Методики ионообменной хроматографии

Методика ионообменной хроматографии ароматических аминокислот разработана еще очень слабо. [c.125]

Методики ионообменной хроматографии [c.482]

Методика ионообменной хроматографии аминокислот мочи [210]. [c.217]

Ионообменная хроматография, так же как и адсорбционная, подразделяется в соответствии с методикой эксперимента на фронтальный анализ, элюентную и вытеснительную хроматографию. [c.116]

Правильный выбор сорбента и соответствующей элюирующей системы — это первый и наиболее важный этап решения поставленной задачи. Поэтому необходимо обстоятельно знать свойства всех типов используемых в ТСХ сорбентов. Выбрать оптимальную хроматографическую систему достаточно сложно, поскольку разделение методом ТСХ обычно совершается в результате сочетания различных механизмов, чаще всего адсорбции и распределения между фазами, а также ионного обмена или затрудненной диффузии (гель-хроматография). Однако, еслп условия выбраны правильно, один из механизмов разделения становится преобладающим. Если разделяемые соединения неполярны, следует создать условия, благоприятные для адсорбционной хроматографии (применение сорбента с большой адсорбционной способностью), а для разделения полярных (растворимых в воде) соединений следует использовать принципы, применяемые в жидко-жидкостной хроматографии. Наконец, при работе с ионогенными соединениями следует избрать методику ионообменной хроматографии. Очевидно, что налицо определенная аналогия с колоночной хроматографией. [c.97]

Разделение ионов. Методом элюентного анализа можно разделять ионы, используя их различную способность к полному обмену. Поскольку методика работы такая же, как в методе хроматографического разделения, этот метод называют ионообменной хроматографией. [c.250]

Методика распределительной хроматографии в колонках аналогична методике адсорбционной и ионообменной элюентной хроматографии вначале в колонку с носителем вводят небольшой объем раствора смеси компонентов, а затем промывают колонку подвижным растворителем. Фильтрат собирают отдельными порциями, анализируют в них содержание компонентов и строят график выходной кривой (кривой вымывания). [c.149]

Одно из достоинств тонкослойной ионообменной хроматографии состоит в том, что она является простым и доступным методом раннего обнаружения почти всех наследственных дефектов обмена аминокислот. Нами разработаны две методики для массовых испытаний. [c.253]

Последовательное и фракционное экстрагирования, занимающие среднее положение между простым экстрагированием и противоточным распределением, предпочтительны в тех случаях, когда хотят с небольшими затратами времени и труда добиться более эффективного разделения. Использование этого метода для количественного анализа возможно только, если известен качественный состав смеси. Так, например, в свое время был разработан метод определения низших жирных кислот в смеси, основанный на принципе последовательного экстрагирования и титровании отдельных фракций [145, 155]. В настоящее время, когда имеются гораздо более точные и быстрые методы, основанные на распределительной, газовой и ионообменной хроматографии, эта методика уже устарела. [c.405]

Обзор по анализу воды атомно-абсорбционным методом представлен в работе [719], приведены методики определения многих элементов. Рассмотрены прямые методы с различными способами атомизации, в том числе и пламенный вариант, а также методы с предварительным концентрированием, например упариванием и ионообменной хроматографией. [c.163]

Ясно, что в таких исследованиях метод колоночной хроматографии неприменим, тогда как тонкослойная хроматография — очень простая, быстрая и удобная процедура, при которой разделяемые вещества обнаруживаются достаточно легко она не требует дорогостоящей аппаратуры и применима для массовых испытаний. Правда, ее разрешающая способность значительно уступает колоночной ионообменной хроматографии. Несмотря на это, относительно молодая методика быстро распространяется во всех областях химии, и это не случайно. [c.243]

Во всех до сих пор разработанных методиках ионообменной тонкослойной хроматографии ограничиваются одномерным разделением. Это одно из преимуществ данного метода по сравнению с классическими методами тонкослойной хроматографии. Для получения однозначной и простой для оценки картины следует в двух местах пластинки (в виде точки или полосы) нанести соответствующие контрольные смеси. Это очень облегчает идентификацию, а если по какой-то причине хроматографическая картина отличается от ожидаемой, тогда с помощью контрольной смеси можно выяснить причину неполного разделения и определить состав образца [c.248]

Ионообменная хроматография имеет ряд достоинств, которые делают этот метод очень ценным для разделений в активационном анализе. Методика ионообменной хроматографии весьма проста и допускает частичную или даже полную автоматизацию процесса разделения, что уменьшает трудоемкость анализа и позволяет дистанционное управление в случае сильноактивных препаратов. При правильном выборе условий разделения в ионообменной хроматографии можно быстро получать разделяемые элементы в радиохимически чистом виде, причем в большинстве случаев может быть получено практически количественное выделение (>90%). [c.173]

Разделение сульфамидных препаратов, основанное на ионообменной хроматографии в комбинации с радиохимической методикой [779]. [c.271]

Чтобы предсказать хроматографическую подвижность элементов, нужно прежде всего знать константы обмена или коэффициенты распределения [22]. На основании этих характеристик можно также предсказать положения пиков при градиентном элюировании [23] и влияние на разделение степени сшитости ионообменной смолы [24]. Показано, например [24], что наилучшее разделение щелочных металлов достигается на предельно сшитых смолах (рис. 51.2). Для определения оптимальных условий можно использовать результаты ионообменной хроматографии на бумаге, однако это возможно лишь в том случае, если речь идет о разделении конкретной смеси на аналогичном ионите [25]. Наблюдаемые расхождения в результатах часто вызваны либо использованием различных методик -[26], либо наличием связующих компонентов в ионообменной бумаге [27]. [c.323]

Методом катионирования определяют фтор-ион в шлаках электропечей [19], в полимерах фтор- и бор-ионы — в свинцовом борфтористоводородном электролите [20] отделяют фтор-ион от сульфатов (пирогидролизом сульфаты отделяются трудно) [21], урана, железа, алюминия, никеля, хрома, других катионов и Р.З.Э. [22]. Фтор-ион в техническом бифториде калия [23], во фторорганических соединениях, в силикатах [24] (методика №61), в фосфатных рудах (методика № 86) и других материалах [25—30] определяют также методом ионообменной хроматографии. Иногда применяют катионит в экстракционном (экспрессном) варианте, для чего испытуемый раствор смешивают с катионитом в колбе, фильтруют и определяют фтористоводородную кислоту. Фосфат- и фтор-ионы разделяют на свежеприготовленной колонке из карбоната серебра, при этом фосфат-ион задерживается на колонке, а фтор-ион вымывается. [c.142]

Методика № 61 Анализ силикатов с применением ионообменной хроматографии [c.143]

Помимо рассмотренных случаев ионообменная хроматография часто используется в сочетании с другими методами разделения — главным образом с методом осаждения. Этот вариант обычно имеет тот недостаток, что разделение выполняется с введением больших количеств носителей (больше 5 мг). Поэтому методики разделения с применением ионообменной хроматографии оказываются длительными и требуют больших объемов растворов. [c.187]

Поскольку в данной главе рассматриваются в основном липофильные вешества в неводных растворах, то мы не будем особо останавливаться на методике хроматографии на бумаге (или ее более современного аналога, использующего стекла, покрытые целлюлозой), для нормальной и обращенной распределительной, ионообменной, ситовой хроматографии, а также на разделении неорганических ионов. Достаточно сказать, что описанные аппаратура и методика в общем применимы во всех методах хроматографии в тонком слое, которые различаются только механизмом разделения. Мы не намеревались дать обзор всех работ в этой области (см. список дополнительной литературы). Вместо этого мы опишем методику адсорбционной хроматографии в тонком слое, широко используемую в лаборатории авторов с 1961 г., и обсудим ее некоторые усовершенствования. [c.133]

Поскольку через ионообменную смолу в колонке в течение длительного времени пропускается относительно большой объем буферных растворов, то на смоле адсорбируются некоторые катионы металлов, которые не элюируются при обычной процедуре регенерации смолы. Это приводит к постепенному уменьшению обменной емкости смолы. Однако первоначальная емкость смолы может быть восстановлена по специально предписанной методике. При хроматографии на анионообменных смолах некоторые комплексы металлов, обнаруживаемые в следовых количествах в буферных растворах необратимо реагируют со смолой. Первоначальная емкость такого анионообменника не восстанавливается. [c.22]

Применение ионообменной хроматографии оказалось успешным для таких важных сравнительно низкомолекулярных белков, как лизоцим [123], )ибонуклеаза [60], цитохром С [83, 96], химотрипсиноген [61], инсулин 14] и папаин [73]. В каждом случае разделение производили на смоле R -50 в карбоксильной форме. Разделение смеси белков яичного белка на три компонента было произведено с помощью фронтального анализа на смоле дауэкс-50 [115, 116]. Одновременный электрофоретический анализ исходной альбуминовой фракции подтвердил присутствие трех основных компонентов. Бордман и Партридж [11—13] распространили ионообменную методику на разделение таких больших молекул, как СО-гемоглобин быка и СО-гемоглобин плода овцы. Денатурация была доведена до минимума тем, что работу проводили вблизи 0°. [c.331]

На примере системы железо — кобальт показана возможность применения методики, использующей одновременно приемы радиохимии и комплексообразовательной ионообменной хроматографии. [c.96]

По природе взаимодействия разделяемых веществ с твердой фазой различают адсорбционную, распределительную и ионообменную хроматографии. Адсорбционная хроматография основана на молекулярной адсорбции и подчиняется уравнению Лэнгмюра. Ионообменная хроматография определяется процессом ио1нообмена. В основе распределительной хроматографии лежит различие н коэффициентах распределения разделяемых веществ между двумя жидкими фазами. По методике проведения различают колоночную, хроматографию на бумаге и тонкослойную. Сорбция, иоиный обмен, распределение между фазами различного состава протекают непрерывно при последовательном многократном повторении. При колоночной хроматографии изучаемую смесь веществ в виде раствора (жидкая фаза) пропускают через колонку со слоем сорбента (твердая фаза). [c.254]

Если электрофорез и хроматографию на бумаге можно отнести к микропрепаративным методам, то метод разделения смеси пептидов с помощью ионообменной хроматографии следует, пожалуй, считать макропрепаративным. Его главное преимущество заключается в том, что он позволяет обрабатывать большие количества материала и получать несомненно большие выходы фракций. Применение при ионообменной хроматографии летучих буферов дает возможность избежать трудоемкой процедуры обессоливания, которая осложняла ранее предложенные методики [49, 92]. Большим достижением в области ионообменной хроматографии является введение сферических смол. Их применение способствует увеличению скорости потока фракционируемых веществ через колонку и значительно сокращает продолжительность препаративного разделения. Сферические смолы в автоматических аминокислотных анализаторах обеспечивают воспроизводимую сравнительную хроматографию пептидов с высокой разрешающей способностью, т. е. позволяют автоматически проводить анализ методом отпечатков пальцев . [c.38]

Составление методики количественного анализа возможно, если известен состав вещества, а также какие компоненты являются основными, а какие — примесями. Полуколичественную оценку содержания металлов и некоторых неметаллов можно провести методом эмиссионного спектрального анализа (см. гл. 6). Из хроматографических методов для качественного анализа наиболее подходят ионообменная хроматография и хроматография на бумаге. Однако эти методы пригодны лищь для анализа смесей, состоящих из небольшого числа компонентов, например, катионов одной-трех групп. Применение дробных реакций дает надежную информацию также в случае несложных смесей, кроме нескольких специфических реакций (на ионы аммония, железа). [c.198]

Р-римые П. можно осадить из водных р-ров смеишваю-щимися с водой орг. р-рителями (напр., этанолом, метанолом, ацетоном). Р-римость конкретного П. определяет методику выделения его из прир. объекта. Так, целлюлозу и хитин получают, отмывая подходящими реагентами все сопутствующие в-ва, тогда как прочие полисахариды вначале переводят в р-р и вьщеляют затем фракционным осаждением р-рителями, с помощью образования нерастворимых ко.мплексов или солей, ионообменной хроматографией и т.д. [c.22]

При кристаллизации образуется дигидрат в впде игл. Степень чистоты определяется биологическими методами. В начале неочищенное вещество содержит около 20% фолиевой кислоты [2], однако выход вещества в процессе очистки достаточно высок. Хатчингс и Мове [4] опубликовали обзор, посвященный химии фолиевой кислоты. В работе Гейнрпха [5] описана методика очистки фолиевой кислоты при помощи ионообменной хроматографии. [c.342]

В последнее время появилась возможность определять аминокислотный состав белков с помощью автоматических аминокислотных анализаторов. Когда в 1948 г. Мур и Стейн [551 в дополнение к классическим методам органической химии, а также манометрическому и бактериологическому анализу ввели ионообменную хроматографию, наступил поворотный момент в развитии химии аминокислот. В основу работы созданных сотрудниками Рокфеллеровского института современных автоматических аминокислотных анализаторов была положена ионообменная хроматография. Принцип работы этих приборов заключается в следующем. Исследуемый белок гидролизуют, затем гидролизат подвергают хроматографии на смоле типа дауэкс 50 х8 в Na-форме. Элюирование производят с помощью непрерывной подачи буферного раствора. Выходящий из колонки элюат попадает в пластмассовую ячейку особой формы, где он смешивается с раствором нингидрина. Подачу нингидрина осуществляет специальный насос, работающий синхронно с насосом, подающим буферный раствор на колонку. Затем смесь элюата с нингидрином проходит через тефлоновый капилляр, который погружен в кипящую баню. В этих условиях в растворах происходит нингидриновое окрашивание, интенсивность которого измеряется в проточной кювете спектрофотометрически. Поглощение света регистрируется самописцем. Применение сферических смол [80] позволило сократить время исследования одного образца примерно в четыре раза, а использование особых ячеек сделало вполне допустимыми для анализа очень малые количества исследуемого вещества — порядка 0,01—0,05 мкмоля [38]. Введение одноколоночной процедуры значительно упрощает метод [9, 29, 43, 60]. С помощью этой методики в одной и той же пробе можно определить кислые, нейтральные и основные аминокислоты, что не только экономит исследуемый материал, но и повышает точность и сокращает время исследования. Работая на стандартном аминокислотном анализаторе и пользуясь некоторыми модификациями известных методов, можно полностью закончить анализ одного вещества в течение 3 ч [91. [c.32]

Для разделения сложных смесей, содержащих вещества разных классов (основания, нуклеозиды, нуклеотиды и их поли-фосфаты, олигонуклеотиды, включая олигонуклеотиды, различающиеся порядком основании, и т. п.), с которыми имеют дело, например, при выделении кислоторастворнмой части клеток или тканей или при анализе ферментативных гидролизатов нуклеиновых кислот, применяют исключительно ионообменную хроматографию. В случае необходимости дальнейшее фракционирование проводят по многостадийной схеме, с использованием указанных выше методик. При этом наблюдаются те же закономерности, что и при анализе нуклеотидов (см. предыдущий раздел), поэтому в дальнейшем будет приведено лишь несколько примеров. [c.58]

Определение изотопови, прежде всего Y , связанного с распадом Sr , проводится довольно часто, поэтому для их определения известен ряд радиометрических методик, при которых не требуется отделять некоторые сопутствующие радиоактивные примеси. Так, присутствие а-излучателей не мешает счету -частиц на низкофоновой установке счетчиков Гейгера — Мюллера [1979], а при помощи сцинтилляционного счетчика с жидким сцинтиллятором можно определять изотопы Sr —У в присутствии К и с чувствительностью порядка 10" кюри [536]. В других случаях, когда требуется тщательная очистка от посторонних загрязнений, применяют осаждение иодата для отделения Zr [2083] и метод ионообменной хроматографии как для отделения органических веществ, щелочных, щелочноземельных и некоторых других двухвалентных металлов, например, в анализе урина [1755], так и для разделения самих рзэ [77]. Иногда по У определяют содержание Sr в различных объектах [1566]. [c.265]

Основные научные работы Мура, которые он проводил совместно с У. X. Стайном, посвящены исследованию строения белков. Они разрабатывали точные аналитические методы для определения аминокислотного состава белков. Развили (1951) метод ионообменной хроматографии, который применили для выделения и очистки рибонуклеазы. Благодаря сочетанию хроматографических методов анализа, разработанных Муром и Стайном, с предложенным ими фотометрическим нингидринным методом и их же автоматическим коллектором фракций они создали методику, позволяющую анализировать белковый гидролизат в течение двух недель. Применение синтетических ионообменных смол (сульфокатионитов) позволило им сократить (1950-е) это время до недели. Затем (1958) процесс ими был автоматизирован, а время анализа уменьшено до нескольких часов. Мур и Стайн установили [c.347]

Основными задачами препаративной хроматографии амино кислот являются разделение максимальных количеств материала, выделение чистых аминокислот и, наконец, разработка и использование предельно простых методик. В отличие от аналитической хроматографии здесь вполне допустимы те или иные потери материала. Наибольшей емкостью в отношении аминокислот обладают сорбенты, используемые в адсорбционной хроматографии. В той или иной форме этот метод используют для разделения аминокислот на колонке с активированным углем (в виде фронтального, элютивного или вытеснительного анализа). Разработка этого метода связана главным образом с именем А. Тизелиуса [86]. Таким методом удобно отделять ароматические аминокислоты [87, 88], однако по эффективности этот метод значительно уступает ионообменной хроматографии. [c.355]

Короче говоря, мы попытались ответить на вопросы - что, по-<1ему и как, - касающиеся методики и материалов, используемых в современной жидкостной хроматографии хроматография на бумаге и ионообменная хроматография здесь не рассматриваются. [c.12]

Более подробное описание процедуры вьщеления кислых и основных соединений нефтепродуктов с использованием ионообменной хроматографии приведено в работах Джевела [106, ПО] и Кисилова и Бодушин-ского [111, 112], которые уделяли много внимания как разработке методик выделения неуглеводородных соединений нефтепродуктов, так и широкому применению этих методик для исследования химического состава нефтепродуктов. [c.93]

Быстрые аналитическая и препаративная методики для разделения нефтепродуктов, кипящих при температурах выше 230°С, на насьш1енные, ароматические углеводороды, смолы и асфальтены (один из вариантов SARA-метода) [31] имеют продолжительность до 1-1,5 чв аналитическом варианте и до 4 ч в препаративном. Ускорение достигается в препаративном варианте за счет исключения ионообменной хроматографии, выделения всех смол на одной колонке и использовании Обратного элюирования дпя вьщеления углеводородов. [c.117]

Получение Re в реакциях W(p,n) и W(d,n) хорошо изучено — сняты ФВ, определены сечения и выход этих реакций, разработана методика радиохимического выделения радиорения без носителя из мишеней вольфрама. Большие количества Re в состоянии без носителя получают на сильноточных компактных протонных циклотронах (ток до 300 мкА) из термоустойчивых мишеней WO3 (Тпл = 1473 °С) и Жмет (Тпл = 3410 °С). Химические способы разделения W/Re основаны на принципах экстракции, ионообменной хроматографии, дистилляции. [c.352]

Кинетика обмена в ионообменной хроматографии аминокислот и пептидов сильно зависит от температуры. Воспроизводимый контроль температуры колонки требуется для того, чтобы получить воспроизводимые последовательность и время выхода пиков, необходимые для идентификации аминокислот или пептидов и для разделения близких по свойствам соединений. Эти контролируемые условия обычно достигаются путем циркулирования воды из термостата по рубашке колонки. Термостат снабжается контрольным термометром. Емкость термостата, мощность нагрева и скорость подачи воды насосом должны быть достаточными для поддержания температуры в рубашке колонки с точностью 0,5 °С в диапазоне 30—70 °С. Одной из тонкостей программирования температуры является скорость повышения температуры при переходе от одной температуры к другой, как это предписывается многими методиками анализа. В тех случаях, когда по методике для данного прибора требуется смена температуры, которая происходит в течение 20 мин, любой другой температурный градиент может привести к нежелательным результатам. Поэтому неудивительно, что некоторые методики не удается воспроизвести на сходных приборах, если режимы изменения температур не одинаковы. Целесообразно включать градиентное термостатирование в основную кoн tpyкцию анализатора. [c.28]