Непрерывный анализ элюата

Рис. 513. Непрерывный анализ элюата (анализ в потоке).

Применение соответствующих детекторов, соединенных с вычислительным устройством, делает возможным непрерывный анализ элюата с регистрацией результатов. [c.119]

Непрерывный анализ элюата [c.139]

Элюат можно анализировать периодически, т.е. проводить анализ отдельных фракций различными методами. Полная автоматизация процесса разделения требует непрерывного анализа элюата. Чаще всего используют физические или физико-химические методы анализа. [c.139]

Важным параметром непрерывного анализа элюата является объем измерительной ячейки, который в современных анализаторах не превышает нескольких микролитров. Однако в серийных анализах неорганических веществ чаше всего применяют измерительные ячейки объемом около 0,1 см . [c.140]

Непрерывный анализ элюата 199 [c.199]

НЕПРЕРЫВНЫЙ АНАЛИЗ ЭЛЮАТА Общие положения [c.199]

Анализируемый образец вводят в верхнюю часть колонки, а разделяемые компоненты идентифицируют у выхода из колонки для этого используют непрерывный контроль элюата или собирают его отдельные фракции для последующего анализа. Количественный анализ отдельных фракций часто удобнее проводить при использовании больших образцов и больших по размеру колонок. В последние годы после появления газовых хроматографов с движущейся нитью требования к размеру образцов и колонок снизились. Такие приборы используют в распределительной хроматографии следующим образом протягивают через выходящий из колонки элюат тонкую проволоку и соединяют ее с вводом газового хроматографа. Таким путем регистрирующее устройство хроматографа фиксирует состав жидкого элюата. [c.520]

Быстрый рост числа хроматографических разделений малых количеств многокомпонентных ( 10) смесей, полученных из природных веществ, обычно обусловливает необходимость использования автоматических методов контроля элюата. Обычно существуют два различных способа автоматических анализов элюатов, содержащих сахариды. Первый способ, неразрушающий , основан на исследовании элюата физическими методами. При втором, разрушающем , способе сахариды анализируют посредством химической реакции. Оба способа используют главным образом для аналитических разделений. Для препаративных целей любой из элюатов пропускают через кювету, где наблюдают изменения некоторых его физических свойств (при неразрушающем способе не происходит изменения химического состава растворимого вещества), можно также непрерывно анали- [c.70]

При непрерывном анализе жидкости методом ВПТ иногда используют твердые рабочие электроды, поскольку при этом отпадает необходимость технического решения проблемы подачи, хранения и удаления ртути. Правда, при этом возникают проблемы обеспечения стабильности поверхности электрода или его регенерации. Поэтому такие электроды используют в первую очередь для определения ЭАВ, реагирующих на электроде при потенциалах, положительнее потенциала окисления ртути, а также для определения ЭАВ, продукты электрохимических реакций которых не выделяются на электроде, и в отсутствие в растворе других ЭАВ, продукты электрохимических реакций которых выделяются на электроде. Твердые рабочие электроды можно изготавливать очень малогабаритными. Такие микроэлектроды из золота, платины и других металлов используют при анализе методом ВПТ жидкостей внутри живых организмов, потока жидкого элюата из хроматографической колонки малого диаметра и т. п. [c.50]

Возможность повышения скоростей элюирования привела к созданию прибора для непрерывного автоматического анализа элюата, вытекающего из колонки [821. Это позволило выполнять полный анализ в течение 24 час с относительно небольшой затратой труда. [c.139]

Для регистрации вещества в момент выхода из колонки существует несколько способов. Для веществ кислого характера можно использовать цветную реакцию с индикатором. Более эффективен и пе вызывает загрязнения элюата метод, при котором элюат по выходе из колонки направляют в микрокювету. Там его непрерывно анализируют потенциометрическим, рефрактометрическим, спектрофотометрическим или колориметрическим методами. Наиболее распространен метод обнаружения веществ анализом каждой из точно отмеренных фракций элюата. Чаще всего хроматографируют каждую фракцию элюата или используют химические превращения с последующим исследованием продуктов реакции. [c.74]

Препаративная хроматография имеет своей целью получить некоторые или все компоненты разделяемой смеси в очищенном виде для дальнейшего исследования или использования. В этом случае каждая из разделенных зон после выхода из хроматографической системы должна попасть в отдельный приемник. При наличии непрерывного контроля за выходящей из системы подвижной фазой можно менять приемники после окончания выхода из системы каждой зоны. При жидкостной хроматографии, особенно при разделении очень сложных смесей биополимеров, для обнаружения компонентов приходится проводить специальный анализ проб выходящего из колонки элюата. В этом случае целесообразно собирать элюат в отдельные небольшие фракции и после анализа содержимого каждой из фракций объединять те, которые содержат интересующие экспериментатора вещества, и подвергать их последующей обработке. [c.343]

Так называется вариант хроматографического процесса, когда раствор смеси компонентов непрерывно подается на вход хроматографической колонки. На выходе ее в этом случае появляются один за другим несколько фронтов элюата. За первым из них следует чистый, быстрее других мигрирующий в данной системе компонент смеси, отличающийся, очевидно, наименьшим сродством к неподвижной фазе. Второй фронт отмечает добавление к нему следующего по подвижности компонента. За третьим фронтом следует уже смесь трех компонентов. В настоящее время по вполне понятным причинам фронтальный анализ почти вышел из употребления и применяется лишь в отдельных, специальных случаях. На нем мы более подробно останавливаться пе будем. [c.11]

Существуют две основные принципиально различные схемы хроматографического анализа. Первая, которой в наибольшей степени соответствует термин элюентная, соответствует случаю, когда после хроматографического разделения по элюентной схеме последующее определение разделенных веществ осуществляется в потоке элюата, выходящего из колонки. Чтобы не вносить дополнительной терминологической путаницы, эта схема хроматографического анализа в дальнейшем будет рассматриваться как традиционная. Вторая схема — хроматографическое разделение с определением разделенных веществ непосредственно в хроматографической колонке или в плоском слое. Наибольшее распространение нашла первая схема, причем на начальном этапе развития хроматографии стадии разделения и послед)тощего определения веществ были разнесены во времени и в пространстве. Для определения каждого из выделенных компонентов мог применяться свой метод определения в отдельных фракциях элюата, но при этом хроматографический анализ был лишен своих основных достоинств — универсальности и экспрессности. Качественным скачком в развитии аналитической хроматографии явилось создание газового хроматографа, в котором были совмещены принципы хроматографического разделения и неселективного детектирования разделенных веществ непосредственно в потоке подвижной газовой фазы, называемой газом-носителем. Подобно тому, как создание газового хроматографа привело к появлению первого важнейшего раздела в науке о хроматографических методах анализа — газовой хроматографии, решение проблемы непрерывного детектирования веществ в потоках жидких фаз способствовало появлению и развитию второго аналитического направления — жидкостной хроматографии. [c.180]

Проведение эксперимента значительно упрощается, если имеется возможность производить непрерывный автоматический анализ сходящего с колонки элюата. В противном случае приходится собирать элюат по фракциям и анализировать их обычным способом. Автоматический анализатор, обладая высокой чувствительностью к исследуемым веществам, не должен, однако, каким-либо образом их трансформировать. Измеряемый параметр должен быть при этом пропорционален концентрации результаты анализа следует регистрировать на самописце. Кроме того, на ленте самописца при каждом шаге коллектора должна автоматически ставиться соответствующая метка. [c.63]

Как уже отмечалось, иногда удается осуществить селективное элюирование, т. е. элюировать один из ионов в таких условиях, при которых другие ионы весьма прочно удерживаются ионитом, так что их перемещением вниз по колонке можно пренебречь. В таких системах разделение, естественно, упрощается и можно применять короткие колонки с сравнительно высокой степенью зарядки кроме того, не нужно делить элюат на большое число фракций или проводить непрерывный его анализ. Наиболее типичные разделения этой группы основаны на различиях в константах нестойкости некоторых [c.205]

Интегральные детекторы. Детекторы этого типа непрерывно фиксируют общее количество разделяемых компонентов. Наиболее простым интегральным детектором является азотометр, принцип действия которого основан на измерении (в калиброванной газовой бюретке, заполненной раствором щелочи) объема выходящего нз колонки элюата после поглощения газа-носителя (СОг) щелочью. Если непрерывно фиксировать понижение уровня щелочи в бюретке в процессе анализа, то получаемая хроматограмма будет иметь вид, показанный на рис, 1.9,6, а высота ступени будет мерой количества данного компонента. [c.150]

Обычно концентрации анализируемых компонентов в элюате малы (особенно, если определяют примеси), поэтому детектор должен быть очень чувствителен. Поскольку показания детектора используют для количественных расчетов, желательна линейная зависимость показаний детектора от количества определяемого вещества. Детектор должен обеспечивать возможность непрерывной автоматической регистрации показаний в процессе анализа. [c.165]

Сначала вытекает чистый растворитель, затем наименее адсорбируемый компонент и т. д. Приведенный график позволяет провести качественный И количественный анализ смеси. Вытеснительное элюирование является, наряду с комплексообразующим, важнейшим способом разделения радиоактивных изотопов. На рис. 8.9 показаны схемы приборов для непрерывной регистрации активности элюата. [c.217]

Автоматически действующая установка для одновременного непрерывного анализа элюата из восьми хроматографических колонок изготовлена Симмондсом и Роулэндсом [106 ]. Сложное устройство делит на фракщш элюат из каждой колонки, обрабатывает каждую фракцию цветным реагентом, разбавляет ее и измеряет возникающую окраску. Светоноглощение записывается, и для завершения количественного анализа нужно только вынолнить интегрирование. [c.204]

Последующее развитие ионообменной методики связано с применением автоматических устройств, описанных Лундгреном и Лёбом 136 ]. Метод, рекомендованный для производственных анализов смесей конденсированных фосфатов в составе детергентов, основан на градиентном элюировании и непрерывном анализе элюата с помощью автоанализатора. Прибор программируется для проведения кислотного расщепления полифосфатов, присутствующих в элюате. Образующийся при этом ортофосфат выделяется путем диализа и взаимодействует с молибдатом аммония. Фосфорномолибденовая кислота восстанавливается гидразинсульфатом голубая окраска восстановленного раствора используется для непрерывных колориметрических измерений, результаты которых регистрируются автоматически. Прибор калибруется с помощью смесей известного состава. Образцы, содержащие только орто-, пиро- и три(поли)фос-фат, могут быть проанализированы в течение 1 ч. В присутствии триметафосфата для анализа требуется обычно 2 ч. Точность метода 3% от количества основного компонента. Для компонентов, присутствующих в меньших количествах, точность определения несколько ниже. [c.394]

Чаще других селективных детектирующих устройств при изучении ГАС применяются, по-видимому, микрокулонометрические детекторы (1У1КД), основанные на титровании элюируемых веществ или продуктов их деструкции. Так, ]У[КД с прямым титрованием ионами Ag+ использован. при анализе состава меркаптанов, содержащихся в бензине [294]. Распределение индивидуальных меркаптанов, сульфидов, тиофенов в нефтяных дистиллятах исследовалось путем непрерывного сожжения элюата в токе инертного газа-носителя и микрокулонометрического титрования образующейся ЗОа иодом [295, 296]. При изучении состава азотистых компонентов фракции 200—400°С элюа.ты каталитически восстанавливались, и генерирующийся аммиак также определялся с помощью МКД 140]. [c.35]

При использовании для идентификации загрязняющих веществ таких комбинаций, как ТСХ/ГХ, ТСХ/ИК, ТСХ/МС и др., разделенные вещества извлекают из сорбента на пластинке (см. выше). Однако возможен и непрерывный отбор элюата из ТСХ-системы, его испарение и последующий анализ методом газовой хроматографии. Схема такой комбинации представлена на рис. П.45. Элюат, отобранный из центра ТСХ-пластинки (6), испаряется в сборник фракций (8) за счет разряжения, создаваемого водоструйным насосом (12), подключенным к коллектору фракций через моностат. При анализе в этой системе линдана (популярный пестицид) одновременно происходит его концентрирование в 50 раз. Далее собранный линдан поступает из коллектора (8) в колонку газового хроматографа с ЭЗД (см. главу I). Этим методом можно надежно идентифицировать и опре- [c.192]

Процесс легко автоматизировать, причем этого можно достичь гораздо проще и с меньшими затратами, чем в КЖХ. Изготовлеппс ТСХ-пластинок намного проще, чем изготовление КЖХ-колонок. Кроме того, в проточном методе для организации потока элюата не требуется прецизионных насосов, легко засоряющихся и дорогих. Детектировать разделенные вещества можно практически всеми известными в ТСХ детекторами. За счет непрерывного анализа сокращается время, затрачиваемое обычно на высушивание проб после напесенпя и высушивание хроматограмм иосле окончания хроматографического разделения иеред детектированием, как это чаще всего бывает в обычных методах ТСХ. [c.166]

Алишоев В.Р.,Березкин В.Г.,Татаринский B. . - Зав.лаб.,19б8, ,№ 2,148-149. Способ детектирования в жидкостной хроматографии. (Метод основан на непрерывном анализе капель элюата из жидкостной колонки с помощью ГЮ [c.126]

Перспективы развития различных типов хроматографии. Несмотря на то что в создании более специфичных сорбентов (по сравнению с предложенными в свое время Полингом [70]) достигнуты значительные успехи, по-видимому, аффинная хроматография будет продолжать развиваться. Быстрыми темпами будет, по-видимому, совершенствоваться и препаративная хроматография (например, центрифужная [18], противоточная 19, 20] и так называемая флип-флопная хроматография 71]). Широкомасштабное использование хроматографии (например, для утилизации следовых количеств примесей или очистки лекарственных препаратов) потребует разработки новых, более рациональных процессов непрерывного разделения. Отчетливо наблюдается тенденция к полной автоматизации качественного и количественного анализа элюатов (использование микропроцессоров). Уже предпринято несколько попыток сконструировать универсальный детектор для жидкостной хроматографии. [c.33]

Интерфейс с холодной ловушкой. Интерфейс с холодной ловушкой (рис. 14.2-7) был разработан Уилкинсом и др. в конце 1980-х гг. как более чувствительная альтернатива интерфейсу с проточной ячейкой [14.2-8]. Впоследствии это устройство было адаптировано Гриффитсом [14.2-9]. Оно основано на криоулавливании определяемых веществ перед анализом. Хроматографический элюат непрерывно поступает через нагреваемый капилляр малого диаметра на пластину из 2п8е, охлажденную жидким азотом до 77 К. Пластина движется, перенося сконденсированную пробу в фокус микроскопа, который [c.610]

Подход с проточной ячейкой — наиболее простой вариант работы ЖХ-ФПИК. Хроматографический элюат проходит через проточную ячейку непосредственно после колонки, и интерферограмма непрерывно записывается в течение всего анализа. Использование алгоритма Грама—Шмидта, как в ГХ-ФПИК, для расчета отдельной хроматограммы поглощения в режиме реального времени неосуществимо, поскольку подвижная фаза сильно поглощает и небольшие изменения в поглощении при элюировании определяемых веществ с трудом детектируются. Поэтому обработка данных обычно проводится по окончании хроматографического анализа после вычитания спектра поглощения подвижной фазы. Чтобы предотвратить полное поглощение в полосе растворителя, необходимо использовать короткий оптический путь, обычно менее 0,2 мм для органических подвижных фаз и менее 0,03 мм для водных смесей. Вместе с тем обстоятельством, что коэффициенты поглощения в среднем ИК-диапазоне значительно меньше по сравнению с коэффициентами поглощения в УФ- и видимом диапазонах спектра, это приводит к сравнительно низкой чувствительности этого метода, порядка 0,1-1 мкг. Дополнительным недостатком этого интерфейса является то, что в области поглощения растворителя никакой информации о поглощении определяемого вещества не может быть получено, поскольку правильное вычитание затруднительно, особенно для обращенно-фазовых смесей растворителей. Более того, вычитание фонового сигнала не может быть проведено удовлетворительно, если необходимо градиентное элю- [c.630]

В последнее время появилась возможность определять аминокислотный состав белков с помощью автоматических аминокислотных анализаторов. Когда в 1948 г. Мур и Стейн [551 в дополнение к классическим методам органической химии, а также манометрическому и бактериологическому анализу ввели ионообменную хроматографию, наступил поворотный момент в развитии химии аминокислот. В основу работы созданных сотрудниками Рокфеллеровского института современных автоматических аминокислотных анализаторов была положена ионообменная хроматография. Принцип работы этих приборов заключается в следующем. Исследуемый белок гидролизуют, затем гидролизат подвергают хроматографии на смоле типа дауэкс 50 х8 в Na-форме. Элюирование производят с помощью непрерывной подачи буферного раствора. Выходящий из колонки элюат попадает в пластмассовую ячейку особой формы, где он смешивается с раствором нингидрина. Подачу нингидрина осуществляет специальный насос, работающий синхронно с насосом, подающим буферный раствор на колонку. Затем смесь элюата с нингидрином проходит через тефлоновый капилляр, который погружен в кипящую баню. В этих условиях в растворах происходит нингидриновое окрашивание, интенсивность которого измеряется в проточной кювете спектрофотометрически. Поглощение света регистрируется самописцем. Применение сферических смол [80] позволило сократить время исследования одного образца примерно в четыре раза, а использование особых ячеек сделало вполне допустимыми для анализа очень малые количества исследуемого вещества — порядка 0,01—0,05 мкмоля [38]. Введение одноколоночной процедуры значительно упрощает метод [9, 29, 43, 60]. С помощью этой методики в одной и той же пробе можно определить кислые, нейтральные и основные аминокислоты, что не только экономит исследуемый материал, но и повышает точность и сокращает время исследования. Работая на стандартном аминокислотном анализаторе и пользуясь некоторыми модификациями известных методов, можно полностью закончить анализ одного вещества в течение 3 ч [91. [c.32]

Когда способные к обмену ионы элюента (Н+) имеют мень-,шее сродство к иониту, чем разделяемые ионы (N3+ и Ы+), в элюате в течение всего процесса элюирования обнаруживаются ионы элюента (Н+). Поэтому важно выбирать элюент так, чтобы его ионы легко отделялись от разделяемых ионов. В этом особенность элюентной хроматографии — когда все разделяемые ионы можно в принципе получить в виде отдельных фракций (в отличие от метода фронтального анализа). Однако полосы некоторых элементов могут быть сильно размытыми, и чистыми такие элементы можно получить лищь в виде очень разбавленного раствора. В этом случае полезно применять ступенчатое элюирование. Так как наибольшее размазывание наблюдается для наиболее сорбируемых ионов смеси, сначала элюируют не-, сколько ионов одним элюентом, а затем завершают элюирование другим раствором, более эффективно выделяющим ионы, оставшиеся в колонке. Можно применять непрерывное повышение концентрации элюента (градиентное элюирование). [c.159]

Для разделения конденсированных фосфатов применяют ионообменную хроматографию [947]. Орто- и пирофосфаты, содержащиеся в виде примесей в перекристаллизованном триполифосфате, разделяют путем градиентного элюирования 0,002 N HG1, к которой непрерывно добавляют 0,6 М R 1. Последовательно элюируются орто-, пирО и триполифосфат в элюатах объемом 100, 200 и 300—350 мл соответственно. Фосфат в элюатах определяют фотометрически в виде фосфорномолибденового комплекса. В качестве ионита применяют смолу дауэкс-1Х8. Для анализа более конденсированных фосфатов используют элюент с большей концентрацией KG1 (1 М или 2М раствор KG1). Выход фосфатов составляет >95%. [c.166]

В элюате необходимо определить содержание компО Не1НТ01В образца. Это можно сделать следующим образом. Разделяют элюат на отдельные фракции анализ отдельной фракции производят, используя селективные или неселвктнвщые детекторы (анализ можно выполнять непрерывно). Так как ю<бъем отдельной фракции и О бъем детектора приводит к дополнительному уширению зоны, что соответственно приводит к снижению разрешающей способпо-сти устройства в целом, то и объем отдельной фракции и объем детектора должны быть как можно меньшими. [c.93]

При фракционировании декстрана на шариках пористой двуокиси кремния в дополнение к восстановительному анализу концевых групп, использующему упомянутый выше гексацианофер-рат(П1) калия, Баркер и сотр. [69] применили автоматический непрерывный метод анализа общего содержания гексоз на основе реагента цистеин—серная кислота. Элюат смешивали с водой и добавляли со скоростью истечения потока 0,1 мл/мин [c.76]

В работе [73] описан автоматический метод анализов органических кислот, предусматривающий использование колонок с силикагелем элюентом служили смеси хлороформа и грег-амило-вого спирта. Концентрация грег-амилового спирта в элюенте непрерывно увеличивалась в градиентном устройстве Уаг1 га(1, и смесь насосом подавалась в колонку. Индивидуальные разделенные кислоты, присутствующие в элюате, реагировали с индикатором (о-нитрофенол в абсолютном метаноле), который непрерывно подавался в поток элюата появляющееся при этом окрашивание регистрировалось проточным фотометрическим детектором при 350 нм. Этот метод был успешно применен для разделения ряда физиологически активных кислот, таких, как промежуточные соединения цикла Кребса. Чувствительность пр проведении серийных разделений этим методом примерно в 40 раз выше, чем при стандартном ручном методе, точность метода выше 3%. Кроме того, до введения образца не требуется предварительная депротеинизация и экстракция (с возможной потерей летучих веществ и получением случайных ошибочных результатов). [c.181]

Сошедший с колонки элюат можно анализировать любым подходящим методом. Вещества, содержащие ароматические кольца (полистиролы, белки, нуклеиновые кислоты), можно оценить количественно не только с помощью уже описанных автоматических регистрирующих устройств, но также и путем прямого измерения отдельных фракций на спектрофотометре. Для всех твердых веществ вполне приемлем разработанный Крэйгом [63] метод анализа по сухому остатку, который заключается в том, что аликвотную часть элюата упаривают в полусферических чашечках и затем взвешивают остаток. Многие соединения удается анализировать с помощью специфических цветных реакций. Для белков, например, цветная реакция Фолина — Лоури оказывается более чувствительной, чем прямое измерение поглощения в ультрафиолете. Эту реакцию можно проводить непрерывно на автоматическом анализаторе [45]. Еще более чувствительный метод основан на образовании биурето-вого комплекса с избытком радиоактивной меди. (Этот метод позволяет обнаружить белок [c.79]

Поскольку концентрация компонентов (особенно плохо сорбируемых) в элюате изменяется очень быстро, детектордолжен обладать малой инерционностью. Кроме того, хроматографический детектор должен быть универсальным, так как в процессе анализа данной системы через него могут проходить бинарные смеси газа-носителя с веществами самого различного строения. Обычно концентрации анализируемых компонентов в элюате малы (особенно, если определяются примеси), поэтому детектор должен быть очень чувствителен. Поскольку показания детектора используются для количественных расчетов, желательна линейная зависимость сигнала от количества определяемого вещества. Наконец, детектор должен обеспечивать возможность непрерывной автоматической регистрации показаний в процессе анализа. [c.164]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология