Анализ меченых атомов

Гипотеза об установлении равновесия, приведенная стр. 76, может быть опровергнута. Исходя из хлорбензола-1-С установление равновесия и повторная протонизация должны привести к одному и тому же хлорбензолу-2-С и затем к одному и тому же анилину-З-С . Анализ полученного анилина показывает, что меченый атом находится в положении 1 и 2 84]. [c.77]

Другим перспективным направлением в разработке амперометрических биосенсоров является создание устройств, основанных на иммунологических реакциях. Принцип иммунного анализа заключается во взаимодействии исследуемого вещества, называемого антигеном (АГ), со специфически связывающимся с ним антителом (АТ) с образованием комплекса АГ -АТ. При фиксированной концентрации антитела (антигена) равновесное отношение концентраций связанного и свободного антигена (антитела) зависит от его общей концентрации. Таким образом, неизвестную концентрацию антигена (антитела) можно определить при помощи фиксированного количества меченых антител (антигенов). Для этого антиген или антитело метят ферментами. Разработанные к настоящему времени иммуноферментные амперометрические датчики можно классифицировать следующим образом [c.506]

В работе [290] дана оценка необходимой степени обогаще ния аминокислот, меченных N, С, 0, Н, при анализе ме тодом СИД Анализировались N ацетил к-пропиловые эфиры аминокислот, которые в случае ХИ (газ реагент метан) образу ют интенсивный пик иона МН+ Результаты исследования сви детельствуют что для определения аминокислот в образце сыворотки крови объемом 100 мкл изотопный избыток N должен быть не менее 0,08% (ат ) В работе [291] было пока зано, что количественный анализ аминокислот, меченных с избытком 0,1 % ( т) можно проводить методом СИД при ГХ—МС ХИ на уровне концентраций О 1 нмоль [c.199]

Нуклеофильное присоединение молекулы спирта к атому углерода карбонильной группы было подтверждено опытами со спиртами, содержащими изотоп в гидроксильной группе. Например, по данным анализа продуктов реакции бензойной кислоты с метанолом, содержащим меченый кислород оказался в сложном эфире. [c.222]

Ошибка изотопного измерения составляла не более 1 % от определяемой изотопной концентрации. Как уже было указано, искусственная атмосфера для дыхания приготовлялась либо из меченого газообразного кислорода О2 и азота, либо из обыкновенного газообразного и ислорода и азота — смотря по варианту опыта. Парциальное давление кислорода в этих смесях равнялось обычному атмосферному. Газообразный тяжелый кислород был получен нами из тяжелой воды HgO щелочным электролизом на платиновых электродах. Обогащение воды тяжелым кислородом равнялось приблизительно 1 ат. % При масс-снектрометрических анализах сравнивались отношения изотопных пиков углекислоты, соответствующие массовым числам 46 и 45. [c.126]

Участие глицина в биосинтезе пуринового кольца нашло подтверждение при обследовании людей, получавших с пищей меченный глицин [3]. После расщепления мочевой кислоты, выделенной из мочи таких людей, было обнаружено, что атом азота в положении 7 ведет свое происхождение прямо из аминогруппы глицина. Аналогичные данные были получены в опытах с дрожжами. В этих опытах дрожжи выращивали на среде с глицином, меченным [4], затем из нуклеиновой кислоты извлекали гуанин и при его анализе нашли, что N-7 возник непосредственно из глицина. [c.168]

Из рассмотрения изотермы связывания меченого антигена с антителами следует, что условия В <[Ат]о/2 и Ат]о<1//С могут выполняться одновременно только при [Аг ]о< МК. Если популяция антител гетерогенна по аффинности к антигену, то концентрацию меченого антигена следует выбирать такой, чтобы условие В <[Ат]о/2 выполнялось для высокоаффинной фракции антител, определяющей чувствительность анализа. [c.230]

Максимальная чувствительность в данной схеме достигается при проведении первой стадии в равновесном режиме. Но значительно на чувствительность влияет лишь степень приближения к равновесному состоянию реакции определяемого антигена с антителами. Так как эта реакция проходит в растворе, то скорость приближения ее к равновесию может быть значительно выше, чем процесса образования комплекса на носителе. В этом случае для сокращения времени анализа в целом целесообразно увеличивать концентрацию иммобилизованного антигена и проводить реакцию образования комплекса на твердой фазе в кинетическом режиме. Увеличение концентрации иммобилизованного антигена необходимо для образования комплекса в достаточном количестве для последующего его выявления мечеными антителами. Но прн этом также следует соблюдать соотношение В,- Ат]о/2, чтобы не [c.253]

Аналогичный расчет используют при анализе масс-спектров веществ, содержащих и другие стабильные изотопы, введенные в молекулу для изучения механизма фрагментации. Иногда меченый атом может оказаться в анализируемом веществе в результате каких-либо химических превращений. Например, при обработке окиси Р-метилстиро-ла тяжелокислородной водой Нг Ю в присутствии следов кислоты был получен гликоль, в масс-спектре которого наблюдался интенсивный пик иона т/е 109 и пик иона т/е 45, тогда как в масс-спектре немеченого гликоля были только пики ионов т/е 107 и 45. Исход реакции не зависел от стереохимии исходной эпокиси [c.167]

Изотопный анализ продуктов восстановления и окисления, образующихся из меченого азид-иона, убедительно показывает, что 1) в каждой молекуле содержится только один меченый атом азота 2) по конфигурации молекула является линейной и не образует замкнутого кольца и 3) меченый атом находится в конце цепочки. Поскольку в ионе К = оба конечных атома не различаются 1между собой, это соединение называется азидом-1-М . [c.228]

При анализе масс-спектров меченых циклогексана, метил-циклогексана, этилциклопентана и метилциклопентана [105] было установлено, что для метилциклопентана атом С с равной вероятностью может принадлежать ионам ( 5Hg)+ и (СНз) " следовательно, при ионизации происходит разрыв кольца у заместителя с последующей диссоциацией открытой цепи. [c.55]

Реакция ненасыщенных жиров и жирных кислот с 1Вг, в результате которой образуются производные, содержащие по одному атому иода и брома, лежит в основе известного титриметри-ческого метода Гануса [53]. В работах [54, 55] описан метод определения микроколичеств этих веществ, в котором используется бромистый иод, меченный изотопом В анализе этим методом пробу наносят на фильтровальную бумагу и обрабатывают ее раствором радиореагента в абсолютном метаноле, насыщенном бромидом натрия. Реакционная способность нанесенных на бумагу соединений значительно увеличивается за счет получающейся относительно большой поверхности их контакта с реагентом. Для приготовления раствора ЧВг в мерную колбу емкостью 10 мл переносят порцию водного раствора Ыа Ч, в которой содержится [c.229]

Как ни странно, меченый триптофан не включался в кольца А, и В, хотя хорошо известна роль этой аминокислоты как источника хпнолиновой системы в других природных соединениях [34]. Эти данные еще раз подчеркивают необходимость экспериментальной проверки биогенетических схем, даже если структурный анализ указывает на возможность осуществления одного из самых типичных путей биосинтеза. В случае стрептонигрина можно было бы предложить, например, вполне разумную схему (схема 27 путь б),, в которой предшественниками являются аминокислоты триптофан (кольца Ли В), тирозин или дофамин (кольцо О и часть кольца С) и треонин (оставшийся кротонильный фрагмент кольца С и атом азота). [c.377]

Реакция ненасыщенных жиров и жирных кислот с 1Вг, в результате которой образуются производные, содержащие по одному атому иода и брома, лежит в основе известного титриметри-ческого метода Гануса [53]. В работах [54, 55] описан метод определения микроколичеств этих веществ, в котором используется бромистый иод, меченный изотопом В анализе этим методом пробу наносят на фильтровальную бумагу и обрабатывают ее раствором радиореагента в абсолютном метаноле, насыщенном бромидом натрия. Реакционная способность нанесенных на бумагу соединений значительно увеличивается за счет получающейся относительно большой поверхности их контакта с реагентом. Для приготовления раствора ЧВг в мерную колбу емкостью 10 мл переносят порцию водного раствора Ыа Ч, в которой содержится I мМ соли и радиоактивность которой равна 0,5 мКи. После выпаривания этой порции и тщательного высушивания остатка в эту колбу добавляют теоретический объем 0,2 н. раствора брома в. сухом метаноле о завершении реакции в колбе судят по изменению цвета раствора с коричневого на оранжевый. Образующийся в этой реакции ЫаВг служит для насыщения реагента, в котором пе должно быть свободного брома. [c.229]

Не исключено, что массоперенос в твердой фазе сопровождает СР сплавов, у которых концентрация электроположительного компонента даже менее 1 ат.%. Соответствующие данные получены при помощи радиохимического анализа [ 2—64]. Так, после анодного растворения сплава 1и0,35п (меченного и 5п" ) и послойного химического травления поверхности обнаружена область, в которой концентрация олова непрерывно изменяется [63]. Ее толщина составляет ЗООО атомных слоев, причем поверхностное содержание олова примерно в 7 раз превышает объемное. На отдельных участках поверхности концентрация олова достигала 7-ь 10 ат.%. Обогащение поверхности сплава электроположительным компонентом подтверждено результатами радиохимических экспериментов со сплавами 1пО,25Си [62], In0,lAg [65], а также данными регистрации обратного резерфордовского рассеивания ионов, возникающего при облучении пучком ионов гелия поверхности сплавов системы А1—Си (0,5 1 ат.% Си), подвергнутых анодной поляризации в нитратном растворе [60]. [c.46]

Действительно, анализ спектров меченых аналогов показывает, что в случае тра с-кетона II элиминируется фрагмент С2Н4О, содержащий карбонильную группу, СНг-группу из положения С-2 и еще два атома водорода [I]. Один из этих водородных атомов мигрирует из положения С-4, а другой, как было установлено, переходит от атомов С-3 или С-10 [1]. Отсутствие пика иона (М — 44)+ в спектрах двух 10-метилированных транс-декалонов- свидетельствует о том, что атом водорода мигрирует из положения С-10 [1]. Таким образом, все превращение, связанное с элиминированием фрагмента С2Н4О, можно себе представить как распад молекулярного иона по типу а-разрыва, сопровождающийся одновременной миграцией гидридного иона из положения С-10 к карбонильной группе, с образованием иона к. Последний в результате обычного р-раз-рыва, сопровождающегося миграцией у-водородного атома, превращается в ион л с mlе 122, (М —44)+, содержащий сопряженную диеновую систему. [c.179]

При анализе масс-спектров меченых циклогексана, метилциклогексана, этилциклопентана и метилциклопентана [52] было установлено, что для метилциклопентана атом с равной вероятностью оказывается принадлежащим ионам С5Щ. Следовательно, при ионизаций происходит разрыв кольца у заместителя, с последующей диссоциацией открытой цепи. В метилциклогексане отрыв группы СНд происходит только в боковой цепи. Отрыв групп СНд и С2Н5 от молекулярных ионов этилциклопентана и метилциклопентана происходит из боковой цепи только частично. Отрыв группы С2Н4 происходит главным образом из кольца (в случае метилциклогексана и метилциклопентана). Значения теплот образования ионов СеНц из циклогексана и метилциклогексана с несомненностью доказывают, что при диссоциативной ионизации углеводородов этого типа образуется ион, имеющий циклическую, а не олефиновую структуру, как это имело место в случае циклопентановых углеводородов [53]. [c.40]

Следующее важное условие состоит в том, что хелат должен быть термически устойчивым, особенно если он обладает низкой летучестью поэтому требует высокой рабочей температуры (колонки. Для достижения хорошей воспроизводимости значений времени удерживания, жоторое представляет собой период времени от. вюедения образца в колонку до появления максимума пика яа кривой элюирования, условия опыта должны быть подобраны таким образом, чтобы яе происходило разложения хелата. Одним из путей предотвращения этого является наблюдение за полостью ввода образца с целью обнаружения возможного нелетучего остатка. Другой способ контроля заключается в анализе элюируемых компонентов. Хелатирующий агент должен подбираться с учетом чувствительности применяемого детектора. Например, в случае использования электронозахватяого детектора его чувствительность значительно повышается, если в состав молекулы реагента входит по крайней мере один атом галогена. Применение детектора, снабженного счетчиком радиоактивности, позволяет использовать реагенты, меченные радиоактивными изотопами. [c.240]

Ли и Крюгер провели дезаминирование 1-аминопропанов, меченых по -углеродному атому радиоуглеродомТГ, тритием и дейтерием [27, 2В]. Радиометрический анализ и изучение спектров ПМР показали, что только 3-4% метки перегруппировалось из а -положения, причем метка распределилась совершенно равномерно между Э У Положениями полученных пропиловых спиртов [c.37]

M. M. Шемякин, В. И. Майминд и Э. Гомес [120, 451] сделали первую попытку осветить вопрос таутомерии триазенов при помощи меченых атомов. В качестве объектов исследования они применили диазоаминобензол, меченный по одному из крайних атомов азота, и диазоаминобензол, меченный по среднему атому азота (для контрольных опытов). Синтез первого был осуществлен сочетанием соли диазония с меченным анилином, а второй был синтезирован диазотированием анилина, меченным нитритом натрия, и сочетанием полученной соли диазония с обыкновенным анилином. Меченые триазены подвергались изомеризации при нагревании в уксусной кислоте в аминоазобензол, в котором аминогруппа диазоти-ровалась и образовавшаяся соль диазония разлагалась в присутствии гидрохинона. Выделившийся азот подвергался изотопному анализу на масс-спектрометре. Кроме того, из диазоаминобензола, меченного по одному из крайних атомов азота действием на него дифенилкетеном, получено ацильное производное. Как сам триазен, так и его ацильное производное подвергались расщеплению соляной кислотой и термически. При этом был выделен азот, анилин, а при распаде ацильного производного триазена — ацильное производное анилина. Азот непосредственно подвергался изотопному анализу, ацильное производное анилина гидролизовалось в анилин, а анилин превращался в соль диазония. Разложением соли диазония в присутствии полухлористой меди получался азот, который также анализировался на содержание [c.128]

Приведенные выше данные о превращении усвояемого аэота в почве получены в замкнутой системе вегетационного опыта, когда сравнительно легко мояшо произвести точный учет ато-мо(в N в этой системе. При работе с N в полевых условиях, в условиях естественного залегания почвы, при подведении баланса атомов N возникают известные затруднения, связанные с динамич1ностью подвижного усвояемого азота, представленного главным образом нитратной формой с миграцией его по почвенному профилю. Поэтому при анализе почвы необходи.мо отбирать представительные пробы не только в верхнем пахот-нсм слое, но и в более глубоких слоях почвы, куда может проникнуть легкорастворимое соединение азота. Используя в полевом опыте N , мы лепко можем определить степень использования усвояемого азота растениями и размеры включения его в органическое вещество, но учет потерь азота сопряжен с большими затруднениями, так как не всегда можно быть уверенным, что меченый усвояемый азот не проник в более глубокий почвенный слой. - [c.256]

Этот продукт применяли при исследовании реакций термического и фотохимического разложения трифенилгидразина. При термическом разложении тpифeнилгидpaзинa-N 2 образуется азобензол-N , в котором, согласно данным анализа, распределение меченого азота является статистически случайным это указывает на то, что он образуется из осколков, содержащих только один атом азота. Этот результат отличается от данных, полученных при термическом или фотохимическом разложении гидразобензола-N , при котором образуется азо-бензол-NJ поскольку отсутствует стадия случайного соединения осколков (см. методику синтеза гидразобензола-NJ , примечание 2). Другими продуктами, образующимися при термическом разложении трифенилгидразина-К1 2, являются дифениламин-N и небольшое количество анилина-N . [c.271]

В ряде работ изучался вопрос об общей детоксикации и экскреции с лш-триазинов. На примере лабораторных и домашних животных исследован метаболизм хлор- и метилтио-с жж-триази-нов. Исходные пропазин и прометрин выделяются с калом после перорального введения этих препаратов крысам лишь в небольших количествах, а в моче они содержатся в концентрациях, которые находятся за пределами чувствительности методов анализа. В моче обнаружено несколько метаболитов, меченных п отличающихся по строению от оксипропазина [135—137]. При введении крысам через желудочный зонд симазина, атразина, прометона и пропазина симазин выделялся с калом и мочой примерно в одинаковых количествах, а атразин, прометон и пропазин выделялись в основном с мочой. В обоих экскретах через 48 час после введения оказалось приблизительно от 70 до 90% введенной метки [138—141]. Анализ методом ионообменной хроматографии позволил установить в продуктах экскреции присутствие нескольких метаболитов [124, 140—142]. В других опытах молочным коровам скармливали в течение нескольких дней немеченые симазин и атразин, и в их моче были найдены лишь небольшие количества исходных соединений (1—2% введенной дозы). Поскольку примененный метод анализа основан на реакционной способности активного атома хлора, не представляется возможным отделить вклад исходных соединений от вклада продуктов разложения, еще удерживающих этот атом [131, 132]. [c.72]

Рестрикционный анализ ДНК позволяет выявить различия в отдельных нуклеотидных парах, появляющиеся в результате мутаций в сайтах, узнаваемых соответствующим ферментом. В случае серповидноклеточной анемии происходит замена АТ на ТА в шестой паре нуклеотидов гена, кодирующего Р-цепь гемоглобина человека замена происходит в сайте (СТКАО), чувствительном к рестриктазе Ойе (рис. 9.19). Фрагменты ДНК, возникающие под действием Ос1е1 у здорового человека и больного серповидноклеточной анемией можно сравнить с помощью метода гибридизации по Саузерну, используя в качестве зонда радиоактивно меченную ДНК гена Р-глобина, как это показано на рис. 9.19. Таким способом можно определять присутствие вредного мутантного гена в геноме эмбриона за несколько месяцев до рождения. Для этого культивируют зародышевые клетки, взятые при амниоцентезе. ДНК этих клеток экстрагируют и подвергают анализу. Такая диагностическая процедура может производиться в тех случаях, когда существует подозрение, что оба родителя-носители вредного рецессивного гена. Следует заметить, что в большинстве случаев вредные мутации происходят вне сайтов, узнаваемых рестриктазами. Однако иногда такие мутации оказываются в хромосомах тесно сцепленными с сайтами рестрикции, что может во многих случаях использоваться в пренатальной диагностике. [c.288]

Возможна также и ситуация, в которой уменьшение [Аг ]о также может привести к искажению калибровочной кривой. Допустим, что в анализе используются высокоаффинные антитела (/С 1ДАт]о). Тогда при низких значениях Аг ]о меченый антиген может практически полностью связаться с антителами даже при условии, что концентрация свободных центров связывания существенно меньше [Ат]о. Это приведет к тому, что рост концентрации свободных центров связывания не будет сопровождаться увеличением связывания меченого антигена, следствием чего будет появ-аение плато в начальной части калибровочной кривой, т. е. ниж-яий предел обнаружения антигена повысится. Улучшить чувствительность в такой ситуации можно увеличением [Аг ]о до значений, равных или превосходящих [Ат]о (рис. 43). [c.244]

Чрезвычайно чувствительный метод анализа, требующий строгой специфичности АТ и их высокой аффинности. Необходима стадия отделения комплексов от нссвязавшегося АГ. Требует дорогостоящего оборудования. Для мечения необходим стандартный АГ. Радиационная опасность [c.27]

Рис. 8-4. Турбидиметрический анализ многовалентных антигенов, основанный на активировании фермента. Многовалентный антиген из образца последовательно реагирует с антителами, меченными -галактозидазой, и модифицированными антителами, несущими большой отрицательный заряд (вследствие обработки янтарным ангидридом). В образующемся комплексе фермент окружен отрицательными зарядами. При анализе с помощью поликатиояного макромолекулярного субстрата (см. рис. 8-1) ферментный конъюгат, входящий в состав комплекса, проявляет большую активность по сравнению со свободным конъюгатом или конъюгатом, связанным только с антигеном, Аг — антиген, Ат — антитело, Ф — фермент

Справочник химика 21

Химия и химическая технология