Определение структуры выделенных фракций

Нативная рибонуклеаза не чувствительна к действию трипсина и химотрипсина. Поэтому сначала проводили окисление рибонуклеазы (остатки цистина при. этом окислялись до остатков цистеиновой кислоты) и окисленный препарат подвергали затем действию протеолитических ферментов. При помош,и хроматографии на дауэкс 50-Х-2 [82] из триптического гидролизата было выделено 15 пептидных фрагментов [82], а из гидролизата после действия химотрипсина — 32 фрагмента [83]. Для количественного определения аминокислотного состава выделенных пептидов и для достижения их чистоты необходимо использовать достаточное количество исходного материала (200 мг). Фракции, содержащие более одного компонента, подвергают повторному фракционированию в несколько измененных условиях. Расщепление с помощью пепсина [6], хотя оно и не столь селективно, позволяет, однако, получить другие пептиды, которые помогают воссоздать полную структуру рибонуклеазы. [c.415]

Во-первых, гетерогенностью антител по физико-химическим свойствам, в том числе по сродству к антигену. Во-вторых, сложностью определения общего количества антител, а также отдельных фракций. В-третьих, в случае поливалентных антигенов возможностью образования комплексов сложного состава, в том числе циклической структуры, в которых проявляется кооператив-ность Взаимодействия активных центров антител. Все это не позволяет применить традиционные методы для расчета истинных значений констант связывания. Более надежные данные могут быть получены для моноклональных антител и их РаЬ-фрагментов, так как в этом случае могут быть выделены индивидуальные антитела в гомогенном виде. [c.41]

Каждая ректификационная колонна дает возможность выделить из исходной смеси определенного состава две или более фракций другого состава. При этом исходный состав является центром тяжести некоторого комплекса, в вершинах которого расположены полученные в результате разделения фракции. Последнее определяется условиями материального баланса. Так как предельно возможные составы фракций, соответствующих вершинам комплекса, предопределены структурой диаграммы, то действие каждой ректификационной колонны ограничено пределами области ректификации. Любая точка в вершине балансового комплекса, если она совпадает с точкой чистого компонента, может быть некоторым центром тяжести последующего балансового комплекса или симплекса, которому отвечают свои вершины, отражающие состав получаемых фракций Такая цепь балансовых комплексов соответствует последовательности выделения фракций, характерной для диаграммы данной структуры. [c.214]

Органеллу можно определить как ограниченную мембраной субклеточную структуру, которую можно выделить при высокоскоростном центрифугировании. Согласно этому определению, рибосомы, цитоскелет и цитозоль не являются органеллами. Однако в этой таблице они перечислены вместе с органеллами, поскольку их тоже обычно выделяют путем центрифугирования. Их можно рассматривать как субклеточные образования или фракции. Препарат органелл, выделенных в ходе одного цикла дифференциального центрифугирования, редко бывает чистым чтобы получить чистую фракцию, обычно приходится центрифугировать препарат по меньшей мере несколько раз. [c.15]

Дифференциальное центрифугирование применяют для изучения химического состава ядер, митохондрий и дру-, гих структур. В этом случае объект измельчают с использованием сахарозы в специальном приборе — гомогенизаторе. Полученный гомогенат путем дробного центрифугирования разделяют по плотности на фракции, состоящие из определенных, но изолированных клеточных структур. При сравнительно небольших ускорениях на центрифуге из гомогената осаждают клеточные ядра. При значительно больших ускорениях центрифугированием надосадочной жидкости выделяют митохондрии, а затем рибосомы и другие структуры. [c.55]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология