Пипетки стартовые

Пробы наносят в виде точки или полоски длиной 6—7 мм при помощи пипетки на 0,1 мл, специально приготовленного капилляра или микрошприца. Для препаративного разделения смесей вещество пробы наносят сплошной линией (капля к капле). Отмечают стартовую линию. Пробу наносят осторожным прикосновением пипетки так, чтобы [c.134]

Нанесение исследуемого материала (сыворотки). На отмеченную стартовую линию смоченной полоски пипеткой наносят 0,01 мл нормальной сыворотки, содержащей 5,6—8% белка. [c.48]

Способ нанесения сыворотки. Анализируемый материал наносят пипеткой поперек полоски, на 3 мм отступая от каждого ее края. Для этого пипетку медленно и равномерно передвигают по стартовой линии, слегка прикасаясь кончиком к бумаге. Кончик пипетки должен быть гладким, чтобы не поцарапать бумагу осторожного прикосновения к бумаге вполне достаточно для того, чтобы исследуемый материал впитался. [c.48]

Если приходится фракционировать значительный объем материала, желательно наносить его на сухую, а не на влажную бумагу. Большой объем наносимого материала, естественно, пропитывает значительную площадь бумаги. Если подсушивать место старта , можно частично ограничить растекание наносимого раствора. Правда, в этом случае создается опасность необратимой адсорбции некоторых пептидов на бумаге особенно это относится к большим пептидам, и поэтому такого подсушивания следует избегать. Однако, если область старта действительно занимает слишком большую площадь, наносимый материал можно сконцентрировать следующим способом. Сразу после нанесения образца бумагу кладут на чистое стекло. Увлажненную область старта с помощью двух стеклянных палочек приподнимают так, чтобы она не касалась стекла. Продвигая кончик пипетки параллельно линии старта примерно на расстоянии 1 см от увлажненной области, смачивают буферным раствором бумагу вокруг нее. Буферный раствор должен свободно выходить из пипетки и впитываться в бумагу. Увлажнение повторяют несколько раз по обе стороны стартовой зоны, пока она полностью не пропитается буферным раствором. После этого смачивают всю остальную площадь листа фильтровальной бумаги. Очень важно, чтобы нанесенный материал в стартовой области имел pH используемого буферного раствора. Особенно это существенно в тех случаях, когда лиофилизированный образец наносится в растворе аммиака. Поскольку этот раствор имеет более высокое значение pH, чем обычно используемый буферный раствор, важно, чтобы последний был достаточно емким. Обеспечить нужный )Н в месте нанесения образца можно довольно простым приемом. Для этого бумагу вокруг стартовой зоны смачивают буферным [c.98]

Анализируемое вещество растворяют в упомянутом выше буферном растворе для нанесения, имеющем оптимальный для связывания pH. Объем образца можно варьировать, однако нанесение слишком больших объемов занимает много времени. Оптимальным, пожалуй, является объем от 0,1 до 0,5 мл. Раствор над смолой удаляют и образец вводят соответствующей пипеткой с помощью сжатого азота. Остатки наносимого образца трижды смывают со стенок колонки стартовым раствором круговыми движениями пипетки. [c.179]

Подбор подходящей системы растворителей обычно не составляет большого труда. Одним из преимуществ хроматографии в тонких слоях при адсорбционном варианте является то обстоятельство, что, изменяя полярность системы, можно произвольно перемещать анализируемую смесь веществ в область оптимального деления. Как уже указывалось в разд. 1.6.2, системы растворителей одинаковой полярности применительно к данной смеси веществ могут обладать различной разделительной способностью. Это зависит от характера взаимодействия между веществом, растворителем и сорбентом. Для предварительного подбора нужной системы используется метод Шталя [135], согласно которому на пластинку наносят несколько стартовых пятен одной и той же смеси в разные точки. Затем в эти точки с помощью пипетки накапывают небольшие количества различных систем растворителей. Полученные таким образом миниатюрные круговые хроматограммы часто дают возможность судить, какая из систем для данного случая дает оптимальное разделение. Другой быстрый способ оценки заключается в нанесении слоя сорбента на стеклянную палочку или трубку затем на слой наносят смесь веществ, а проявление проводят в пробирке [142]. Если для систем, состоящих из двух растворителей, найти оптимальное соотношение компонентов легко, то для многокомпонентных хроматографических систем это сделать довольно трудно. Для облегчения решения этой задачи польские авторы [158]1 предложили пользоваться диаграммами, вполне доступными в лабораторной практике. [c.65]

При разделении малых количеств смеси вещество в растворителе можно наносить с помощью микропипетки или пипетки с суженным наконечником в отдельные точки, расположенные близко друг к другу, причем в каждую точку наносят одинаковое количество образца. Этот способ, хотя и гарантирует равномерность нанесения, очень трудоемок и занимает много времени. Описана конструкция простого устройства для нанесения смеси с помощью серии пипеток [135]. Более быстрый, но требующий ловкости и навыка способ состоит в нанесении пипеткой непрерывной стартовой полосы. При этом способе довольно трудно обеспечить постоянство концентрации образца вдоль всей стартовой зоны. Кроме того, нужно следить за тем, чтобы не повредить слой концом пипетки (небольшое повреждение допустимо). При перемещении вдоль пластинки пипетку следует прижимать к линейке. [c.129]

Воспроизводимость результатов кинетических измерений повышается при использовании метода одновременного компарирования. В анализируемый раствор и растворы щкалы стандартов одновременно с помощью стартовой пипетки вводят реагент, инициирующий протекание каталитической реакции. Через определенный промежуток времени сравнивают аналитические сигналы анализируемого раствора и шкалы стандартов и оценивают содержание определяемого вещества. Метод не требует термостати-рования. [c.271]

Упаренную пробу исследуемого ядохимиката при помощи микропипетки на 1 мл или пипетки с оттянутым концом наносят 1Ю каплям в одну точку на пластинку с сорбентом на середину стартовой линии. Колбочку с пробой несколько раз (3—4) смывают небольшими порциями эфира (по 0,3 мл), которые наносят в центр того же пятна. Справа и слева от пробы помещаю стандартные растворы исследуемого ядохимиката, содержащие 2 5 10 мкг препарата. [c.71]

Ход определения. Сначала находят, как и при анализе методом А , значения отдельных фенолов. Для этого на стартовую линию увлажненной бумаги наносят калиброванной пипеткой капли растворов отдельных фенолов. Бумагу свертывают в цилиндр и закрепляют в этой форме, соединяя язычки вверху и внизу обычными канцелярскими скрепками. Затем цилиндр помещают в камеру и проводят хроматографическое разделение при 5—7 °С, для чего камеру помещают % холодильник. Через 45—60 мин растворитель достигает верхней линии. Тогда хроматограмму извлекают из сосуда, быстро подсушивают на воздухе и сразу же опрыскивают раствором диазотированного п-нитроанилина, пользуясь распылителем, показанным на рис. 21. Появляются окрашенные пятна. Разделив расстояния от стартовой линии до пятен на путь, пройденный растворителем, получают значения отдельных фенолов. [c.236]

По одной капле приготовленных растворов с помощью капиллярной пипетки наносят на стартовую круговую линию на круглом куске фильтровальной бумаги диаметром 200 мм и проявляют хроматограмму, как было указано на стр. 319. Проявителем служит 1—2 и. раствор соляной кислоты. Проявление ведут до четкого разделения компонентов смеси и до получения из искусственных смесей пятен с четкой градацией интенсивности их окрасок. На рис. 42 показана проявленная хроматограмма. [c.321]

Определение проводится с применением стартовой пипетки (см. стр. 67). В пробирки вводится вода, люцигенин, перекись водорода и растворы четырехокиси осмия различной концентра ции. В одну или несколько пробирок вместо раствора осмия вводят анализируемый раствор. Измеряют время, за которое достигнута определенная интенсивность свечения, и по графику находят содержание осмия. [c.127]

С помощью микропипетки (пригодна пипетка, используемая при анализах крови) на стартовые точки наносят по одной капле 1—3%-ного раствора исследуемых веществ. Диаметр пятен при нанесении не должен быть больше 0,5—0,7 см. [c.63]

На круге, отступая от центра на 2 см, очерчивают карандашом окружность, представляющую собой линию будущего фронта перемещения нанесенных на бумагу аминотолуолов. Эту линию принято называть стартовой линией. На стартовую линию наносят при помощи пипетки, сделанной из капиллярной трубки, каплю в количестве 0,002—0,004 мл испытуемой жидкости, а также контрольные вещества, содержащие соответствующие изомеры аминотолуола. [c.163]

Бензольные вытяжки собирают в мерную колбу емкостью 50 мл и доводят бензолом до метки. Пипеткой, сделанной из капиллярной трубки, берут каплю размером не более 0,004 мл (капли больших размеров не дают четкого разделения изомеров), наносят на стартовую линию фильтровальной бумаги, помещают в эксикатор, закрывая его плотно крышкой. Опыт продолжается до тех пор, пока фронт перемещения подвижного растворителя не дойдет почти вплотную до краев фильтровальной бумаги. [c.165]

Навеску нейтральной смолы в количестве 1 г растворяли в 15—20 мл диэтилового эфира и с помощью капиллярной пипетки наносили на стартовую линию как можно более равномерно. [c.149]

На хроматографической пластинке на расстоянии 1,5 см от нижнего края простым карандашом намечают стартовую линию. Пипеткой осторожным прикосновением, чтобы не нарушить слой адсорбента, наносят анализируемую пробу. Диаметр пятна не должен превышать 5—6 мм. На расстоянии 1,5—2 см от анализируемой пробы наносят пробы индивидуальных аминокислот ( свидетели ). Расстояние между пробами должно быть не менее [c.142]

Подготовленную пластину переносят на поверхность рабочего стола, покрытую фильтровальной бумагой. Калиброванной пипеткой, содержащей 5 мл раствора азобензола в петролейном эфире, порциями ( 0,2 мл) наносят анализируемый образец в виде полосы на стартовую линию (дожидаются испарения растворителя во избежание размывания хроматографической полосы). Образующаяся полоса должна отстоять от боковых сторон пластины и от нижнего края примерно на 1,5 см и по ширине не превышать 0,5 см. [c.551]

Для детектирования аминокислоты используют 0,2%-ный раствор нингидрина в этаноле. Вышедшие из колонки фракции собирают по 5 мл в пробирки и проверяют наличие аминокислоты. Для этого на полоску хроматографической бумаги капилляром (или микрошприцем) вносят пробы из каждой пробирки и после подсушивания на нагревательном столике хроматографической бумаги с нанесенными анализируемыми компонентами добавляют с помощью стеклянной пипетки в каждую из стартовых точек спиртовый раствор нингидрина (по 1-2 капле). После нагревания полоски бумаги с образцами в течение 1-3 мин на нагревательном столике аминокислота проявляется в виде розово-фиолетовых пятен. [c.564]

Извлечение и раствор свидетеля наносят капилляром или специальной пипеткой на стартовую линию, которая отстоит от нижнего края пластинки на 1,5—2 см. Для разделения обычно применяют способ восходящей хроматографии. Край пластинки погружают в жидкость, которую IFaливaют в хроматографическую камеру. Слой жидкости должен быть около 5 мм. Пластинку с закрепленным слоем помещают в хроматографическую камеру, насыщенную парами растворителя, вертикально, с тезакрепленным слоем — под углом 15—20 , Экспозиция от 30 мии до 1,5 ч. [c.139]

Полоску твердого носителя опрыскивают боратным буфером (0,1 М раствором КагВ407 1ОН2О, pH 9,3) и помещают в прибор для электрофореза. Исследуемое вещество в виде раствора в воде, боратном буфере или щелочном растворе с pH 9,3 наносят из пипетки на полоску носителя так, чтобы 5—10 мал раствора, содержащего 10—50 мкг вещества, образовали на влажном носителе вдоль стартовой линии возможно более узкую полоску длиной не более 5 с/л. [c.49]

Б. Хроматография. На колонку размером 1x50 см пипеткой осторожно наносят 2 мл сыворотки, диализованной в течение суток против стартового буферного раствора. После того как нанесенная сыворотка войдет в Ф-целлюлозу, ее остатки смывают тремя порциями буферного раствора по 2 мл. Фракционирование белков производят с помощью ступенчатого элюирования, подавая на колонку следующие растворы 0,02 М NaHzPO (стартовый буферный [c.214]

Ход анализа. На стеклянную пластину размером 200x200 мм равномерным слоем толщиной 0,25 мм наносят свежеприготовленную смесь адсорбента с водой (30 г Силикагеля тщательно перемешивают с 60-мл дистиллированной воды), пластинку подсушивают 10—15 мин при комнатной температуре, а затем выдерживают 30 мин в сушильном шкафу при 120 °С. На стартовую линию (на расстоянии около 15 мм от нижней кромки слоя) наносят пипеткой около 5 мкл 1 %-ного водного или щелочного раствора пробы исследуемого продукта оксиэтилирования. Хроматографирование осуществляют по восходящему способу в камере, заполненной на высоту 5—7 мм одним -ИЗ элюентов. Так, для элюирования вышеуказанных продуктов, за исключением оксиэтилированных аминов, применяют смесь бутанон-2 — вода. Для элюирования оксиэтилированных жирных аминов применяют смесь бутанон-2 — раствор аммиака. После подъема фронта растворителя на высоту 150 мм пластинку выдерживают 20— 30 мин в сушильном шкафу при 60—70 °С и обрызгивают модифицированным реактивом Драгендорфа. Разделенные компоненты проявляются в виде оранжево-красных пятен на желтом фоне. [c.219]

Богнар предложил метод одновременного компарирова-ния. Идея этого метода заключается в том, что в нескольких растворах (среди них исследуемый и несколько стандартных с различными концентрациями определяемого элемента) при одинаковых температурах одновременно начинается индикаторная каталитическая реакция. Одновременное начало реакции достигается применением стартовой пипетки специальной конструкции. Пипетка представляет собой серию обыкновенных пипеток, герметически присоединенных к закрытой с одной стороны трубке. Трубка имеет несколько отростков с кранами, через которые она сообщается с пипетками- Трубка также может быть герметически закрыта краном. При открывании крана в трубку входит воздух и пипетки одновременно освобождаются от заполняющего их раствора. [c.67]

Хроматографическое разделение экстракта на бумаге. Для хроматографического разделения эндогенных гиббереллиноподобных веществ используют бумагу быстрая или средняя Ленинградская № 2, промытую 20%-ным раствором химически чистой муравьиной кислоты, разрезанную на полосы размером 15 X 40 см, с продольным расположением волокон по длине полосы. Разделение проводят нисходящим током растворителя в цилиндрических камерах (высотой в 60 см) с притертой крышкой, стеклянной подставкой и хроматографической лодочкой (объемом 50 мл) для помещения растворителя. Спиртовой экстракт наносят на стартовую линию пипеткой сплошной полосой в объеме 1 мл на специальном станке в токе холодного воздуха. При хроматографии используют растворитель изопропиловый спирт (С3Н7ОН) — вода (5 2), для насыщения атмосферы хроматографической камеры на дно наливают ту же смесь растворителя в другом соотношении (2 5). В системе растворителей с нейтральной реакцией, в отличие от системы с кислой реакцией изопропиловый спирт — уксусная кислота — вода (4 1 5) и системы со щелочной реакцией изопропиловый спирт — МН40Н — вода (10 1 1), гиббереллиноподобные вещества располагаются компактным пятном с хорошо очерченными краями. [c.52]

Растворы проб (концентрация 5—20%) лучше всего наносить на стартовую линию с помощью автоматического аппликатора, так как в этом случае проба будет нанесена совершенно равномерно вдоль всей стартовой линии. В этих целях очень удобно пользоваться прибором Ое5а а Аи1оИпег, выпускаемым фирмой Веза а (рис. 9.13). Если же в лаборатории не имеется такого прибора, то пробу наносят на пластинки следующим образом. Маленький тампон из хлопковой ваты вводят с помощью тонкой проволоки на 4—5 мм внутрь кончика пипетки емкостью [c.123]

Получение хроматограмм в закрепленном слое носителя. Для получения тонкого закрепленного слоя сорбента заранее приготовленную массу, которая состоит из сорбента, гипса и воды, наносят на пластинку при помощи специальных приборов. Затем пластинки с носителем сущат на воздухе при комнатной температуре в течение 15—20 мин в горизонтальном положении. После этого их нагревают в сушильном шкафу при температуре 100—120° С в течение 30 мин. На подготовленной таким образом пластинке проводят стартовую линию на расстоянии 1,5 см от края. Затем на стартовую линию наносят пробу раствора при помощи пипетки (0,1 мл) или капилляра, но так, чтобы слой носителя при этом не нарушался. Существенную роль для разделения играет количество наносимого вещества, что сильно сказывается на величину Rf. Большие количества наносимого вещества дают большие и плохой формы пятна и заниженную величину Я/. [c.98]

Хроматографическое разделение па бумаге по технике выполнения эксперимента гораздо проще, чем другие методы разделения. Для получения хроматограммы на бумаге вырезают бумажную полоску определенных размеров (см. рис. 21) на ней на расстоянии 2,5 см от нижнего края проводят простым карандашом стартовую линию и на эту линию наносят микропипеткой пробу раствора. Конец пипетки чисто вытирают куском мягкой фильтровальной бумаги. Оптимальный объем наносимой пробы составляет 5—10 мкл. При нанесении капли пипетка должна находиться в вертикальном положении, [c.105]

Специальная техника необходима для равномерного нанесения относительно больших объемов растворов образцов в виде узкой полосы на старт пластинки для препаративной ТСХ. Нанесение пипеткой в виде ряда близко расположенных точек требует много времени и обычно дает неоднородные зоны. Более удачной стартовая полоса получается при использовании широкополосной пипетки [Л6 2 пистолета — микрошпоица [16] или автоматического аппликатора [16, 17]. Подробно препаративная ТСХ описана в работах [2, 3]. [c.66]

Воспроизводимость результатов каталиметрии повышается при использовании одновременного компариро-вания (вариант способа фиксированного времени). Метод заключается в том, что в анализируемый раствор и растворы шкалы стандартов одновременно с помощью стартовой пипетки вводят реагент, инициирующий протекание каталитической реакции. По истечении определенного времени сравнивают окраску (или флуоресценцию) айализируемого раствора со шкалой стандартов и оценивают содержание определяемого вещества. Вследствие одновременного проведения реакции во всех растворах температурные колебания в них о.цинаковы и [c.12]

Поскольку температура оказывает сильное влияние на скорость каталитических процессов, необходимо обеспечить тер-мостатирование растворов. Однако, если одновременно проводить измерения скорости реакции в анализируемых растворах и растворах с известным количеством определяемого иона и в одинаковых условиях, то отпадает необходимость в термо-статировании растворов. Очень важно при таком способе проведения определений, чтобы реакции в эталонных и анализируемых растворах начинались одновременно. Положив в основу описанный принцип, Богнар предложил метод одновременного компарирования [4]. Одновременность пуска реакций обеспечивается специальными стартовыми пипетками. Метод одновременного компарирования может быть применен и в случае проведения реакций при температуре, близкой к 100°. Ошибка определений не превышает 10%. [c.37]

Нанесение проб на тонкослойные пластинки. На стартовую линию пластинки (15 мм от края пластинки) с помощью калиброванной микропипетки наносят 2 мкл раствора 0,05 М по отношению СаСЬ и Mg b. Два стартовых пятна наносят на расстоянии не менее 10—15 мм друг от друга. При нанесении пятен необходимо следить за тем, чтобы порции раствора были точными, пятна должны быть кругообразными. Раствор необходимо наносить аккуратно так, чтобы не повредить концом пипетки слой сорбента. На дно цилиндрического стеклянного сосуда (90 X 40) с притертой крышкой наливают элюент, состоящий из ацетона (х. ч.) и 4 н. раствора хлористоводородной кислоты (93 7). Объем элюента составляет 10 мл. В камеру помещают стеклянные пластинки с нанесенными пробами. Продолжительность разделения кальция и магния от 15 мин до 2 ч. Хроматографированные пластинки сушат, опрыскивают насыщенным раствором ализарина в этаноле и помещают в камеру, насыщенную аммиаком. На фиолетовом фоне появляются пятна соединений кальция и магния соответственно интенсивной синей и пурпурной окраски. [c.336]

К 0,25 мл негемолизированной сыворотки прибавляют 0,5 мл 96° спирта. Осадок отделяют центрифугированием в течение 10 минут. Отсасывают 0,25 мл надосадочной жидкости и добавляют к ней 0,1 мл диазосмеси. Через 20 минут окрашенную смесь набирают в микропипетку на 0,1 мл и наносят на стартовую линию так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см (каждый раз из пипетки выходит примерно 0,002—0,003 мл раствора). По окончании нанесения йятен лист скрепляют -ниткой, чтобы он приобрел форму цилиндра, помещают в сосуд, содержащий растворитель и стоящий под колпаком. Следует наливать такое количество растворителя, чтобы пятна, находящиеся на стартовой линии, не соприкасались с ним. Восходящая хроматография длится 15—18 часов. Хроматограммы высушивают на открытом воздухе. Карандашом отмечают линию фронта растворителя и вычисляют коэффициент скорости распределения (РГ) каждого пятна. Эта величина представляет собой отношение расстояния в сантиметрах от стартовой линии до линии фронта растворителя к расстоянию от старта до центра пятна. [c.60]

В пробирку при помощи пипетки отбирают 2 аликвотные части раствора, равные 10 и 20 мл. В пробирки помещают заплавленные в верхней части стеклянные капилляры и на горячей водяной бане отгоняют почти полностью растворитель. Оставшуюся каплю раствора количественно, смывая несколько раз 1—2 кап. ацетона с помощью тех же капилляров, но уже с отломанной запаянной частью, наносят на стартовую линию хроматографической пластинки. Параллельно на пластинку наносят 2—3 стандартных раствора с содержанием инсектицида 5, 10 и 20 мкг. [c.92]

Пластину для ТСХ с алюминиевой подложкой разрезают ножницами на полоски длиной 10 см и различной шириной в зависимости от числа образцов (7 мм на каждый образец и по 15 мм на поля с каждой стороны). Линию нанесения образцов проводят в 15 мм от края пластины мягким карандашом и отмечают точку нанесения для каждого образца. Липиды растворяют в проявляющем растворе, образец (1 мкл) набирают в микрошприц и наносят на пластину в виде тонкой полоски. Можно наносить образец на ту же стартовую линию повторно, но необходимо соблюдать осторожность, чтобы не повредить иглой слой силикагеля. После того как место нанесения высохнет, пластину помещают в стеклянный сосуд для ТСХ, в котором содержится 100 мл проявляющего раствора, заранее уравновешенного с газообразной фазой. Пластину вынимают до того, как растворитель достигнет ее верхнего края. Полностью сухую пластину погружают на 30 с в полиизобутилметакрилат, растворенный в гексане. Как уже отмечалось выше, эта обработка не является обязательной. Сухую пластину выдерживают в течение 30 мин при 4°С в буфере Б. Пузырьки воздуха, прикрепившиеся к пластине, следует удалить концом пипетки. Пластину вынимают из буфера Б и тыльную сторону тщательно протирают. Затем ее кладут на кусок парафильма, чуть больший по площади, чем сама пластина, и помещают во влажную камеру. Надосадочную жидкость гибридом разводят в соотношении I 1 буфером Б и осторожно наслаивают по каплям на хроматограмму (100 мкл на 1 см ). Влажную камеру устанавливают строго горизонтально. После инкубации в течение 6 ч при 4°С пластину промывают 6 раз по 1 мин охлажденным ЗФР на качалке для удаления избытка антител. Затем инкубацию повторяют в тех же условиях с меченными 1-антителами (5-10 имп/(мин-мл) против IgG мыши в буфере Б. После инкубации в течение 6—12 ч и отмывки ЗФР в тех же условиях хроматограмму высушивают и экспонируют с рентгеновской пленкой. [c.170]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология