Уксусная кислота как растворитель в хроматографии

Водный раствор экстрагируют диэтиловым эфиром (3 X ЮО мл), экстракт промывают водным насыщенным раствором хлорида натрия и высушивают над сульфатом магния. После удаления растворителя получают 0,53 г светло-желтого масла со слабым запахом уксусной кислоты. Тонкослойная хроматография на силикагеле показывает наличие по крайней мере двух компонентов, элюируемых смесью диэтиловый эфир-гексан (50 50). Получают три главных пика, 211 мг, 42 %. Первый пик 18 мг, элюированный смесью эфир-бензол (15 85), идентифицирован как производное тетрагидрофурана (40), второй пик, элюированный смесью эфир-бензол (20 80), как производное (39). Последний значительный пик 52 мг, элюированный смесью эфир-бензол (40 60), идентифицирован как желаемый гликоль (41). [c.95]

Подготовка бумаги. Для разделения аминокислот используют бумагу для хроматографии № 1 или 2, предварительно обработанную раствором 8-оксихинолина или раствором трилона Б для удаления следов катионов металлов. Листы бумаги, соответствующие по размеру хроматографической камере, помещают в 0,1 %-ный раствор 8-оксихинолина (раствор 0,1 г 8-оксихинолина в 100 мл смеси, состоящей из н-бутилового спирта, ледяной уксусной кислоты и воды в объемном соотношении 4 1 1). Через 1—2 мин бумагу вынимают, подсушивают, помещают в хроматографическую камеру для нисходящей хроматографии, закрепляют один конец в кювете с подвижным растворителем — смесью н-бутилового спирта, уксусной кислоты и воды (4 1 5 по объему). [c.110]

Бумага, применяемая как носитель (суппорт) в распределительной хроматографии, должна удовлетворять определенным требованиям. а-Целлюлозы должно быть в бумаге 95—99%. Бумага должна быть чистой и однородной по составу и строению волокон с их длиной 0,5—3 мм. В такой бумаге дистиллированная вода поднимается за 10 мин на 60—80 мм, смесь бутилового спирта с уксусной кислотой за 6 ч на 15—25 см при комнатной температуре. Для хроматографии наиболее подходит линтерная бумага , не содержащая веществ, растворимых в органических растворителях (например, клеящих веществ), т. е. непроклеенная бумага. Линтерная целлюлоза — это высокомолекулярный полисахарид, содержащий 2500—3000 остатков глюкозы в макромолекуле. Текстура такой бумаги должна быть всюду одинаковой. Поры или пространства между волокнами должны иметь размеры 1—12 мк. [c.520]

Используют метод нисходящей хроматографии (см. разд. А, 2.5.4.1). В качестве растворителя используют насыщенный водой фенол или смесь бутанола, ледяной уксусной кислоты и воды (4 1 1). Для проявления опрыскивают N— N-индикатором (см. разд. Е). При этом, кроме величины Rf, получают и сведения о природе аминокислоты по характерной для нее цветной зоне. [c.313]

Хроматография пластинки Силуфол , система метанол — бензол — ледяная уксусная кислота (8 45 4), растворитель — ацетон / / = 0,91. [c.181]

Хроматографии на бумаге (система растворителей н-бутанол—уксусная кислота—вода=4 1 5). Метод позволяет определить примесь эфира пиридоксина. [c.168]

Наличие трех флавоноидов в соке столовой свеклы установлено хроматографией на бумаге с применением растворителя 60 %-ной уксусной кислоты и проявителя — хлористого алюминия. Идентифицирован (по метчику) кверцетин. Два других флавоноида не идентифицированы. [c.392]

При применении тонкослойной хроматографии в качестве сорбентов используют силикагель. Системы растворителей также весьма разнообразны н-бутанол — метиловый спирт — диэтиламин (17 1 2) хлороформ — метиловый спирт — уксусная кислота (18 1 1) хлороформ — 25%-ный раствор аммиака (1000 1) гексан — ацетон (4 1) и др. Хроматограммы обрабатываются парами иода. [c.165]

После нанесения растворов на бумагу приступают к разделению сахаров в соответствующей смеси растворителей (н-бутанол — пиридин вода, 6 4 3 н-бута-нол — уксусная кислота — вода, 4 1 5). Хроматография нисходящая. Продолжительность разделения 2—3 суток. [c.230]

Растворитель (8) этилацетат—уксусная кислота—муравьиная кислота—вода / (18 4 1 3) приготовляют, смешивая в делительной воронке 360 мл этилацетата,, 80 мл уксусной кислоты, 20 мл муравьиной кислоты и 60 мл воды. Полученный раствор используют для разделения углеводов восходящей хроматографией. Часто используют также растворитель (10) н-бутанол—уксусная кислота— вода (4 1 5). Его приготовляют смешиванием 400 мл к-бутанола, 100 мл ледяной уксусной кислоты и 500 Л1л воды. После отстаивания смесь разделяют на две фазы, нижнюю сливают и отбрасывают. Если оставшийся растворитель мутнеет, к нему добавляют несколько капель уксусной кислоты для осветления. Прн длительном стоянии отстаивается в нижней части раствора водный слой, его удаляют. Этот растворитель применяется для восходящей хроматографии. [c.71]

По методу Уайта [39] моносахариды, разделенные хроматографией на бумаге с растворителем н-бутанол—уксусная кислота—вода (5 2 1), идентифицировали спектроскопически. Для этой цели сахара элюировали с хроматограмм водой, к упаренным элюатам добавляли по 400 мг бромистого калия и полученные смеси выдерживали в течение 2,5—3 ч при частом перемешивании. Высушенные порошки гомогенизировали, прессовали в таблетки и анализировали в спектрофотометре системы Перкин — Эльмер. Для контроля использовали водные растворы чистых сахаров. [c.74]

Как указывалось ранее, в гидролизатах, помимо нейтральных моносахаридов, часто присутствуют О-глюкуроновая и О-галакту-роновая кислоты. Хроматографией на бумаге с растворителями, применяемыми для разделения моносахаридов (как, например, этилацетат—пиридин—вода), уроновые кислоты не разделяются. В кислых растворителях (этилацетат—уксусная кислота—вода) значения Rf этих уроновых кислот очень близки. По этой причине не достигается на хроматограммах достаточно отчетливое разделение. [c.87]

Далее колонку с сефадексом А-25 промывали растворами муравьиной кислоты (по 4 л) возрастающих концентраций от О до 0,1 н. и затем 0,5 л 2 н. раствора НСООН. Вещества, полученные элюированием 2 н. раствором муравьиной кислоты, разделяли хроматографией на бумаге с растворителем этилацетат—уксусная кислота—муравьиная кислота—вода (18 3 1 4). На хроматограммах после проявления был обнаружен ряд пятен, соответствующих кислым олигосахаридам. [c.125]

Б. Проводят испытание, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве адсорбента кизельгур Р1 и импрегнируя пластинку путем погружения в смесь 10 объемов жидкого парафина Р и 90 объемов петролейного эфира Р на 5 мм ниже поверхности жидкости. После того как фронт растворителя достигнет высоты не менее 16 см, вынимают пластинку из хроматографической камеры и оставляют ее стоять при комнатной температуре до полного удаления растворителя. Используют импрегнированную пластинку в пределах 2 ч с момента приготовления, проводя хроматографирование в том же направлении, что и импрегнирование. В качестве подвижной фазы используют смесь 4 объемов ледяной уксусной кислоты Р и 6 объемов воды. Наносят отдельно на пластинку по 2 мкл каждого из двух растворов в смеси [c.290]

Разновидностью распределительной хроматографии является хроматография на бумаге, широко используемая в биохимических лабораториях, в том числе клинических, для разделения пептидов, аминокислот и других веществ (рис. 1.4). В качестве стационарной фазы при этом служит вода, адсорбированная целлюлозными цепями фильтровальной бумаги. Образец помещают на одном конце бумажной полосы, этим же концом бумагу погружают в подходящую смесь органических растворителей (например, бутанол-уксусная кислота-вода в определенных соотношениях). При движении растворителя по бумаге благодаря силе капиллярности происходит разделение компонентов смеси. Проявленную хроматограмму высушивают, а местоположение каждого из разделяемых веществ определяют химическими или физико-химическими методами. [c.28]

Хорошее разделение можно получить при хроматографии в летучем буферном растворе пиридин — уксусная кислота pH 5, который готовят на деионизованной воде, смешивая 40 мл уксусной кислоты и 40 мл пиридина и доводя конечный объем до 10(50 мл. В этом буферном растворе в отличие от цитратного Тир и Фен меняются местами (фиг. 50), а аминокислоты в направлении от линии старта к фронту растворителя движутся в следующем порядке Арг, Гис, Лиз, Тир, Фен. [c.251]

Бутанол — уксусная кислота — вода (4 1 5). Этот растворитель применяется для восходящей хроматографии. Его готовят, тщательно смешивая в 1,5-л делительной воронке 400 мл н-бутанола, 100 мл ледяной уксусной кислоты и 500 мл дистиллированной воды. После отстаивания смесь разделяется на две фазы, нижнюю сливают и отбрасывают. Если оставшийся растворитель мутнеет, к нему добавляют несколько капель уксусной кислоты до осветления. При длительном стоянии раствора в нижней части оседает водный слой, который удаляют. [c.186]

Границы применения температуры плавления отдельных озазонов слишком близки друг к другу, и это иногда затрудняет идентификацию. Удобными методами идентификации являются бумажная и тонкослойная хроматография (см. разд. А, 2.5.4,1 и А, 2.6.3). В качестве растворителя при этом рекомендуется смесь бутанола, ледяной уксусной кислоты и воды (4 1 1) или фенол, насыщенный водой. Употребляемые растворители должны быть перегнаны, для контроля одновременно с исследуемой пробой хроматографируют аутентичный образец. Восстанавливающие сахара проявляют, опрыскивая фталатом анилиния (приготовление см, в разд. Е), а затем 10 мин нагревая при 105 ""С. Невосстанавли-вающие сахара проявляют смесью равных частей 0,2%-ного спиртового раствора нафторезорцина и 2%-ного водного раствора трихлоруксусной кислоты с последующим нагреванием до 100 °С. [c.310]

Для оптимального разделения некоторых аминокислот, плохо отделяющихся друг от друга в перечисленных системах, используют п другие растворители, которые приведены в соответствующих руководствах (см., например Хроматография на бумаге//Под ред. И. Хайса и К. Мацека. М., 1962). Так, для отделения валина от фенилаланина (проблема, возникающая при анализе антибиотика грамицидина С. состоящего всего из пяти разных аминокислот) можно рекомендовать последовательное пропускание двух растворителей систему 2-бута-нол — 3%-ный аммиак (3 1), а затем систему н-бутанол — уксусная кислота — вода (8 3 1). [c.129]

Простые эфиры, особенно циклического строения, легко окисляются воздухом с образованием пероксидов. Присутствие последних крайне нежелательно, так как они разрушают сорбенты с привитой фазой и полимерные сорбенты, а также окисляют лабильные компоненты анализируемых смесей и поглощают в УФ-области. Наиболее часто из растворителей этого класса применяют тетрагидрофуран, обычно стабилизированный гидрохиноном. Перед перегонкой проверяют наличие пероксидов в тетрагидрофуране. К 1 мл растворителя прибавляют 1 мл. 10%-ного раствора К1 или Nal в ледяной уксусной кислоте. При низкой концентрации пероксида раствор окрашивается в желтый цвет, а при высокой — в коричневый. При заметном содержании пероксидов во избежание взрыва при перегонке их удаляют кипячением с 0,5% U2 I2 в течение 30 мин. Тетрагидрофуран после удаления пероксида хранят над твердым КОН (10—15% об.] в плотно закрытой бутыли из темного стекла в атмосфере инертного газа и перегоняют непосредственно перед, применением. Чистота полученного растворителя вполне достаточна дпя проведения эксклюзионной хроматографии на полужестких полистироль-ных гелях при детектировании рефрактометром. В других вариантах, особенно при работе с УФ-детектором, может потребоваться дополнительная адсорбционная очистка. [c.133]

Для тонкослойной хроматографии применяют подвижный растворитель хлороформ-метанол-вода (65 25 4) или хлороформ-метанол-уксусная кислота-вода (25 15 4 2) проявляют раствором родамина или йодом. Для идентификации аминофосфатидов (кефалина) хроматограмму опрыскивают раствором нингидрина для холинсодержащих фосфолипидов (лецитина) применяют реактив Драгендорфа [15]. Идентифицированы следующие фосфолипиды [9J лецитин (R — 0,6) и кефалин (Rf —0,32). В качестве метчиков применяли синтетический лецитин и фосфолипиды желтка яйца. [c.374]

При обнаружении стероидных алкалоидов методом бумажной хроматографии используются различные смеси растворителей ме-тнлэтилкетон, насыщенный водой -бутанол — уксусная кислота — вода (10 2 5) м-бутанол — пиридин — вода (10 2 Б) и др. Для обработки хро.матограмм чаще всего применяются реактив Драгендорфа (оранжевые пятна) или концентрированный хлороформный раствор треххлеристой сурьмы с последующим непро-должительньш нагреванием при Ю5 (кирпич но-крас ное окрашивание). [c.165]

Для щелочного расщепления раство"ряют полисахарид при 25— 38° С в известковой воде, не содержащей кислорода. Реакция протекает в течение нескольких недель или месяцев. Ионы кальция после расщепления полисахарида удаляют с помощью катионообменной смолы. Оставшийся нерасщепленный полисахарид выделяют осаж дением этанолом. Продукты распада разделяют фракционированным осаждением их кальциевых солей. Сахараты исследуют распределительной хроматографией на бумаге с растворителем этилацетат— уксусная кислота — вода 10 1,3 1). [c.121]

Отделению калия от других катионов методом хроматографии на бумаге посвящен ряд работ Предложено много вариантов, отличающихся применяемыми растворителями, способами проявления и другими деталями Для разделения калия и нагрия рекомендуют растворитель, состоящий из смеси 1 объема конц НС1, 4 объемов 0,5%-ного раствора винной кислоты и 10 объемов воды [1278] В качестве растворителя предлагается также смесь 4 объемов 96%-ного этанола и 1 объема 2 N уксусной кислоты [2522, 2600], 8 объемов этанола и 2 объемов 0,1 N соляной кислоты [721], смесь равных объемов метанола и этанола [2790] [c.144]

Принцип распределительной хроматографии основан на различии в коэффициентах распределения аминокислот между водой и органическим растворителем. Особенность метода распределительной хроматографии на бумаге по сравнению с обычной экстракцией ам.инокислот из водного раствора органическим растворителем заключается в том, что одну из фаз, чаще всего водную, помещают на какой-нибудь инертный твердый носитель, а органический растворитель — подвижная фаза,— проходя через первую, извлекает и распределяет аминокислоты на бумаге в соответствии с их коэффициентами распределения. Положение аминокислот на бумаге определяют по отношению скорости движения аминокислоты скорости движения фронта растворителя и обозначают Rf. Величина за висит в первую очередь от строения аминокислоты, затем от системы растворителей, pH среды и сорта бумаги, Чем полярнее аминокислота, тем меньше она растворяется в органических растворителях и тем меньше ее R . Увеличение длины углеродной цепи повышает . Введение в молекулу полярных групп, например, гидроксильной, аминной или карбоксильной понижает Rf Так, Rf фенилаланина в системе фенол/вода = 0,85, а тирозиит 0,51. Другие примеры изменения в зависимости от строения аминокислоты представлены на рис. 3 и 4. Подбирая соответствующие смеси растворителей, можно провести достаточно тонкое разделение аминокислот. Наиболее часто пользуются для такого разделения системами вода — фенол — аммиа вода — бутапол — уксусная кислота бутанол — аммиак — коллидин и т. д. Разделение можно проводить на одномерной или двумерной хроматограммах. Можно пользоваться также различными типами распределительной хроматографии на бумаге — нисходящей, восходящей и радиальной. Величины Rt для каждой из систем растворителей оказываются постоянными при соблюдении [c.479]

Посторонние примеси. Проводят определение, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве адсорбента силикагель Р4, а в качестве подвижной фазы смесь 5 объемов 1-бутанола Р, 4 объемов воды и 1 объема уксусной кислоты ( 300 г/л) ИР. Наносят отдельно на пластинку по 5 мкл каждого из трех растворов в метаноле Р, содержащих (А) 40 мг испытуемого вещества в 1 мл, (Б) 0,40 мг испытуемого вещества в 1 мл и (В) 0,40 мг бефения оксинафтоата СО в 1 мл. Вынимают пластинку из хроматографической камеры, дают ей высохнуть на воздухе и оценивают хроматограмму в ультрафиолетовом свете (254 и 365 нм). При 254 нм видны два основных пятна на хроматограммах растворов А, Б и В, в то время как при 365 нм флуоресцируют только пятна, близкие к фронту растворителя. Любое дополнительное пятно, видимое на хроматограмме, полученной с раствором А, кроме двух основных пятен, не должно быть более интенсивным при рассмотрении при двух длинах волн, чем пятно, расположенное ближе к стартовой линии при хроматографировании раствора Б. [c.56]

Посторонние примеси. Проводят испытание, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве сорбента силикагель Р4, а в качестве подвижной фазы — смесь 80 объемов дибутилового эфира Р, 16 объемов гексана Р и 4 объемов ледяной уксусной кислоты Р. Помещают пластинку в хроматографическую камеру, погружая ее на 5 мм в жидкость. После того как фронт растворителя достигнет высоты около 12 см, извлекают пластинку из камеры и высушивают ее в течение нескольких минут в струе теплого воздуха. Дают пластинке остыть и наносят отдельно по 5 мкл каждого из 2 растворов, содержащих (А) 0,10 г испытуемого вещества в 1 мл и (Б) 0,050 мг 4-аминобензойной кислоты Р в 1 мл. Дают фронту растворителя подняться на 10 см выше линии нанесения. После извлечения из хроматографической камеры высушивают пластинку 10 мин при 105 С и оценивают хроматограмму в ультрафиолетовом свете (254 нм). Любое пятно, которое дает раствор А, кроме основного пятна, не должно быть более интенсивным, чем пятно, которое даст раствор Б, Основное пятно остается на линии нанесения. [c.357]

После удаления кислот путем пропускания водного раствора через колонку с довексом-2, они исчерпывающе экстрагировали элюат эфиром и подвергали эфирный экстракт двухмерной хроматографии на бумаге. Растворителями служили бутанол — аммиак — вода (45 5 50, нисходящий метод) бутанол — уксусная кислота — вода (4 1 5, восходящий мегод) бензол — петролейный эфир (точка кипения 40—70° С) — метанол — вода (5 5 1 5, органическая фаза, восходящий метод) бутанол — аммиак — вода (восходящий метод). [c.445]

Невозможно привести исчерпывающий перечень растворителей, которые использовались для разделения аминов методами хроматографии на бумаге или в тонком слое, но наиболее пригодными оказались следующие а) н-бутанол-уксусная кислота-вода (4 1 1 или 12 3 5) б) изопропанол-конц. NH3 -вода (8 1 1 или 20 I 2) в) трет-имкловъш спирт- 17%-ный водный метиламин (4 1) г) в ио )-бутанол -пиридин-уксусная кислота-вода (604 10 41 100) д) этанол вода-КНз (18 1 1) е) метанол-вода-пиридин (20 5 1) ж) и/>< и-бутанол-вода-метилэтилкетон-диэтиламин (10 10 5 1). [c.382]

Для фракционирования ДНФ-аминокислот предложено несколько различных методик. Водо- и кислоторастворимые ДНФ-аминокислоты можно разделить с помощью одномерной хроматографии, используя в качестве растворителя смесь н-пропилового спирта и 37%-ного раствора NH4OH (7 3, по объему). Препарат наносят на пластинку в растворе уксусной кислоты или 0,5 н. НС1, [c.235]

Эфирорастворимые ДНФ-аминокислоты также могут быть разделены с помощью двумерной хроматографии на силикагеле в следующих системах растворителей 1) толуол — пиридин — эти-ленхлоргидрин — 0,8 н. ЫН ОН (100 30 60 60), верхняя фаза используется в качестве элюента при хроматографии, нижняя — для предварительной обработки слоя носителя 2) хлороформ — бензиловый спирт — уксусная кислота (70 30 3) 3) бензол — -пиридин — уксусная кислота (80 20 2) 4) хлороформ — метанол— уксусная кислота (95 5 1). [c.236]

Очень чувствительным методом идентификации аминокислот является тонкослойная хроматография их диметиламинонафталин-5-сульфонильных производных (гл. ХП1). Для фракционирования их на силикагеле можно, например, воспользоваться следующими системами растворителей хлороформ — бензиловый спирт — уксусная кислота (100 30 3) бензол — пиридин — уксусная кислота (80 20 2) 2-бутанон — пропионовая кислота — вода (15 5 6). [c.237]

Применяя подходящие растворители и стандартные растворы дансиламинокислот, можно идентифицировать дансильные производные всех аминокислот. Вудс и Ванг [19] сообщили о том, что использование полиамидных слоев, связанных с полиэфирной подложкой, чрезвычайно эффективно при разделении дансиламино-кислот (гл. Х1П). Можно добиться вполне удовлетворительных результатов фракционирования с помощью двумерной хроматографии сначала в смеси вода — 90%-ная муравьиная кислота (200 3), а затем в смеси бензол — ледяная уксусная кислота (9 1). [c.237]

Тонкослойная хроматография успешно применяется для идентификации ДНФ-аминокислот. По сравнению с хроматографией на бумаге этот метод более чувствителен и требует меньших затрат времени. Чаще всего смеси разделяют в силикагеле в следующих системах растворителей [2] а) толуол — пиридин — этиленхлор-гидрин—аммиак (0,8 М) (100 30 60 60) эта система гетероген-на, верхняя фаза используется для хроматографии, нижняя — для уравновешивания адсорбента б) хлороформ—бензиловый спирт— уксусная кислота (70 30 3) в) бензол — пиридин — уксусная кислота (80 20 2) г) хлороформ—метанол—уксусная кислота (95 5 1). Для идентификации достаточно примерно 0,2—0,5 мкг ДНФ-аминокислоты. Распределение ДНФ-аминокислот при двумерной хроматографии в различных системах растворителей показано на фиг. 61. [c.270]

Обычно для идентификации аминокислот необходимо провести хроматографию в трех системах растворителей I — 1,5%-ная муравьиная кислота И — бензол—уксусная кислота (9 1) П1 — этилацетат—метанол—уксусная кислота (10 1 1). В некоторых случаях при идентификации е-ДНС-Лиз, а-ДНС-Гис и ДНС-Арг может оказаться необходимой четвертая система IV — 0,05 М МазР04 — этанол (3 1). Для идентификации ДНС-цистеиновой кислоты требуется пятая система растворителей V—1 М NH4OH— этанол (1 1). [c.279]

Агрегатное состояние и растворимость моносахаридов и их производных определяются, в первую очередь, наличием в их молекулах большого числа сильнополярных гидроксильных групп, способных к образованию водородных связей. Поэтому подавляющее большинство моносахаридов представляет собой нелетучие вещества, легко растворимые в воде, диметилформамиде или диметилсульфоксиде, умеренно растворимые в низших спиртах, пиридине и уксусной кислоте и практически нерастворимые в таких обычных органических растворителях, как эфир, бензол, хлороформ, диоксан, тетрагидрофуран, этилацетат и т. д. Однако производные моносахаридов, в которых гидроксильные группы замещены (метиловые эфиры, ацетаты, триметилсилилпроизводные, некоторые алкил-иденовые производные), достаточно летучи, и их можно очищать перегонкой или возгонкой в вакууме. Для анализа этих производных может быть применена газо-жидкостная хроматография. [c.49]