Определение значений Rp аминокислот

Работа 112. Количественный анализ аминокислот путем хроматографирования. Определение значений аминокислот [c.172]

Если целью опыта является определение значений и нет необходимости в выделении разделяемых веществ, то обнаружить зоны на столбике можно при помощи любой цветной реакции. Так, полосы аминокислот на колонке с крахмалом можно обнаружить, смочив столбик эфирным раствором нингидрина с последующим нагреванием всей колонки. При этом зоны аминокислот проявляются в виде интенсивных фиолетовых полос [133]. [c.460]

Важное значение белков и составляющих их аминокислот обусловило большой интерес к определениям аминокислот методом ГХ. Существуют различные методы автоматического анализа с использованием хроматографии на колонке, однако ГХ обеспечивает более быстрый анализ и позволяет уменьшить величину анализируемой пробы, Было предложено большое число различных по типу производных, чтобы осуществить количественное определение двадцати аминокислот, обычно обнаруживаемых в белках. Выбор наилучшего производного осложняется большей частью тем, что эти аминокислоты содержат 12 различных функциональных групп, а желательно получить метод, применимый для анализа все>с [c.137]

Значения р/Са, аммонийных солей лежат обычно в пределах от 1 до 3 значения р/Са, биполярных ионов находятся в области от 9 до 10. Для каждой а-аминокислоты имеется свое определенное значение pH, при котором биполярный ион преобладает в равновесии с аммонийной солью и карбоксилатом. Эта так называемая изоэлектрическая точка (1Р), определяемая соотношением [c.501]

Целью количественного аминокислотного анализа является определение молярного состава пептида, т. е. типа и количеств входящих в него аминокислот. Выражение молярных отношений аминокислот путем сопоставления содержания данной аминокислоты с соответствующим значением аминокислоты, присутствующей в смеси в наименьшем количестве, хотя и дает верную картину общего состава исходного соединения, не позволяет получить информации о размере, т. е. длине полипептидной цепи. Для этого нужно определить количество хотя бы одной из аминокислот и отнести его к количеству взятого пептида. Естественно, такое определение имеет смысл только при условии, что все аминокислоты, составляющие пептид, обнаруживаются с одинаковой точностью. В таком случае можно работать с одним или несколькими внутренними стандартами, имеющими подходящие удерживаемые объемы, и находить индивидуальные поправочные коэффициенты, специфичные для определяемых производных аминокислот и, как уже упоминалось, в сильной степени зависящие от типа детектора [45, 48]. [c.336]

Как указывалось ранее, отнесение резонансных линий к определенному типу аминокислот можно было бы считать простой процедурой, если бы существовала простая зависимость между значениями резонансных частот и [c.128]

Положение равновесия, т. е. соотношение различных форм а-аминокислоты, в водном растворе при определенных значениях ри существенно зависит от строения радикала, главны образом наличия в нем ионогенных групп, играющих роль допол нительных кислотных и основных центров. [c.328]

Имеется определенное значение pH, при котором содержание бетаина наибольшее. Это значение определяется ыа основе измерения электропроводности раствора аминокислоты при различных pH. Наименьшая электропроводность наблюдается при наиболь- [c.619]

Эта информация, как мы вскоре увидим, имеет важное практическое значение, так как из нее следует, что смесь аминокислот можно разделить, подвергнув ее воздействию электрического поля при определенном значении pH в этих условиях различные аминокислоты движутся в разных направлениях и с разными относительными скоростями. [c.122]

В последнее время для разделения смесей аминокислот широко используют метод электрофореза на бумаге, при котором на полосы фильтровальной бумаги наносят смесь аминокислот, бумагу смачивают буферным раствором с определенным значением pH и пропускают через нее электрический ток. Через несколько часов вследствие различия ИЭТ аминокислот и, следовательно, разных скоростей и направлений их движения в электрическом поле смесь аминокислот разделяется на бумаге на индивидуальные аминокислоты, количество которых может быть определено тем или иным методом. В настоящее время электрофорез используется для разделения не только аминокислот, но и белков, нуклеиновых кислот, органических кислот и ряда других соединений. Благодаря тому что аминокислоты являются амфотерными электролитами, они могут давать соли одновременно как с кислотами, так и с основаниями [c.188]

ЭТИМ же растворителем движутся и аминокислоты, причем относительная скорость движения отдельных аминокислот в токе растворителя будет различной. Она зависит от свойств и строения аминокислоты, свойств растворителя и некоторых других факторов. Скорость движения каждой аминокислоты при заданных условиях характеризуется определенными значениями Rf, где [c.217]

При определенных значениях pH, характерных для каждой аминокислоты, они индифферентны к действию электрического тока. В этом случае концентрации анионов и катионов в растворах равны. Подобные значения pH называются изоэлектрической точкой ами- [c.268]

Электрохимические данные также указывают на биполярное строение в кислой среде аминокислоты мигрируют к катоду и проявляют свойство катиона, в щелочной среде аминокислоты устремляются к аноду и являются, следовательно, анионами. При определенных значениях pH, характерных для каждой аминокислоты, они индифферентны к действию электрического тока. В этом случае концентрации анионов и катионов в растворах равны. Подобные значения pH называются изоэлектрической точкой аминокислоты (рН1). (Структурные модели глицина и метионина см. на цветной табл. V.) [c.272]

Это уравнение связывает время анализа со всеми параметрами опыта. Очевидно, следует, ограничив разрешающую способность анализа определенным значением К , так подбирать условия хроматографии аминокислот на колонке, чтобы время разделения каждой соседней пары было минимальным. Тогда время анализа будет определяться К. последней, самой медленно идущей по колонке аминокислоты — (в обычном анализе — аргинина). [c.155]

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЗНАЧЕНИЙ Яр АМИНОКИСЛОТ [c.33]

Экспериментально было установлено, что метод титрования формальдегидом дает заниженные результаты при определении аминного азота в таких аминокислотах, как лизин. Несколько менее заниженные результаты получаются при анализе некоторых других аминокислот, например, гистидина и фенилаланина. Как показывает опыт, истинные конечные точки при титровании индивидуальных аминокислот не соответствуют одной и той же величине pH. При титровании смесей всегда необходимо выбрать для конечной точки определенное значение pH и в зависимости от этого [c.211]

Таким образом, воздушное питание имеет определенное значение в усвоении сельскохозяйственными культурами серы. При помощи меченой серы удалось уточнить поглощение соединений этого элемента корнями из почвы. Совсем еще недавно считали, что растения могут питаться только окисленными соединениями серы (сернокислыми солями). Теперь стало известно, что некоторое значение принадлежит и органическим веществам, содержащим серу в восстановленном состоянии. В частности, доказано, что серусодержащая аминокислота — метионин, добавленная в окружающую корни среду, поступала в растение и использовалась им. Эта аминокислота была помечена радиоизотопом серы, что и позволило проследить за дальнейшими превращениями ее в растительном организме. [c.212]

Значение аминокислот. В клетках организма существует определенный метаболический уровень (пул) аминокислот, который включает аминокислоты, образовавшиеся при распаде белков пищи и тканевых белков, а также вновь синтезированные (заменимые) аминокислоты. В большей степени аминокислоты (400 г сут ) используются для синтеза белков тела, в меньшей (30 г сут ) — для синтеза других азотсодержащих соединений (рис. 86). Аминокислоты могут превращаться в углеводы или жир- [c.234]

Белки состоят в основном из /.-аминокислот, характеризующихся определенными значениями [а]в. Полипептиды, полученные из -аминокислот, обладают оптической активностью и в форме статистического клубка. Однако основной вклад в оптическую активность белка дает специфическая спиральная упаковка плоских амидных групп —ЫН—СНК—СО— (звездочка отмечает асимметрический атом углерода, К — боковая группа, специфичная для каждой аминокислоты). В настоящее время наиболее щироко известны две упорядоченные структуры белков а-спираль и р-склад-чатая структура. Переходы амидной группы л->л и /г—>-я вносят различные вклады в оптическую активность полипептидных цепей, находящихся в различных конформациях соответственно спектры ДОВ и КД полипептидов в различных конформациях отличаются друг от друга. На рис. 24 приведены спектры ДОВ и КД модельных полипептидов в конформациях статистического клубка, [c.45]

Полиэлектролиты. Если звенья макромолекулы содержат боковые ионогенные группы, то полимеры проявляют своеобразные-электрические, конфигурационные и гидродинамические свойства. Такие полимеры называют полиэлектролитами. К ним относятся поликислоты (полиметакриловая, нуклеиновые кислоты и др.) полиоснования полиамфолиты. Полиамфолиты содержат кислотные-и основные группы в одной макромолекуле. Это белки и синтетические полипептиды. Они построены из аминокислот и содержат основные (ЫНзОН) и кислотные (—СООН) группы, которые располагаются не только на концах цепей, но и в боковых ответвлениях. Раствор каждого полиамфолита в зависнмости от его состава имеет определенное значение pH, при котором сумма положительных и отрицательных зарядов в цепи равны. Это значение pH называется изоэлектрической точкой (ИЭТ). При pH ниже ИЭТ в цепи преобладают положительные заряды из-за подавления диссоциации СООН-групп. При достаточно низком pH полиамфолит превращается в полиоснование. При pH выще ИЭТ полиамфолит постепенно переходит в поликислоту. [c.287]

Белки состоят в основном из L-аминокислот, характеризующихся определенными значениями [а]с. Полипептиды, полученные из -аминокислот, обладают оптической активностью и в форме статистического клубка. Однако основной вклад в оптическую активность белка дает специфическая спиральная упаковка плоских амидных групп —NH— HR—СО— (звездочка отмечает асимметрический атом углерода, R —боковая группа, специфичная для каждой аминокислоты). В настоящее время наиболее широко известны две упорядоченные структуры белков а-спираль и р-склад-чатая структура. Переходы амидной группы и п- л вносят [c.45]

Аминокислоты в растворе находятся в виде цвиттерионов. Их заряд, определяемый степенью диссоциации карбоксильных, аминогрупп и боковых радикалов, зависит от pH раствора. Используя метод электрофореза на бумаге, удается провести разделение определенных групп аминокислот. Сложные смеси аминокислот могут быть разделены с помощью электрофорезов, проводимых при разных значениях pH во взаимноперпендикулярных направлениях или комбинацией электрофореза и хроматографии. [c.137]

Высокая чувствительность метода обратного изотопного разбавления с радиореагентом, а также селективность, которую обеспечивает применение индикаторного изотопа, позволяют определять микроколичества смесей первичных и вторичных аминов. Эти методы широко применяли в определениях различных аминокислот в биологических образцах [85—88]. В работе [86], в частности, описано использование этих методов для оценки содержания одиннадцати таких соединений в 1 мг белка. Метод с пипсилхлоридом применялся для анализа гистамина, причем в этом анализе проводилось четыре цикла перекристаллизации соответствующего производного с целью его очистки до получения постоянного значения удельной радиоактивности. После проведения этого анализа было предложено [89] применять данный метод для определения любого амина, который дает кристаллический замещенный д-иод-бензолсульфамид. Этим же методом оценивались микрограммные количества 2,4-диоксипиримидина и его 5-метильного производного [90]. Для разделения пипсильных производных в дополнение к бумажной хроматографии применялись жидкофазная колоночная хроматография [91] и тонкослойная хроматография [92]. Хроматографию на бумаге применяли также для оценки радиохимической чистоты реагента [93]. [c.310]

Еще одной важной проблемой в стереохимии природных соединений является установление строения полипептидных антибиотиков, продуцируемых бактериями и грибами. Такие полипептиды часто содержат в своей структуре неприродные аминокислоты, т. е. имеющие в-конфигурацию или обладающие структурой, не обнаруженной в белках. Очистка и установление структуры таких сложных соединений, часто вьщеляемых в очень небольших количествах, требует квалифицированного разделения и точных аналитических методов. В этом отнощении исключительно важным является непосредственное определение конфигурации аминокислот методом хиральной хроматографии. Особенно большое значение имеет применение хиральной ГХ для хирального аминокислотного анализа и создания аминокислотных карт гидролизатов. Приведенный ниже пример [24] должен проиллюстрировать сказанное. [c.182]

Оптическое вращение есть функция длины волны, которая в диапазоне 350—600 нм выражается однотермовым уравнением Друде (1). Для поли (аминокислоты), находящейся в растворе в неупорядоченной конформации, =1, тогда как для полипептида, существующего в виде а-спирали, уравнение является двухтермо-вым (t==2). Когда длина волны Ло для определенной поли (аминокислоты) равна 212 им, константа Ъо имеет значение —630 [34]. Используя эти величины, можно подсчитать, какая часть полипептида находится в виде правой спирали, найдя это математическим путем по данным оптического вращения в видимой части спектра Положительное значение Ьо соответствует тем редким случаям когда поли (аминокислоты) принимают конформацию левой а-спи рали в том случае, когда эта величина составляет около 630, од нако меньшие ее значения между -f200 и —200 соответствуют кон формации -формы. [c.436]

Отнесение резонансных линий к определенному типу аминокислот основывается на том, что в аминокислотных остатках большинство протонов связаны между собой косвенным спин-спиновым взаимодействием. В то же время спин-спиновое взаимодействие между протонами двух соседних аминокислот очень слабое, поскольку между ближайшими парами протонов На-протоном и амидным, имеются четыре связи (см. рис.3.3), т.е. каждый аминокислотый остаток протеина можно рассматривать как изолированную спиновую систему. Так что для каждой аминокислоты имеет место типичная картина спин-спинового взаимодействия, наблюдаемая в двумерных спектрах ЯМР. Рис.3.25 дает схематическое представление о косвенном спин-спиновом взаимодействии для валинового остатка, соответствующее методам OSY и R T. Такая же картина должна наблюдаться и в реальном экспериментальном спектре (рис.3.26). Интерпретация спектра осложняется не только тем, что неизвестны точные значения химических едвигов для искомых резонансных линий, но и тем, что не может быть проведено надежное отнесение отдельных кросс-пиков в спектре. Это может быть также связано и со слишком большой шириной резонансных линий кросс-пиков, так как уширение линий сопровождается также уменьшением их амплитуды, и часто рассматриваемые линии сливаются с фоном. Поскольку ширины линий, которые в основном определяются временем поперечной релаксации и скоростью химического обмена, заранее неизвестны, то отсутствует уверенность в том, что проведено правильное отнесение линий. Особенно существенно на отнесении линий сказывается ширина линий в спектрах, полученных по методу OSY, в которых пики в подспектре расщепляются на пики с отрицательными и положительными знаками, так что полный интеграл пиков кросс-мультиплета равен нулю. Чем больше ширины линий, тем менее заметны эти линии в спектре. Это проявляется тем нагляднее, чем ближе располож ены одна к другой линии различных знаков, что пршсходит в том сл уча е, [c.132]

Начиная со 2-й пол. 20 в. бурно развиваются кинетич. методы исследования, происходит становление теории цепных реакций (Н. Н. Семенов), основ теории кислотно-основного (Бренстед — Лоури) и гетерог. катализа, на базе к-рых разрабатываются пром. методы дегидрирования углеводородов, в т. ч. нефтяных, с получением олефинов, бензола и его гомологов, алкилирования парафивов олефинами и др. Большое значение приобрели синтез Фишера — Тропша (восстановление окиси углерода водородом) с получением метанола и тедельных углеводородов, р-ция Дильса — Альдера, карбодиимидный синтез пептидов, методы определения последовательности аминокислот в белках. В связи с возникшей проблемой дефицита жидкого топлива огромное значение приобрела р-ция Бергиуса (гидрирование угля в жидкие углеводороды, 1912—13). [c.413]

Разработанные в последние годы методы селективного гидролиза, разделения и идентификации открыли новые возможности для химического изучения структуры полипептидов и белков. Как уже указывалось, эти природные продукты включают разнообразный материал антибиотики, гормоны, токсины, ферйенты,. вирусы, волокна и т. д. Хотя за короткий период времени был достигнут большой прогресс в выяснении структуры различных природных продуктов, работа по установлению химической структуры белков в значительной степени осложнена их макромолеку-лярной природой. Изучение последовательности аминокислот в полипептидах и белках показывает наличие в них своеобразных группировок аминокислот. Например, из семи основных аминокислот, имеющихся в АКТГ, четыре расположены по соседству, а все семь включены в последовательность из 14 аминокислот из семи кислых аминокислот, ирисутствуюпщх в этом гормоне, три находятся по соседству друг с другом. В рибонуклеазе три остатка серина и три остатка аланина находятся рядом аналогична располагаются три ароматические аминокислоты в инсулине. Для ряда ферментов — тромбина, трипсина, химотрипсина и фосфоглюкомутазы было отмечено наличие одинаковой последовательности из шести аминокислот. Отмечено, что в структуре-и механизме действия протеолитических ферментов важную роль играют определенные трипептиды [160]. В настоящее время из-за ограниченности наших знаний относительно точного молекулярного механизма действия гормонов и ферментов можно делать только предположения о значении тёх или иных аминокислотных группировок. Вопрос о связи определенной последовательности аминокислот с функциями различных соединений может быть выяснен лишь по мере накопления экспериментального материала. Тем самым, по-видимому, станет возможным значительно более полное понимание механизма действия природных соединений на молекулярном уровне. [c.418]

Взаимодействие 2,4-динитрофтор- и 2,4-динитрохлорбензола с аминами, спиртами и меркаптанами может быть применено для идентификации этих соединений. Особенно большое значение это имеет для определения концевых аминокислот в пептидах. Для этого аминогруппу пептида арили-руют 2,4-динитрофторбензолом и гидролизуют. Концевая аминокислота в виде 2,4-динитрофенильного производного (ДНФ-производное) может быть легко отделена от других аминокислот и идентифицирована [c.326]

Таким образом, для чисто химических или физико-химических исследований основным требованием является точность для широкого обзора в области пищевых белков самое первое, что нужно, это — получить возможно больше материала по присутствию и содержанию незаменимых аминокпслот. В нашей практике часто встречалось, что пищевой белок является хорошим источником больщинства незаменимых аминокислот, которые легко определить (именно цистин, метионин, аргинин, гистидин, лизин, тирозин и триптофан), и все же неполноценен в отношении других аминокислот, для выявления которых нет простых и точных способов определения. Если в таких случаях руководствоваться только анализами первой группы аЛтинокислот, то можно было бы впасть в серьезную ошибку при биологической оценке данного белка. Поэтому только полный анализ аминокислот, имеющих значение для питания, может дать правильную и полноценную картину исследуемых продуктов, даже если определение отдельных аминокислот будет произведено не абсолютными, а скорее сравнительными методами. [c.9]

В этом интервале pH аминокислоты с нейтральной R-группой обладают небольшим средним зарядом при определенном значении pH (изоэлектри-ческая точка р/), характерном для данной аминокислоты, средний заряд аминокислоты равен нулю. Легко показать, что у аминокислот, не содержащих дополнительных кислотных или основных групп, р/ равно полусумме двух значений pZ , т. е. что р/ = (pZa a -f р а 02ну2. в табл. 8 приведены значения рКа и р/ для аминокислот, входящих в состав белков. [c.46]

Взаимодействие 2,4-динитрофторо- и 2,4-динитрохлоробензо-ла с аминами, сниртами и тиолами можно использовать при идентификации этих соединений. Особенно большое значение эта реакция имеет для определения концевых аминокислот в пептидах. Для этого пептид арилируют 2,4-динитрофторобензо-лом и гидролизуют. Концевая аминокислота в виде 2,4-динитро-фенильного производного (ДНФ-производного) может быть легко отделена от других аминокислот и идентифицирована (Ф. Сэнгер) [c.475]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология