Растворы сравнения при измерении величин поглощения

Простые спектрофотометры обычно делают однолучевыми. Рассмотрим порядок работы на приборах этого типа. Вначале устанавливают выбранную длину волны. Затем компенсируют темновой ток, т. е. показания прибора, появляющиеся до включения оптической части прибора. Кювету с раствором сравнения устанавливают на пути светового потока и, открыв шторку, пропускают через раствор монохроматический свет. Проводят компенсацию, выводя стрелку гальванометра на нуль. Это означает, что для раствора сравнения установлено 100% пропускания. Затем раствор сравнения заменяют исследуемым раствором и стрелку гальванометра опять выводят на нуль. Теперь значение оптической плотности можно определить по шкале. Поскольку предварительно поглощение чистого растворителя было скомпенсировано, измеренную величину можно рассматривать как оптическую плотность анализируемой пробы. [c.359]

Метод высокого поглощения. В методе высокого поглощения прибор настраивают на нуль обычным путем при помощи шторки, закрывающей детектор от потока излучения. Однако настройку на 100% пропускания проводят по эталонному раствору с меньшей концентрацией, чем исследуемый. Затем эталонный раствор заменяют исследуемым и со шкалы считывают величину относительного пропускания. Как видно из рис. 24-6 (диаграмма Л), ре зультатом такого видоизменения является растяжение небольшой части шкалы до 100% таким образом, при сравнении с чистым растворителем пропускание эталонного раствора сравнения равно 10%, в то время как при сравнении с тем же растворителем испытуемый раствор пропускает 4%. Иными словами, пропускание испытуемого раствора составляет четыре десятых от пропускания стандартного раствора, измеренного относительно растворителя. Однако если раствор сравнения заменить эталонным раствором, его пропускание становится равным 100%. Пропускание же исследуемого раствора по-прежнему составляет четыре десятых от пропускания эталонного раствора, т. е. 40%. [c.154]

Излучение источника фокусируется зеркалами на диспергирующее устройство (призма из высококачественного кварцй фракционная решетка). Там пучок разлагается в спектр, изображение которого тем же зеркалом фокусируется на выходной щели монохроматора. Выходная щель из полученного спектра вырезает узкую полосу спектра чем уже щель, тем более монохроматична выходящая полоса. С помощью зеркала монохроматизированный пучок разделяется на два одинаковых по интенсивности луча один проходит через кювету сравнения, а другой - через кювету с образцом. Вращающейся диафрагмой перекрывают попеременно то луч сравнения, то луч образца, разделяя эти лучи во времени. После прохождения кювет световой поток зеркалами направляется на детектор, которым обычно служит фотоэлемент или фотоумножитель. После детектора сигнал усиливается и поступает на специальное электронное устройство -разделитель сигналов, где он раздваивается на два канала сигнал образца и сигнал сравнения. В обоих каналах сигналы усиливаются и подаются на самописец, который регистрирует отношение степени пропускания световых лучей через кювету образца к пропусканию светового потока через кювету сравнения. Логарифм данного отношения равен разности оптических плотностей образца и эталона эту величину можно записать, если перед самописцем установлено логарифмирующее устройство. В этом случае спектр будет представлять зависимость оптической плотности от длины волны или волнового числа и зависит от концентрации измеряемого образца. Для получения спектра, не зависящего от концентрации раствора, экспериментально полученный спектр перерисовывают по точкам, пользуясь законом Бугера-Ламберта-Беера, в спектр в координатах lg (или )- X (или V), Нерегистрирующие спектрофотометры - однолучевые приборы, измеряющие по отдельным точкам (спектрометрический метод). В сочетании с измерительной системой по схеме уравновешенного моста это наилучшие приборы для точных количественных измерений, которые осуществляются путем сравнения сигналов при попеременной установке в световой пучок образца и эталона. Основной их недостаток состоит в большой затрате времени для записи спектра, а не полосы поглощения при единственном значении длины волны. [c.185]

При несоблюдении закона поглощения излучений необходимо для построения градуировочного графика предварительно выбрать оптимальный раствор сравнения. Оптимальную концентрацию раствора сравнения выбирают следующим образом [9]. Готовят ряд эталонных растворов с постоянной величиной Д и интервалами АА не более 0,2—0,4. Измеряют оптические плотности каждого последующего раствора по отношению к предыдущему и вычисляют е = Лг/Дс и е Со, г, где Со, г — концентрация раствора, который в г-м измерении является раствором сравнения. [c.72]

Обычно проведение спектрофотометрических количественных определений требует сравнения величины поглощения, полученной для раствора испытуемого вещества, приготовленного, как указано в статье, с величиной поглощения стандартного образца. В таких случаях спектрофотометрические измерения вначале проводят с раствором стандартного образца, а затем с раствором испытуемого вещества. Второе измерение проводят как можно быстрее после первого и в тех же экспериментальных условиях. [c.43]

Сольватацией называется такое взаимодействие растворенного вещества с растворителем, которое приводит к более низкой активности растворителя вблизи частиц растворенного вещества по сравнению с чистым растворителем. В случае водных растворов сольватация называется гидратацией. Гидратация ионов обусловлена ориентацией дипольных молекул воды в электрическом поле иона, а гидратация полярных групп — в молекулах неэлектролитов и полимеров— ориентацией молекул воды в результате взаимодействия диполей и образования водородных связей. В гидратном слое молекулы воды располагаются более упорядоченным образом, но остаются химически неизмененными, чем гидратация отличается от химического соединения с водой окислов металлов и ангидридов кислот. Благодаря постепенному падению энергии связи растворенного вещества с растворителем (по мере удаления от молекулы растворенного вещества), сольватный слой имеет несколько диффузный характер, но в основном энергия взаимодействия и наибольшее падение активности растворителя сосредоточены в первом молекулярном слое. Растворитель в сольватной оболочке обладает, меньшей упругостью пара, меньшей растворяющей способностью, меньшей диэлектрической постоянной, меньшей сжимаемостью, он труднее вымораживается, обладает большей плотностью и т.,д. изменение любого из этих свойств раствора может быть использовано для определения величины сольватации. Наиболее прямой метод измерения сольватации состоит в установлении теплового эффекта поглощения навеской полимера определенного количества растворителя из смеси последнего с инертной к полимеру жидкостью например, Каргин и Папков определили, что сольватация нитроцеллюлозы в ацетоне и пиридине составляет около 1 молекулы растворителя на одну полярную группу — ОМОг полимера (табл. 15). Думанский и Некряч определили гидратацию ряда полимеров по теплоте смачивания (см. стр. 78), в частности, для крахмала найдено, что на глюкозный остаток приходится 3 молекулы связанной воды. Думанский установил также, что связывание воды самыми различными веществами происходит с тепловым [c.173]

Необходимо проверять погрешность, обусловленную различным поглощением стенок кюветы, путем измерения разницы поглощающей способности хлороформа в обеих кюветах. Полученные в основном определении результаты корректируют на эту величину. Если погрешность увеличивается, кюветы очищают путем погружения в азотную кислоту, ополаскивания водой и сушки с ацетоном и хлороформом. Метят одну кювету и используют ее в дальнейшем для раствора сравнения. [c.352]

Возможность определения фурфурола в водных растворах спектрофотометрическим методом основана на интенсивном избирательном поглощении света в ультрафиолетовой области при характерной длине волны А,=278 ммк. Для определения фурфурола в дистилляте по этому методу пипеткой отмеряют 10 мл ранее отогнанного раствора фурфурола в мерную колбу на 500 мл и раствор разбавляют водой до метки. Раствор тщательно перемешивают и определяют оптическую плотность раствора при А,=278 ммк в сравнении с оптической плотностью воды при той же величине К. Содержание фурфурола находят по калибровочному графику. Для измерения оптической плотности применяют кювету с толщиной рабочего слоя 10 мм. Такая подготовка к анализу приемлема в том случае, если содержание пентоз в исследуемом материале находится в пределах 2—10%. При более высоком содержании пентоз уменьшают концентрацию фурфурола соответствующим разведением раствора. При этом, определив по калибровочной кривой содержание фурфурола, результат увеличивают во столько раз. во сколько раз была уменьшена концентрация фурфурола в растворе для анализа. Для построения калибровочной кривой приготовляют растворы фурфурола с концентрацией от 5 мг1л до 1 мг/л. Оптическую плотность растворов определяют аналогично вышеизложенному. По полученным данным строят график, откладывая на оси абсцисс концентрацию фурфурола, а на оси ординат оптическую плотность растворов. Содержание потенциального фурфурола вычисляют по формуле [c.61]

Параллельно делались идентичные растворы тирозина в воде. Поглощение тех и других растворов фотографировалось в толстом слое (15 см). Стабилизированный источник излучения обладал непрерывным эмиссионным спектром. Измерение поглощения производилось фотометрическим путем, при этом из величины, характеризующей поглощение тирозина в гликоколе, вычиталась величина поглощения гликокола (снималась в том же опыте, на той же пластинке) и из поглощения тирозина в воде вычиталось поглощение воды. Экспозиции производились через 30—40 мин после присоединения тирозина к гликоколу и соответственно к воде. Кривые характеризующие результаты и являющиеся средними из большого числа опытов, показывают, что поглощение тирозина в характерной для него области (2700— 2800 А) проявляется яснее всего в 2% растворе гликокола. При этом увеличение поглощения по сравнению с поглощением тирозина в воде или в наиболее слабом растворе гликокола достигало 50—80% (рис. 9). [c.42]

В нерегистрирующем спектрофотометре выходящий свет пропускают через растворитель и раствор. Ток фотоэлемента пропорционален интенсивности попавшего в него света таким образом, два измерения дают соответственно Р и /. Щелевое устройство позволяет нормировать интенсивность света, прошедшего через растворитель, что равносильно приведению для каждой длины волны к единице, и тогда оптическая плотность lg РЦ) равна просто отрицательной величине логарифма интенсивности света, прошедшего через раствор. Дальнейший прогресс был достигнут благодаря применению автоматизации появились регистрирующие спектрофотометры, в которых интенсивности света, прошедшего через растворитель и раствор, постоянно контролируются по мере изменения длины волны, а самописец вычерчивает спектральную кривую зависимости оптической плотности от длины волны. Сравнение растворителя с раствором, производимое автоматически или вручную, позволяет выделить поглощение самого растворителя, причем необходимо принимать надлежащие меры, чтобы этот учет был точным, особенно если растворитель поглощает значительную часть падающего света. [c.188]

О2 и Аг поправочный множитель для Аг составляет 1,1, т. е. при переходе от газовой с азы к раствору коэффициенты поглощения изменяются приблизительно на 10%. Тот же порядок величины имеют и погрешности в значениях Аг, взятых из литературы. Для ряда веществ нами были выполнены непосредственные измерения интегрального коэффициента поглощения в растворе в жидком кислороде. Сравнение полученных экспериментальных значений Ар с данными, взятыми из литературы [8—19] позволяет сделать вывод, что для определения растворимости и количественного анализа можно пользоваться интегральными коэффициентами для газовой фазы, исправленными по формуле (1). [c.85]

Величины фактического поглощения (измеренные относительно воды в кювете сравнения), полученные для холостого раствора и для градуировочных растворов, следует регистрировать каждый раз, когда применяют данный метод. Такая регистрация величин позволит установить любое отклонение. Отклонение может быть вызвано загрязнением холостого раствора или градуировочных серий аммонием или порчей одного или более реактивов. В этом или другом случае нужно применять корректирующие меры. [c.161]

Согласно закону Бера, коэффициент поглощения является постоянной величиной, не зависящей от концентрации, длины пути и интенсивности падающего излучения. Закон Бера ничего не говорит о влиянии температуры, природы растворителя или длины волны. Установлено, что на практике температура имеет второстепенное значение, если только она не меняется в очень широких пределах. С изменением температуры немного изменяется концентрация (вследствие изменения объема). Кроме того, если поглощающее вещество находится в растворе в равновесии с другими веществами, следует ожидать влияния температуры в той или иной степени. В то же время некоторые вещества при охлаждении до температуры жидкого азота проявляют совершенно другие абсорбционные свойства. На практике при аналитических измерениях влиянием температуры в большинстве случаев можно пренебречь, особенно если сравнение поглощения неизвестного и стандартного образцов проводится при одной и той же температуре. [c.49]

Тот раствор, для которого величина / получается наибольшей и используется в качестве раствора сравнения, так как при наибольшем значении / достигается наибольшая чувствительность и точность определения. Однако следует иметь в виду, что в фотометрическом анализе увеличение концентрации раствора сравнения Сд не всегда приводит к повышению точности онределения, главным образом, из-за возникающих отклонений от основного закона светопоглощения вследствие немонохроматичности пог,лощаемого света. Поэтому при выборе оптимальных условий дифференциальных измерений следует, прежде всего, найти ту предельную концентрацию раствора сравнения, при которой обеспечивается прохождение через поглощаемый раствор достаточного количества света и используемый прибор устанавливается на нуль . При работе на регистрирующих спектрофотометрах нри дифференциальных измерениях перо должно перемещаться с обычной для прибора скоростью и величина максимума поглощения или оптической плотности не до,]1жна зависеть от усиления. В противном случае необходимо уменьшить либо толщину поглощающего слоя, либо концентрацию раствора сравнения. [c.106]

Наиболее целесообразно производить измерение оптической плотности исследуемого раствора при длине волны падающего светового потока, соответствующей максимуму поглощения. При фотометрических измерениях это осуществляется подбором светофильтра. Критерием соответствия максимума пропускания светофильтра максимуму поглощения абсорбционной кривой исследуемого раствора является величина оптической плотности. Оптическая плотность в этом случае должна быть наибольшей по по сравнению с ее величинами, измеренными с другими светофильтрами. [c.80]

Межфазные области в блок-сополимере СБС. Поскольку при 20 °С система полистирол — циклогексан находится ниже своей тета-температуры, следовало ожидать, что перенос растворителя происходит по полибутадиеновой матрице, а домены полистирола практически непроницаемы. (Известно, что полистирол поглощает четырехкратное количество жидкого циклогексана, а сополимер, растворим в этом растворителе. Однако максимальное количество поглощенного циклогексана не превышало 40% исходной массы образца. Кроме того, взятый для сравнения образец чистого полистирола за сопоставимое время эксперимента практически совсем не поглощал циклогексана. На основании этого был сделан вывод, что домены полистирола в блок-сополимере полностью непроницаемы для паров циклогексана и поли-стирольные домены, за исключением межфазных областей, можно рассматривать как частицы непроницаемой фазы, диспергированные в проницаемой сплошной среде.) Таким образом, предполагалось, что измеренные коэффициенты диффузии будут отражать структуру полибутадиеновой фазы, а их величины должны быть характерны для эластомеров (причем диффузия происходит по закону Фика). [c.254]

По принятой нами методике на одну и ту же фотопластинку фотографировались (с одинаковой экспозицией, но с различной шириной входной щели спектрографа) 7—8 спектров чистого растворителя и 3—4 спектра раствора исследуемого соединения. Ширина входной щели спектрографа изменялась в пределах от 0,028 мм до 0,391 мм. Спектры растворителя, снятые со щелью различной ширины, служат одновременно и марками почернения, и спектрами сравнения для измерения поглощения в спектрах растворов. Характеристические кривые строились по логарифмам ширины щели и соответствующим им почернениям в спектрах растворителя. По полученной таким образом характеристической кривой измерялась величина погашения в спектрах раствора исследуемого соединения, которые точно так же фотографировались с различной шириной щели. Ширина щели изменялась для раствора преимущественно в пределах от 0,091 до [c.106]

Если это поглощение является основным в видимой области спектра, вещество окрашено в желтый цвет, т. е. если из белого света удалить немного фиолетовых лучей, в результате получается желтый цвет. Именно благодаря обычно имеющему место поглощению в фиолетовой области спектра очень большое число веществ имеет более или менее яркую желтую окраску. Кроме того, желтые растворы обычно бывает трудно сравнивать отчасти именно потому, что точная область и интенсивность поглощения, обусловливающие желтую окраску, не всегда определенны и могут легко изменяться в довольно широких пределах. Другим следствием указанного обстоятельства является то, что для получения действительно надежных результатов колориметрические измерения следует проводить с помощью света, который содержит главным образом поглощаемую часть спектра и очень незначительную величину пропускаемой части спектра. Именно поэтому простое визуальное сравнение окрасок принципиально не может дать надежных результатов, если только падающий свет не является монохроматическим. Преимущество визуальных спектрофотометров в этом смысле состоит в том. [c.67]

Методом дифференциальной спектрофотометрии в ультрафиолетовой области были обнаружены изменения в спектрах при связывании ионов металлов с сидерофилинами [45, 64, 70]. В спектрах растворов комплексов металлов по сравнению со спектрами растворов апофермента максимумы поглощения наблюдаются вблизи 245 и 295 нм [64]. В литературе имеются некоторые разногласия относительно формы и интенсивности дифференциальной полосы при 295 нм [46] возможно, они связаны с различиями в концентрации исследуемых растворов, которые приводят к разным вкладам в приборную ошибку, связанную со светорассеянием или с общими трудностями в измерении небольших различий между большими величинами поглощения. По-видимому, дифференциальная полоса поглощения при 295 нм обусловлена воздействием связанного иона металла на тирозильные остатки [76]. Остатки триптофана также могут давать вклады в дифференциальные спектры [c.346]

Существенное значение для воспроизводимости в фотометрических методах имеет ошибка измерения. В зависимости от измеряемой величины поглощения воспроизводимость этой величины различна. Слишком низкие концентрации окрашенного вещества в растворе определяются с большой ошибкой, поскольку пропускание исследуемого раствора приближается к пропусканию раствора сравнения и составляет почти 100%. В интенсивно окрашенных растворах через раствор проходит только небольшая часть излучения, что также приводит к увеличению ошибки измерения. Чтобы найти значение поглощения, при котором результаты измерения характеризуются наилучшей воспроизводимостью, дважды дифференцируют уравнение Бера (см. стр. 12) и приравнивают вторую производную нулю. Оказывается, что при этом мипиму му ошибки измерения соответствует значение поглощения А = 0,43 (пропускание Т = 37%). Как видно из рис. 14, относительно небольшой ошибкой характеризуются измерения поглощения в пределах 0,2—0,8 (пропускание 65—15%). [c.26]

Вообще для измерения поглощения частично обесцвеченного фторидами комплекса циркония с эриохромцианипом рекомендуют [321 использовать в качестве раствора сравнения раствор эриохромоцианина R. Максимальная величина поглощения наблюдается при отсутствии фторидов она снижается по мере увеличения количества фторидов, а калибровочная кривая 1 имеет вид, показанный на рис. 70. Более удобно измерение поглощения [2], при котором в качестве раствора сравнения применяют раствор реагента (комплекс циркония с эриохромциапином). Тогда нулевому поглощению соответствует нулевое содержание фторидов. С увеличением количества фторидов возрастает разница в поглощении между раствором сравнения и исследуемым раствором, частично обесцвеченным фторидами. В результате получается калибровочная кривая 2 (см. рис. 70) такого же вида, как и в фотометрических методах. При таком способе измерения кювету с анализируемым раствором устанавливают в спектрофотометре в том месте, которое обычно занимает раствор сравнения. [c.437]

По сравнению с о-фенантролином использование батофенантроли-на для определения железа дает два важных преимущества. Во-пер-вых, мольный коэффициент поглощения комплекса железа(II) с бато-фенантрОЛИНОМ, равный 22 350 л моль см-i, почти в два раза больше соответствующей величины для комплекса железа (II) с 1,1 О-фенантролином. Во-вторых, первый комплекс экстрагируется несмешивающимися с водой растворителями, такими как изоамиловый спирт и м-гексиловый спирт. Это позволяет концентрировать комплексы железа (II) с батофенантролином в малом объеме неводной фазы. Поскольку можно непосредственно проводить спектрофотометрические измерения органической фазы, достигается очень высокая чувствительность. Обычно можно обнаружить 0,1 мкг железа в 1 мл раствора, используя о-фенантролин, и до 0,005 мкг в 1 мл при использовании батофенан-тролина. Эти методы настолько чувствительны, что следует предпринимать ряд мер предосторожности для уверенности, что железо не присутствует в виде загрязняющей примеси в реагентах, используемых для определения. [c.651]

Новые работы, произведенные в последние годы, обнаружили, что некоторое дополнительное молекулярное поглощение звука создают соли, растворенные в воде. В частности, оказалось, что интереснее всего ведут себя соли магния по измерениям Смита, Барретта и Бейера [8], даже существующая небольшая концентрация MgS04 в океанской воде способна приблизительно в 1,5 раза увеличить молекулярное поглощение ультразвука по сравнению с дистиллированной водой. В области звуковых частот измерения были проделаны А. А. Аревшатяном. При этом оказалось, что хлористый натрий дает эффект, который практически не уступает действию солей магния хотя относительная величина поглощения звука, рассчитанная на доли моля раствора, здесь меньше на 30—40%, но зато концентрация хлористого натрия в океанской воде в 16 раз превышает концентрацию сернокислого магния. В общей сложности соли, растворенные в океанской воде, должны увеличивать молекулярное поглощение энергии звука в 3—4 раза по сравнению с дистиллированной водой. Теория явления пока отсутствует. [c.776]

Авторы этих работ установили, что оксиацетиленовое пламя обеспечивает в 9 раз лучшую чувствительность по сравнению с оксиводородным пламенем при следующих параметрах скорость потока кислорода 4 л мин, ацетилена — 2,2 л1мин, скорость распыления раствора 4-метил-2-пентан.она 3,8 мл1мин. Отметим, что грамм-атомный состав этого топлива соответствует С —29%, 0 — 29%, Н —42%, т. е. весь кислород идет на окисление углерода. Чувствительность определения алюминия критически зависит от участка пламени, в котором измеряется поглощение. Максимум абсорбции наблюдался на расстоянии 19 мм от сопла горелки, а на расстояниях 15 и 24 мм абсорбция уменьшается примерно вдвое (Фассел и Моссотти проводили измерения на высоте 25 мм от сопла горелки, что связано, по-ви-димому, с усилением восстановительных свойств пламени). При боковом перемещении пламени относительно оптической оси наблюдаются два максимума, соответствующих пересечению пучком света границ внутреннего конуса пламени. Уменьшение количества вводимого в пламя ацетилена при постоянной скорости распыления раствора и постоянном потоке кислорода уменьшает абсорбцию алюминия. Например, при изменении отношения кислород/ацетилен с 2,7 до 4,5 абсорбция уменьшается примерно вдвое. Чувствительность определения алюминия составляла около 8-10" %, что довольно хорошо совпадает с приводимой в табл. 29 величиной 6 10 7о. [c.223]

Эриохромцианин R — натриевая соль сульфооксидиметил-фуксондикарбоновой кислоты (табл. 10). Применение его для определения бериллия ограничено высоким поглощением раствора красителя в условиях фотометрирования и сильным влиянием температуры на интенсивность окраски комплекса. Измерения светопоглощения производят при 15—30° С через 3—4 часа после смешивания реагентов [300]. Концентрация реагента не должна быть более 0,5%. Максимальная окраска комплекса с бериллием наблюдается при 512 ммк. При этой длине волны наименее интенсивной окраской обладают растворы эриохром-цианина при pH 7,9. В присутствии комплексона III оптимальная величина pH 9,2—9,5 [300, 394]. Сравнение светопоглощения эриохромцианина R и его комплекса с бериллием в зависимости от pH раствора приводится на рис. 15. [c.79]

Чувствительность определений оценивается как концентрация элемента в растворе, которая создает абсорбционный сигнал, равный 1%, и выражается в мкг1мл. Для сравнения различных аналитических методов удобным является понятие предел обнаружения 17]. Предел обнаружения определяется как концентрация, вызывающая абсорбцию, соответствующую удвоенной величине сигнала при измерении холостого опыта (флуктуации фона). Некоторые авторы предельную чувствительность метода оценивают по величине изменения поглощения, выраженного в оптической плотности Омов [3] [c.243]

Величины фактического поглощения (измеренные относительно воды в кювете сравнения), полученные для холостого раствора и для градуировочных растворов, следует регистрировать каждый раз, когда применяют данньЕ [ метоп. Такая регистрация величин позволит установить [c.156]

Для проверки уравнения (III. 118) Эйзенман [22,60] измерил потенциалы ряда стеклянных электродов в чистых растворах 0,1 н. Na l и 0,1 н. КС1 в электрохимической ячейке, включающей в качестве электрода сравнения НКЭ. Кроме того, измерение поглощения Na и К позволило рассчитать отношения подвижностей ионов к/uNa В стекле. Все полученные величины для двух типов стекол приведены в табл. IX. 10 наряду с значениями К, найденными потенциометрически (рассчитанными) и из опытов с радиоактивными индикаторами. [c.288]

При разработке метода определения стронция индикаторы сравнивались по предельно допустимой кислотности среды, контрастности окраски и чувствительности. Максимально допустимая кислотность среды (рНдоп) является важным показателем практической пригодности того или иного реагента, поскольку избирательность метода и воспроизводимость результатов при меньших pH, как правило, выше. За рНдоп принималось то минимальное значение pH, при котором окраска комплекса развивается полностью — начало плато на кривой D — pH при соотношении Ме R = 1 5. Контрастность реакции характеризовалась значением АЯ — разностью между Ящах спектров поглощения растворов комплекса и реагента. Спектры поглощения комплексов стронция с изучаемыми реагентами имеют два пика (рис. 4, 5). При вычислении величины АЯ, учитывалась длина волны второго максимума. Под чувствительностью реакции в данном случае понимали ту концентрацию стронция в растворе, которая вызывала изменение светопоглощения раствора реагента на 0,010 при измерении оптической плотности на СФ-4 в кюветах с Z == 10 мм относительно раствора реагента при рНдоц. Результаты сравнения приведены в табл. 10. Из таблицы видно, что изученные реагенты дают со стронцием цветную реакцию в достаточно кислой среде вполне удовлетворительной контрастности (ДХ = 6590 hjk). [c.73]

Присутствие белков в высоких концентрациях усиливает поглощение при 492 ммк, но максимум поглоп1,ения соответствует большим длинам волн. Влияние этих примесей можно почти полностью исключить для этого после завершения реакции реакционную смесь встряхивают с равным объемом хлороформа. Чтобы удалить эмульгированный х горо-форм из водной фазы, жидкость центрифугируют или оставляют на ночь для отстаивания [9] и спектрофотометрпруют водную фазу. Оптическая плотность, обусловленная гексозамииом, возрастает примерно на /3 по сравнению с первоначальной. Точность количественного определения увеличивается при применении дихроматических измерений при 492 и 520 ммк. Разность />490 — -Опго только на 25% меньше, чем 492, и является линейной функцией концентрации гексозамина. Величина коэффициента экстинкции для п-галактозамина на 5%1 меньше его величины для ю-глюкозамина. Окраска раствора устойчива. [c.51]

Согласно одному из вариантов дифференциального метода, называемого иногда ЛЕ или Ае методом, измерение проводится путем сра1внения неизвестного вещества при определенной величине pH к той же концентрации вещества, но при другой, отличной от первой, величине pH. Например, для определения фенолов разводят часть раствора щелочным, буфером, а другую часть кислотным буфером. Измеряют поглощение более щелочного раствора, используя для сравнения кислотный раствор. Рассчитывают содержание фенолов, применяя А Е значение, найденное для чистого вещества в той же паре буферных растворов. [c.192]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология