Методы измерения интенсивности флуоресценции

Методы измерения интенсивности флуоресценции [c.191]

Из приведенных данных видно, что предел чувствительности данной реакции при применении инструментальных методов измерения интенсивности флуоресценции равняется 0,25 цг/5 мл [c.28]

Показано, что флуоресцирующее вещество и вещество, вызывающее коричневую окраску, не обязательно одно и то же. Описан метод измерения интенсивности флуоресценции с применением панкреатина. [c.40]

Методы измерения интенсивности поглощения УФ-излучения и гашения флуоресценции [c.187]

Прямое измерение интенсивности флуоресценции веществ на тонком слое сорбента обладает рядом существенных преимуществ но сравнению с методом ослабления флуоресценции, [c.191]

Флуориметрические методы определения бериллия основаны на измерении интенсивности флуоресценции его соединений с некоторыми органическими веществами (производными флавона, оксиантрахинона, 8-оксихинолина и др.)- Флуоресцентные реагенты на бериллий приведены в табл. 11. [c.119]

Метод основан на применении монохроматического (как правило, лазерного) излучения для возбуждения атомов или молекул определяемых компонентов и измерении интенсивности флуоресценции, являющейся функцией содержания определяемого компонента газовой смеси. [c.921]

Можно определять содержание галлия в биологических материалах путем измерения интенсивности флуоресценции хлороформного раствора оксихинолината галлия в ультрафиолетовом свете 774], либо методом пламенной фотометрии [670]. [c.192]

Большинство люминесцентных определений неорганических веществ основано на измерении интенсивности флуоресценции комплексных соединений катиона с органическими реагентами [8]. Однако интенсивность флуоресценции таких комплексов, а соответственно и чувствительность метода, часто недостаточно высоки. Повышение интенсивности флуоресценции комплексов неорганических веществ с органическими лигандами при замораживании растворов представляет поэтому существенный интерес для увеличения чувствительности люминесцентных реакций. [c.75]

Методы, основанные на флуоресценции веществ, большей частью разработаны в области органического анализа. В неорганическом анализе они нашли применение сравнительно недавно Флуоресцентный анализ заключается в исследовании света, испускаемого веществом, облучаемым ультрафиолетовыми лучами (обычно длиной волны между 3000 и 4000 А). Используются также и другие средства возбуждения флуоресценции, как, например, рентгеновские и катодные лучи. При использовании этого метода для количественного анализа необходимо тщательно продумать выбор источника возбуждения, светофильтров условий подготовки образца и способа измерения интенсивности флуоресценции. [c.176]

Метод заключается в измерении интенсивности флуоресценции хромофорных группировок триптофана и тирозина в области 340—350 нм под действием УФ-облучения (280—290 нм). Наибольший вклад вносит флуоресценция индольного хромофора триптофана, наиболее чувствительная к структурным изменениям исследуемого белка. Наименьший вклад вносит флуоресценция остатка фенилаланина. По чувствительности флуоресцентный метод на три порядка превосходит спектрофотометрию при 280 нм, однако здесь предъявляются более высокие требования к природе и чистоте элюента. К другим факторам, ограничивающим применение метода, относится различная зависимость интенсивности флуоресценции от pH среды у разных типов белков. [c.459]

Ко второй группе мы относим те методы количественного анализа, которые основаны на измерении интенсивности флуоресценции интересующего вещества. [c.70]

Елисеевой [35] описан упрощенный метод определения малых количеств рибофлавина в моче,основанный па измерении интенсивности флуоресценции рибофлавина в водных растворах. Для внесения поправки на флуоресценцию примесей автор предлагает разрушать рибофлавин фотохимическим путем, а именно облучением ртутной лампой ПРК-2 без светофильтра. [c.204]

С развитием соответствующей аппаратуры флуоресценцию стали применять для анализа ряда веществ, которые проявляют это свойство. Мы не будем подробно освещать этот метод, значительно усовершенствованный за последнее десятилетие, ввиду ограниченности его применения в геохимии однако прибор, разработанный для измерения интенсивности флуоресценции растворов [2], существенно-облегчил У. Д. Эвансу и др. [3] геохимическое исследование месторождения нефти Ноттингемшира. В этой главе мы коснемся исключительно флуоресценции растворов. [c.251]

В качестве источника ультрафиолетового света применена лампа ДРШ-250 с двойным светофильтром из УФС-3 и раствора сульфата меди. Измерение интенсивности флуоресценции каждого образца проводилось один раз с применением светофильтра, выделяющего часть спектра, начиная с 750 ммк, и второй раз с интерференционным светофильтром, имеющим максимум пропускания около 700 ммк. Отношение этих интенсивностей резко зависит от содержания хрома в образце, что позволяет построить калибровочную кривую и определять по ней содержание хрома в рубине от десятых долей процента до 1—2%. Метод дает возможность определять хром в рубинах любой формы и практически любых размеров с ошибкой около 5% от определяемой величины. [c.366]

При детектировании конкретной смеси веществ перед оператором встает ряд вопросов, в том числе — какой способ измерения выбрать (денситометрию но пропусканию или отражению исходного излучения, измерение интенсивности флуоресценции или метод ее гашения) в зависимости от свойств самих веществ, распределения их по толщине слоя (равномерного, вблизи поверхности сорбента, вблизи подложки), диаметра зоны (рис. У.З), толщины слоя сорбента, оптических свойств сорбента и подложки. [c.82]

Метод основан на измерении интенсивности флуоресценции кристаллофосфора sl-TI (см. реферат к статье Определение [c.239]

Метод основан на измерении интенсивности флуоресценции комплекса алюминия с салицилаль-о-аминофенолом. Определение алюминия выполняют методом добавок после растворения анализируемого уксуснокислого натрия в воде и нейтрализации раствора до pH 5,8—6,0. В качестве холостой пробы используют анализируемый раствор с добавкой комплексона 111. [c.240]

Количественный флуоресцентный метод анализа основан на измерении интенсивности флуоресценции искомого вещества путем сравнения его с интенсивностью флуоресценции вещества с известной концентрацией. Для оценки интенсивности флуоресценции наибольшее применение нашли визуальный и фотометрический методы. Вследствие того что выход флуоресценции зависит от ряда факторов, подготовку пробы и измерение интенсивности флуоресценции необходимо вести в строго определенных условиях. [c.117]

Метод основан на выпаривании аликвотной части пробы в платиновых чашках, сплавлении остатка со смешанным флюсом из смеси карбонатных солей калия и натрия при 600—650° С и измерении интенсивности флуоресценции диска на флуориметре или визуально путем сравнения с серией стандартных дисков. [c.132]

Применение фосфоресценции в анализе дает возможность практически полностью исключить свечение холостой пробы, вызванное флуоресценцией анализируемого раствора, кюветы и отраженным светом источника возбуждения. При этом повышается чувствительность метода. Измерение интенсивности фосфоресценции в разные промежутки времени после возбуждения и изменение температуры повышает избирательность метода. [c.8]

Определению содержания красителей на тканях посвящена работа [93], которую проводили по методу внещнего стандарта на вакуумном автоматическом рентгеновском спектрометре Р -1212 с конструктивно измененным устройством для подачи образцов. Концентрацию красителя рассчитывали по интенсив--ности рентгеновской флуоресценции входящих в состав красителя элементов. В качестве таких элементов использовали, например, 8, Сг, Со, N1, Си, Вг, т. е. те элементы, которые не содержатся в исходных неокрашенных волокнах и тканях. Для определения и учета фона параллельно проводили измерения на контрольном неокрашенном образце. Анализ вели по градуировочным графикам, для построения которых в качестве эталонов использовали образцы окрашенной ткани, проанализированные химическими методами. Обычно наблюдалась линейная зависимость между интенсивностью рентгеновской флуоресценции и концентрацией красителя. Результаты измерения интенсивности флуоресценции от элементов с малыми атомными номерами, например серы на шерсти, сильно зависят от равномерности распределения красителя в волокне или ткани. Для исключения этого недостатка анализ проводят на предварительно измельченном волокне, спрессованном в таблетку. На каждом образце проводят три измерения продолжительность одного измерения 100 с. Точность определения зависит от содержания определяемого элемента и возрастает с его увеличением. Метод прост в исполнении и весьма перспективен, особенно в тех случаях, когда требуются только относительные значения отдельных компонент для расчета рецептуры красителей. [c.66]

За последние годы число работ, носвященных флуоресцентным реакциям (т. е. приему II), значительно возросло, одновременно изменился и их характер флуоресцентные реакции разрабатывают с неменьшей тщательностью, чем обычные аналитические, например, колориметрические.. Все чаще их используют для количественных определений элементов, присутствующих в минимальных количествах, и применяют для этого объективные методы измерения интенсивности флуоресценции с помощью высокочувствительных фотоэлектрических фотометров. [c.165]

С точки зрения путей релаксации энергии возбужденных частиц и, соотв., методов детектирования, различают след, методы Л. с. 1) абсорбционно-трансмиссионные, основанные на измерении спектра пропускания образца (нечувствительны к судьбе возбужденных частнц) 2) опто-калоримет-рич. (опто-термич., опто-акустич. и т.д.), основанные на непосредственном измерении поглощенной в образце энергии при этом необходима релаксация части энергии возбуждения в тепло (безызлучат. релаксация) 3) флуоресцентный, основанный на измерении интенсивности флуоресценции как ф-ции длины волны возбуждающего лазера (излучат, релаксация) 4) опто-гальванич., в к-ром возбуждение частиц регистрируют по изменению проводимости, и фотоиониза-ционные-по появлению заряженных частиц. [c.565]

Определение при помощи койевой кислоты [451]. Максимум излучения раствора соединения находится при 470 нм, максимум светопоглощения — при 380 нм. Оптимальные условия определения pH 5,7—6,8 концентрация реагента 0,2—0,6% перед измерением интенсивности флуоресценции растворы выдерживают 30 мин. Метод позволяет определять 2—50 мкг Au в объеме 50 мл с чувствительностью 0,02 мкг1мл. Определению 40 мкг Au не мешают 10 мкг Pd(II), 50 мкг Fe(IH), 100 мкг Hg(H), Pt(II), 2 мг Te(IV), 200—300 мкг Ag, 400—500 мкг u, 10 мг Т1(1П). Сильно мешают NH4 I и NH4NO3. [c.164]

Установлено, что между концентрацией изучаемого вещества в растворе и измеренной интенсивностью флуоресценции существует прямая зависимость, что позволяет использовать данный метод в целях количественного определения производных кумарина, особенно учи-тьгаая возможность сочетатя данного метода с хроматографией на бумаге или в тех. Тем не менее, метод флуорометрии, несмотря на его высокую чувствительность, пока не нашел применения в количественном анализе кумаринов. Однако, флуоресцентные свойства производных бензо-а-пирона нашли широкое применение в качественном анализе, главным образом, при хроматографии на бумаге и в тонких слоях сорбентов. Следует отметить, что по характеру флу-оресце шии можно отличить фурокумарины от других представителей этого класса соединений. [c.76]

Методы определения хрома путем измерения интенсивности флуоресценции по линии СтКа, вызванной рентгеновскими лучами, применяют при анализах руд, горных пород, минералов, биологических объектов, металлов, сплавов. Интенсивность аналитической рентгеновской линии обусловлена концентрацией элемента, природой основы, в которой находится элемент, природой и концентрацией других элементов, присутствующих в пробе, и толпщной пробы [41. Измеренная критическая толщина слоя металлического хрома равна 0,003 мм для порошков она значительно выше [534, с. 2301. Теоретические значения предела обнаружения хрома по критерию Зст равны при определении в металлическом железе — 4,0-10 %, в бериллии— 1.0-10 % [4, с. 232]. Пределы обнаружения хрома в растворах 5 мкг/мл [534]. При определении хрома используют различные типы спектрометров с кристаллом Ъ1р, рентгеновской трубкой с У-анодом (50 кв, 30 ма) в качестве приемника излучения используют сцинтилля-ционный счетчик с кристаллом КаТ(Т1) или проточные пропорциональные счетчики. [c.97]

Флуорометрический метод определения витамина в пищевых продуктах (по К. А. Половолоцкой, Н. И. Зайцевой, Е.П. Скоробогатовой). Метод основан на измерении интенсивности флуоресценции раствора витамина В . В флуорометре световая энергия флуоресценции превращается при помощи фотоэлементов в электрическую, которая измеряется чувствительным гальванометром. Восстановленная форма рибофлавина утрачивает свою флуоресцирующую способность. Недостатком флуорометрического метода является то, что флуоресценция вытяжек может зависеть не только от содержания в них рибофлавина, но и от содержания других веществ. Это учитывают, дополнительно определяя в отдельной пробе флуоресценцию сопутствующих веществ после восстановления рибофлавина ( гашения флуоресценции восстановителями, например Na SaOi HjO). [c.142]

Метод измерения отражения и гашения флуоресценции можно также применять при ТСХ веществ, поглощающих УФ-излучение. Метод гашения флуоресценции позволяет определять только вещества с максимумом поглощения выше 240 нм, так как максимум возбуждения обычно используемого флуоресцентного индикатора находится около 280 нм. Сравнивая эти методы, можно сказать, что наилучшие результаты дает количественное детектирование по отражению по сравнению с пропусканием и гашением флуоресценции. Наиболее эффективным методом количественного анализа является измерение интенсивности флуоресценции веществ в слое сорбента. Это — высокоселективный, высокочувствительный (особенно при использовании лазерных флуоресцентных детекторов) метод анализа с широким интервалом линейной зависимости количество вещества — интенсивность флуоресценции, не зависящий от формы зоны. Широкие возможности метода флуоресцентного детектирования в ТСХ связаны с возможностями дерийатиза-ции веществ до или после ТСХ с превращением их в флуоресцирующие производные или инициированием флуоресценции разделенных веществ электрохимическими или химическими методами. [c.371]

Метод атомной резонансной флуоресценции — измерение интенсивности флуоресценции, возникающей при поглощении резонансного излучения, — имеет некоторые преимущества по сравнению с методом резонансного поглощения для кинетических исследований реакций атомов в основном состоянии. Если в качестве источников резонансного излучения используются микроволновые разрядные лампы с обычно сильным самообра- [c.316]

Ясно, что все ранее сказанное относительно необходимой тщательности работы в полной мере относится к измерениям интенсивности флуоресценции тиохрома. Как и для рибофлавина, предложены стеклянные стандарты [38] один для дозировки растворов, содержащих 0,5 у мл, другой для растворов концентрации 1,0 у мл. Метод с успехом применяется для определения витамина В в биологических наздкостях. Работа Сток [39] посвящена уточнению методики определения витамина В при использовании для измерений интенсивности свечения фотоэлектрического фотометра. Рекомендуется готовить стандартный раствор из сульфата хинина. Подчеркивается необходимость учитывать склонность крис- [c.204]

Интересен опубликованный в 1951 г. доклад подкомитета [40], спв циально выделенного в США для проведения работы по уточнению тио-хромного метода в применении к определению витамина в злаках и хлебных продуктах, р солоде, дрожжах, мясе и продуктах из них. В докладе сопоставляются результаты анализов одиннадцати различных лаборато рий. Установлено, что очистка адсорбцией на обменном силикате дает лучшие результаты, чем отмывание изобутиловым спиртом, что окисленНе следует проводить заранее приготовленной смесью щелочи и красной кровяной соли, а не добавлять их раздельно, что для отделения тиохрома лучше применять изобутанол, насыщенный водой, а не сухой, что получаемые результаты целесообразно проверять методом добавления навески аневрина к исходному экстракту для проверки потерь в процессе анализа и что для конечного определения содержания аневрина иредиочтительно пользоваться непосредственным пересчетом на иитепсивность флуоресценции тиохрома, а не калибровочной кривой. Отмечается, что степень точности метода неодинакова в ирименении к различным продуктам. Предложен новый количественный метод определения витамина В , основанный на измерении интенсивности флуоресценции соединения, образующегося при взаимодействии витамина с бромистым цианом [41]. [c.205]

Определепие содержания 2-п итро нафталина в 1-н и т-ронафталино [97]. Нитронафталии сульфируют серной кислотой, восстанавливают (цинковой пылью или иным металлом), разбавляют до нужного объема и обязательно фильтруют, так как даже в растворах, кажущихся прозрачными, взвешенные частицы цинка влияют на интенсивность свечения pH раствора должен быть 4,6 в качестве буфера применяют уксуснокислый натрий. При возбуждении ближним ультрафиолетовым светом (365 ммк) -изомер ярко люминесцирует синим светом ( 450 ммк), а-изомер — зеленоватым ( 510 ммк) при измерении интенсивности флуоресценции -изомера зеленое свечение а-изомера ослабляют с помощью светофильтра. Кроме того, условия сульфирования подобраны так, что около 95—100% 1-питронафталина разрушаются, содержание же 2-нитропафталина остается неизменным этим повышается чувствительность метода. [c.213]

В последней работе приведены примеры каждого из трех способов использования флуоресцентных измерений для определения молярного отношения металла в хелате к хелатообра-зующему агенту. Первый из них — это хорошо известный метод непрерывных вариаций [386], основанный на измерении интенсивности флуоресценции ряда растворов, в которых суммарная концентрация (ион металла + реагент) одинакова, а отношение концентраций иона металла к реагенту варьирует. Максимум флуоресценции наблюдается в той точке, где отношение [ион металла]/[реагент] в растворе равно такому же отношению в комплексе. По второму методу [387] измеряется флуоресценция серии растворов, причем все они содержат ион металла в одинаковой концентрации, а концентрация реагента варьирует. В точке, где отношение [ион металла]/[реагент] в растворе равно соответствующему отношению в хелате, наклон полученной кривой изменяется. По мере того как константа диссоциации хелата увеличивается, наклон вновь уменьшается. В третьем методе [388] строят две кривые флуоресценция — концентрация. В первом случае ион металла с постоянной концентрацией с реагирует с меньшими, меняющимися концентрациями реагента, а во втором — реагент с концентрацией с соединяется с меньшими, меняющимися концентрациями иона металла. Обе зависимости линейны, и отношение их наклонов равно молярному отношению иона металла к реагенту в хелате. [c.455]

Метод основан на измерении интенсивности флуоресценции комплекса алюминия с салицилаль-о-аминофеноло.м. Определение алюминия проводят после смывания остатка от выпаривания воды или кислоты ацетатным буферным раствором с pH 5,8—6,0. В качестве холостого используют буферный раствор. Определение выполняют методом добавок. Относительная ошибка определения составляет от 15 до 20%. [c.234]

Метод основан на измерении интенсивности флуоресценции кристаллофосфора 2Li20 Mg0 1,26 УОз-Мп. Спектр флуоресценции этого кристаллофосфора представляет собой бесструктурную полосу с максимумом при длине волны 668 нм. Кристаллофосфоры получают прокаливанием шихты указанного выше состава при 850 °С в течение 30 мин. Чувствительность определения 0,001 мкг Мп в 100 мг основы. Остальные ионы в количестве до 2 мкг практически не мешают определению. Ошибка определения составляет 30%. [c.236]

Метод основан на способности 8-хинолилгидразона 8-оксихинальдинового альдегида образовывать комплексь-ое соединение с кальцием, которое флуоресцирует под действием ультрафиолетовых лучей. Опримальным условием проведения анализа является среда 0,1 и. раствора едкого кали. Время развития флуоресценции максимальной интенсивности 20. чин. Флуоресценцию возбуждали низковольтной лампой накаливания. Измерение интенсивности флуоресценции проводили на приборе ФО-1. [c.241]

Метод основан па измерении интенсивности флуоресценции кристаллофосфора sl-Tl. ЧуЕСтвительность определения — 0,002 мкг таллия в 100 мгС 1. Кристаллофосфор получают кристаллизацией водных растворов иодистого цезия и таллия. Определению таллия в этих условиях не мешают 100-кратные количества марганца, никеля и висмута при 100-кратном избытке частично ослабляют люминесценцию таллия железо, медь, кобальт и хром. Поэтому определение таллия выполняют методом добавок. Продолжительность определения 15—20 мин, ошибка определения 30%. [c.242]

Метод основан на измерении интенсивности флуоресценции комплекса алюминия с салицилаль-о-аминофеноло.м. Определение алюминия выполняют методом добавок после растворения навески окиси свинца в концентрированной уксусной кислоте и нейтрализации раствора аммиаком до pH 5,5. Необходимое значение pH (5,8—6,0) достигают добавлением ацетатного буферного раствора. В качестве холостой пробы используют нейтрализованный аммиаком раствор уксусной кислоты с таким же количеством буферного раствора, как и в анализируемом растворе. [c.243]

Метод основан иа измерении интенсивности флуоресценции кристаллофосфора PbS04- e0.2(Sm). В качестве аналитической используют полосу с максимумом 575 нм. Кристаллофосфоры получают, прокаливая двуокись церия с сульфатом свинца и самарием при температуре 850 °С в течение 30. чин. Большинство РЗЭ, а также железо, медь, кобальт и хром уменьшают интенсизность люминесценции кристаллофосфора, поэтому определение выполняют методом добавок. Продолжительность определения 30 мин. Чувствительность определения составлет 0,02 мкг самария в 100. мг основы. Ошибка 30, о. [c.244]

Метод определения самария в ЕигОд состоит в приготовлении кристаллофосфора на основе Са У04 с добавлением окиси европия, содержащей самарий, и последующем измерении интенсивности флуоресценции. [c.128]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология