Чувствительность флуоресцентных реакций

Для облегчения сравнительной оценки чувствительности флуоресцентных реакций и цветных (колориметрических), для которых приведены лишь молярные коэффициенты погашения, перевод последних в определяемый минимум при заданных условиях измерения дан в табл. П-3. В ней приняты следующие условия атомный вес определяемого элемента около 100, его соотношение с реактивом в составе комплекса 1 1, измерение оптической плотности производится в кюветах с толщиной слоя 10 и 50 мм, минимальное надежное значение оптической плотности 0,02. [c.54]

Отмечены мало чувствительные флуоресцентные реакции бария с морином в спиртовом растворе едкого натра (желто-зеленая флуоресценция) [232], с куркумином, адсорбированным осадком кремнефторида бария (коричневое свечение) [234] и [c.143]

Было обнаружено , что таллий (I) дает весьма чувствительную флуоресцентную реакцию с родамином 6Ж- Это обстоятельство представляет несомненный интерес, так как открывает возможность флуориметрического определения таллия, минуя стадию его окисления. Оптимальные условия определения таллия с родамином 6Ж следующие реакция должна проводиться в среде 5 н. бромистоводородной или 15 н. серной кислоты в присутствии бромид-иона в количестве 0,5 мл 40%-ного раствора бромида калия на 10 мл анализируемого раствора. При объеме водной среды 10 мл объем органической среды (бензола)--4 мл. Чувствительность реакции—0,005 мкг в 1 мл бензольного экстракта. [c.307]

Такое резкое увеличение интенсивности флуоресценции комплексов при замораживании растворов позволило увеличить чувствительность флуоресцентной реакции определения ниобия с 0,05 до 0,005 мкг в 1 мл раствора. [c.8]

Благодаря высокой чувствительности флуоресцентных реакций, с их помощью можно решать задачи микрохимического открытия ионов при низкой их концентрации в малых количествах вещества. [c.10]

Это позволяет поднять чувствительность флуоресцентной реакции на порядок — от 0,05 до 0,005 мкг ъ 1 мл раствора. С применением низких температур расширяются возможности использования фосфоресценции комплексных соединений. При этом практически полностью исключается свечение холостой пробы, вызванное свечением анализируемого раствора, кюветы и отраженным светом источника возбуждения. В качестве примера можно привести метод определения бериллия по фосфоресценции его комплекса с дибензоилметаном. [c.12]

Цель первой части работы — обнаружение на молекуле ЛДГ участков, способных к взаимодействию с аурамином О демонстрация чувствительности флуоресцентных характеристик связанного аурамина О к взаимодействию ЛДГ с коферментом, субстратом и ингибитором реакции определение значения константы диссоциации (/Сд) комплекса НАД—ЛДГ по флуоресценции аурамина О. [c.340]

Почти исключительная особенность системы иО —ЫаР давать яркую желто-зеленую флуоресценцию под действием ультрафиолетового излучения делает флуоресцентный метод настолько избирательным, что в ряде случаев предварительного отделения примесей не требуется. Это особенно удобно для быстрых качественных анализов и, конечно, для количественных определений, которые подробно описываются в гл. IV. Хорошая избирательность флуоресцентных реакций сочетается с высокой чувствительностью, что делает метод полезным при анализе сбросных и природных вод и объектов с низким содержанием урана [239, 262, 364, 747, 8641. [c.35]

Родамины. Определение ртути основано на том, что ассоциат аниона бромидного комплекса ртути с катионом родамина С экстрагируется органическими растворителями и флуоресцирует оранжевым цветом [1181. Максимум в спектре возбуждения флуоресценции экстракта находится при 560 нм, максимум излучения — около 590 нм. Флуоресценция экстракта приобретает яркость после полного разделения фаз и устойчива в течение 2 — 3 час [1171. Наилучшие условия для проведения флуоресцентной реакции ртути с родамином С 4,5 N кислота и 0,1 N бромид, позволяющие определять ртуть при ее содержании >0,5 мка ъ Ъ мл экстракта. С повышением концентрации бромида чувствительность этой реакции снижается. [c.116]

Из описанных в литературе многочисленных реакций обнаружения цветная реакция ван Урка (реактив № 48) является наиболее специфичной, а флуоресцентная реакция Прохазки (реактив № 64) — наиболее чувствительной. Для получения оптимальной окраски в случае реакции ван Урка следует точно соблюдать приведенные условия (см. № 48). Окончательную обработку парами царской водки следует осуществлять осторожно уже следов царской водки достаточно для усиления окраски, при избытке слой желтеет. [c.300]

Чувствительность некоторых флуоресцентных реакций [c.51]

Очень высокой чувствительностью характеризуются некоторые флуоресцентные реакции, выполняемые сухим путем — образование кристаллофосфоров (табл. 10). [c.52]

Введен в рациональный ассортимент органических реактивов для опреде ления неорганических ионов для люминесцентного определения бора. Флуоресцентная реакция бора с бензоином отличается высокой чувствительностью, достаточно селективна и протекает в умеренно кислой и щелочной средах, а не в концентрированных кислотах, как это характерно для большинства других реактивов на бор. [c.61]

Флуоресцентная реакция германия с антраценовым синим несколько специфичнее аналогичной цветной реакции (стр. 296) и позволяет открывать германий в растворах с отношением А Ge 2. Чувствительность флуоресцентного и колориметрического методов обнаружения германия антраценовым синим примерно одинакова. [c.298]

Однако в случае недостаточной избирательности флуоресцентной реакции высокая ее чувствительность может создать затруднения при анализе веществ, так как увеличивается вероятность помех со стороны присутствующих в растворе посторонних примесей — в сторону как завышения, так и занижения результатов определения. [c.24]

Следует четко указывать, к какому объему раствора отнесено содержание вещества, соответствующее нижнему и верхнему пределам реакции. Это может быть или исходная аликвотная часть раствора пробы, которую берут для выполнения анализа, или конечный объем готового для измерения раствора, полученного после прибавления всех реактивов при экстракционных определениях можно еще различать конечный объем экстракта или водной фазы, из которой он извлечен. Для характеристики флуоресцентных реакций большое значение имеет концентрация определяемого вещества в том конечном объеме (водной или неводной фазы), в котором производят флуориметрирование содержания определяемого вещества, отнесенные к этому объему, можно назвать эффективными пределами реакции. Для оценки практических возможностей способа и выбора навески, разбавления и т. д. важно знать количества искомого вещества, доступные определению в том наибольшем объеме раствора анализируемой пробы (ее аликвотной части), который допустим ходом определения.Содержания определяемого вещества, отнесенные к этому (исходному) объему, можно считать за реальные пределы реакции. Чувствительность конкретной методики (ее нижний реальный предел) зависит от воспроизводимости показаний холостого опыта, проведенного через весь ход анализа. Его суммарная погрешность слагается из всех ошибок определения при разложении пробы, в промежуточных процессах разделения и на конечной стадии измерения. Поэтому реальную чувствительность любой методики определения следует устанавливать для каждого хода анализа применительно к данным конкретным объектам. [c.58]

Описаны также фотоколориметрирование галлия с бутиловым эфиром родамина С [143] и флуоресцентная реакция с родамином 6Ж, более чувствительная, но менее избирательная, чем с родамином С [167]. По опубликованным до настоящего времени данным, оба эти реактива не имеют практических преимуществ перед родамином С. [c.156]

Подобно многим цветным реактивам на бор, взаимодействующим в тех же условиях и с германием, больщинство из описанных флуоресцентных реакций последнего проводят в среде, принятой для определения бора (концентрированные кислоты, щелочной спиртовой раствор). Однако предложенные способы его открытия по своей чувствительности значительно уступают реакциям бора. Краткие данные по опубликованным флуоресцентным реактивам на германий приведены в табл. 1У-9. При [c.156]

В табл. 8 приведены окрашенные соединения бериллия с наф-тазарином, алканнином, 1,4,5,8-тетраоксиантрахиноном, хиниза-рином, хинизаринсульфокислотой, флуоресцирующие при облучении ультрафиолетовым светом. Чувствительность флуоресцентной реакции этих соединений выше чувствительности цветной реакции их с бериллием. [c.44]

Ряд представителей группы о,о -диоксиазокрасителей (соло-хромовые красители) [64, 325, 366, 391, 407, 712, 988, 1005, 1006, 1247, 1426] и триоксиазокрасителей [325, 576] дает с солями галлия чувствительные флуоресцентные реакции. В табл. 11 приведены реакции галлия с этими красителями, чувствительность открытия галлия по наблюдению оранжево-красного свечения при облучении аналитической кварцевой лампой. Реакции выполняют в присутствии буферных смесей, pH 3—4, Как видно из табл. 11, наиболее пригоден для открытия галлия по флуоресценции реагент 3. В присутствии спирта с солями галлия получается более яркая флуоресценция. Реагенты 6 и 8 реагируют с солями галлйя с переменой окраски, причем характерно, что А1, а также 1п, Мп, N1, Со, Ре, Т1, Сг (III) и 2п не дают подобного эффекта. Изменение же окраски вызывается многими катионами так, с красителями 4 и 6 реагируют соли Сг (III), N1, Со, Т[, 2п и Ре (II), с красителем 8 — соли тех же элементов, кроме хрома. Поэтому перед проведением реакции галлий должен быть отделен от сопутствующих металлов. [c.35]

В связи с весьма высокой чувствительностью флуоресцентных реакций и низким содержанием определяемых веществ при работе необходимо принимать меры предосторожности, которые рекомендуются при всех определениях следов веществ (например, при помощи дитизона) [40, 50, 93 и др.]. Особенное внимание надо уделять воспроизводимости условий определения и мерам, ведущим к снижению величины холостого опыта. Как правило, для всех анализируемых и эталонных растворов надо использовать одни и те же реактивы и готовить все флуоримет-рируемые растворы одновременно. Все реактивы должны быть возможно более высокой чистоты и предварительно проверены на отсутствие в них определяемых элементов, флуоресцирующих загрязнений и примесей, вызывающих тущение в случае надобности их следует подвергать дополнительной очистке. В число контролируемых реактивов следует включить и дистиллированную воду, которая, кроме неорганических, может содержать и следы органических веществ. [c.25]

Во флуориметрах с источником возбуждения, имеющим непрерывный спектр испускания, в качестве осветителя используют низковольтную лампу накаливания. Монохроматизирую-щими устройствами служат скрещенные светофильтры с границей скрещения, соответствующей спектрам возбуждения (поглощения) и излучения определяемого вещества. Первичный светофильтр (стеклянный или жидкостный) имеет широкук> область спектрального пропускания, соответствующую полосе поглощения флуориметрируемого раствора вторичный светофильтр поглощает пропущенный первичным светофильтром лучистый поток (рассеянный частями прибора и раствором) и по возможности полно пропускает свет, излучаемый определяемым веществом. Такие приборы особенно пригодны для флуориметрирования веществ, слабо поглощающих ультрафиолетовые излучения, но имеющих максимум возбуждения в желтой, оранжевой и красной областях спектра и флуоресцирующих соответственно в его более длинноволновой части. Для регистрации флуоресценции таких веществ следует применять фотоумножители с катодом, область чувствительности которого сдвинута далее к красному концу спектра, чем в приборах с ультрафиолетовыми осветителями. Как правило, при таком возбуждении яркость свечения одних и тех же растворов выше, чем при ультрафиолетовом возбуждении вследствие этого в ряде случаев можно достигнуть увеличения чувствительности флуоресцентных реакций и регистрировать фототок чувствительным микроамперметром без усиления. [c.62]

Визуальную чувствительность флуоресцентной реакции можно определить подобно тому, как определяют колориметрическую чувствительность. Именно, в слое раствора, имеющем единицу по- перечного сечения 1 см , перпендикулярно к направлению наблюдения, находят наименьщее количество элемента (в у), которого достаточно, чтобы дать заметную флуоресценцию или же чуть более сильную, чем в слепом опыте. Конечно, надо указать условия наблюдения, особенно интенсивность и длину волны возбуждающего света. Иногда интенсивность ультрафиолетового возбуждающего света имеет второстепенное значение, так как уже слепой опыт может давать заметную флуоресценцию, вызываемую реактивом или растворителем (органические жидкости — хлороформ, спирт и ацетон — обычно слабо флуоресцируют). Так как растворители могут флуоресцировать, то чувствительность флуоресцентных реакций, в отличие от чувствительности цветных реакций, может не зависеть от наблюдаемой длины слоя раствора. Практически этот недостаток не имеет большого значения, так как длина наблюдаемого слоя обьтчно не превышает [c.87]

Многие окрашенные соединения бериллия флуоресцируют при облучении ультрафиолетовым светом методы обнаружения, основанные на флуоресцентных реакциях, отличаются очень вы-сокой чувствительностью. [c.37]

Флуоресцентные реакции. Для качественного обнаружения кальция используются некоторые флуоресцентные реакции. Кальций может быть открыт по желто-зеленой флуоресценции с м о -р и н о м, оранжево-красной скуркумином и по флуоресценции оксихинолината кальция в присутствии аммиака [984]. Последняя реакция отличается высокой чувствительностью (< 0,15 мкг Са в капле мешает кальций, находяш ийся на фильтровальной бумаге). Реакция кальция с оксихинолином находит широкое применение в хроматографии на бумаге. [c.25]

Эти реакции отличаются в общем несколько более высокой чувствительностью, чем цветные реакции. Полагают, что по флуоресценции удается обнаруживать до 10" г вещества в 1 мл раствора , т. е. при концентрации около 10" моль1л. Известные в настоящее время флуоресцентные реакции, хотя и отличаются значительной чувствительностью, но столь низкие концентрации с их помощью обнаруживать не удается (табл. 9). [c.51]

Этот метод заслуживает большого внимания, так как обладает высокой чувствительностью и при определенных условиях селективностью. Флуоресцентные реакции осуществляются как в растворах, так и в твердых веществах — перлах , представляющих собой прессованные смеси или плавы анализируемого вещества с каким-либо наполнителем . Для возбуждеюш флуоресценции пользуются ультрафиолетовыми лучами от лабораторной ртутной лампы. Приведем несколько примеров. [c.338]

Преимущество люминесцентных химических реакций перед обычными — их исключительная чувствительность люминесценцию можно наблюдать при очень малых концентрациях флуоресцирующего вещества, и это, как уже выше указывалось, специфически характерно для явления флуоресценции, а следовательно, и для ириемов, основанных на его использовании. Кроме того, включение флуоресцентных реакций в число аналитических увеличивает ассортимент последних в некоторых случаях, когда реакция на химический индивидуум отсутствует, заполнение пробела является существенным. [c.67]

Большое число работ носвя1цепо определению а л ю м и н и я. Здесь мы имеем типичный пример флуоресцентной реакции, претерпевшей сложную эволюцию были опробованы различные реагенты, уточнены условия проведения реакции, проверены мешающие факторы и в результате разработаны методы, оказавшиеся достаточно специфичными, чувствительными и точными для качественного и количественного определения следов алюминия в бериллии [24, 59], в металлическом магнии [114], морской воде [60], сталях и сплавах [61—63], в пиве [64]. Одной из первых была описана реакция алюминия с морином, известная в литературе иод названием реакции Гоппельшредера [65]. Реакция проводится в уксуснокислом растворе при рН = 3,0—4,5, и так н е широко применяется, как капельная. В разных работах чувствительность реакции с морином оценивается но-разному и зависит она от качества реактива. Гото считает возможным с нрименением морина открыть в капле раствора 0,01 у А1, [16], в то время как еще в 1901 г. М. С. Цвет определял алюминий морином в количестве 0,0001у в капле раствора [66]. В условиях проведения реакции на алюминий морин флуоресцирует и в присутствии Zn, Ве, Са, Зс [29]. Количественное определение алюминия морином приводится в работе [67]. [c.171]

Следует отметить, что, к сожалению, в судебной химии еще не нашлк применения многие качественные флуоресцентные реакции, обладающие достаточной специфичностью и большой чувствительностью. [c.329]

Одно из непрерывно расширяющихся практических применений люминофоров — использование их для флуориметрического определения весьма малых количеств неорганических веществ. Фотолю-минесцентный (флуоресцентный) анализ характеризуется относит тельной простотой требуемой аппаратуры, очень высокой чувствительностью и применяется для определения микрокомпонентов веществ особой чистоты, проб минерального сырья и продуктов его технологической переработки, металлов и сплавов при анализе почв, окружающей среды, биологических и многих других веществ [1—7]. За последнее десятилетие по люминесцентному анализу неорганических веществ и связанным с ним вопросам опубликовано около 1500 работ. Флуоресцентные реакции того или иного типа предложены для определения почти всех элементов периодической системы Д. И. Менделеева около 50 из них можно определять или открывать при помощи люминофоров. Чувствительность количественного определения около двух десятков элементов достигает сотых и даже тысячных долей микрограмма в конечном объеме анализируемого раствора [8, 9]. [c.276]

По-видимому, наиболее чувствительный флуоресцентный реактив на галлий — 2,2, 4 -триокси-5-хлор-1,1 -азобензол-3-сульфокис-лота, предложенный Е. А. Божевольновым, А. М. Лукиным и М. Н. Градинарской В водном растворе определяется 0,01 мкг галлия в 5 мл, а если продукт реакции извлекать изоамиловым спиртом при соотношении объемов 1 10, то в 5 мл изоамилового спирта можно открыть 0,0005 мкг галлия. Определение проводят при рн 1,7—3,5. Алюминий допустим даже в стократном по отношению к содержанию галлия количестве, но в этом случае допу стимьш интервал pH сужается до 1,7—2,2. [c.753]

Количественный флуориметрический анализ (флуоримет-рия ) является очень чувствительным методом химического анализа и поэтому особенно эффективен для определения весьма низких содержаний искомых веществ. В его основе чаще всего лежат флуоресцентные реакции — химические реакции определяемого вещества с органическими реактивами, приводящие к образованию флуоресцирующих продуктов под воздействием соответствующего внещнего облучения такие продукты сами становятся источниками света, но с прекращением этого облучения их свечение гаснет. Разложение и подготовку проб к определению производят обычным химическим путем, яркость флуоресценции конечных растворов служит мерой содержания в них искомого вещества. [c.3]

Практическим примером большей чувствительности флуоресцентного открытия по сравнению с цветным эффектом, который дает один и тот же реагент, могут служить следующие реакции. Окраска раствора бериллиевого комплекса с 5,8-дихлорхини-зарином позволяет открывать его при концентрации , 0мкг1мл, а флуоресценция того же раствора при ультрафиолетовом облучении— до содержаний бериллия 0,01 мкг1мл [43] для бензольного экстракта галлия с родамином С такие границы при коли- [c.23]

В связи с отсутствием единообразной ф уориметрической аппаратуры при установлении эффективных пределов флуоресцентных реакций необходимо точно оговаривать условия флуориметрирования— тип и мощность источника возбуждения, характеристику первичного и вторичного светофильтров, спектральную и общую чувствительность приемника света. За нижний предел целесообразно принимать некоторое определенное превышение яркости флуоресценции над флуктуациями холостого опыта, за верхний — концентрацию, при которой начинается отклонение от флуориметрической пропорциональности, т. е. искривление калибровочного графика Ф=/(С). [c.56]

Рассмотренные далее флуоресцентные реакции для качественного открытия и количественного определения элементов расположены в алфавитном порядке по наименованиям последних. Для каждого из них приведены по возможности все флуоресцентные реактивы, описанные в литературе. Все значения чувствительности реакций и концентрационных пределов, рекомендованных авторами работ для выполнения количественных определений, пересчитаны в единую размерность мкг1мл. В отдельных случаях между действительными значениями чувствительности тех или иных реакций может быть некоторое несоответствие, вызванное тем, что одни авторы относят определяемое количество элемента к объему исходной аликвотной части испытуемого раствора, а другие — к конечному объему водной фазы или экстракта. Другая причина различий в значении чувствительности одной и той же реакции может заключаться в неодинаковых условиях измерения яркости флуоресценции — визуальная оценка, применение упрощенных приборов или усовершенствованной высокочувствительной электронной аппаратуры. В некоторых случаях большое значение имеет различие [c.137]

Основные данные по флуоресцентным реакциям с пороговой чувствительностью не выше 100 мкг1мл, описанным для качественного открытия элементов, и краткая характеристика реак- [c.138]

Ряд реактивов, первоначально описанных для качественного открытия алюминия, затем был предложен и для его количественного определения (в их числе и З-окси-2-нафтойная кислота, позволяющая путем капельной реакции открывать 0,0002 мкг А1) [158]. Такие реактивы сведены в табл. IV-2. Морин применен для определения алюминия в воде [367]. При использовании 8-оксихинальдина для анализа окиси тория влияние мешающих элементов устраняют путем экстракции теноилтрифтора-цетоном и введения соответствующих комплексообразователей [228]. Известная флуоресцентная реакция алюминия с 8-оксихи-нолином применена для его прямого определения в воде [288], в бронзе [229], в вольфраме и его окислах [204], в металлических магнии [151] и уране [152], в солях висмута (после удаления последнего электролизом на ртутном катоде) [153] и в реактивных кислотах [320]. Реакция с понтахром сине-черным Р (эриохром сине-черным В) [360] использована при анализе сталей, бронз и минералов [355], морской воды [337], сульфида цинка (то же, после отделения мешающих примесей электролизом на ртутном катоде) [204], металлических магния [257, 259], германия [119] и сурьмы [123]. Отмечено применение для тех же целей понтахром фиолетового SW [327]. Салицилал-2-аминофенол, предложенный ранее для качественных целей [242], был использован для анализа реактивов высокой степени чистоты [35, 36, 76]. Указанная в табл. IV-2 чувствительность достигнута при условии тщательной очистки используемых буферных растворов. Для устранения помех со стороны больших количеств железа при анализе сталей предложено осаждать его избытком едкого натра в присутствии пергидроля [295], а при анализе силикатов — восстанавливать до двухвалентного состояния с последующей маскировкой 2,2 -дипиридилом [354] в обоих случаях определение алюминия производят путем его фотометри-рования в виде 8-оксихинолината. [c.143]

Флуоресцентные реакции ряда 2,2-диоксиазосоединений с элементами группы алюминия изучали многие исследователи [93, 107, 128, 197, 312, 360, 365]. Кроме качественных реакций для открытия галлия, условия которых были описаны в ряде работ (табл. IV-7), некоторые из этих соединений были применены и для его количественного определения (табл. IV-8). Реакция понтахром сине-черного (кислотного хром сине-чер-ного) с галлием оказалась значительно менее чувствительной, чем с алюминием [197, 198]. При использовании солохрома красного и черного для отделения галлия от мешающих элементов применена его эфирная экстракция [270] или ионный обмен [268]. Сульфонафтолазорезорцин [120, 128] применен для определения галлия в полупроводниковом кремнии и цинке высокой чистоты [121] и в металлическом германии и его двуокиси германий удаляют путем выпаривания с соляной кислотой, но для устранения потерь галлия во время этой операции в раствор вводят хлорид натрия [119]. Значительно чувствительнее суль-фонафтолазорезорцина синтезированный в ИРЕА реактив лю-могаллион, позволяющий определять галлий в присутствии 100-кратных количеств алюминия [31, 107] при замораживании жидким азотом яркость флуоресценции этого комплекса возрастает в 10 раз [34]. Салицилал-2-аминофенол предложен для открытия галлия в глиноземе, бокситах, силикатах и сфалерите для устранения помех со стороны до 1000-кратных количеств алюминия в раствор вводят фторид или фтороборат натрия, а от больших количеств индия, цинка и окрашенных ионов галлий отделяют посредством эфирной экстракции [308]. К последнему реактиву близки производные резорцилового альдегида [247], формилгидразон которого описан для открытия галлия на бумажных хроматограммах [248]. [c.152]

Из оксифлавонов в качестве реактивов на галлий были исследованы морин [39, 163, 192], кверцетин [2, 94, 162, 163], дати-сцетин и рутил [162, 163]. Установлены состав и константы нестойкости галлиевых комплексов, некоторые фотометрические характеристики их растворов [162, 163, 164]. Приведенное авторами значение чувствительности при количественном определении галлия с морином является наибольшим из всех флуоресцентных реакций этого элемента но определению мешают многие ионы [39, 162]. Для повышения избирательности способа после предварительной эфирной экстракции галлия предложено извлекать хлороформом его тройной комплекс с морином и купферроном [195]. [c.152]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология