Минимальней и максимальная оптическая плотность

Среди высокомолекулярных соединений важное место занимают белки. Они играют основную роль во всех жизненных процессах, а продукты их переработки — в технике и производстве. Белки являются полимерными электролитами, так как их молекулы содержат ионогенные группы. Поэтому растворы белков имеют целый ряд особенностей по сравнению с растворами других полимеров. В состав молекул белков входят разнообразные а-аминокислоты, в общем виде формула их строения может быть записана в форме КНг — К — СООН. В водном растворе макромолекула представляет амфотерный ион КНз — К — СОО . Если числа диссоциированных амино- и карбоксильных групп одинаковы, то молекула белка в целом электронейтральна. Такое состояние бедка называют изоэлектрическим состоянием, а соответствующее ему значение pH раствора — изоэлектрической точкой (ИЭТ). Чаще всего белки — более сильные кислоты, чем основания, и для них ИЭТ лежит при pH < 7. При различных pH изменяется форма макромолекул в растворе. В ИЭТ макромолекулы свернуты в клубок вследствие взаимного притяжения разноименных зарядов. Б кислой и щелочной средах в макромолекуле преобладают заряды только одного знака, и вследствие их взаимного отталкивания молекулы распрямляются и существуют в растворе в виде длинных гибких цепочек. Поэтому практически все свойства растворов белков проходят через экстремальные значения в изоэлектрическом состоянии осмотическое давление и вязкость минимальны в ИЭТ и сильно возрастают в кислой и щелочной средах вследствие возрастания асимметрии молекул, минимальна также способность вещества к набуханию, оптическая плотность раствора в ИЭТ максимальна. Изучение всех этих свойств используется для определения изоэлектрической точки белков. [c.443]

Как показывает рис. 11.12, концентрация ионов меди является решающей при колориметрическом определении аминов. Кривая I показывает зависимость оптической плотности реакционного раствора, содержащего 0,372 мг этаноламина, от концентрации дигидрата хлорида меди(II). Концентрация триэтаноламина и салицилового альдегида составляла 15,0 и 0,5% (об.) соответственно. По этой кривой видно, что для получения максимальной оптической плотности необходимо не менее 5,0 мг дигидрата хлорида меди (II). Кривая 2 показывает влияние иона меди на оптическую плотность раствора в холостом опыте. Очевидно, что для получения минимального поглощения в холостом опыте требуется минимальная концентрация ионов меди (5 мг дигидрата хлорида меди(II) в 2 мл реактива, что соответствует концентрации хлорида меди в реактиве 0,25%). [c.442]

Кажущуюся константу диссоциации определяют графически по кривой зависимости е — pH или О — pH (рис. X. 28). Значение pH, отвечающее точке, лежащей посредине между горизонтальными участками максимального и минимального значений оптической плотности, равно р/Са- [c.655]

Удобнее определять константу диссоциации по графику зависимости оптической плотности при некоторой выбранной длине волны от pH раствора [22, 36, 53] . Значение pH, отвечающее точке, лежащей посредине между максимальным и минимальным значениями оптической плотности, равно величине показателя константы диссоциации. Упрощенным вариантом этого метода является графическое определение константы диссоциации по кривым спектрофотометрического титрования [59, 62]. [c.80]

Результаты измерений наносят на график оптическая плотность - длина волны. На основании кривых светопоглощения производят выбор светофильтра, при котором наблюдается максимальное поглощение раствора I и минимальное - раствора II. [c.178]

ВОЛНЫ выбирают в точке максимальной оптической плотности (минимального пропускания) и обозначают ее тах Значение А-тах а также значение оптической плотности >шах, определенное при этой длине волны, и соответствующего коэффициента поглощения атах являются характеристическими свойствами каждого анализируемого красителя. Для расчета max уравнение (4) примет вид [c.158]

В третьем методе концентрацию определяют по величине промежутка времени, необходимого для достижения определенной глубины протекания индикаторной реакции, например до максимального или минимального значения оптической плотности. Калибровочный график в этом случае строят в координатах концентрация определяемого иона—обратная величина времени достижения заданной глубины протекания индикаторной реакции. Если в растворе наряду с каталитической протекает и некаталитическая реакция, то ориентируют ся на определенное значение разности концентраций одного из участников реакции или оптической плотности исследуемого раствора и раствора сравнения. Эту функцию можно получить автоматически, поместив в одну из кювет фотоколориметра компоненты реагирующей смеси с катализатором, а в другую — ту же смесь, но без катализатора. По простоте выполнения и точности метод приближается к предыдущему. Он использован для определения микроконцентраций ионов Вг в работах [19, 20, 700]. [c.114]

Ошибка определения концентрации зависит от выбора длины волны, на которой производится измерение оптической плотности,— рабочей длины волны. Следует выбирать такие точки на кривой поглощения вещества — точки максимального поглощения,— где минимальна зависимость коэффициента экстинкции от длины волны. В этом случае ошибка в градуировке прибора по длинам волн не приведет к отклонениям истинного коэффициента экстинкции от его табличного значения. [c.174]

Снимают кривые светопоглощения этих растворов (/ = 1 см) и на одном графике строят зависимости А - Л и А = - Я. Выбирают такие участки спектра (светофильтры), в области которых поглощение кс максимально, а кислотного красного -минимально (Я)) и наоборот - кислотного синего минимально, а кк максимально (Х2). Величины оптических плотностей при выбранных светофильтрах AJ используют [c.170]

При отсутствии колориметров снимают кривые спектрального отражения образцов на спектрофотометре. Полученные спектральные коэффициенты отражения при заданном стандартном источнике Des и заданном стандартном наблюдателе МКО используют для расчета координат цвета и цветовых различий на ЭВМ. Для оценки равномерности окрашивания можно также измерять оптическую плотность поверхности полимерного материала в отраженном свете с помощью денситометров различных типов. При этом применяют геометрический метод определения неравномерности распределения показателей, который состоит в вычислении отношения площадей, заключенных между ординатой максимального уклонения и кривой, соединяющей ординаты соответствующих уклонений, и этой же кривой и ординатой минимального уклонения. Это отношение К называют коэффициентом неравномерности окраски. Равномерному распределению оптической плотности на всех участках поверхности соответствует значение Л = I. При К > 1 преобладают участки с повышенным (по сравнению с общим фоном) содержанием пигмента, при /С С 1 —участки с пониженным содержанием пигмента [31]. [c.54]

Увеличение оптической плотности раствора сравнения (Лер) будет вызывать в соответствии с уравнением (3.20) уменьшение оптической плотности, при которой достигается максимальная точность результатов. При Лер = 0,435 относительная оптическая плотность будет равна нулю. Таким образом, точные измерения будут достигаться при высокой оптической плотности раствора сравнения и минимальной относительной оптической плотности. Этот вывод иллюстрируется также кривыми рис. 3.14. [c.74]

Помимо методов, основанных на измерении площади пятна, существуют способы количественной оценки соединений по размерам пятен [56]. В этих способах учитывают только ширину и длину пятен или же максимальный и минимальный диаметры пятен и оптическую плотность в центре пятна [57]. [c.40]

МИНИМАЛЬНАЯ И МАКСИМАЛЬНАЯ ОПТИЧЕСКАЯ ПЛОТНОСТЬ [c.102]

Если работа производится на нерегистрирующем спектрофотометре, то снять спектры поглощения двух крайних растворов с максимальным и минимальным значениями,pH в диапазоне длин волн от 400 до 700 нм. Толщина поглощающего слоя 1 см. Вычертить спектры поглощения обоих растворов на одном листе миллиметровой бумаги. Определить длины волн максимумов поглощения аниона и молекулы кислоты. При длинах волн максимумов поглощения аниона и кислоты измерить оптические плотности всех десяти растворов. Точками отметить максимумы поглощения на спектрах. [c.82]

Минимальная ц максимальная оптическая плотность 102 [c.300]

Рассмотрим точность измерения оптической плотности окрашенного раствора на разных участках видимой области спектра. Допустим, что рассматриваемое вещество имеет спектр поглощения, показанный на рис, 2.8, а. Выберем участки спектра, где окрашенное веще- ство максимально (при Я = 550 нм) и минимально (при Я == 640 нм) поглощает лучи. Затем, приготовив три пробы окрашенного вещества с различными концентрациями так, чтобы < Сз < Сд, измерим их оптические плотности при Л акс и Я ин. Для обеих длин волн строим графическую зависимость оптической плотности от концентрации раствора определяемого вещества. Из рис. 2.8, б видно, что при изменении концентрации вещества в интервале от до Са (ДС) соответствующее ему изменение оптической плотности АО будет гораздо больше при чем при Так как практическая ошибка [c.31]

Шкала правого барабана нанесена так, что 100% по шкале светопропускания соответствует минимальному раскрытию щели, а 30% — максимальному раскрытию ее. Красная шкала правого барабана позволяет измерять оптическую плотность от О до 0,52. [c.55]

Рассмотрим точность измерения оптической плотности окрашенного раствора на разных участках видимой области спектра. Допустим, что рассматриваемое вещество имеет спектр поглощения, показанный на рис. 9, а. Выберем участки спектра, где окрашенное вещество максимально поглощает лучи при Я = 550 нм и минимально— при Я = 640 нм. Затем, приготовив три пробы окрашенного вещества с различными концентрациями так, чтобы С , измерим их оптические плотности при и Для обеих длин [c.24]

Задача 23. Молярный коэффициент светопоглощения а-фурил-диоксимата никеля в хлороформе составляет 19 ООО. Какое минимальное процентное содержание никеля в чистом алюминии может быть определено этим реактивом, если навеска А1 не должна превышать 1 3, максимальный объем хлороформного экстракта составляет 10 мл, толщина кюветы равна 5 см, минимальная оптическая плотность раствора, при которой ошибка измерения не превышает 10%, равна 0,020. [c.295]

Область нормальных почернений начинается около 0,3—0,4 единиц оптической плотности. Таким образом, интервал почернений, в пределах которого ведутся фотометрические измерения, равен —2,0. Разность lg Н. —lg Я,, соответствующая точкам максимального В) и минимального (Л) почернения прямолинейной части характеристической кривой, называется широтой эмульсии. Широта эмульсии характеризует отношение максимального количества освещения к минимальному, которое может быть передано фотоэмульсии в прямолинейной части характеристической кривой. Из уравнения (4) широта эмульсии равна [c.171]

Определение оптической плотности растворов. При определении оптической плотности растворов (если в методике не указан необходимый светофильтр) рекомендуется начинать работу с подбора светофильтра. Для выбора светофильтра наливают ко-лориметрируемый раствор в кювету и производят определение оптической плотности со всеми (в случае ФЭК-Н-54 с 8 светофильтрами) светофильтрами и по полученным данным строят кривую, откладывая по оси абсцисс длины волн, по оси ординат — соответствующие значения оптической плотности. Для получения максимальной чувствительности работают с тем светофильтром, который показал наибольшую оптическую плотность. При работе с растворами, имеющими смешанную окраску, от этого правила приходится отступать, применяя тот светофильтр, при котором оптическая плотность окраски постороннего вещества имеет минимальное значение. Например, при колориметрировании комплекса кобальта с нитрозо-Н-солью следует работать не при длине волны 453 нм (максимальная оптическая плотность комплекса нитрозо-К-соли с кобальтом), а при 536 нм (при минимальной оптической плотности нитрозо-К-соли). [c.27]

Для того чтобы достичь максимальной точности измерения оптической плотности, бесконечно малое ее приращение ДЛ должно составлять по возможности меньшую часть наблюдаемой оптической плотности А, другими словами, ДЛ/Л должно быть минимальным. Чтобы найти значение Л, при котором ДЛ/Л минимально, нужно дважды продифференцировать выражение Л = 1 (Ро/Р) и приравнять вторую производную нулю. Для удобства запишем это выражение в виде [c.73]

Сначала рассмотрим микрофотометр. Большинство приборов оснащены устройствами для установки нуля и полной шкалы. Нуль можно установить либо по нулевому пропусканию, либо в области максимального почернения измеряемой пластины. Пол ную шкалу можно установить по пропусканию в области, непосредственно примыкающей к измеряемой линии, по пропусканию в области минимального почернения, по пластине, свободной от эмульсии, или по пропусканию без пластины. В последнем случае необходимо тщательно следить за тем, чтобы оптика фотометра не расстроилась из-за смещения пластины требуется также, чтобы все время измерялась оптическая плотность меньше нулевой (т. е. чтобы измеряемый свет, проходящий через пластину, был всегда меньше, чем свет, проходящий без пластины). [c.208]

Для измерения почернения линий изображение спектра устанавливают перед щелью экрана, за которым стоит фотоэлемент. На экране виден увеличенный в 20 раз участок спектра. Выбрав в нем линию, микрометрическим винтом передвигают каретку в направлении, перпендикулярном щели. Когда центральная часть линии перекрывает щель, отсчет на шкале гальванометра приобретает максимальное значение (по шкале оптических плотностей или минимальное по шкале пропускания) отсчет записывают. [c.223]

Поскольку наклон калибровочного графика определяет ошибку измерения, но зависит от концентрации, ясно, что выбор концентрации раствора сравнения в случае неидеальных систем не может основываться на единственном принципе, устанавливающем, что точность измерений тем выше, чем выше оптическая плотность раствора сравнения (см. стр. 26). Из выражения (49) легко сделать вывод, что при прочих равных условиях ошибка измерения тем меньше, чем больше величина и Со, а минимальная ошибка измерения соответствует максимальной величине произведения и Со (так называемая условная оптическая плотность). [c.54]

Был использован промышленный карбид титана и карбид, очищенный соляной кислотой и отмытый до постоянной электропроводности промывных вод. -потенциал измеряли методом электроосмоса в модернизированном приборе Гортикова [6] и рассчитывали по уравнению Смо-луховского [7]. Поправку на поверхностную электропроводность во внешней обкладке двойного электрического слоя не вводили, поскольку уже в 10 -н. растворах она очень мала [8]. Диафрагмы из Т1С получали при центрифугировании предварительные опыты показали, что рассчитываемые величины -по-тенциала не зависят от длины диафрагмы и ее уплотнения. Отношение длины капилляров к их сечению, по-видимому, превышало некоторое минимальное значение, необходимое для установления стационарного электроосмотического переноса при заданном градиенте потенциала [8]. Устойчивость суспензий оценивали по скорости просветления жидкости в цилиндре, а также по оптической плотности центрифугированной суспензии. Рабочая концентрация суспензий составляла 10 вес.%. Суспензии карбида титана в чистой воде характеризуются небольшими отрицательными значениями -потенциала (рис. 1 и 2). Е-потенциал очищенного Т1С по абсолютному значению выше технического. Это связано, по всей вероятности, с наличием в промышленном продукте примесей железа [9]. Окислы железа в воде имеют положительный заряд на поверхности карбида титана. Добавление щелочи приводит к повышению отрицательного -потенциала, который достигает своего максимального значения при pH 11,5 для технического и pH 12,4 для очищенного образца. Дальнейшее повышение концентрации щелочи в системе резко снижает -потенциал Т1С. [c.44]

Интенсивность окраски реакционной смеси, получающейся при добавлении нингидринового реагента к эффлюенту, измеряется проточным колориметром в условиях постоянной скорости потока жидкости. Возникающее изменение напряжения на фотоэлементе регистрируется самописцем. Обычно выходное напряжение колориметра на самописец составляет О—5 мВ. При максимальном развитии окраски (наивысшая оптическая плотность, ОП) напряжение равно нулю, а при отсутствии, за исключением фона реагентов (фоновая линия), напряжение составляет 5 мВ. Для точной записи результатов хроматографического анализа самописец должен а) точно реагировать только на сигнал фотоэлемента калориметра б) допускать длительную работу с минимальным дрейфом из-за тепловых и электрических помех в) иметь постоянную скорость лентопротяжного механизма для обеспечения точной идентификации пиков по времени. Если запись на самописце производится на диаграммной бумаге с линейной шкалой, то для расчета пиков аминокислот или пептидов необходим шаблон с нанесенной сеткой ОП. Если самописец снабжен диаграммной бумагой со шкалой в единицах ОП или логарифмической шкалой, величина поглощения находится непосредственно. Другими вспомогательными элементами, которые связаны с записью анализа и считаются составными частями системы регистрации, являются устройства, осуществляющие расширение шкалы, логарифмирование сигнала, интегрирование пика, а также цифропечать и связь с ЭВМ. Расширение шкалы представляет собой метод, по которому вся шкала самописца может быть легко заменена с О—5,0 мВ на 4,0—5,0 или 4,5— [c.32]

Затем в правый пучок света вводят кювету с растворителем. При этом стрелка гальванометра отклоняется от нулевого положения. Вращением барабана 8 приводят ее в нулевое положение и определяют величину коэффициента светопропускания или оптической плотности по левому отсчетиому барабану 8. Отсчет-ные барабаны имеют 2 шкалы шкала коэффициентов светопропускания (черная) и шкала оптической плотности (красная). На левом барабане 100% по шкале светопропускания соответствует максимальному раскрытию диафрагмы, а 0%—полному ее закрытию. На правом барабане 100%—щель раскрыта минимально, 30%—максимально. [c.48]

Рассмотрим влияние результатов измерения оптической плотности раствора прн разных длинах волн на чувствительность и погрешность фотометрического определения. Допустим, что рассматриваемый комплекс имеет спектр поглош,ения, показанный на. рис, 2.8, а. Выберем участки спектра, где анализируемое соединение поглощает лучи максимально (при к = 550 им) и минимально (при % = 640 нм). Затем, приготовив окрашенные растворы с различными конпентращ1Ями так, чтобы < С.2 < g, измерим их оптические плотности при макс и А,мин- Для обеих длин волн построим графическую зависимость оптической плотности от концентрации раствора определяемого вещества (см. рис. 2.8, б). Из рисунка видно, что при изменении концентрации вещества в интервале от j до С. (АС) соответствующее ему изменение оптической плотности АЛ будет гораздо больше при Кхякс, чем при 1мин- Так как практическая погрешность измерения оптической плотности раствора приблизительно одинакова, то изменение концентрации АС (погрешность определения) будет гораздо больше при чем при Kia - Угловой коэффициент зависи- [c.44]

Метод непрерывной струи наиболее удобен, когда за реакцией следят при помощи детектора с большой постоянной времени (стр. 41) в других случаях обычно предпочитают метод остановленной струи (стр. 52). Наименьшее время полупревращения, которое можно определить методом непрерывной струи, составляет около 1 мсек . Наибольшее время полупревращения ограничивается минимальной скоростью, нри которой поток турбулентен (стр. 48) и составляет примерно 0,1 сек. Максимальная и минимальная константы скорости, которые можно определить, зависят также от величины изменения оптической плотности или другого свойства и от чувствительности детектора (см. табл. 3) уравнение для максимального значения было выведено Чансом [3, 35]. В настоящее время наиболее чувствительные фото-и, флуориметрические методы позволяют использовать растворы, разбавленные до 10 Ж, что должно обеспечить измерение высоких констант скорости второго порядка до 10 л-молъ сек [36]. [c.49]

Измерение оптической плотности может быть осуществлено как при минимальном рас1 рытии диафрагм (сравнительно высокая точность, но небольшие значения оптической плотности), так и при максимальном их раскрытии (большие значения оптической плотности, но небольшая точность). Если используют первый вариант, то первоначально в обе кюветы помещают растворитель и добиваются равенства световых потоков (при узкой диафрагме) путем ввода оптических клиньев. Затем помещают на пути одного из лучей исследуемый раствор и раскрытием диафрагмы добиваются компенсации световых потоков. При изменении оптической плотности исследуемого раствора во времени периодически раскрывают или прикрывают диафрагму до состояния компенсации и таким образом определяют оптическую плотность исследуемого раствора. Термостатирование кювет осуществляют при помощи специального термостатированного кюветодержателя [c.43]

В спектрофотометрах старых конструкций точность диктовалась точностью считывания со шкалы или записи самописца. Общую точность таких приборов можно повысить путем расширения шкалы. Для этого нужно приготовить один или несколько стандартных растворов с концентрацией, по возможности более близкой к определяемой. Прибор настраивают по самому разбавленному стандартному раствору (но не по растворителю) на максимальное пропускание, а по более концентрированному раствору — на минимальное пропускание. Сейчас такой способ используется редко в основном из-за того, что удобные в обращении цифровые дисплеи обеспечивают существенное снижение ошибки считывания. Точно так же счетчики фотонов повышают точность при измерении высокой оптической плотности. Тем не менее способы расширения шкалы следует иметь в виду как возможную альтернативу преимущества и ограничения их разобраны в работе Ингла [20]. [c.77]

Эксклюзионная хроматография полимеров предъявляет ряд специфических требований к растворителям, используемым в качестве элюента при разделении [25, 106 ]. Эти растворители должны полностью растворять исследуемый полимер, иметь малую вязкость и быть устойчивыми к действию окислителей и препятствовать деструкции полимера в процессе анализа. Чем лучше термодинамическое качество растворителя, тем селективнее разделение. Растворитель должен обеспечивать максимальную чувствительность детектора, допускать быстрое выделение полимера из фракций, а также быть достаточно полярным, либо иметь полярные добавки (спирты, ТГФ), чтобы подавить адсорбцию полимера. В случае рефрактометрического детектора выбор растворителя определяется, при прочих равных условиях, максимальной разницей в показателях преломления полимера и растворителя. В случае абсорбционных детекторов (ИК- и УФ-спектрофотометров) растворитель должен обладать минимальной оптической плотностью в области рабочих длин волн детектора. При использовании в ка честве сорбента гелей необходимым условием является хорошее набухание геля в растворителе —элюенте. Иногда гидрофобные гели можно использовать для разделения водорастворимых полимеров, при введении в элюент ПАВ. Например, добавка 0,1% Ыа-ла-урилсульфата в воду позволяет проводить на стирогелях разделе ние декстранов [365]. [c.190]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология