Проба при препаративном разделении

Анализ с помощью плоскостной (тонкослойной, бумажной) Ш X технически осуществляется почти так же, как и препаративное разделение, и отличается от последнего лишь малым объемом разделяемой пробы. Пятна разделенных ГАС выявляются сравнительно просто визуальным наблюдением их свечения при УФ облучении или окрашивании после опрыскивания слоя специфическими реагентами [267, 268]. В аналитических работах метод ТСХ чаще всего применяется для качественной идентификации отдельных групп соединений по характеру окрашивания (свечения) и параметрам удерживания (величинам И ). Получение точных количественных данных о составе разделяемой смеси с помощью ТСХ обычно связано с определенными трудностями. Некоторые перспективы улучшения разделения и облегчения количественного анализа кроются в применении уже упоминавшейся высокоэффективной круговой тонкослойной ЖХ и сканирующих устройств, фотометрирующих интенсивность спектров рассеяния или флуоресценции разделенных соединений [156]. [c.34]

Пробы наносят в виде точки или полоски длиной 6—7 мм при помощи пипетки на 0,1 мл, специально приготовленного капилляра или микрошприца. Для препаративного разделения смесей вещество пробы наносят сплошной линией (капля к капле). Отмечают стартовую линию. Пробу наносят осторожным прикосновением пипетки так, чтобы [c.134]

Количество образца, которое можно ввести на колонку для препаративного разделения, зависит от многих факторов, и для каждого случая должно определяться экспериментально, предпочтительно с использованием аналитической колонки и растворов образца разной концентрации. В самом общем виде можно сказать, что масса образца, которую можно ввести, составляет от 0,1 до 1 мг на 1 г сорбента при отсутствии заметной перегрузки колонки пробой (снижение эффективности колонки менее чем в 2 раза). Как правило, препаративные разделения проводят при максимально возможной перегрузке колонки пробой, поэтому чем больше а для разделяемых компонентов, тем больше можно перегрузить колонку пробой и тем соответственно больше получить разделенного вещества за препаративный цикл. При разделении простых смесей, когда работают с большой перегрузкой, эффективность препаративных колонок с мелкими узко дисперсными сорбентами по основным пикам быстро падает, но по пикам примесей остается высокой, что позволяет отделять их более четко. При работе с большой перегрузкой эффективность по основным пикам для малоэффективных колонок и колонок средней и высокой эффективности близка. Однако по мере усложнения задачи (более сложные смеси, меньше а) допустимая перегрузка уменьшается и малоэффективные колонки становятся непригодными,, они перестают обеспечивать разделение и получение чистых компонентов даже при отсутствии перегрузки. [c.61]

Обшая проблема всех препаративных разделений — это невозможность создания очень большой колонки при сохранении ее эффективности. Вследствие этого всегда допускается определенная перегрузка колонки пробой и условия разделения оптимизируются эмпирически. [c.232]

При проведении препаративных разделений, как мы видели, необходимы сорбенты с высокими значениями а, что позволяет в определенных пределах перегружать колонку пробой. Значения , превышающие 10, были недавно обнаружены для некоторых комбинаций сор-бент/сорбат/растворитель. Примеры подобных систем приведены в табл. 10.1. [c.240]

Серьёзное расхождение наблюдается в распределении групп ароматических углеводородов. Так, например, при анализе гудрона западносибирской нефти методом ВНИИ НП содержание группы средних ароматических углеводородов — 28,2 тяжелых — 14,6%, по предлагаемому методу 6,7 и 33,9% соответственно. Вто же время суммарное содержание ароматических углеводородов по обоим методам — 56,0 и 52,2% — разнится незначительно. Это явление связано с различиями в способах элюирования к идентификации хроматографических групп. Чтобы иметь некоторое представление о том, как идет хроматографическое разделение по предложенному методу, было осуществлено препаративное разделение гудрона самотлорской нефти. Разделение проводилось на силикагеле АСК (фракция 0,25—0,5 мм), прокаленном при 250 С в течение 6 ч, с отбором 60 фракций по 30 мл. Проба растворялась в бензоле в соотношении 1 4. Отношение проба силикагель равно 1 100. Подвижной фазой служила смесь растворителей изооктан, дихлорэтан, диизоамиловый эфир, этпл-ацетат, этиловый спирт в соотношении 8 0, 1 0, 1 0, 1 0,4 соответственно, как и в аналитическом варианте. [c.12]

Общая конструктивная схема колонки включает в себя корпус, фильтры и наконечники (рис. 5.11). Корпус представляет собой цилиндрическую трубку из нержавеющей стали, стекла или полимерных материалов он служит емкостью для слоя сорбента. Верхний и нижний концы корпуса закрывают фильтры. Чаще всего это диски из пористой нержавеющей стали, по диаметру соответствующие наружному диаметру колонки. Диаметр пор фильтров 0,5—2 мкм, их назначение — удерживать слой сорбента в колонке. Кроме того, фильтр на входе в колонку задерживает механические примеси из подвижной фазы и образцов. Наконечники герметизируют всю колонку и служат для подключения капиллярных трубок, соединяющих колонку с дозатором и детектором. Конструкция наконечников должна быть такой, чтобы свести к минимуму внеколоночное размывание пробы и разделенных компонентов. Наконечник хорошей конструкции так формирует поток на входе в колонку, что поперечное размывание и отрицательное влияние стеночного эффекта сводятся к минимуму. Фактически в колонке работает при этом только центральная часть сорбента. Такие колонки характеризуются высокой эффективностью. Однако при указанной конструкции колонки сорбент будет легко перегружаться по мере увеличения массы вводимой пробы, и поэтому наконечники препаративных колонок призваны решать прямо противоположную задачу — распределять пробу по возможно большей части поперечного сечения. В настоящее время чаще всего применяются колонки трех типов цельнометаллические, разборные со сменными разделительными патронами полимерные для работы в режиме радиального сжатия. [c.197]

Большинство химиков-органиков склонны подразделять хроматографические методы на аналитические и препаративные. Методы, предназначенные для аналитических целей, обычно требуют очень небольших количеств анализируемых материалов. Попытки переносить разработанные аналитические методики на иное оборудование, позволяющее работать с большими пробами, необходимыми для препаративного разделения, следует предпринимать с большой осторожностью. Препаративное разделение целесообразно проводить с достаточно большими пробами с тем, чтобы выделенные продукты можно было использовать для нескольких химических и спектральных анализов или провести с-ними какие-либо химические реакции. [c.432]

Колоночная хроматография. Колоночную хроматографию можно непосредственно использовать для препаративного разделения и очистки веществ, поскольку обычно бывает нетрудно, по крайней мере в принципе, выбрать размер колонок и количество сорбента таким образом, чтобы они соответствовали объему подлежащей разделению пробы. Однако следует помнить, что такой метод может потребовать больших затрат времени, достигающих нескольких часов или даже дней . Прежде чем проводить колоночную хроматографию, необходимо выяснить, как ведет себя данная проба в условиях тонкослойной хроматографии (разд. 3.2). [c.433]

Газовая хроматография была описана в разд. 3.4 в качестве метода анализа и проверки чистоты исследуемых соединений. В настоящем разделе описание метода газовой хроматографии будет расширено и распространено на препаративное разделение веществ. В том случае, если исследуемая проба выдерживает условия газохроматографического разделения, этот метод оказывается одним из наиболее простых, быстрых и полезных аналитических методов, которые могут быть применены для указанной цели. [c.457]

В стремлении облегчить и ускорить проведение препаративного разделения не следует применять чрезмерно большие пробы. Когда величина пробы достигает такого значения, при котором происходит перегрузка хроматографической колонки, пики, регистрируемые самописцем хроматографа, резко искажаются и теряют свою нормальную острую или колоколообразную форму. [c.458]

На рис. 17-2 показано, как используют микропипетку для нанесения пятна раствора пробы на тонкослойную хроматографическую пластинку. Максимальное количество материала для одного пятна составляет около 200 мкг при толщине слоя адсорбента 0,25 мм. Для препаративных разделений пробу либо наносят в виде линии, состоящей из близко лежащих друг к другу точек, либо в виде узкой полосы около нижнего края пластинки при помощи специального прибора. В этом случае можно нанести до 1 мг пробы на 1 см длины полосы при толщине слоя [c.562]

Препаративное разделение веществ связано с использованием больших проб. Известны установки, позволяющие за один цикл переработать около 500 г сырья. Однако увеличение пробы не может быть беспредельным, так как оно приводит к значительному ухудшению четкости разделения и, следовательно, к получению недостаточно чистых продуктов. [c.299]

В рассмотренной выше классификации фазовое отношение и проницаемость увеличиваются в порядке перечисления, а оптимальная температура колонки и масса пробы снижаются. В том же ряду возрастает сложность изготовления колонок. Для препаративного разделения, сочетания с другими методами, разделения низкокипящих веществ, а также при необходимости использования более простой аппаратуры автор рекомендует колонки, указанные в начале списка. Для более сложных случаев разделения или экспресс-анализа следует предпочесть колонки, перечисленные в конце списка. Автор приводит также [c.121]

Влияние величины пробы на процесс разделения явилось предметом многочисленных исследований [54—56]. К сожалению, в большинстве из них мерой эффективности препаративного разделения полагалась величина ВЭТТ, откуда следовало, что величину пробы нужно ограничивать некоторым максимальным объемом, так как в противном случае происходит ухудшение работы колонки. Подробное обсуждение этого вопроса приводят Сойер и Пернелл в работе [57] в этой же работе они получили следующее выражение для максимального объема пробы (жидкой) [c.28]

Другой подход к этому вопросу исследовал де Клерк [59]. Он ввел объем пробы в основное выражение для зависимости эффективности препаративного разделения от параметров колонки с помощью эквивалентного гауссовского входного пика (ЭГП). ЭГП определяется как гауссовское распределение концентрации, максимальное значение и площадь которого те же, что и для действительного распределения концентрации образца. Рассуждения при Этом таковы. Для вычислений по формуле (1.6) требуется мера величины полн. [c.29]

Приготовляют пластинки специально для препаративных целей, т. е. размером не менее 20X50 см, и покрывают слоем сорбента толщиной до 1,5—3 мм. Это обстоятельство позволяет увеличить пробы, подлежащие разделению, до 20—25 мг вещества на 1 см длины стартовой линии. Хроматографирование по данному способу проводят методами восходящей или нисходящей хроматографии. [c.128]

В последние несколько десятилетий развиты более эффективные методы разделения, и аналитические методы разделения, основанные на дистилляции, часто заменялись новыми методами. Однако дистилляхщя все еще играет роль в препаративных разделениях, включая операции очистки пробы. [c.192]

Точно определенный диапазон эксклюзии между мертвым объемом и суммой мертвого объема и объема пор Vo + Vp обеспечивает малые времена удерживания, определяемые коэффициентом распределения К. Получаются узкие пики, что позволяет проводить их правильную колююственную обработку. Поскольку, как правило, проба не вступает ни в какие химические или физические взаимодействия, ее компоненты элюируются без потерь. Следовательно, данный метод пригоден для препаративного разделения. В то же время, проба не влияет на разделяющую колонку, как это происходит в других видах жидкостной хроматографии. [c.292]

В первых сериях опытов по препаративному разделению [10] Пиркл использовал колонку размером 2 х 30 дюймов (51 х 760 мм). Загрузка колонки была достаточно высокой, в пределах 1—8 г. Для сорбатов с а > 1,4 наблюдалось практически количественное разделение образцов массой в несколько грамм. Был создан также прибор для непрерывного разделения методом ЖХ в режиме повторяющегося ввода пробы, что позволило в некоторых случаях достигнуть производительности разделения 0,9 г/ч. Впоследствии масштабы разделения были увеличены еще больше [11]. Это позволило разделить за один проход 50 г рацемического метилового эфира Ы-(2-нафтил)ала-нина на большой препаративной колонке с 13 кг хирального сорбента. [c.232]

В-третьих, при более высоких концентрациях образца, используемых в препаративпой ЖХ, он может выпасть в осадок в насосе, узле ввода пробы, трубопроводах или в голове колонки, как только вводимый раствор станет достаточно разбав-ленны.м подвижной фазой. Это может потребовать демонтажа узлов системы и (или) перепаковки части или всей препаративной ЖХ-колонки, если образец нельзя будет растворить in situ. Для того чтобы избежать этих проблем, исследуйте, как влияет на раствор образца разбавление подвижной фазой, с помощью пробного эксперимента до проведения препаративного разделения. [c.102]

Особенности препаративного разделения соотношение силикагель-проба— 200 1, фракции легкой и средней ароматики, как и фракции смол, соединялись в одну. [c.75]

Пики этих веществ иа хроматограмме разделены довольно плохо. Заштрихованные лло. щаци соответствуют частям разделяемых компонентов, выделенным в чистом виде-Часть пробы, соответствующая центральной зоне хроматограммы, подвергается разделению повторно. При этом в последующих циклах величина разделяемой в колонке пробы снижается, что приводит к улучшению достигаемого разделения. При проведении препаративных разделений методом жидкостной хроматографии высокого давления такая методика оказывается особенно полезной. 1 — отбор чистого компонента Б 2—отбор чистого компонента А 5 — часть пробы, подлежащая повторному разделению. [c.457]

Колонки ДЛЯ газовой хроматографии могут быть капиллярными и наполненными . Капиллярные колонки представляют собой длинные тонкие трубки, содержащие только одну неподвижную фазу. Наполненные колонки имеют больший диаметр. Их заполняют сорбентом, полученным путем нанесения неподвижной фазы на инертный твердый носитель (например, измельченный огнеупорный кирпич). Аналитические колонки могут иметь длину от 10—15 см до 1—2 км. Наиболее часто применяют колонки длиной от 1,5 до 3—4 м. Для проведения препаративного разделения во избежание чрезмерно больших значений времени удерживания обычно предпочитают колонки умеренной длины (1,5—3,5 м). Хотя существуют приборы, на которых можно работать с колонками очень большого диаметра, обычно удобнее применять для препаративного разделения приборы, снабженные детектором по теплопроводности и имеющие колонки диаметром от 6 до 9 мм. Такие колонки достаточно удобны как для аналитической, так и для препаративной работы. В том случае, если газовый хроматограф имеет детектор, разрушающий пробу (например, пламенноионизационный), то в систему коммуникаций прибора включают делители потока, направляющие меньшую часть пробы к детектору, а остальное — в систему сбора выделенных фракций. [c.458]

Для препаративного разделения веществ и сбора разделенных фракций особенно полезной является жидкостная хроматография высокого разрешения. Этот процесс превосходит традиционные варианты газовой и жидкостной хроматографии по скорости разделения и удобству работы. Кроме того, при использовании этого метода снижается возможность разрушения пробы, так как она не подвергается воздействию высоких температур. Типичный прибор для препаративной жидкостной хроматографии высокого разрешения показан на рис. 7.27. [c.470]

Препаративное разделение проводят в колонках на тех же носителях, что и при тонкослойной хроматографии постоянно отбирают пробы на коллекторе для хроматографии, содержание вещества в фракциях определяют фотоколориметрически или спектрофотометрически (стр. 280). Применяют жидкостной коллектор (рис. 27), ХКОВ и хккв. [c.277]

Предложен метод, находящийся на стыке дистилляции и хроматографии -- хрома-дистилляция. Разделяемая смесь вводится в трубку с наполнителем (стеклянными или металлическими шариками) или в капиллярную колонку и при пропускании газа-носителя на заднем фронте жидкости происходит испарение. Для обеспечения конденсации на переднем фронте на слое создают неподвижное температурное поле с отрицательным градиентом. Возможно осуществление и изотермического варианта — в этом случае перед нанесением смеси вводится компонент более летучий, чем все компоненты смеси. Хромадистилляция может использоваться как для препаративного разделения и очистки веществ, так и для анализа получения кривых разгонки нефтяных фракций. Преимущества этого метода по сравнению с обычной ректификацией — меньший объем пробы ( 0,1 мл) и более четкое разделение. [c.29]

При работе методом распределительной хроматографии слои дополнительно пропитывают лииофильными или полярными нелетучими веществами. Пробы анализируемых веществ от 0,1 до 50 мкг наносят на пластинку в виде растворов в подходящем растворителе. Пробы наносят в виде точки или иногда в виде полоски длиной 6—7 мм, а для препаративного разделения смеси — в виде сплошной линии. [c.117]

Для решения этгсх вопросов в НИИМСК сконструирован автоматический препаративный хроматограф. Прибор был использован для разделения газовых смесей. Хроматограф работает циклически. В течение одного автоматического цикла осуществляются следующие операции вливается измерительная схема гея и задается проба на разделение [c.212]

Понятие линейная емкость иллюстрирует рис. 4. При вводе образцз в количестве, меньшем 10 г г коэффициент А не зависит от размера пробы. При размере пробы более 10" г г" К начинает резко уменьшаться. При вводе образца, равного о,1 > снижается на 0,1 К, т, е. на 10% от значения К. Размер пробы 0о,х при этом значении X считается предельным для данного количества адсорбента и может быть принят как оптимальный в случае препаративного разделения. Для аналитических целей целесообразнее вводить пробу менее 0о,1 [c.16]

Выбор размера колонки обусловлен той задачей, которая ставится перед разделением. Если необходимо получить фракции дая дальнейшего исследования или осуществить препаративное разделение с целью получения молекулярно-массового распределения на неоткалиброванной колонке или фракций дая построения калибровочной кривой, используют колонки большого размера, диаметром 8—12 мм и дайной 600—4000 мм. Все более широкое применение находит в последнее время аналитическая ЭХ, где проводят разделение небольшой пробы на высокоэффективных небольших колонках, заполненных микрогелями типа д-стирагелей. Эти колонки используют в обычных жидкостных хроматографах, снабженных детекторами, насосом дая подачи растворителя, дозирующими устройствами. В этом случае работают на небольших колонках диаметром 6-7 мм и дайной 200-300 мм. [c.75]

На рис. VIII, 13 приведена хроматограмма препаративного разделения семикомпонентной углеводородной смеси, выполненного на хроматографе Aerograph модели А-700 фирмы Varian с колонкой длиной 3 м, внутренним диаметром 9,5 мм, заполненной 30% силиконового масла на носителе, при программировании температуры от 70 до 130 °С. Продолжительность разделения составляла 21 мин при объеме жидкой пробы 1 мл. На этом же приборе осуществляли препаративное разделение изомеров. Разделение транс- и г мс-циклодо-деценов проведено на колонке длиной 6 м, внутренним диаметром 9,5 мм в качестве неподвижной жидкости применяли эфир диэти-ленгликоля и янтарной кислоты. Объем пробы составлял 0,1 мл. [c.282]

Вопросы взятия пробы, обогащения, разделения, разложения и т. д. в микроанализе решаются иначе, чем в макроанализе, и требуют специально видоизмененной аппаратуры и техники. Вместе с тем открытие искомого вещества нередко сводится к микросинтезу. Поэтому в книге дано описание аппаратуры, приопоооблений и посуды, предложенных не только для капельного анализа, но и для препаративной микрохимии вообще. Знакомство с аппаратурой и техникой препаративной микрохимии полезно для аналитика также и потому, что ему довольно часто приходится очищать или синтезировать малые количества ценных или редко встречающихся реактивов. [c.30]

В препаративной хроматографии используют пробы сравнительно больших величин, поэтому важное значение имеют эффекты, связанные с вводом проб в колонку. Основные вопросы здесь таковы 1) что происходит при вводе пробы в колонку, 2) каково влияние формы (концентрационного профиля) и величины пробы на эффективность препаративного разделения и 3) какова роль концентрации вводимой пробы. [c.27]