ДНФ-производные аминокислот приготовление

Второй метод заключается в нитрозировании малонового эфира, восстановлении полученного производного в аминомалоновый эфир, последующем ацилировании и затем - алкилировании. Из приготовленного таким путем Ы-ацетилалкилмало-нового эфира целевое соединение - а-аминокислоту - получают кислотным гидролизом при нагревании [c.451]

Радиоизотопный анализ производных жирных и желчной кислот, приготовленных с использованием и разделенных методом хроматографии на бумаге, осуществляли путем непосредственного измерения радиоактивности пятен хроматограммы [91, 94, 95] или путем приготовления из бумажной хроматограммы авторадиограммы и последующего измерения интенсивности хроматографических зон с помощью записывающего микрофотометра [92, 93]. Использовали и жидкостные сцинтилляционные счетчики в комбинации с жидкостной колоночной хроматографией [96]. При использовании жидкостного сцинтилляционного счетчика в комбинации с тонкослойной хроматографией чувствительность метода, в котором применяется для определения динитрофенильных производных аминокислот [97], возрастала в сто раз, достигая 1 пМ 98] при воспроизводимости результатов d=6%. Анализируя аналогичным методом смеси кислот известного состава, можно идентифицировать анализируемые кислоты и оценить их количества. Определенным преимуществом диазометана является отсутствие пространственных эффектов при проведении вышеуказанных реакций. [c.154]

На бензоильных производных -аминокислот был проверен классический способ приготовления этиловых эфиров. [c.367]

Динитрофенильные (ДНФ) производные аминокислот имеют большое значение, поскольку они легко хроматографируются и для открытия пятен не требуется индикатора. Приготовление этих производных применяют для идентификации и определения свободных аминогрупп в белках и полипептидах [188]. Для хроматографических целей нет необходимости выделять производные в чистом виде. Следует отметить, что другие группы (кроме [c.440]

Как правило, метить данный реагент можно путем введения в него изотопа Н в три возможных положения или путем введения в него изотопа " С в любое из положений. Такая возможность осуществления двух меток позволяет применять этот реагент в определениях методами, требующими использования двух изотопов (сравнительный и индикаторный). Такой метод применяли, например, для определения полумикроколичеств аминокислот [ПО, 111]. В этих анализах реагент для превращения аминокислот в их производные метили тритием (сравнительный изотоп), а для приготовления индикаторных производных применяли тот же реагент [c.314]

Последовательность операций в данном методе следующая. В одном из углов пластинки на расстоянии 1 см от краев отмечают стартовую точку. Необходимо проследить за тем, чтобы эта точка была в одном и том же месте с обеих сторон. Затем гидролизат, приготовленный описанным выше способом, растворяют в 20 мкл 50%-ного пиридина и половину его наносят на одну, а половину — на другую сторону, все время подсушивая раствор важно наносить материал действительно в виде точки. Затем на одну сторону пластинки наносят контрольную смесь аминокислот, состоящую из следующих компонентов ДНС-Сер, ДНС-Глу, ДНС-Про, ДНС-Гли, ДНС-Иле, бис-ДНС-Тир, ДНС-Арг. В контрольной смеси, 1 мкл которой наносят в место старта, концентрация каждого производного равна 1 нмоль/мкл. [c.279]

Нами были использованы образцы различных аминокислот и их производных. Для обеспечения надлежащей точности воспроизводимости параллельных определений условия опыта постоянно стандартизовались. Исходили не из отдельных навесок, а титровали аликвотные части, взятые из предварительно приготовленного раствора. Для исключения ошибок, связанных с предварительной нейтрализацией формалина и растворителей в отдельности, оказалось более целесообразным проводить их совместную нейтрализацию. [c.103]

Замещение протона на триметилсилильную (ТМС)-группу (термин силилирование обычно используется именно в этом контексте) успешно применялось для приготовления летучих производных таких биологически важных соединений, как сахара [124], пуриновые и пиримидиновые основания, нуклеозиды и нуклеотиды [42], стероиды [126], амины [63] и аминокислоты. В настоящее время имеется целый ряд реагентов и огромное число методов силилирования, причем выбор конкретных условий определяется исследуемым соединением и масштабами проводимой реакции. Соответствующие методы рассматриваются в появившемся недавно обзоре [94]. [c.100]

Зная количество добавленного к смеси нерадиоактивного носителя и удельные активности производного, выделенного из смсси (вместе с носителем) и соответствующим образом приготовленного стандарта, можно рассчитать количество данной аминокислоты в исходной смеси [153]. [c.40]

В такую конденсацию вступают не только аминокислоты, но и их производные, в том числе белковые вещества. Реакция эта используется в микробиологии для приготовления лечебных сывороток анатоксинов). [c.382]

Это позволяет при сохранении достаточной разрешающей способности хроматографических колонок существенно уменьшить время анализа [40]. Хотя метод, безусловно, не приспособлен еще для количественных определений, но, вероятно, степень превращения аминокислот в соответствующие производные имеет величину одного порядка для большинства аминокислот, поскольку сигнал детектора для производных, приготовленных по стандартной процедуре, почти одинаков. Кроме того, величина сигнала составляет примерно 85% от величины сигнала, полученного для растворов чистых производных [38]. [c.264]

В частности оказалось, что поверхность диатомита хорошо силани-зируется. Мартин впервые на таком силанизированном носителе разделил жирные кислоты [77 позднее на силанизированном диатомите, приготовленном другим способом, удалось разделить динитрофенильные н азо-бензолсульфонильные производные аминокислот, динитрофенилгидра-зоны и т. д. [90]. [c.467]

Пластины на полиамидных пленках обладают существенными особенностями. Переход от фиксированных на подложке гранулированных сорбентов к пористым мембранам позволяет за счет увеличения гидравлической проницаемости хроматографического слоя и его большей регулярности значительно повысить скорость и чувствительность анализа в ТСХ. Ряд фирм ( Шляйхер и Шуль , Пирс , Машерей и Нагел и др.) выпускают полиамидные пластины (полиэтилентерефталатные пленки, покрытые с двух сторон пористым слоем полиамида), приготовленные по методу Ванга. Толщина слоя полиамида составляет 50 мкм. Такие пластины можно использовать многократно после промывки полярным растворителем. ТСХ на полиамидных слоях широко применяют в анализе биохимических объектов, фенолов, производных аминокислот, гетероциклических соединений, кислот и др. [c.351]

Гидроксамовые производные аминокислот. Дпя получения <1, 1 -лей-цингидроксамовой кислоты раствор гидроксиламина, приготовленный иэ 5,5 г гидроксиламина солянокислого, высушенного предварительно при [c.56]

Очень удобны для двумерной хроматографии слои, приготовленные по Вангу [700, 701, 704, 715], и готовые полиамидные листы [395, 495, 378]. Ванг широко использовал двумерную хроматографию для разделения смеси производных аминокислот [702, 704, 706, 710, 711, 715, 726]. Эггер [349, 352] при двумерном хроматографировании флавоноидов и их гликозидов использовал в первом направлении полярную систему вода—этанол—метилэтилкетон—ацетилацетон, а во втором направлении — хлороформ-метанольную смесь. [c.146]

В отличие от эфиров ТФА-аминокислот ацетиламинокислоты, впервые изучавшиеся Янгсом [129] в виде н-бутиловых эфиров, менее летучи и, следовательно, имеют больший удерживаемый объем. По-видимому, полярные основные аминокислоты, такие, как Арг, а также Гис, Три и цистин, вряд ли можно подвергать газовой хроматографии. Их нет среди 35 аминокислот (в том числе 18 природных), разделенных с помощью ГХ в виде н-амиловых эфиров Джонсоном и др. [42]. Эти авторы разделяли также н-бутило-вые,. изобутиловые и изоамиловые эфиры, приготовленные аналогично ТФА-производным. Эти эфиры получали в виде бромгидра-тов, а затем прямо ацетилировали уксусным ангидридом. Известно, что при этом из оксиаминокислот образуются также N, 0-диацетиль-ные соединения, но пока нет никаких данных о том, как взаимодействует ангидрид с другими полифункциональными аминокислотами. По сравнению с соответствующими ТФА-производными 0-ацетил-соединения гораздо меньше подвержены гидролизу и, по-видимому, обладают более высокой термоустойчИвостью правда, соответствующих количественных измерений еще не проводили. В литературе описано разделение н-пропиловых эфиров ацетиламинокислот [29], но подробные методики не были опубликованы. [c.321]

Четвертой, не упомянутой выше, но приобретающей в последнее время все больший интерес, задачей, разрешаемой при помощи химического изменения белков, является применение его в качестве вспомогательного средства при исследовании порядка чередования аминокислотных остатков. и определения концевых групп в белках. Работа в этом направлении была существенно облегчена введением метода Зангера [9] и весьма широко проводится английскими биохимиками. Новый способ отличается от обычного способа приготовления белковых производных или измененных белков тем, что полученные соединения гидролизуют и образующиеся производные аминокислот изолируют. Часто этим способом исследуют структуру не только нативных белков, но и продуктов неполного ферментативного или кислотного гидролиза, а также структуру продуктов частичного окисления. При разрыве поперечных цистиновых связей (—S—S—) путем окисления до остатка цистеиновой кислоты (—SO3H), которое также было введено Зангером [10], молекула белка распадается на отдельные полипептидные цепи. Тристрам [11] (статья III) и Фокс [12] произвели оценку точности аналитических результатов этого важного исследования. [c.270]

Преобладающее число карбоксизащитных групп производится на основе первичных, вторичных и третичных спиртов. Для приготовления эфиров аминокислот служат методы, нзвестнЬ1е из органической химии, причем исходят либо из свободной аминокислоты, либо из N-зaмeщeннoгo производного амин кислоты. [c.116]

Высокая реакционная способность этого реагента является в некотором смысле его недостатком, так как первичные амины могут частично превращаться в дизамещенные производные. Заметное дизамещение происходит лишь после завершения монозамещения, поэтому было предложено проводить ряд последовательных частичных реакций и периодически удалять из реакционной смеси монопипсильное соединение [81]. Это позволяет избежать заниженных результатов в анализах некоторых аминокислот. Изо топ Ч имеет относительно короткий период полураспада (8 дней), и при его использовании требуется непрерывно проводить контрольные измерения радиоактивности препарата, приготовленного с использованием того же количества реагента, что и в основном анализе. [c.308]

Аминокислоты не обладают летучестью, поэтому на первый взгляд кажется, что их нельзя определять с помощью ГХ. Однако, если вспомнить, что для чисто структурных анализов и для разделения , смесей химическими способами получают множество производных исходного материала, окрашенных и имеющих различную раствори- мость, очевидно, можно надеяться найти способ приготовления для ГХ летучих и термостабильных производных из исходных нелетучих и легкоразрушаемых веществ. Таким образом, самые различные [c.294]

Большое распространение в последнее время получила хроматография на полиамиде (е-поликапролактаме). Было показано, что полиамиды в зависимости от способа получения обладают различной разделительной способностью [154]. В качестве связующего для полиамидных слоев хорошо зарекомендовала себя целлюлоза [43, 154]. Полиамид применяли также и для приготовления незакрепленных слоев [154]. Помимо целлюлозы в качестве связующего можно использовать крахмал. Слои с пре-красны.ми механическими свойствами мол<но получить из смеси полиамида, силикагеля и крахмала [94]. Полиамид пригоден для разделения фенолов. В этом случае при использовании водных систем растворителей характер разделения аналогичен получаемому при применении хроматографии с обращенными фазами, т. е, в системе с гидрофильной неподвижной фазой (см. разд. 3.2.1.3) [154]. Необходимо помнить, что элюотропный ряд растворителей в случае полиамида совершенно иной, чем применительно к другим сорбентам. Это объясняется разным характером взаимодействия между хроматографируемым веществом и сорбентом. Помимо фенолов в тонком слое полиамида хроматографировали антипиретики [54], тиаминовые производные [60], антибиотики [77], консервирующие вещества [57, 90], аминокислоты и их производные, нуклеозиды и нуклеотиды [163, 164] и другие соединения. Хроматографируемые вещества хорошо вымываются из полиамидного слоя, поэтому пластинки с полиамидом можно использовать для повторных разделений [163]. [c.41]

Алкильные производные. Используя метод Пиннера, Вестерманн [41] получил из N-rt-тозил- и N-карбобензоксипроизводных иминоэфиров различных а-аминокислот соответствуюш ие 1,2-дигидро-сил<л<-тетразины. В случае глицина и фенилглицина в эквивалентных количествах образовывались изомерные 1-амино-1,2,4-триазолы. Иминоэфиры, приготовленные из а-амино-масляной (R = Н, R" = С2Н5) или а-аминоизомасляной (R = R" = СНл) [c.94]

Алкильные производные. Используя метод Пиннера, Вестерманн 141] получил из М-п-тозил- и М-карбобензоксипроизводных иминоэфиров различных а-аминокислот соответствующие 1,2-дигидро-сыл<л<-тетразины. В случае глицина и фенилглицина в эквивалентных количествах образовывались изомерные 1-амино-1,2,4-триазолы. Иминоэфиры, приготовленные из а-амино-масляной (К = Н, К" = С2Н5) или а-аминоизомасляной (К = К" = СН.ч) [c.94]

Так силилировались ОН- и SH-группы, а также имидазольная группа гистидина [105]. Лучшие выходы для нескольких ТМС-аминокислот составляли 75% [И4]. С помощью ГХ с применением силиконового масла в качестве жидкой фазы [106] были разделены производные аланина, валина, лейцина, глутаминовой кислоты и фенилаланина. Хроматографированию подвергались также этиловые эфиры N-ТМС-аминокислот наряду со свободными основаниями ТМС-эфиров, приготовленными реакцией аминокислот с ГМДС или же удалением лабильной N-TM -группы аммиаком [107]. Авторы утверждают, что получены пики аргинина, гистидина и лизина, но не приводят для них времен удерживания. [c.101]

Что касается скорости, чувствительности и стоимости, любой из газохроматографических методов выгодно отличается от существующих автоматических анализаторов на смоле, но последние удобнее и проще в обращении. Более широкое использование ГХ будет зависеть главным образом от развития автоматизированных методов. Нетрудно представить себе прибор с помещенным в нем рядом образцов пептидов или белков, которые обрабатываются по очереди определенными реагентами и затем по одному подаются на хроматографическую колонку в ходе элюирования пики идентифицируются, интегрируются, а результаты печатаются в виде количества наномолей аминокислоты. Сароф (личное сообщение) уже работает в этом направлении, используя газофазное получение производных. Реагенты для приготовления ТФА-метиловых эфиров проходят вместе с газом-носителем над образцом, который затем упаривают в токе горячего газа и подают на колонку. Следует отметить, что при метилировании раствором НС1 в метаноле может протекать алкоголиз пептидов и белков, что позволяет обойтись без длительной и утомительной стадии гидролиза [11]. Сароф также снизил время элюирования менее летучих аминокислот и отказался от программирования температуры, применив колонку из трех секций с уменьшающейся температурой, каждая секция работает в изотермическом режиме [84]. С помощью кранов между секциями аминокислоты направляются или на следующую секцию, или же непосредственно в детектор. Этот метод должен облегчить автоматизацию, ускорить разделение и значительно увеличить срок службы колонки. [c.132]

Получены также фосфокарбоновые производные некоторых аминокислот. Первым был приготовлен р-аспартилфосфат Блэк и Райт [145] получили это соединение в растворе при помощи следующих реакций. а-Бензиловый эфир р-хлорангидрида М-кар-бобензокси-Ь-аспарагиновой кислоты реагировал со смесью фосфата серебра и фосфорной кислоты с образованием соот- [c.38]

Разделение синтетических аминокислот. — Гринштейн разработала удобный метод ферментативного разделения рацематов аминокислот. Например, -аланин ацетилируют и образующееся ацетильное производное 1) -аланина обрабатывают раствором фермента, катализирующего деацетилирование. Раствор этого фермента может быть легко приготовлен из свиных почек, кусочки которых гомогенизируют с водой в гомогенизаторе Уоринга и полученный гомогени-зат центрифугируют. Прозрачный раствор, содержащий фермент, декантируют в целлофановый мешок, который опускают в проточную воду на ночь для удаления диализом растворимых небелковых компонентов. Диализованный раствор фермента вновь центрифугируют, после чего он готов для использования. Полное расщепление ацетил-Ь-аланина проходит примерно за четыре часа. Фермент действует главным образом на ацетильное производство природной аминокислоты. В результате указанной ферментативной обработки образуется смесь [c.644]

Подтверждением этому служит возможность реакции с алкилзамещеннымн малоновыми эфирами, в случае к-рых невозможно образование а, р-ненасы-щенных соединений в пользу этой схемы говорит также успешный синтез р-аминокислот из заранее приготовленных альдиминов и выделение в нек-рых случаях промежуточно получающихся производных р-амино-а, а-дикарбоновых к-т. [c.346]

Наряду с соответствующими производными ряда простых аминокислот получены также -( -метоксифенилазо)-бензил-оксикарбонильные производные ь-аргинина (ацилирование в смеси едкого натра с бикарбонатом натрия), р-метилового эфира ь-аспарагиновой кислоты, у-метилового эфира ь-глутамино-вой кислоты и Ы -бензил-г-гистидина [2037]. Ы -Защищенный лизин синтезирован через медный комплекс, а соответствующий метиловый эфир получен с помощью Ы-карбоксиангидрида, приготовленного из Ы -защищенного лизина и фосгена [2033]. Благодаря окраске, присущей такого рода Ы-защищенным аминокислотам и пептидам, оказывается возможным их непосредственное обнаружение и количественное определение при [c.63]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология