Хроматография на бумаге бумаге

В распределительной хроматографии на бумаге разделение веществ происходит вследствие различия в распределении между двумя жидкими фазами, одна из которых подвижна (как правило, смесь органических растворителей), а другая — неподвижна и представляет собой воду, находящуюся в волокнах хроматографической бумаги. [c.212]

Если оба компонента смеси растворимы в воде или нерастворимы в ней, пытаются осуществить разделение, используя различную растворимость их в метиловом спирте (методика та же, что и при применении воды). Хорошие результаты и в этом случае может дать применение хроматографии в незакрепленном тонком слое (см. стр. 31). В качестве адсорбента используют силикагель. Растворитель подбирают эмпирически, как это описано выше для случая, когда в качестве адсорбента применяется окись алюминия. Можно также применять хроматографию на бумаге (см. стр. 36). [c.244]

Разновидностью распределительной хроматографии является хроматография на бумаге, широко используемая в биохимических лабораториях, в том числе клинических, для разделения пептидов, аминокислот и других веществ (рис. 1.4). В качестве стационарной фазы при этом служит вода, адсорбированная целлюлозными цепями фильтровальной бумаги. Образец помещают на одном конце бумажной полосы, этим же концом бумагу погружают в подходящую смесь органических растворителей (например, бутанол-уксусная кислота-вода в определенных соотношениях). При движении растворителя по бумаге благодаря силе капиллярности происходит разделение компонентов смеси. Проявленную хроматограмму высушивают, а местоположение каждого из разделяемых веществ определяют химическими или физико-химическими методами. [c.28]

Прибор для проведения хроматографии на бумаге показан на рис. 27. На полоску бумаги наносят каплю водного раствора, после чего подвешивают полоску на крючок внутри пробирки, погрузив узкий конец бумаги в слой органического растворителя (например, бутилового спирта). Впитываясь бумагой, растворитель поднимается вверх, причем каждый из компонентов исследуемой смеси [c.66]

Хорошие результаты и в этом случае может дать применение хроматографии в незакрепленном тонком слое (см. стр. 26). В качестве адсорбента используют силикагель. Растворитель подбирают эмпирически, как это описано выше для случая, когда в качестве адсорбента применяется окись алюминия. Можно также применять хроматографию на бумаге (см. стр. 29). [c.130]

Коэффициент распределения вещества зависит от его растворимости в подвижном растворителе и от адсорбции его на целлюлозе. Механизм разделения смеси веществ с помощью хроматографии на бумаге заключается в следующем. На пути движения растворителя по бумаге помещают смесь веществ, подлежащих разделению. Растворитель, достигнув участка бумаги, на котором находится смесь веществ, начинает экстрагировать отдельные вещества и передвигать их по бумаге с различной скоростью. При движении по бумаге вещества группируются по скорости их движения, образуя ряд отдельных групп, каждая из которых содержит одно или несколько веществ. Величина скорости движения веществ по бумаге обусловлена величиной равнодействующей двух противоположно направленных сил силы сродства вещества к растворителю (растворимость) и силы адсорбции вещества на набухшей целлюлозе. Чем выше растворимость данного вещества в растворителе и чем быстрее передвигается растворитель по бумаге, тем больше сила, двигающая вещество в направлении движения растворителя. Сила адсорбции вещества на целлюлозе тормозит это движение. Величина и конфигурация молекул передвигаемых веществ оказывает влияние на скорость движения вещества и его отделение от других веществ. Коэффициенты распределения веществ различны при употреблении различных растворителей, поэтому для хроматографического разделения смесей различных веществ необходимо выбирать растворитель, обеспечивающий наиболее полное разделение веществ. [c.73]

В том случае, когда необходимо при помощи хроматографии на бумаге идентифицировать -аминоспирты, удаление относительно большого количества солей представляет определенные трудности. Удачное решение этой задачи было предложено Рисом. В системе фенол (70 г) — вода (30 мл) (к которой добавлено 5 о по объему раствора аммиака с уд. весом 0,880) аминоспирты движутся с фронтом растворителя, оставляя на некотором расстоянии позади себя видимое пятно солей. Восходящее хроматографирование в феноле (на высоту 6 см) оказывается достаточным бумагу затем высушивают при 45° и отрезают зону, содержащую соль. После этого на листе бумаги можно провести хроматографирование -аминоспиртов. [c.204]

Количественный анализ. Успешное использование качественного анализа методом хроматографии на бумаге поставило вопрос о возможности разработки количественной хроматографии неорганических веществ. Количественный анализ можно в принципе проводить двумя способами. После разделения смеси анализ проводят или на бумаге, или же после элюирования пятен с бумаги соответствующим растворителем. [c.90]

Хроматография на бумаге. Исключительно большой интерес представляет целлюлоза в виде фильтровальной бумаги, и ее свойства широко изучались в течение последних лет. Термин хроматография на бумаге применяется теперь для обозначения всех процессов хроматографического разделения на бумаге, независимо от механизма разделения. В это понятие включается также и распределительная хроматография на бумаге (см. ниже). Техника хроматографии иа бумаге в применении к красителям представляет собой в основном усовершенствованный метод капиллярного анализа Шенбейна. Иногда для разделения смешанного красителя на ряд концентрических зон, в каждой из которых располагается индивидуальный краситель, достаточно нанести на фильтровальную бумагу несколько капель воды. Еще в 1893 г. Патерсон получил таким образом для продажного красителя Яркого черного Е прекрасно выраженный капиллярный спектр из пурпурно-черного, оранжевого, зеленого и желтого колец. Он измерил также капиллярные скорости и показал, что у красителей с сульфогруппами в молекуле, например у Кислотного фуксина, ббльшие скорости, чем у основных красителей, например у Фуксина. Гранди описал схему идентификации красителей на окрашенной бумаге, основанную на последовательных экстракциях кипящей водой, этиловым спиртом и аммиаком для разделения кислотных, основных и прямых красителей. Вслед за тем индивидуальные красители выделялись капиллярным методом с помощью промокательной бумаги или ацетатного шелка. Капиллярные явления, характерные для растворов и золей красителей, были исследованы Гарнером. По высоте капиллярного подъема R раствора красителя на фильтровальной бумаге, выраженной в процентах к высоте подъема чистого растворителя, он [c.1508]

По разделению и определению производных аминокислот методом ГЖХ проведено сравнительно мало работ, несмотря на очевидные преимущества этого метода. В настоящее время широко применяют методы хроматографии на бумаге и ионного обмена, но они не имеют достоинств, присущих методу ГЖХ, таких, как быстрота, доступность автоматизации процесса или возможность разделения близких по свойствам компонентов. Так, для разделения лейцинов методом хроматографии на бумаге необходимы специальные растворители, а полный анализ гидролизата белка. методом ионного обмена, по Муру и Штейну, занимает 22 час и требует специального оборудования, применяемого в основном только для данного метода. Тех же результатов [c.528]

Процесс хроматографии на бумаге сводится к следующему. Из фильтровальной бумаги вырезается узкая длинная полоска, один конец которой сужен в виде языка. На некотором расстоянии от этого конца полоски наносится маленькая капля раствора, содержащего вещество для хроматографии. Бумажная полоска подвешивается в закрытом сосуде, насыщенном парами подвижного растворителя, и опускается суженным концом в чашечку с растворителем. Воздушно-сухая бумага содержит около 25% воды, которая служит неподвижной фазой. Растворитель поднимается по бумажной полоске в силу капиллярности, вместе с ним перемещаются вещества, нанесенные на бумагу, в соответствии со своим коэффициентом распределения между подвижным растворителем и водой. Когда растворитель пройдет определенное расстояние по полоске, бумагу высушивают и тем или иным методом определяют положение пятен компонентов. При хроматографии на бумаге главной характеристикой для установления вещества пятен является величина — коэффициент распределения, т. е. отношение скорости движения данного вешества к скорости движения растворителя. [c.240]

Хроматография на бумаге. Хроматография на бумаге — это метод разделения близко родственных смесей полярных веществ. Смесь, которую надо разделить, растворяют в смеси двух частично смешивающихся растворителей, причем каждый из них насыщен относительно другого. Примером подходящей смеси может быть феиол, насыщенный водой. Образующуюся смесь пропускают затем через целлюлозу либо путем стекания под действием силы тяжести в колонке, либо посредством капиллярных сил в листе бумаги. Часто берут обычную фильтровальную бумагу, содержащую адсорбированный на ее поверхности слой воды. Этот водный слой создает неподвижную фазу, а растворенные вещества претерпевают бесчисленное множество разделений между водной фазой и подвижной фазой при ее движении. Компоненты растворенной смеси обладают различной растворимостью в этих двух фазах и, следовательно, расходуют разное количество времени, перемещаясь в неподвижной и подвижной фазах. В результате этого каждый компонент движется вдоль бумаги с разной скоростью. Таким образом, этот процесс является скорее не многократной адсорбцией, а непрерывной жидко-жидкостной экстракцией. [c.155]

Аппаратура для хроматографии на бумаге (БХ) практически аналогична используемой в ТСХ. В простейшем варианте разделение проводят в сосуде с крышкой, к которой можно прикрепить проволоку или зажим для закрепления бумажной ленты. Простые устройства для проведения восходящей и нисходящей хроматографии схематически изображены на рис. 1.19. При отсутствии значительных колебаний температуры контроль этого параметра обычно не проводят. Полезным приспособлением в камере для разделения может служить конструкция для размещения листа бумаги. Она выполнена таким образом, чтобы при насыщении камеры бумага не касалась элюента, а по достижении насыщения можно было, не открывая камеры, подавать растворители к хроматограмме и перемещать бумагу. Так же как и в ТСХ, камера для разделения содержит всю хроматографическую систему, за исключением детектора и регистратора. [c.79]

Хроматография на бумаге в настоящее время утратила то значение, какое она имела в 40—60-х гг., поскольку из многих практически важных областей анализа ее вытеснили более точные, воспроизводимые и высокочувствительные методы. Хроматография на бумаге до сих пор остается эффективным средством разделения неизвестных многокомпонентных смесей и широко используется в лабораториях, где отсутствует дорогостоящее оборудование для газовой хроматографии и спектрофотометрии. Вследствие этого бумажную хроматографию применяют для важных исследований в химии почвы, в том числе для исследования пути разложения органических продуктов, группового предварительного определения остатков пестицидов в почве, для разделения и определения следов удобрений в экстрактах из почв и растений. К тому же на примере бумажной хроматографии удобно знакомить студентов с теорией хроматографии, используя оборудование, легко доступное для любой учебной лаборатории. [c.340]

Значительно реже, чем ТСХ, используется в нефтяном анализе хроматография на бумаге. Имеются лишь редкие сообщения о ее использовании для разделения нефтяных кислот, аминов, аминокислот, фенолов и других полярных веществ [157, 158], хотя в исс.тедованиях биохимических объектов этот метод приносит неоценимую пользу. [c.20]

В египетской нефти с помощью хроматографии на бумаге обнаружен р-нафтол [6541. [c.106]

Нисходящая хроматография на бумаге, импрегнированной погружением в 30% раствор формалина в метаноле. [c.139]

ХРОМАТОГРАФИЯ НА БУМАГЕ (бумажная хроматогра фия, БХ), основана па различии в скорости перемещения компонентов анализируемой смеси по бумаге в потоке р-рителя соответств. состава. Хроматограммой в этом случае наз. картину расположения хроматографич. зон на бумаге после завершения разделения. Каплю анализируемого р-ра (1—10 мкл) наносят на спец. бумагу, по к-рой под действием капиллярных и гравитац. сил перемещается р-ритель. Эксперимент проводят обычно в герметичных сосудах, как правило стеклянных. Бумага м. б. инертным носителем неподвижной фазы (напр., в распределит, и осадочной БХ) либо активной неподвижной фазой (в адсорбц. и ионообменной БХ). [c.668]

Количественное определение сахаров с применением хроматографии на бумаге включает в себя следующие основные операции а) фиксацию растительного материала б) экстракцию сахяров и очистку вытяжки от белков и других примесей в) распределительную хроматографию сахаров на бумаге г) элюцию сахаров с бумаги д) определение их содержания в элюатах. [c.227]

Хроматографическое разделение на бумаге обычно протекает значительно медленнее, чем на пластинке при тонкослойной хроматографии, а сам метод, как правило, не столь универсален, как тонкослойная хроматография, поскольку возможные вариации неподвижной фазы гораздо более ограничены. Нельзя также использовать для определения многие коррозирующие реактивы, которые обычно применяют, когда сорбентом служит нанесенный на стеклянную пластинку неорганический материал. Тем не менее хроматография на бумаге остается полезным методом, и некоторые весьма эффективные разделения, которые первоначально были осуществлены с использованием бумаги, не удавалось успешно перенести а тонкослойную пластинку. Для полуколичествен-ной и количественной оценки значительно легче и эффективнее вырезать нужную площадь бумаги и элюировать разделенный компонент, чем оолностью снять слой порошка для [c.97]

Титановый желтый разных фирм или даже партий одной и той же фирмы имеет различную чувствительность к магнию [567, 772, 962, 1261]. Брэдфильд [567] исследовал разные партии титанового желтого методами химического анализа, спектрофотометрии и хроматографии на бумаге. Все испытанные партии показывали два максимума поглощения — при 330 и 405 нм. Максимум при 330 нм соответствует желтому флуоресцирующему компоненту с Л/ == 0,55—0,65 при применении в хроматографии па бумаге смеси фенола, этанола и воды в качестве растворителя. Максимум при 405 нм обусловлен присутствием нефлуоресцирующего компонента с Rf = 0,28—0,35, взаимодействующего с Mg (ОН)а. Относительные количества этих двух компонентов в различных партиях реагента меняются. Этим объясняется неодинаковая чувстви- [c.113]

Ряд работ посвящен анализу смесей фосфатов методом хроматографии на бумаге с последующим фотометрическим определением (после их гидролиза до ортофосфатов) в виде синего фосфорномолибденового комплекса. В качестве растворителя применяют смесь диоксана, воды, трихлоруксусной кислоты и концентрированного раствора аммиака, для восстановления фосфоромолибдата на бумаге — раствор 1-амино-2-нафтол-4-сульфокислоты, Na2S03 и NaH Og в разбавленном растворе NH4OH [898]. [c.101]

С. И. Бурмистров показал, что метод хроматографии на бумаге пригоден для идентификации ариламинов, получающихся при восстановлении азокрасителей. На основании идентификации аминов можно определить состав исходных азокрасителей. На бумаге можно достигнуть полного разделения двух компонентных смесей некоторых ароматических аминов, нанося раствор смеси (полученный экстрагированием водно-щелочного раствора, образующегося после восстановления азокрасителя, эфиром, бензолом или хлороформом) на бумагу, обработанную парами соляной, муравьиной или уксусной кислоты и проявляя хроматограмму несколькими каплями бензола. Амины располагаются на бумаге, обработанной кислотами, в порядке, зависящем от их основности, причем наиболее основной амин остается в центре. При последующей обработке хроматограммы растворами нитрита натрия и а-нафтола в центре хроматограммы появляется окрашенная полос- [c.317]

В тонкослойной хроматографии [171] неподвижную фазу (обычно неорганический сорбент) при помош,и связующего закрепляют в виде равномерного тонкого слоя на гладкой плоской поверхности, например на пластинке из стекла или пластика. Методика анализа очень напоминает хроматографию на бумаге. Образцы наносят в виде пятен на некотором расстоянии от одного конца пластинки, который затем погружают в сосуд с промывным раствором. Последний поднимается вверх по неподвижной фазе за счет ее капиллярности и перемещает пятна с различной скоростью. В тонкослойной хроматографии также можно применять двумерный метод. Главное преимущество тонкослойной хроматй-графии перед хроматографией на бумаге заключается в большей скорости миграции и меньшей продолжительности процесса разделения. В ионообменной тонкослойной хроматографии можно работать с любым ионообменником в качестве неподвижной фазы. [c.337]

В тонкослойной хроматографии неподвижная фаза расположена не в виде колонки, а распределена на поверхности. - Этот метод впервые предложил Шрайбер в СССР, но в Германии о стал применяться после появления работ Шталя. Следует заметить, что хроматография иа бумаге, которая собственно яв. 1яегся, частным случаем тонкослойной хроматографии, еще до открытия. последней получила в западных странах значительное применение [c.96]

Пенициллины и близкие вещества. При помощи хроматографии на бумаге изучали, во-первых, те превращения, которые пе-нкциллины претерпевают в клетках чувствительных микроорганизмов, и, во-вторых, инактивацию пенициллинов и близких веществ устойчивы.ми к ним микроорганизмами. В первом случае клетки чувствительного микроорганизма (использовали золотистый стафилококк) обрабатывали радиоактивным пенициллином [546]. При экстракции этих клеток раствором лаурилсульфоната натрия (а также цри помощи других методов выделения) был извлечен комплекс пенициллина с неидентифицированными соединениями, причем хроматографией на бумаге показано, что во всех случаях выделены одни и те же вещества. При обработке комплекса щелочами (pH 9,5—10,5) получена пенициллоиновая кислота, которую удалось идентифицировать хроматографией и электрофорезом на бумаге. [c.56]

Что касается подробностей метода хроматографии на бумаге, то широкое распространение получил способ, предложенный Меткафом и Марчем [72]. Он заключается в пропитке бумаги 5%-ным раствором силикона в петролейном эфире обработанная таким образом бумага представляет собой неполярную фазу, в то время как элюент (верхний слой смеси хлороформа, этилового спирта и воды в соотношении 10 10 6) служит полярной фазой Эта система называется хроматографией с обращением фаз , так как в обычных условиях бумага является полярной фазой. В более новой системе с обращением фаз [95] используется бумага, пропитанная смесью фенилцеллозольва с ацетоном в соотношении 1 10 или 1 20, либо в смеси целлозольва, пропиленгликоля и ацетона в соотношении 1 1 10 или 1 1 20. Элюентом служит либо я-гексан — хлороформ— ацетонитрил (50 5 6), либо н-гексан — бензол — ацетонитрил (50 5 6). [c.414]

В литературе еще не описаны системы, в которых с помощью хроматографии на бумаге можно было бы разделить все 16 динуклеозидмонофосфатов (д-ХфУ) однако, как это видно из фиг. 7 и 8, изомеры типа д-ЦфА н д-АфЦ и некоторые другие разделить все н<е удалось [42]. Для разделения в одном направлении использовали растворитель Хочкисс [29] (насыщенный водой бутанол в атмосфере аммиака). В такой системе динуклеозидмонофосфаты движутся очень медленно и тем не менее при этом происходит разделение изомеров типа д-Хф и д-УфХ. На фиг. 7 показано разделение д-ТфЦ и д-ЦфТ после 6-дневного хроматографирования растворнтель пропускали таким образом, что он стекал с нижнего края бумаги. (При этом рекомендуется время от времени проверять положение на хроматограмме быстро движущегося компонента). На фиг. 8 показано разделение изомеров д-АфГ и д-ГфА после пропускания растворителя в течение 15 дней. [c.21]

В последнее время в качестве носителя для неподвижного растворителя вместо колонки используют полоски или листы фильтровальной бумаги, не содержащей минеральных примесей. В этом случае каплю испытуемого раствора, например смесь растворов солей железа (П1) и кобальта, наносят на край полоски бумаги. Бумагу подвешивают в закрытой камере (рис. 19), опустив ее край с нанесенной на него каплей испытуемого раствора в сосуд с подвижным растворителем, например с я-бутиловым спиртом. Под-вижный растворитель, перемещаясь по бумаге, смачивает ее. При этом каждое содержащееся в анализируемой смеси вещество с присущей ему скоростью перемещается в том же направлении, что и растворитель. По окончании разделения ионов бумагу высушивают и затем опрыскивают реактивом, в данном случае раствором К4 1Ре(СЫ)вК который образует окрашенные соединения с разделяемыми веществами (синее—с ионами железа, зеленое—с ионами кобальта). Образующиеся при этсм зоны в виде окрашенных пятен позволяют установить наличие отдельных компонентов (рис. 20). Такой вид распределительной хроматографии называют бумажной хроматографией. [c.143]

В первой стадии исследования пептид должен быть полностью гидролизован, а природа образующихся при этом аминокислот должна быть определена при помощи хроматографии на бумаге. Затем по результатам количественного анализа аминокислот устанавливается приблизительная формула пептида, от которой в случае пептидов с короткой цепью особой точности е требуется в данном случае можно воспользоваться полуколиче-ствешюй хроматографией на бумаге, дающей точность +10%. Однако во всех других случаях следует пользотаться наиболее точными методами, применяемыми в анализе белков. В качестве примера можно указать на применение Пирсом и Дю Виньо [388] [c.157]

Метод круговой хроматографии на бумаге, который применяли Теббенс с сотр. [5], был развит Руттером [10, И]. К центру круга фильтровальной бумаги диаметром 15 см присоединяли бумажный фитиль и эфирный экстракт объемом 3—5 мкл наносили на бумагу в точку, где фитиль касался листа. Бумагу и элюент помещали в чашку Петри. Время разделения равнялось приблизительно 4 ч. [c.182]

Техника хроматографии на бумаге состоит в следующем. Каплю раствора исследуемой смеси наносят на бумагу и высушивают. Затем бумагу помещают в закрытый сосуд, в котором она непрерывно смачивается растворителем. Этот растворитель равномерно движется по бумаге в одном направлении, при этом вещества, входящие в состав исследуемой смеси, перемещаются по бумаге в том же направлении с различной скоростью, образуя отдельные зоны или пятна. Для получеЕшя хороших результатов при хроматографировании на бумаге необходимо соблюдать следующие условия [c.79]

Таким путем удается добиться и разделения сахаров. Хроматография на бумаге была применена для качественного анализа редуцирующих сахаров в таких разнообразных материалах,. как яблочный сок, яичный белок и кровь [49, 216]. Для локализации положения отдельных сахаров на бумаге был применен аммиачный раствор окиси серебра, хотя в более поздней работе указывается, что флуоресценция, появляющаяся после конденсации редуцирующего сахара с ж-фенилендиамином, дает более надежные результаты. Как силикагель, так и фильтровальная бумага были применены для хроматографического разделения органических кислот, выделенных из фруктов [99, 139]. На этом же принципе основано определение молочной кислоты в молоке и янтарной — в яичных продуктах [60]. Особый интерес для биохимика представляет применение хроматографии на бумаге для разделения пуринов, пиримидинов и нуклеозидов из гидролизата нуклеиновой кислоты [134]. Удалось улучшить метод определения витамина В в рыбьих жирах и продуктах облучения эргостерина, основанный на измерении характерной абсорбции в ультрафиолетовом свете или интенсивности окраски производных с треххлористой сурьмой точность определения была значительно повышена после хроматографического удаления примесей, мешающих определению [79, 95]. [c.164]

Если при хроматографии на бумаге аминокислот для удаления растворителя с хроматограммы применяют нагревание, аминокислоты образуют пятна, флуоресцирующие в ультрафиолетовом свете [88]. По-видимому, сущность этого явления состоит во взаимодействии аминокислот с альдегидными группами модифицированных или низкомолекулярных цепей целлюлозы бумаги, сходном с реакцией Майяра, при которой на первых стадиях появляются вещества, флуоресцирующие в ультрафиолетовом свете [40, 89]. Очевидно, реакции такого типа будут оказывать влияние на количественную хроматографию аминокислот на бумаге. [c.119]

Для осуигествления хроматографического нроцесса необходимо, чтобы одии слой жидкости перемещался относительно другого. В этом случае распределение растворенных веществ между двумя слоями жидкости происходит многократно в динамических условиях. При хроматографии па бумаге одна, более полярная жид кость сорбируется волокнами бумаги, образуя фиксированную (неподвижную) жидкую фазу другая, менее полярная жидкость, смачивая волокна бумаги, поднимается но листу в силу явления капиллярного поднятия. [c.328]

Для разделения двухкомпонентпой смеси 4-нитрофенола н 4-амипофенола при помощи одномерной хроматографии на бумаге в качестве подвижной фазы используют 0,5 Ai раствор НС1. Проявляют разделенные соединения на хроматограмме над концентрированным раствором аммиака. [c.220]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология