Получение и анализ хроматограмм на бумаге

Методики получения распределительных хроматограмм на бумаге. Методика проведения анализа на бумаге аналогична методике, применяемой в тонкослойной хроматографии и описанной в гл. IV. Анализ может выполняться восходящим или нисходящим способом на полосках специальной бумаги. Кроме того, исходная смесь может наноситься в центр круга и далее распределяться концентрическими кольцами от центра к периферии. В этом случае получают круговую хроматограмму. Прибор для получения круговой хроматограммы изображен на рис. 11.2, а приспособление крз жка бумаги для получения круговой хроматограммы — на рис. 11.3. Для подачи подвижной фазы в центр круга в бумаге вырезается фитиль, как показано на рис. 11.3. Конец фитиля опускается в сосуд с подвижной фазой. При нисходящей хроматографии пользуются прибором, изображенным на рис. 11.4. Стартовая линии а этом случае находится в верхней части полоски бумаги. [c.219]

Требования к пробе. Проба должна содержать около 1 % каждого из определяемых веществ. Эта концентрация является контрольной. На бумагу наносят 5—50 мкг, т. е. 0,5—5 мкл пробы. В работе применяют микропипетки для качественного анализа лучше пользоваться тонкими капельницами или трубочками, применяемыми для определения температуры плавления веществ. Пробу наносят на бумагу в заранее отмеченное место, находящееся на расстоянии около 2 см от нижнего (или верхнего при получении нисходящей хроматограммы) края, в виде точек или полос. Иногда при проведении количественного анализа предпочитают наносить пробу в виде полос. Перед проведением хроматографии необходимо удалить растворитель, нанесенный вместе с определяемыми веществами, высушивая бумагу горячим, воздухом. [c.354]

Число носителей, пригодных для распределительной хроматографии, крайне ограничено. Носителей, которые бы идеально удовлетворяли требованиям распределительной хроматографии, почти нет. Более или менее удовлетворительными качествами обладают такие носители, как особым образом приготовленный силикагель, очищенный крахмал, целлюлоза. Особое место в качестве носителя занимает фильтровальная бумага. Получение бумажных хроматограмм в распределительной хроматографии рассматривается как особый вид хроматографического анализа и носит название б у -мажной хроматографии. [c.320]

В проделанном опыте вы обнаружите, что произойдет разделение смеси вдоль бумажной полоски на ряд веществ, различающихся по цвету. Полученное изображение на бумаге называется хроматограммой, а сам метод подобного разделения смесей носит название хроматографического анализа. [c.437]

Наряду с колоночной осадочной хроматографией в качественном анализе неорганических ионов весьма успешно применяется и бумажный вариант получения осадочных хроматограмм. Н. А. Тананаев в разработанном им в 1920—1922 гг. капельном методе качественного анализа описывает много случаев открытия ионов с помощью реакций, выполняемых на фильтровальной бумаге. Результаты анализа в виде цветных пятен и колец представляют собой хроматограммы, многие из которых являются типичными осадочными хроматограммами. [c.208]

Для анализа на бумагу наносят растворы, содержащие определенные количества веществ, легко разделяющихся и проявляющихся на хроматограмме. Затем контуры пятна очерчивают карандашом и определяют их площадь планиметром или же пятна вырезают и взвешивают. На основании полученных данных строят калибровочный график, откладывая по оси абсцисс 1п с, по оси ординат — площадь или массу пятен. Рекомендуется проводить несколько параллельных опытов. Если пятна очерчены резко, точность анализов составляет 10— 15% К недостаткам метода следует отнести зависимость площади пятна не только от концентрации, но и от размера капли, сорта бумаги, темлературы и т. д. [c.101]

Сущность работы. Наряду с колоночной осадочной хроматографией анализ смеси ионов можно производить методом осадочной хроматографии на бумаге. В этом случае роль носителя играет фильтровальная бумага, которая предварительно пропитывается раствором выбранного осадителя. Неокрашенные осадки можно проявлять соответствуюш,ими реагентами. В остальном принцип получения осадочной хроматограммы на бумаге не отличается от ее получения в колонке. [c.130]

Качественный и количественный анализ. Методика качественного анализа. Так как в большинстве случаев хроматограмма на бумаге после разделения смеси веществ и испарения подвижной фазы бесцветна, то на основании ее нельзя не только идентифицировать вещества, но и судить о степени разделения их смеси. Поэтому полученные хроматограммы следует проявить. Для этого применяют растворы различных веществ, при взаимодействии которых с компонентами анализируемой смеси образуются окрашенные соединения. В проявленной хроматограмме по окраске пятна, образованного тем или иным веществом смеси и проявителем, можно идентифицировать вещество. Если проявитель образует со всеми веществами разделяемой смеси одинаково окрашенные пятна, то идентификацию проводят по месту расположения пятна на бумаге. Каче- [c.122]

Количественное определение нуклеиновых кислот. Принцип метода основан на выделении рибонуклеиновых (РНК) и дезоксирибонуклеиновых (ДНК) кислот и на дальнейшем их анализе прямыми и косвенными методами. К прямым методам относятся такие, которые включают гидролиз нуклеиновых кислот с последующим выделением из гидролизатов пуринов и пиримидинов и определение их хроматографическим методом. Хроматография позволяет производить точный микроанализ нуклеиновых кислот. Исследование пуринов и пиримидинов проводят в ультрафиолетовом свете, наблюдая флуоресценцию пятен на хроматограммах или в экстрактах, полученных из соответствующих участков хроматограмм. Кроме хроматографического метода, применяют также способ электрофореза на бумаге. [c.60]

При рассмотрении круговых тонкослойных хроматограмм различных настоек в ультрафиолетовом свете характер флуоресценции был до того ярок и специфичен для каждой настойки, что мы решили это свойство использовать для экспресс-анализа в условиях аптеки. Для этой цели мы скопировали полученные зоны на бумагу и раскрасили их. Эти красочные картины могли служить в качестве шкал для идентификации настоек. Характеристика настойки основывалась на числе полученных зон, их распределении и цвете. Два первых признака не вызывали сомнения, но обозначение цвета отличалось неопределенностью. Особенно это относилось к цвету флуоресценции. В дальнейшем предполагалось создание постоянных справочных пособий качественного определения галеновых препаратов с применением цветных фотографий зон. Однако начавшаяся Великая Отечественная война помешала осуществить эти планы. [c.32]

Кроме определения знака заряда частиц, капиллярный метод можно применять для анализа смесей различных окрашенных веществ.. Например, из раствора флуоресцеина и метиленового голубого при погружении в него бумаги вверх поднимается только желтый краситель флуоресцеин, в то время как метиленовый голубой осаждается вблизи от места погружения бумаги в раствор. Проявление так полученной первичной хроматограммы на бумаге можно производить, заменяя раствор в сосуде чистым растворителем (см. главу V). [c.173]

Получение и анализ хроматограмм на бумаге [c.82]

Получение круговой хроматограммы. Этот вид хроматограммы на бумаге является наиболее старым способом, впервые примененным более ста лет назад. В усовершенствованном виде он был использован в 1948 г. При этом методе вещества, подвергающиеся анализу, разделяются не полосами и пятнами, а круговыми зонами. Для получения круговой хроматограммы вырезают бумажный круг, который по диаметру должен быть несколько больше, чем диаметр камеры. Камерой для получения хроматограмм может быть чашка Петри (рис. 32, а и б). Затем по радиусу круга вырезают полосу шириной 2 мм, отгибают ее и погружают в растворитель после того, как на место сгиба была [c.86]

Круговая хроматограмма. Этот вид хроматографии на бумаге является наиболее старым он был впервые применен более ста лет назад и усовершенствован в 1948 г. Вещества, подвергающиеся анализу, разделяются не полосами и пятнами, а круговыми зонами. Камерой для получения хроматограмм может служить чашка Петри (рис. 47, а, б). Для получения круговой хроматограммы вырезают бумажный круг диаметром, несколько большим диаметра камеры. По радиусу круга вырезают полоску шириной 2 мм, отгибают ее, на место сгиба наносят каплю исследуемого раствора, и погружают ее конец, или хвостик , в растворитель. [c.110]

Что же касается фактической воспроизводимости значений Rf в ТСХ, то Бреннер и др. [42] методом статистического анализа показали, что величины Я/, получаемые в ТСХ, столь же хорошо воспроизводятся, как и аналогичные величины в хроматографии на бумаге. Это, конечно, справедливо, только если достигается идентичность условий получения тонкослойных хроматограмм. [c.310]

Метод получения хроматограмм на гидрофобной бумаге применяется для анализа водонерастворимых веществ. Он получил название метода обращенных фаз. В этом случае неподвижной фазой служит неполярный растворитель (углеводород), а подвижной — полярный (водные растворы спиртов, органических кислот и т. п.). [c.222]

Количественное определение ионов после хроматографического разделения на бумаге можно проводить несколькими методами 1) извлечением из пятен отдельных компонентов после разделения смеси и количественное их определение обычными микроаналитическими методами 2) измерением площади пятен на хроматограммах. Площадь 5 пятна на хроматограмме является функцией концентрации С компонента в анализируемой пробе 8 = a g + В, где а и й — постоянные, определяемые экспериментально. Однако первый метод трудоемкий, а при использовании второго приведенная зависимость площади пятна от логарифма концентрации соблюдается не строго и для получения более или менее надежных результатов необходимо проводить много параллельных определений. Одной из причин разброса результатов анализа является то, что при хроматографировании разделение происходит по нескольким механизмам протекающим одновременно — распределение ионов между двумя растворителями, ионный обмен, образование малорастворимых осадков, физическая адсорбция на бумаге. [c.341]

Ко второй группе методов количественного анализа относится метод вымывания, заключающийся в том, что полученную хроматограмму разрезают на части так, чтобы в каждой находилось одно пятно. Затем вещество экстрагируют из бумаги и в экстракте определяют его количество любым из доступных методов. Предварительно определяют положение каждого пятна на хроматограмме, для чего проводят параллельное хроматографирование двух капель одного и того же раствора. После этого одну хроматограмму проявляют. Непроявленную вторую хроматограмму разрезают в соответствии с результатами проявления первой хроматограммы. [c.126]

При анализе смесей на диаграммной бумаге вычерчивается хроматограмма, состоящая из ряда отдельных пиков, из которых каждый характеризует ту или иную составляющую анализируемой пробы. На рис. 20 в качестве примера приведена хроматограмма, полученная при разделении смеси, содержащей пропилен 1), изобутан (2), м-бу-тан (3) и бутен-1 (4). [c.60]

Методика качественного анализа. В большинстве случаев хроматограмма на бумаге после проведения опыта по разделению смеси веществ и испарения подвижной фазы оказывается бесцветной и поэтому не позволяет непосредственно не только идентифицировать вещество, но и судить о наличии разделения их смеси. Поэтому полученные хроматограммы должны быть проявлены. Для этой цели могут служить растворы различных веществ, при взаимодействии которых с компонентами анализируемой смеси образуются окрашенные соединения. В проявленной хроматограмме по окраске пятна, образованного тем или иным веществом смеси и проявителем, можно производить идентификацию вещества. Если проявитель образует со всеми веществами разделенной смеси одинаково окрашенные пятна, то идентификация веществ должна производиться по месту расположения пятна на бумаге. Качественное обнаружение веществ в проявленной хроматограмме возможно не только по окраске пятен, видимой, при дневном освещении, но и по люминесценции в ультрафиолетовом свете. [c.261]

Первым хроматографическим методом, примененным для разделения смесей свободных моносахаридов, была хроматография на бумаге . В настоящее время, несомненно, этот метод является наиболее употребительным при анализе моносахаридов и целого ряда их производных. Техника проведения хроматографического разделения (подготовка образцов для анализа, применяемые системы растворителей, способы получения хроматограмм и обнаружение зон) подробно описана в соответствующих руководств ах Величина Нр, характеризующая хроматографическое поведение данного вещества в дайной системе растворителей, служит для идентификации изучаемых соединений с веществами известного строения. Чтобы исключить влияние на Рр изменяющихся условий разделения, обычно сравнивают хроматографическое поведение исследуемого и заведомого моносахарида на одной и той же хроматограмме. [c.410]

За последние годы усовершенствована техника получения радиохроматограмм. Обычно для получения радиохроматограммы (т. е. отпечатка хроматограммы на фотобумаге или фотопленке) необходима экспозиция от 3 до 18 дней, в зависимости от активности и количества радиоактивного изотопа. С помощью специальных приборов, позволяющих записывать импульсы хроматограммы на бумагу, экспозиция может быть сокращена до 18 мин, а точность построения кривой значительно повышена. Радиоав-тография имеет большое значение при анализе бумажных хроматограмм, так как она исключает необходимость проявлять хроматограмму опрыскиванием бумаги проявителем. Если чувствительность обычного хроматографического анализа на бумаге находится в пределах 10 —10 г, то при помощи радиохроматографического метода можно производить анализ таких следовых количеств, как 10 — 10-20 2 [c.181]

Описано определение РОГ в присутствии других ионов с применением хроматографии на бумаге [873]. Для анализа применяют бумагу ватман № 1, пропитанную последовательно растворами РЬ (N03)2 и KJ. Проявителем служит раствор KJ. Белое пятно, полученное на высушенной хроматограмме (осадок фосфата РЬ), вырезают и анализируют. Определение РОГ возможно в присутствии NS-, С1-, Br-, NO3, СОГ, J-, JO3, СН3СОО-, В4ОГ, F-, SbaOj", К+, NH4, ОН , Н+, тартрата и цитрата. Мешают [c.101]

Основателем хроматографического метода Цветом в 1906—1910 гг. было отмечено, что в ряде случаев капиллярного анализа при получении хроматограмлг на бумаге из растворов пигментов происходит выпадение осадков пигментов в результате возникновения градиента концентрации спирта в растворителе. До указанных выше работ в 1885 г. была опубликована книга Рунге в виде альбома оригинальных бумажных хроматограмм, полученных нутем впитывания растворов солей в фильтровальную бумагу, предварительно пропитанную различными веш,ествами. К хемосорбционным реакциям можно отнести также многие реакции, проводимые в капельном и дробном анализе Тананаева. [c.124]

Разделение в БХ основано на том же принципе, что и в ТСХ, так как хроматографическая бумага может быть импрег-нирована твердыми адсорбентами. Разделение можно проводить по восходящему и нисходящему вариантам. По восходящему варианту полоска бумаги нижним краем опускается в растворитель, налитый на дно камеры. Поскольку в этом случае растворитель не поднимается выше чем на 20—22,5 см, эффективность разделения ограничена. При нисходящем способе растворитель помещают в верхней части камеры в специальном сосуде. Путь растворителя не ограничен он может даже стекать с нижнего края листа бумаги. Иногда используют вариант круговой хроматограммы, при котором на хроматограмме получают не пятна, а концентрические круги. Для получения такой хроматограммы из бумаги вырезают круг и в центр его подают пробу и растворитель. Методы качественного и количественного анализа БХ и ТСХ аналогичны, однако при локализации зон необходимо более тщательно подбирать проявляющие реактивы, поскольку хроматографическая бумага может содержать примеси. При методе БХ камера для разделения должна иметь несколько больший объем, чем при ТСХ. Хроматографическая бумага выпускается различных марок в зависимости от способа обработки, плотности и толщины. Сорта бумаги, обеспечивающие быстрое прохождение растворителя, сокращают время анализа, но дают нечеткое разделение обратное явление наблюдается для бумаг с медленным прохождением растворителя. [c.59]

Проявление хроматограммы. Первичную хроматограмму обрабатывают 0,05 н. раствором гидроксида натрия. При этом иодид свинца РЫг растворяется в гидроксиде натрия с образованием бесцветного плюмбита натрия Na2Pb02, остается светло-желтое кольцо иодида серебра Agi. При избытке щелочи оно постепенно чернеет, так как образуется оксид серебра Ag2U. Все эти операции занимают 10—15 мин. Поэтому получение осадочной хроматограммы на бумаге можно использовать в качестве проверки правильности результатов качественного анализа катионов второй группы. [c.245]

Главная особенность хроматографов серии Цвет-500М , определяющая их технический уровень и принадлежность к новому поколению хроматографической аппаратуры, состоит в использовании современных средств вычислительной техники для автоматизированной обработки хроматографической информации. При этом конечная цель анализа — получение аналитической информации непосредственно в виде концентраций анализируемых веществ — достигается инструментальными средствами и полностью упраздняется необходимость вручную обрабатывать хроматограмму, записываемую аналоговым регистратором (самопишущим потенциометром) на бумаге, или вручную обрабатывать значения параметров пиков, например площадей, измеряемых интегратором. [c.138]

Для получения хроматограммы работавшее маспо тщательно Перемешивают. Масло набирают в пипетку, две капли сбрасьшают в стакан, третью наносят на горизонтально закрепленную фильтровальную бумагу. Для каждой пробы снимают три хроматограммы. После анализа пипетку промывают бензином. Оценку хроматограмм проводят через 2...4 ч поспе нанесения капли. За это время масло впитывается в бумагу и растекается по ее порам, образуя серое или черное пятно. На хроматограмме различают три зоны (рис. 53). В центре пятна расположено ядро, занимающее площадь, на которой маспо растекалось по поверхности бумаги. Ядро окружено серой или черной зоной диффузии, очерченной нерастворимыми в масле продуктами. За предепы зоны диффузии растекается чистое маспо, которое окрашивает бумагу в жептый или коричневый цвет. [c.203]

Для анализа электрофореграммы разрезают на отрезки по 2 см, полисахариды с полученных отрезков элюируют водой, элюаты гидролизуют и углеводный состав гидролизатов определяют хроматографией на бумаге с растворителем пиридин— этилацетат—вода (1 5 5). Состав углеводов на хроматограммах, соответствующих отрезкам —6 электрофореграмм (рис. 26), дает возможность представитв распределение на электрофореграммах 4-0-метилглюкуроноарабоксилана и галактуроноарабогалактана. Наличие только двух пиков на электрофореграмме свидетельствует об однородности разделенных полисахаридов. [c.177]

Получение н анализ плоскостных хроматограмм. На полоске хроматографической бумаги или на тонком слое сорбенга проводят острым карандашом стартовую линию на расстоянии 1 см от нижнего края бумаги (пластинки). Пробу наносят микропипеткой на линию старта. Диаметр пятна [c.334]

В водяную баню для нагревания помещают круглодонную трехгорлую колбу на 500 мл, снабженную обратным холодильником с пропущенной через него мешалкой, термометром, капельной воронкой. Загружают 200 мл воды, 0,03 г диспергатора НФ и при размешивании прибавляют сернокислотный раствор 1-амн-ноантрахннон-2-карбоновой кислоты с такой скоростью, чтобы температура не поднималась выше 60 °С. Образуется суспензия красного цвета. Ее медленно прн размешнваннн охлаждают до 20 °С и прн 20—25°С добавляют по каплям 5,8 мл Вгг в течение 1 ч. Реакционную массу размешивают 3 ч при 20—25°С, затем нагревают в течение 2 ч до 55°С н выдерживают при 55— 60 °С 3—5 ч. Конец реакции определяют по данным хроматографического анализа. Для этого 0,5 мл реакционной массы отфильтровывают, осадок растворяют в 5 мл диметилформамида. Каплю полученного раствора наносят на круг хроматографической бумаги, пропитанной 10 %-ным раствором 1-бромнафталина в этаноле. Элюент —60% уксусная кислота. На хроматограмме должна быть видна красная полоса, соответствующая 1-амино-4-бромантрахинон-2-карбоновой кислоте, и должны отсутствовать или наблюдаться в виде следов оранжевая полоса (I полоса), соответствующая 1 амино-2,4-дибромантрахинону и красная (II полоса), соответствующая 1-аминоантрахинон-2-карбоновой кислоте. Если исходное соединение присутствует в значительном количестве, то выдержку продолжают еще I ч и отбирают пробу на конец реакции. [c.84]

Японская фирма Shimadzu специально для хроматографии выпускает два типа самопишущих микропроцессорных устройств обработки данных достаточно простое для рутинных анализов модели Хроматопак -RIB и более сложное с дисплеем модели Хроматопак -R2A . В модели -RIB предусмотрена печать на термочувствительной бумаге и запись хроматограмм на графопостроителе печать наименований пиков обработка до 339 пиков на хроматограмме линеаризация сигнала для нелинейных детекторов полностью автоматизированный анализ по временной программе и изменение параметров в ходе анализа измерение высоты, площади и времени удерживания пиков точная калибровка на основе получения коэффициентов чувствительности собственная диагностика неисправностей воспроизводимая обработка различных по форме пиков, в том числе узких (шириной до 0,2 с), плечевых , не полностью разделившихся, при сильном шуме и дрейфе нулевой линии воспроизводимая идентификация пиков по абсолютным или относительным временам удерживания вычисление количественного состава смесей методами нормализации, внутреннего стандарта, абсолютной и экспоненциальной калибровки исключение не представляющих интерес и отрицательных пиков повторение вычислений в любой момент времени и некоторые другие операции. [c.387]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология