценции одного из эталонов. При расчете учитывается первоначальное разведение крови в 4 раза. [c.333]

Определение. 1 мл сыворотки доводят до кипения с 8,5 мл спирта и 0,5. мл баритового раствора, чтобы полностью извлечь желчные кислоты. После вскипания снова доводят До 10 мл и фильтруют через хороший фильтр. 3 мл фильтрата выпаривают досуха в широкой пробирке Хагедорна. Когда про-бирка совершенно суха, прибавляют 4 мл уксусного эфира, взмучивают осадок, в том числе и находящийся на стенках пробирки, и прибавляют 0,1 мл взвеси СаО. Анализ ставят в водяную баню с температурой 90°. При этом холестерин, лецитин, олеиновая кислота и жиры переходят в раствор. Экстракция закончена через 2 минуты. Пробирку центрифугируют, уксусный эфир сливают, а осадок дважды промывают кипящим в водяной бане уксусным эфиром порциями по 4 мл. В пробирке остаются желчные кислоты, которые теперь растворяют в 4,5 мл 10%-ной ледяной уксусной кислоты в серной кислоте. Пережидают развитие пузырьков и измеряют флюоресценцию. Стандарт 40 мг холевой кислоты в 100 мл 96% спирта. Разводится крепкой серной кислотой до 0,4, 0,2 и 0,1 мг%. [c.334]

Определение. 1—2 сыворотки смешивают с равным объемом воды, прибавляют 2 мл 0,2 н. КОН, 6 мл формалина и 6 мл 95%-НОГО спирта. После каждого прибавления тшательно встряхивают. Затем смесь 3 раза извлекают свободным от перекисей серным эфиром, каждый раз по 20 мл, взбалтывая несколько минут. После этого водный слой выливают, а соединенные эфирные извлечения в той же воронке промывают поочередно 8 мл 2%-ного КОН, 5 мл 1%-кой H2SO4. 1 dS04 к 8 мл 0,5%-нию N82804. Последнюю промывку провопят порциями, 2 раза, хорошо смешивая. Промытый эфир сушат над безводным сернокислым натрием не меньше часа. Берут аликвот эфирного извлечения, равный 0,5 мл сыворотки, и определяют в нем холестерин (так как при значительном его содерлсании в сыворотке он дает окрашивание с реактивом на двухвалентное железо, то нужно вносить поправку). Остальной эфир переводят в склянку Дрекселя и отгоняют на водяной бане при 20—25°, под конец при 35—45°, под током азота. Когда эфира уже мало, добавляют 3— [c.370]

Пример расчета. 1,2 мл сыворотки после вссй описанной обработки цветность по кривой отвечает 4,18 .1г витамина Е холестерин кровн равен 145 мг%. Извлечение велось 60 мл эфира, в определение витамина Е пошло 55 мл. По кривой для холестериновой поправки 145 мг% дают высоту 85, а высота 85 для поправки витамина Е = 1,16 [.и. Кривая для поправки сделана с расчетом на 1 мл, а было взято 1,2 мл сыворотки, следовательно, 1,16 X 1,2 = 1,39 мг. [c.372]

Намбара и др. [80] определили содержание За-холестанола в присутствии Зр-холестанола и холестерина, проводя хроматографирование на силикагеле G со смесью гексан—этилацетат (4 1) в качестве элюирующего растворителя. При количественном определении сначала получали 3,5-динитробензоиловый зфир За-холестанола, обрабатывая элюат раствором 3,5-динитробензоилхлорида в пиридине. Далее эфир экстрагировали гексаном из смеси, а затем обрабатывали этилендиамином и диметилформамидом, чтобы получить окрашенный раствор, поглощение которого измеряли при длине волны 528 нм. Иванов и др. [81] определяли фитостерины колориметрически с помощью сульфосалициловой кислоты после разделения на силикагеле смесью петролейного и диэтилового эфиров (1 1). [c.298]

Бондьерс и Бьеркеруд [82] использовали флуориметрический метод для определения нанограммовых количеств холестерина и его эфиров после элюирования. Чтобы флуоресценция была достаточно интенсивной, хроматограмму обрабатывали модифицированным реактивом Чугаева и подбирали соответствующие условия реакции. Достаточно надежное извлечение исследуемых соединений с силикагеля достигалось после трехкратного экстрагирования. [c.298]

Ход определения. Для анализа применяют растворы холестерина, содержащие в 100 мл 96-процентного спирта около 0,01 г холестерина. 50 мл такого раствора нагревают на водяной бане и обрабатывают затем 50 мл 1-процентного раствора дигит01шна. После осаждения смесь оставляют стоять в течение ночи, отсасывают осадок через маленький взвешенный фильтровальный тигель, высушивают при 90—100° и взвешивают. Найденный вес, умноженный на 0,2432, равен весу холестерина. Чтобы определить сумму холестерина, присутствующего как в свободном виде, так и в виде сложного эфира, пробу предварительно омыляют. Навеску пробы растворяют в абсолютном [c.433]

Мертал и Банч [33] использовали ТСХ в качестве препаративного метода при газо-жидкостном хроматографическом определении холестерина и 5 -кoпpo тaн-3 -oлa в бытовых сточных водах. К двухлитровой, пробе воды добавляли 5 мл концентрированной НС1 и 10 мл 20%-ного раствора хлористого натрия. Затем проводили экстрагирование гексаном в количестве 100 мл. Слой растворителя отмывали "50 мл 70%-ного этанола и упаривали досуха. Эфиры стеринов кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч с 7,5%-ным раствором КОН в 70%-ном этаноле и разбавляли равным объемом воды. Стерины экстрагировали двумя порциями гексана, который в свою очередь отмывали 5 мл 50%-ного этанола и после этого упаривали досуха в 5-миллилитровой пробирке. ТСХ-пластинки размерами 20X20 см, покрытые слоем (0,25 мм) силикагеля G, отмытого спиртом, активировали в течение 1 ч при 110°С. Стерины, полученные в результате гидролиза, растворяли в 20—50 мкл ацетона и наносили на пластинку вместе со стандартными растворами. Разделение проводили смесью хлороформа и эфира (9 1). Пластинки опрыскивали 10%-ным раствором фосфорномолибденовой кислоты в 95%-ном этаноле. После выдерживания пластинок при 100 °С в течение 5 мин стерины проявлялись в виде темных пятен на желтом фоне. Значения i / копростанола и холестерина равнялись 0,65 и 0,50 соответственно. Зоны неизвестных веществ, соответствующие расположению стандартов, извлекали и подготовляли для ГХ-анализа. Предел определения копростанола равен 20 нг/л, количественные измерения становились возможными при концентрациях выше 100 нг/л. [c.498]

Принцип. Фосфолипиды и хо.пестерин экстрагируются смесью спирта и эфира. Часть экстракта используют для определения холестерина по Блюру, другая часть подвергается минерализации с последующи. определением концентрации фосфолипидов по неорганическому фосфору. [c.72]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология