аминокислотные производные получение

Для количественного определения аминокислот в отличие от обычной количественной ГХ важно парциальное содержание в смеси не аминокислотного производного, а исходной аминокислоты. Ошибки всех операций, проводимых перед разделением и идентификацией, оказываются включенными в общую ошибку конечного аналитического результата. Поэтому превращение аминокислот должно быть количественным или по крайней мере количественно воспроизводимым. Большие различия в выходах, даже если они воспроизводимы, заведомо усложнят работу и сделают ее чрезвычайно трудоемкой. Как показано при исследовании образования бутиловых эфиров ТФА-аминокислот, средние выходы для определенных аминокислот почти не отличались друг от друга и составляли около 96% [16, 53]. Однако при получении летучих ТФА-метиловых эфиров Ала, Гли и Вал происходили значительные потери вещества даже при аккуратном концентрировании образцов [19, 53]. Если для аминокислотного анализа выбраны производные с высокой летучестью, подобных операций лучше изрыгать. [c.336]

Строение полученных аминокислотных производных подтверждается данными количественного анализа, ИК, УФ и ПМР спектроскопии. [c.46]

Применение газовой хроматографии для аминокислотного анализа лимитировалось несколькими факторами. В литературе можно найти много методов, явно удовлетворительных в руках их авторов, которые оказалось трудно или невозможно воспроизвести в любой другой лаборатории. Хорошей хроматографической методике свойствен выбор и проверка произвольных величин для ряда взаимосвязанных переменных — носителей, жидких фаз, температур и т. д. Если принять во внимание дополнительные переменные, связанные с выбором производных и метода синтеза, то неудивительно, что множество работ имеет мало общих точек соприкосновения и в каждой из этих работ говорится о каких-либо улучшениях или преимуществах. На этом основании доверие к ГХ как практическому методу определения аминокислот поколебалось. Те же особенности усложняли и написание обзора литературы, так как многоразмерная матрица, определяемая всеми переменными, ни в коей мере не являлась полностью исследованной. Часто объяснение, выдвигаемое в одной работе, нельзя подтвердить ссылкой на другую Например, производные, полученные в процессе А, анализируются одним исследователем на колонке типа X, и при этом пик аргинина не обнаруживается, другой автор получает производные по схеме В, анализирует их на колонке У и указывает пик аргинина. Неизвестно, то ли первому исследователю не удалось получить желаемое производное аргинина, то ли он [c.87]

Большой интерес представляют исследования по созданию новых экспресс-методов синтеза полипептидов. К ним относятся работы Д. Г. Кнорре, предложившего метод синтеза пептидов в водном растворе без выделения промежуточных соединений, распространенный недавно на синтез аминокислотных производных нуклеиновых кислот. Новые возможности открывает и метод синтеза пептидов на полимерном носителе недавно был предложен метод синтеза пептидов на полимере в растворе, имеющий ряд преимуществ в сравнении с ранее известным твердофазным методом с помощью синтеза на полимерной подложке недавно был получен ряд природных пептидов, в частности гипертензии (Л. А. Щукина). [c.515]

Тот факт, что реакция азотистой кислоты с шерстью протекает не по простой схеме, был доказан путем полного аминокислотного анализа производного, полученного при взаимодействии шерсти с 0,125 М раствором нитрита натрия и 0,25 М раствором ацетата натрия при pH 4,0 в течение 24 час при 38° [147]. Полученные данные показали, что в результате указанной обработки почти все аминокислоты шерсти так или иначе изменяются особенно сильно эти изменения затрагивают лизиновые, фенилаланиновые и тирозиновые звенья, а цистиновые звенья изменяются лишь незначительно (табл. У1-18). [c.360]

Прежде всего, белки уникальны в отношении химического строения. Это гетерогенные нерегулярные полипептидные последовательности 20 а-аминокислот и их производных, включающих самые разнообразные по своим химическим и физическим свойствам, т.е. валентным и невалентным взаимодействиям, атомные группы. В химическом построении белковых молекул уже можно усмотреть огромные потенциальные возможности к вариации физико-химических свойств. И в то же время белки представляют собой фактически единственный класс соединений, химические свойства которых нельзя непосредственно соотнести с химическим строением молекул. Поведение белков всецело определяется исключительной, присущей только им пространственной структурной организацией. Лишаясь ее, белки теряют все свои биологические свойства. За редким исключением, лишь белковые цепи способны самопроизвольно свертываться в строго детерминированные структуры, геометрия и конформационная динамика которых в физиологических (нативных) условиях полностью определяются аминокислотной последовательностью. Трехмерные структуры белков индивидуализированы, очень сложны и имеют строгий порядок, не сводящийся, однако, к периодичности. Способность природной полипептидной цепи к пространственной самоорганизации и обретению определенной молекулярной структуры - самая яркая особенность белков, отсутствующая у молекул искусственных полимеров, в том числе у полученных человеком поли-а-аминокислот. В растворе синтетический полимер находится в состоянии статистического клубка, флуктуации которого могут приводить к появлению в цепи регулярных участков лишь ближнего порядка. При этом, однако, ни при каких условиях не образуются стабильные трехмерные структуры, тем более идентичные для всех молекул данного полимера. В твердом виде синтетический полимер пребывает в аморфном состоянии, которое может включать частично кристаллическую фазу из беспорядочно ориентированных друг относительно друга зародышевых микрокристаллических областей. Искусственные полимеры отличаются качественно и по своим химическим свойствам, которые в той или иной мере воспроизводят свойства соответствующего мономера и могут быть описаны ограниченным набором реакций, специфичных для повторяющегося звена в свободном состоянии. [c.51]

Хроматография производных аминокислот получила интенсивное развитие в связи с разработкой методов определения первичной структуры белков. Вероятно, трудно найти в органической химии и биохимии более удачный пример столь тесной взаимосвязи развития представлений о структуре и функциях большого класса веществ, каким являются белки, с хроматографическими методами анализа. Основное внимание было направлено на разработку методов определения N-концевых остатков аминокислот в белках, причем в идентификации соответствующих производных большое значение имели тонкослойная (ТСХ) и бумажная хроматография (БХ) (см. обзоры [1, 2]). Газожидкостная и жидкостная колоночная хроматографии находят в этой области ограниченное применение, однако интерес к последнему методу постепенно растет. Интерес к жидкостной хроматографий вызван вполне определенными причинами. Во-первых, постоянно появляются новые методы избирательной модификации остатков аминокислот в белках, а идентификация производных аминокислот требует развития хроматографических методов. Во-вторых, исследованию подвергают все более труднодоступные белки, что в свою очередь вызывает необходимость создания надежных методов количественного анализа. Интерес к колоночной хроматографии возрастает также в связи с выделением и получением необычных аминокислот, а также в связи с необходимостью предотвращения ошибок при определении аминокислотной последовательности. Понятия современный и классический метод используют здесь условно, поскольку новые методики обычно создают на базе стандартной аппаратуры примером может служить автоматический анализ ДНФ- и ДНС-аминокис-лот [3, 4]. Насколько известно, до сих пор не пытались использовать скоростную хроматографию высокого разрешения для разделения производных аминокислот, хотя некоторые соединения, например ДНС-аминокислоты, являются для этого метода довольно удобным объектом. Производные аминокислот использовали в структурном анализе белков крайне неравномерно. По-видимому, всеобщее увлечение ДНФ-аминокислотами проходит окончательно, уступая место повышенному интересу [c.360]

Главным в нашей работе мы считаем выделение и установление строения колхавлина, выделение и изучение химических свойств специозина, новые наблюдения относительно химических свойств колхицина, - установление конформации аминогруппы и термическое бензоидирование тропонового цикла, синтез и изучение свойств аминокислотных производных колхицина, исследования по разработке метода получения колхамина. Существенными мы считаем и обобщения относительно связи строения и биологической активности в ряду колхицина, Перечисленное представляет собой основные положения, выносимые на защиту. [c.10]

Наличие колхициновой структуры во всех полученных аминокислотных производных колхицина подтверждается поглощением в области 1600 см" . Другое подтверждение колхициновой структуры - это восемь полос, характ изующих трициклическое строение колхицино-внх производных Очевидно практическое совпадение для всех [c.184]

По типу реакции колхицина с аммиаком и аминами впервые получены аминокислотные производные зтого алкалоида. Изучены условия реакции и свойства полученных соединений. Доказано со -замещение в колхициновых производных орнитина и лизина и о< -замещение в аргинине. Всего синтезировано 17 колхициновых производных аминокислот в том числе исходя из гликокола, -аланина, глутаминовой кислоты, основных аминокислот и дипептидов. Это первое систематическое исследование взаимодействия алкалоида с аминокислотами. [c.292]

Несмотря на то что карбодиимидному методу синтеза нуклеотидо-(Р- ,К)-пептидов свойственны некоторые недостатки, главным из которых является образование большого количества побочных продуктов, значительно снижающих выход основного соединения, метод этот очень прост, не требует подготовительных синтезов и тщательного высушивания растворителей. Особенно следует отметить возможность использования незащищенных нуклеотидов. Все это позволяет считать карбодиимидный метод удобным общим способом получения моно- и олигонуклеотидил-(5 - Ы)-амино-кислот и -пептидов (структур типа I), а также нуклеозид-5 -полифосфо-(Р- М)-аминокислот (типа IV). Кроме того, его можно рекомендовать для синтеза аминокислотных производных дезоксирибонуклеозид-5 - и З -фосфатов. [c.353]

Кроме указанного выше ограничения — невозможности использовать карбодиимид для активации фосфатного остатка, находящегося рядом с незащищенной гидроксильной группой, имеется второе ограничение, не позволяющее использовать этот реагент для получения любых иуклеотидо-(Р->М)-пептидов. Это ограничение связано со свойством карбодии.мидов активировать в присутствии сильных оснований только моноэфиры фосфорной кислоты диэфиры в этих условиях оказываются недостаточно а.ктивными и не реагируют с аминами и спиртами [21]. Следовательно, карбодиимидный метод не может быть использован для синтеза соединений типа Н1 — аминокислотных производных по меж-нуклеотидному фосфору. Этого очень существенного ограничения лишен другой распространенный метод активации фосфатных остатков в нуклеотидах — метод смешанных ангидридов, частным случаем которого яЕ ляется нирофосфатный метод. [c.353]

Вслед за этим в 1902 г. Гофмейстер выдвинул гипотезу об амидообразной связи аминокислотных остатков в белке, которая и легла в основу полипептидной гипотезы. Она же послужила основанием Э. Фишеру н Т. Курциусу для разработки методов синтеза пептидов. Одновременно с синтезом многочисленных пептидов, завершившихся синтезом нонадека-пептида, проводились исследования то выделению пептидов из белков. Был выделен ряд пептидов, тождественных с синтетическими. Они давали биуретовую реакцию и расщеплялись протеолитическими ферментами высшие пептиды обладали коллоидны ми свойствами. Все эти факты в тот период были достаточным подтверждением выдвинутой полипептидной теории. Однако методы органической химии, применявшиеся для выделения пептидов из гидролизатов белков, а именно фракционированная кристаллизация, извлечение органическими растворителями, получение производных и т. д. оказались для этой цели мало пригодными. Число выделенных пептидов было настолько незначительным, что возникли сомнения в справедливости выдвинутой теории. [c.520]

Самый ценный вывод, который был сделан на основании данных, полученных методом рентгеноструктурного анализа, состоит в том, что основной группой, отщепляющей протон от 2 -гидроксила, является Н1з-12, в то время как кислотная группа, отдающая протон уходящему 5 -кислороду, принадлежит Н1з-П9 [59]. (Любопытно, однако, что синтезированное производное рибонуклеазы с М -карбоксиметилированным остатком Н13-12 проявляет некоторую каталитическую активность — факт, в связи с которым возникает ряд вопросов [60].) Характер зависимости активности рибонуклеазы от pH согласуется с предложенным механизмом, поскольку найдены два значения р а (5,4 н 6,4), соответствующие двум группам, состояние ионизации которых контролирует активность фермента. (На основании ЯМР-спектров, показанных на рис. 2-42, было получено значение р/Са, равное 5,8.) Вблизи двух остатков гистидина расположен остаток Ьуз-41. Возможно, его положительный заряд используется для частичной нейтрализации отрицательного заряда на атомах кислорода фосфатной группы, облегчая атаку нуклеофильным агентом. С точки зрения химии рибонуклеазы интересен тот-факт, что под действием бактериальной пептидазы отщепляется фрагмент, содержащий двадцать аминокислотных остатков. Этот 5-пептид . Может воссоединяться с остальной частью молекулы с образованием активного фермента, называемого рибонуклеазой 5. Структура этого, фермента была определена методом дифракции рентгеновских лучей и по существу оказалась аналогичной структуре нативной рибонуклеазы. [c.121]

Итак, были рассмотрены результаты теоретического конформационного анализа совместно с данными экспериментального исследования пространственного строения серии метиламидов N-ацетил-а-аминокислот и их N-метильных производных в различных средах. В основу интерпретации опытного материал ыли положены геометрические и энергетические характеристики ограниченного набора оптимальных конформаций монопептидов, изученных теоретически. При этом обнаружилось полное соответствие между всеми вьшодами теоретического анализа, с одной сто-роньг, и эспериментальными данными, с другой. В результате была установлена непосредственная связь между оптимальными формами рассчитанных монопептидов и соответствующими опытными данными, полученными с помощью различных физических методов теоретический и экспериментальный подходы не обнаружили противоречий в оценке тенденции смещения положений конформационного равновесия у изученных монопептидов при переходе от неполярных к полярным растворам. Тем самым было показано, что использованные в расчете потенциальные функции и параметризация адекватно отражают реальные взаимодействия атомов одного аминокислотного остатка и удовлетворительно имитируют влияние на эти ближайшие взаимодействия окружающей среды. Расчетный метод конформационного анализа выдержал, таким образом, свое первое испытание на пути к решению задачи структурной организации белков. Это, пожалуй, самый важный вывод из проведенного нами комплексного теоретического и экспериментального исследования. Он, конечно, не решал еще многих проблем, но послужил надежным обоснованием дл следующего шага - анализа конформационных возможностей монопеп-тидов всех остальных стандартных аминокислот. [c.172]

Те же ограничения, что и для эфиров ацетиламинокислот, относятся к метиловым эфирам N-формиламинокислот, полученным и разделенным на газовом хроматографе Лоссе и др. [58]. Эти соединения тоже очень слабо летучи и имеют относительно большие удерживаемые объемы. Их можно приготовить обработкой свободной аминокислоты смесью муравьиной кислоты и уксусного ангидрида с последующей этерификацией диазометаном (см. ниже). Из полифункциональных аминокислот исследовали поведение при ГХ лишь Глу и Асп. Диметиловый эфир N-формил-Глу при нагревании превращается в метиловый эфир пирролидон-карбоновой кислоты, и в таком виде его обнаруживают в газовом хроматографе. Несмотря на то что формильные производные простых аминокислот образуются с высокими выходами, эти соединения до сих пор еще не использовали для аминокислотного анализа [c.321]

Количественный анализ аминокислот методом ГХ представляет несомненный интерес. Как правило, количественное определение аминокислотного состава пептида является одним из решающих моментов анализа последовательности. Поскольку при деградации крупного белка образуется большое число фрагментов, желательно затрачивать на анализ каждого из них минимальное количество времени и вещества. Привлечение в данном случае ГХ достаточно хорошо удовлетворяет этим условиям. Многочисленные исследования по ГХ аминокислот в конечном итоге направлены на решение этой задачи. Однако к действительно эффективному количественному методу предъявляются несоизмеримо более высокие требования, чем к качественному. Если учесть к тому же трудности получения и разделения производных аминокислот, станет ясно, почему до сих пор не разработан стандартный метод их количественного определения с помощью газового хроматографа. Основные трудности связаны, как подчеркивалось в разделе о получении производных, с полифункциональными аминокислотами. Метод, игнорирующий их идентификацию, может найти лишь ограниченное применение. Количественный анализ только простых аминокислот не может удовлетворять экспериментатора [40]. Вопрос о том, все ли аминокислоты, встречающиеся в белках, можно определять ГХ с достаточной точностью, все еще остается открытым. Здссь можно только вкратце рассмотреть имеющиеся условия и возможности. Проблемы, связанные с аппаратурой, необходимой для количественной ГХ, уже обсуждались ранее (см. стр. 302). [c.335]

Далее, чтобы пол> чить трипептид СЕЛ, необходимо удалить защиту Z с полученного производного и осуществить ацилирование продукта К-защи-щенным производным аминокислоты С (ZNH HR OX). Повторение такой последовательности операций (удаление защиты с Ы-конца и конденсация с К-защищенным производным следующей аминокислоты) ведет к последовательному формированию тетра-, пентапептида и, в конечном счете, л-звенной полипептидной цепи. Две несложные стадии на каждый шаг роста цепи представляются не слишком высокой ценой, так что кажется, что при доступньгх исходных соединениях построение сколь угодно длинной полипептидной молекулы с заданной последовательностью аминокислотных остатков является всего лишь вопросом достаточного терпения синтетиков. Однако (разумеется, есть однако ) в нашем схематическом изложении из двухстадийного цикла выпала одна техническая, но важная операция — выделение промежуточных олигопептидов из реакционных смесей. Что можно сказать об этой, на первый взгляд не принципиальной (и, во всяком случае, не стратегической) операции [c.299]

Для формирования комбинаторной библиотеки амидов 2-замещенных и 2,3-ди-замещенных 4-тназолндон-5-уксусных кислот использовано взаимодействие малеинимидов с тиомочевинами или тиосемикарбазонами в уксусной кислоте. Для синтеза труднодоступных производных с аминокислотным фрагментом в молекуле малеинимид, полученный ш situ длительным нагреванием малеинангидрида и соответствующей аминокислоты в уксусной кислоте, не выделялся, а вводился непосредственно в реакцию (схема 7). [c.333]

Аминокислотные остатки, примыкающие к Ы-концевой аминокислоте, можно определить, используя динитрофторбензольный метод (ДНФ-метод). При полном гидролизе ДНФ-полипентида образуется ДНФ-производное М-концевой аминокислоты, при частичном же гидролизе получается смесь ДНФ-пептидов, которые можно разделить и гидролизовать, а затем идентифицировать образовавшиеся аминокислоты. Например, Сенгеру удалось окислить инсулин надмуравьиной кислотой и выделить две фракции, в одной из которых (фракция В) содержался Ы-концевой остаток фенилаланина. В результате частичного гидролиза ДНФ-фенилаланиловой цепи был получен ряд ДНФ-пептидов из этих пептидов четыре были [c.29]

По реакции Михаэля из полимерных аминов был синтезирован полиамфолит с р-аминокислотными боковыми цепями Полимерные амины были получены нитрованием полимеров и сополимеров N-винилбeнзимидaзoлa или его производных с последующим восстановлением полученных нитросоединений Образовавшиеся при этом полимерные амины применяли для изго-готовления азокрасителей и анионообменных смол. [c.708]

Затем кембриджская группа провела ряд исследований при разрешении 2 А (рис. 10.8,6). При этом им удалось получить свыше 9000 отчетливых рефлексов для исходного белка и для каждого из четырех производных, содержащих тяжелый атом. Наиболее значительным результатом, полученным при этом исследовании с разрешением 2 А, было явное подтверждение наличия а-спирали, предположение о которой было высказано при исследовании с разрешением 6 А. Они обнаружили, что параметры а-спирали в основном имеют соответствующие теории размеры шаг спирали 5,4 А, проекция на ось спирали расстояния между аминокислотными остатками—1,5 А (см-, раздел, относящийся к фибриллярным белкам). Они пришли к выводу, что молекула миоглобина чрезвычайно компактна что ее глобулярная структура, вероятно, стабилизуется силами, возникающими за счет взаимодействия между близлежащими атомами, а не за счет полярных сил что полярные группы располагаются преимущественно на периферии молекулы, а неполярные группы —вйутри. Все поверхностные полярные группы, по-видймому, сильно сольватированы (рис. 10.8). [c.239]

Определение числа и природы С- и М-концевых аминокислотных остатков позволило добиться существенных успехов в выяснении структуры некоторых белков. Инсулин оказался первым белком, для которого полностью установлен порядок расположения всех аминокислот [102—107]. Сангер и его сотрудники путем окисления инсулина надмуравьиной кислотой получили два основных продукта, которые оказались пептидами, содержащими цистеиновую кислоту и состоящими из 21 и соответственно 30 аминокислотных остатков. Более короткая цепь (по обозначению Сангера — пептид А ) имеет Ы-концевой остаток глицина и С-концевой остаток аспарагина. В более длинной цепи (пептид В ) Ы-концевой аминокислотой оказался фенилаланин, а на С-конце цепи находится аланин. С помощью остроумных приемов, заключающихся в широком использовании метода получения динитрофенильных производных при помощи [c.27]

Смотреть страницы где упоминается термин аминокислотные производные получение: [c.154] [c.12] [c.67] [c.8] [c.188] [c.189] [c.352] [c.180] [c.14] [c.299] [c.296] [c.208] [c.213] [c.173] [c.198] [c.245] [c.546] [c.245] [c.242] [c.149] [c.95] [c.132] [c.228] [c.366] [c.242] [c.431] [c.76]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология