Нуклеиновые кислоты электронная микроскопия

О технике и результатах изучения макромолекул нуклеиновых кислот электронным микроскопом следует сказать особо. Основные приемы были разработаны Холлом. Они заключаются [c.280]

Особенно широко электронная микроскопия применяется в вирусологии. Именно с помощью электронного микроскопа стало возможным визуальное наблюдение большинства возбудителей различных болезней. Используя различные методические приемы электронной микроскопии, можно определить тип симметрии и размер вирусных частиц, морфологию и анатомию, а также строение внутрен-него компонента частицы, природу нуклеиновой кислоты. Электронно-микроскопические исследования необходимы нри изучении вопроса взаимодействия вируса с клеткой, который включает в себя механизмы адсорбции и проникновения вирусных частиц в клетку, кинетику формирования и внутриклеточного размножения вирусов. Кроме того, электронная микроскопия является одним из основных контролей при физико-химических исследованиях вирусов и особенно при их концентрировании и очистке для определения чистоты и гомогенности вирусных препаратов, а также для подсчета вирусных частиц. [c.212]

Рис. 50. Молекулы нуклеиновых кислот (а) и гемоцианина (б), видимые в электронный микроскоп

Установление структуры ДНК и РНК оказалось возможным в результате одновременных усилий многих исследователей. То, что известно сейчас о строении этих нуклеиновых кислот, было выяснено благодаря применению электронной микроскопии для наблюдения некоторых самых маленьких молекул ДНК, рентгеновского дифракционного анализа, расщеплению молекул нуклеиновых кислот на составные части и, наконец, благодаря блестящей догадке Уотсона и Крика о существовании двойной спирали. В частности, химический анализ показал, что в молекулах ДНК всегда содержится приблизительно равное число единиц Т и А, а также равное число единиц Ц и Г. Это подтвердило догадку, что пары оснований Т и А, а также Ц и Г связаны друг с другом. Генетический код определяется последовательностью комбинаций этих оснований, которая может иметь, скажем, такой вид АТ, АТ, ГЦ, АТ, ГЦ, АТ, ГЦ, ГЦ, ГЦ и т.д. [c.486]

Первые электронные микроскопы появились в продаже в 1939 г. и с тех пор стали одним из важнейших приборов, применяющихся при изучении биологии клетки. Обладая разрешением 0,4 нм, электронный микроскоп позволяет увидеть молекулы белков и нуклеиновых кислот, а также детали строения клеточных органелл. Еще более широко электронный микроскоп стал использоваться с 1950 г., когда были сконструированы микротомы и ножи, позволяющие делать ультратонкие (20—200 нм) срезы тканей, предварительно залитых в пластмассу. [c.19]

Ультрафиолетовые спектры поглощения определяются возбуждением электронных уровней атомов и молекул и обладают максимумами, положение которых характерно для определенных атомных группировок, сопряженных двойных связей и др, В белках ультрафиолетовые спектры поглощения в основном определяются ароматическими аминокислотами — фенилаланином /--макс— 260 м х), тирозином и триптофаном 280 жр-), причем спектры поглощения могут быть даже использованы для аналитического определения этих аминокислот. Нуклеиновые кислоты и нуклеопротеиды обладают настолько резким максимумом поглощения при 260—265 лр., что при помощи фотографирования в ультрафиолетовом микроскопе легко определить их содержание в отдельных клетках (Брумберг). Зависимость ультрафиолетовых спектров поглощения от pH, сос- тава среды, от образования комплексов с другими соединениями позволяет исследовать изменения состояния растворенных веществ так, по смещению максимума поглощения с 280 до 260—265 м а было обнаружено образование комплекса между белками и полисахаридами (Розенфельд). Линейные полимеры обычно не имеют интенсивных полос поглощения в видимой и ближней ультрафиолетовой областях спектра. [c.61]

Стремительное развитие биоорганической химии, физической химии полимеров и молекулярной биологии дало хроматографии новый объект исследований — высокомолекулярные соединения. Возникла необходимость в разделении синтетических полимеров и биополимеров, нуклеиновых кислот, белков, а также вирусов, фагов, рибосом и пр. Достигнутый в этом направлении успех позволил одному из крупнейших специалистов в области молекулярной биологии Френсису Крику сказать, что хроматография наряду с рентгеноструктурным анализом, электронной микроскопией и ультрацентрифугированием обеспечила все наиболее крупные успехи молекулярной биологии. Здесь следует особо выделить методы фракционирования биополимеров на ионообменных целлюлозах [2] и основанную на биоспецифической сорбции афинную хроматографию [3]. [c.10]

Изучением оптических свойств и вязкости растворов дезоксирибонуклеиновой кислоты, а также наблюдениями с помощью электронного микроскопа установлено, что молекула дезоксирибонуклеиновой кислоты представляет собой длинную нить. Отдельные нуклеотиды, входящие в состав нуклеиновых кислот, соединяясь между собой, образуют длинную цепную молекулу, в которой отдельные нуклеотиды связываются между собой остатками фосфорной кислоты у 3-го и 5-го атомов дезоксирибозы. [c.562]

Применение. В электронной микроскопии в качестве красителя для специфического выявления нуклеиновых кислот [1].. [c.157]

Малые размеры бактериальной клетки и наличие двух типов нуклеиновых кислот очень затруднили цитохимическое выявление ядерного материала. Тем не менее классические цитологические методы, а затем и техника ультратонких срезов в сочетании с электронной микроскопией позволили в конце концов установить, что бактерии содержат ДНК и что эта ДНК не распределена диффузно в цитоплазме, а локализована в ограниченных участках, которые делятся перед делением клетки. [c.30]

Возможность использования электронного микроскопа затрудняется необходимостью тщательного высушивания объектов, так как внутри электронного микроскопа поддерживается высокий вакуум, необходимый для прохождения электронного пучка кроме того, вследствие сильного поглощения электронов, изучаемые образцы должны быть весьма тонкими (1—10 мк) наконец, следует учитывать изменения образца под влиянием воздействия пучка электронов. В настоящее время разработаны новые методы наблюдения в электронном микроскопе не самих образцов, а отпечатков с них (реплик), которые могут быть получены и с влажных объектов. Кроме того, разработаны также методы прямого наблюдения влажных объектов (суспензии бактерий, молекулы нуклеиновых кислот) в [c.63]

Применение электронных микроскопов к изучению коллоидных растворов дает возможность установить правильную картину строения коллоидов. В электронном микроскопе непосредственно видны частицы высокодисперсных золей серебра, золота и других веществ. При исследовании золей каучука наблюдались длинные нити с расположенными на них узелками. Длинные молекулы многих высокомолекулярных органических веществ образуют сильно разветвленные сетки со спутанными петлями. Это подтверждает предположение о нитеобразном строении молекул многих высокомолекулярных соединений. При помощи электронных микроскопов удалось увидеть молекулы белковых веществ, например гемоцианина, которые оказались шарообразной формы с диаметром, равным 20 m x. На рисунке 99 приведены фотографии молекул нуклеиновых кислот и гемоцианина. [c.348]

Фитопатогенные вирусы представляют собой нуклео-протеиды, состоящие из белков и нуклеиновых кислот. Размеры вирусных частиц чрезвычайно малы, изучать и измерять их можно лишь под электронным микроскопом. Частицы имеют палочковидную, шаровидную или нитевидную форму. Многие вирусы переходят в кристаллическую форму. Внешние условия в сильной степени влияют на развитие вирусов. По отношению к ним различают вирусы стойкие и нестойкие. Стойкие вирусы выдерживают высушивание, сильное нагревание, воздействие света и химических веществ. Нестойкие вирусы погибают при неблагоприятных условиях. [c.69]

Можно ли увидеть молекулы и атомы Невооруженному глазу доступны частицы диаметром 50—25 мк. Хорошие оптические микроскопы дают увеличение в 1200—1500—2000 раз, а в лучших из них увеличение может достигать 5000—6000 раз. Обычный электронный микроскоп дает увеличение в 10 ООО—100 ООО раз. Электронный микроскоп с увеличением в 40 ООО раз уже дает возможность различать микрообъекты около 50 А,. В электронном микроскопе с более сильным увеличением удается рассмотреть частицы с диаметром, измеряемым сотыми долями микрона — макромолекулы, или молекулы-гиганты, например молекулы нуклеиновых кислот, гемоцианина и др. Размеры обычных молекул примерно в 100—200 ра меньше этих величин и с помощью электронного микроскопа не могут быть видны. В последнее время сконструирован новый, так называемый ионный эмиссионный микроскоп с электронным проектором, дающий увеличение в 5—10 млн. раз, т. е. в 20—40 раз больше, чем электронный микроскоп. С помощью этого микроскопа удается видеть не только отдельные молекулы, но и атомы, их образующие. [c.24]

Основные положения. Вирусы — мельчайшие патогенные агенты, видимые только под электронным микроскопом и способные размножаться только внутри живых клеток. Вирусы состоят из нуклеиновой кислоты и белка — компонентов, которые можно разделить химическим путем и даже кристаллизовать. Воссоединение этих двух компонентов возрождает вирус со всеми его биологическими свойствами. Когда вирус поражает живую клетку, ее цитоплазма быстро трансформируется в частицы размножающегося вируса, способного поражать другие клетки. Вирусы вызывают катар верхних дыхательных путей, грипп, корь, скарлатину, ветряную оспу, полиомиелит, бешенство и некоторые виды рака. [c.411]

С целью более подробного исследования природы фракций нуклеиновых кислот в ряде опытов препараты нуклеиновых кислот костного мозга исследовали при помощи электронной микроскопии. [c.51]

Поскольку микросомы так малы, что их с трудом можно рассмотреть даже в электронный микроскоп, строение нх изучено плохо. По всей вероятности, оии представляют собой пузырек, окруженный мембраной и утыканный очень. маленькими частичками величиной 100—150 ангстрем, состоящими из нуклеиновой кислоты и белка. Химический состав микросом сравнительно прост. Они содержат жироподобные венгества, белки н рибонуклеиновую кислоту (РНК). [c.160]

Однако физические методы, например электронная микроскопия, несомненно, могут внести значительный вклад в выяснение структуры нуклеиновых кислот. Можно надеяться, [c.200]

Основополагающая идея структурного анализа нуклеиновых кислот методом электронной микроскопии заключается в прямом наблюдении оснований в составе полинуклеотидной цепи. Реализация этой идеи зависит от трех главных факторов [c.201]

Максимальная разрешающая способность большинства серийных электронных микроскопов составляет 5 А. Это значит, что с их помощью можно дифференцировать две структуры шириной 5 находящиеся на расстоянии 5Я, тогда как при меньшем расстоянии они становятся неразличимыми и сливаются в одно целое. Теоретически возможны электронные микроскопы с большей разрешающей способностью, и в настоящее время существуют приборы, позволяющие дифференцировать структуры, разделенные всего лишь 2 А. Достаточно ли такого разрешения для идентификации оснований в полинуклеотидной цепи, можно видеть из рис. 9.1. На этом рисунке показан участок нуклеиновой кислоты в развернутой конформации, так что расстояние между основаниями близко к максимальному и составляет 7 А. Размер пуриновых оснований вдоль короткой и длинной осей составляет соответственно 2,5 и 5,5 Я, а размер пиримидиновых оснований - 2 и 4 Я, Таким образом, разрешающая способность серийных микроскопов достаточно близка к той, что требуется для структурного анализа. [c.201]

К объектам, изучаемым микробиологией, относятся также вирусы, представляющие собой мельчайшие живые существа, видимые только под электронным микроскопом, размеры их варьируют от 16 до 300 ммк. Они не имеют клеточной структуры, состоят из наследственного материала — нуклеиновой кислоты, покрытой белковой оболочкой. Вирусы являются внутриклеточными паразитами. Они проникают в живую клетку и размножаются, используя питательный материал и ферментные системы клетки, так как не обладая собственным, имеют общий обмен веществ с клеткой, в которой живут. Последняя теряет свойственную ей ранее функцию и приобретает новые, часто вредные для организма особенности. Вирусы паразитируют в живых клетках человека, животных и растений, насекомых и др. Среди них есть виды, паразитирующие в клетках бактерий и вызывающие их разрушение и гибель это — бактериофаги [94, 95]. [c.45]

В разделе А-1 были рассмотрены возможности определения молекулярных весов макромолекул по сведениям, полученным при помощи рентгенографического анализа кристаллов для очень ограниченного класса высокомолекулярных веществ, примером которых являются кристаллические глобулярные белки. Но даже в случае белков возможность определения молекулярного веса таким методом представляет лишь теоретический интерес, поскольку кристаллографические исследования требуют значительно больших усилий по сравнению с обычными методами определения молекулярного веса растворенного полимера. Больший практический интерес представляет возможность определения молекулярного веса по электронно-микроскопическим фотографиям [25]. Однако использование этого метода требует соблюдения особой осторожности при изготовлении образцов, с тем чтобы избежать осложнений, например вследствие молекулярной агрегации [26]. Пределы разрешения, достижимого с помощью электронного микроскопа, позволяют в настоящее время использовать этот метод лишь для исследования молекул глобулярных белков и спиралевидных частиц молекулярного размера, как, например, частиц нуклеиновой кислоты. Холл и Доти [27] показали, что по электронно-микроскопическим фотографиям может быть произведена оценка распределения по молекулярным весам. Однако какой бы надежной ни казалась теоретическая интерпретация, основанная на данных, полученных для растворов полимеров, необходимо добиться такого-положения, когда результаты исследования снимков отдельных молекул будут согласовываться с результатами, полученными заведомо меиее прямым способом. [c.30]

Нуклеопротеидные частицы, известные под названием вирусов, атакуют самые разные живые организмы — от мельчайшей микоплазмы до человека. Они не обладают собственным метаболизмом и оживают , лишь когда содержащаяся в них нуклеиновая кислота проникает в живую клетку. Вирусы привлекают к себе большое внимание не только в связи с тем, что они являются болезнетворными агентами, но также и потому, что широко используются в молекулярно-биологических исследованиях. Зрелая вирусная частица, ил вирион, состоит из одной или нескольких молекул нуклеиновых кислот и белковой оболочки — капсида, которая имеет обычно спиральную или икосаэдрическую форму. Капсид построен из морфологических субъединиц , или капсомеров иногда хорошо различимых под электронным микроскопом. Капсомеры в свою очередь состоят из большого числа белковых субъединиц меньшего размера. Некоторые крупные вирусные частицы имеют мембраноподобную оболочку. Другие, например Т-четные бактериофаги, инфицирующие Е. oli, весьма необычны по форме (дополнение 4-Д). [c.286]

Денатурация нуклеиновых кислот сводится к разрушению двойной спирали (ДНК) илп двуспиральных участков (РНК). Нагревание раствора нативной ДНК вызывает разделение двойной спиралп па две цени, сворачивающиеся в статистические клубки, Нри этом значительно уменьшаются вязкость и оптическая активность, исчезает гипохромизм, т. е. возрастает интенсивность поглощения в области 260 нлг. Разделение на две цепи непосредственно доказывается центрифугированием ДНК, содержащей N, в градиенте плотности s l (ср. с. 82). Клетки Е. сой, выращенные в среде, содержащей i, переносились в среду с обычным N. При делении клеток образовывались редуплицированные двойные спирали, в которых одна цепь содержала N, другая — N. До денатурации наблюдался один пик плотности 1,717 г/см отвечающий двойным спиралям N — N. После денатурации появляются два пика — 1,740 и 1,724 г/см , отвечающие одноиптчатым клубкам соответственно с и., с 4, Плотность повышается, так как клубки более компактны, чем спираль. М. м. ДНК уменьшается при денатурации вдвое. Образование клубков наблюдается в электронном микроскопе. [c.233]

Обоснование того, что прокариотный и эукариотный типы клеточной организации являются наиболее существенной границей, разделяющей все клеточные формы жизни, связано с работами Р. Стейниера (К. 81ашег, 1916—1982) и К. ван Ниля, относящимися к 60-м гг. XX в. Поясним разницу между прокариотами и эукариотами. Клетка — это кусочек цитоплазмы, отграниченный мембраной. Последняя под электронным микроскопом имеет характерную ультраструктуру два электронно-плотных слоя каждый толщиной 2,5 —3,0 нм, разделенных электронно-прозрачным промежутком. Такие мембраны получили название элементарных. Обязательными химическими компонентами каждой клетки являются два вида нуклеиновых кислот (ДНК и РНК), белки, липиды, углеводы. Цитоплазма и элементарная мембрана, окружающая ее, — непременные и обязательные структурные элементы клетки. Это то, что лежит в основе строения всех без исключения клеток. Изучение тонкой структуры выявило существенные различия в строении клеток прокариот (бактерий и цианобактерий) и эукариот (остальные макро- и микроорганизмы). [c.18]

Реакция нуклеиновых кислот с глиоксалем может рассматриваться как специфическая по отношению к гуаниновым звеньям скорость ее взаимодействия с одноцепочечными полинуклеотидами значительно выше, чем с двухцепочечными. Она применялась при изучении первичной структуры РНК как метод ограничения действия гуанилрибонуклеазы. Реакции с альдегидами широко используются для фиксации одноцепочечных участков нуклеиновых кислот при изучении их с помощью электронной микроскопии. [c.390]

Протопласт. Содержимое бактериальной клетки без клеточной оболочки получило название протопласта. Протопласт состоит из цитоплазмы, покрытой мембраной. Разработан метод освобождения протопласта грамположительных бактерий посредством обработки клеток ферментом лизоцимом. Оболочки клеток при этом растворяются, а протопласты сохраняются живыми, способными к росту, делению, синтезу протеинов и нуклеиновых кислот [363]. Цитоплазма представляет собой водянистую или слегка вязкую массу — сложную композицию белков, жиров, углеводов и многочисленных других органических соединений, минеральных веществ и воды. Цитоплазма не гомогенная коллоидная жидкость, она содержит множество субми-кроскопических мембранных структур, выявленных электронной микроскопией. В цитоплазматических белках найдено 20 различных аминокислот, обусловливающих различные свойства белков. Например, аминокислота тирозин имеет спиртовые группы (ОН) в боковой цепи и этим обусловливает гидрофильность цитоплазмы. Липоиды, наоборот, обусловливают гидрофобность цитоплазмы. [c.26]

Роль геометрических факторов. В теории катализа значение геометрических факторов получило наиболее общее выражение в принципе геометрического соответствия мультиплетной теории Баландина. Близкий принцип лежит в основе теории матричных эффектов, общепринятой в современной молекулярной биологии для объяснения действия ферментов, нуклеиновых кислот и других регуляторов биохимических процессов. Применительно к выяснению возможности ускорения сравнительно простых реакций использование геометрических характеристик требует большой осторожности. Трудности начинаются с выбора геометрических параметров поверхности. Во-первых, эти параметры различны для идеальных плоскостей разных индексов (одного и того же монокристалла), которые обычно одновременно наблюдаются на поверхности. Во-вторых, как показывают прямые исследования дифракции медленных электронов, не только расстояния, но и тип структуры могут быть различными на поверхности и в объеме кристалла. Так, в частности, Ое и 81 в объеме имеют кубическую структуру алмаза, а на поверхности — гексагональную структуру расстояния З — 81 или соответственно Се — Се в объеме и на поверхности различаются, как известно, весьма существенно. В-третьих, по данным электронографии и эмиссионной микроскопии, атомы поверхности [c.25]

Вирус мозаики табака состоит примерно на 5 % из рибонуклеиновой кислоты и па 95% из белка. Недавно проведенные исследования при помощи рентгеновских лучей и электронного микроскопа показали, что палочки вируса табака пусты внутри и обладают по всей своей д.иине полостью диаметром 40 А, Этот центральный канал обернут лишь одним винтом рибонуклеиновой кислоты, состоящей примерно из 8000 нуклеотидов (см. Нуклеиновые кислоты ). С внешней стороны к этому винту [c.455]

Новый период в развитии наших знаний об обмене белков и связанных с ними веществ в живых организмах начался в последние 15 лет, после того как в биохимических исследованиях стали щироко применять новейшие физические, химические и физико-химические методы. Метод меченых атомов, электронная микроскопия, дифференциальное центрифугирование, хромаго-фия, электрофорез и многие другие методы позволили биохимикам перейти от изучения процессов обмена в отдельных органах и тканях организма к исследованию этих процессов в клетке и даже взаимодействию между молекулами, получить многие новые данные об обмене веществ и преж де всего обмене белков и связанных с ними нуклеиновых кислотах. [c.286]

Применение. В электронной микроскопии в качестве красителя для контрастирования [I—4], в частности для дополнительного окрашивания с целью кон трастирования нуклеиновых кислот в исследуемых препаратах [5]. В аналИ тической химии в качестве реактива на уксусную и Лропионовую кислоты, Технические показатели (по ТУ 6-09-3196—73) [c.202]

Высокая эффективность монозамещенных производных иприта и азотистого иприта как алкилирующих агентов для полинуклеотидов и относительно узкая специфичность реакции позволяют предполагать, что этот тип алкилирующих агентов может быть успешно использован для химической модификации нуклеиновых кислот. Предложено применение диэтил-( -хлорэтил)-амина для метки положения остатков гуанина вдоль цепей и их последующего детектирования в ДНК с помощью электронной микроскопии 2 . [c.377]

Внешний вид микробов. Наблюдать ультрамикробы удалось только в электронный микроскоп, дающий увеличение до 45 000 раз. Вирусы (рис. 36) представляют собой частицы, состоящие из белковых. веществ и нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК ) и липоидной оболочки. Они не обладают обычной клеточной структурой. К неклеточной форме жизни относятся также бактериофаги (рис. Ъ7). С>ни представляют собой удлиненные образования с утолщенным концом . Вид бактерий отличается исключительным однообразием. Все извест- [c.248]

Возможность использования электронного микроскопа ограничена до некоторой степени необходимостью тщательно высушивать объект, так как внутри электронного микроскопа поддерживается высокий вакуум. Изучаемые образцы должны быть чрезвычайно тонкими (1 —10 мк), поскольку они сильно поглощают электроны. В настоящее время разработаны методы наблюдения в электронном микроскопе не самих образцов, а отпечатков с них (так называемых реплик), которые могут быть получены и с влажных объектов. На рис. 159 представлены полученные в электронном микроскопе снимки молекул нуклеиновых кислот и гёмоцианина. [c.382]

Задача физической химии нуклеиновых кислот состоит в описании и интерпретации ряда свойств, возникающих благодаря наличию у этих полимеров вторичной структуры. Первичная структура, т. е. природа и расположение ковалентных связей в молекуле, изучалась и будет изучаться специальными методами биохимии и органической химии. Аспекты вторичной структуры касаются размеров, формы и конформации макромолекулы, и их изучение проводится методами рентгенографии, а также менее специализированными методами физической химии. Чисто морфологические детали третичной структуры изучаются главным образом методами современной электронной микроскопии. Они включают вопросы взаимоотношения нуклеиновой кислоты и белка в нуклеопротеидах, организации агрегатов полинуклеотидных тяжей и упаковки субъединиц в вирусах и нуклеопротеидных частицах. При рассмотрении еще более высоких уровней организации, например вопроса о распределении нуклеиновых кислот в хромосомах, сомнительно, уместно ли для таких структур пользоваться термином молекула (или даже макромолекула). [c.519]

Несмотря на то что область температурного перехода для ДНК относительно узкая, она все же шире, чем можно было бы ожидать для длинной идеально уложенной спиральной структуры. Внутри этой области с помощью метода электронной микроскопии удалось обнаружить только полностью денатурированные или совершенно нативные структуры [239]. И вновь внутри этой области понижение вязкости быстро достигает предельного значения, а дальнейшее понижение вязкости происходит только при повышении температуры, что указывает на существование известного распределения специфических температур денатурации. Вполне обоснованное объяснение этого заключается в том, что вклад двух типов пар оснований в стабильность спирали различен. В таком случае тепловая денатурация должна была бы зависеть от относительного состава либо всей двуспиральной структуры, либо ее отдельных больщих участков. Показано, что температуры плавления (т. е. точки перегиба на кривых зависимости оптической плотности от температуры), определенные в стандартных условиях (0,15 М хлористого натрия в 0,015 М цитрата натрия) для большого числа дезоксирибонуклеиновых кислот, различающихся по составу оснований, прямо пропорциональны содержанию гуанина и цитозина в нуклеиновой кислоте (рис. 8-20) [240]. Линейная зависимость температур плавления от содержания гуаиин-цитозиновых иар исключительно точна, и поэтому измерение этих температур может быть использовано для определения нуклеотидного состава данной ДНК [241, [c.574]

За последние годы были получены точные доказательства того, что носителем инфекциопности вирусов, и в частности бактериальных вирусов, т. е. фагов, является исключительно нуклеиновая кислота. Впервые такие доказательства представили Гирер и Шрамм в результате опыта на вирусе табачной мозаики. РНК очищалась многократной деиротеииизацией с помощью фепола и додецилсульфата, сохраняя свою инфекционность при введении в растение. При этом удельная инфекционность снижается в 200—300 раз, если рассчитывать ее на единицу вирусной РНК. Следовательно, белковая оболочка вируса небезразлична для процесса заражения. Однако примесь белка в тщательно приготовленных препаратах была мала (меньше 0,02%), и электронный микроскоп показывал полное отсутствие вирусных частиц. Если какое-то количество белка и оставалось в препаратах, то это были денатурированные макромолекулы, неспособные образовать структуру вирусных палочек. [c.358]

Химический состав энтомопатогенных вирусов. Характер вирусных частиц, как они видны в электронный микроскоп, дает картину вируса как живой молекулы, где на спиральном стержне (helix) нуклеиновой кислоты сидят, как зерна в колосе, протеиновые частицы и между ними определенная доля липоидов. По центру протягивается осевой канальчик, а поверхность покрыта собственно оболочкой вируса. Такая структура была установлена и изучена с помощью диффр акции рентгеновых лучей прежде всего у вируса табачной мозаики, и, по-видимому, она типична для всех вирусов. Форма вирусных частиц определяется участком спирали нуклеиновой кислоты и асимметричностью формы белковых и нуклеиновых компонентов [82]. Число белковых частиц на веретеновидной спирали вируса табачной мозаики составляло 44 на 68 А [c.68]

В основе ряда методов структурного анализа нуклеиновых кислот лежит зависимость некоторых физических свойств этих биополимеров от их первичной структуры, К числу таких методов относятся электронная микроскопия, дисперсия оптического вращения (ДОВ) и круговой дихроизм, дифракция оентгеновских лучей, ядерный магнитный резонанс и масс-спектрометрия. Основными достоинствами этих методов являются [c.200]

Можно считать, что для определения последовательности при помощи электронной микроскопии имеются все необходимые инструменты и методы. Каковы же перспективы такого исследования Одним из очевидных подходов является приложение этого метода к нуклеиновой кислоте с известной первичной структурой, желательно однонитчатой и лишенной элементов вторичной структуры. Подход5пцими объектами для этой цели могут быть различные тРНК и 5 S РНК. В растворе с низкой ионной силой длина вытянутой цепи тРНК должна быть 500 Я, а длина 5S РНК -800 R. Локализация ряда точек с заведомо известным расположением в пределах этих расстояний должна быть вполне разрешимой задачей. Удобными объектами для электронномикроскопических исследований могут явиться также сегменты РНК известной структуры, реплицированные так, как описано в гл. 8. Эксперименты такого рода не только явятся независимой проверкой других методов по определению структуры, но и источником необходимого опыта и свидетельством надежности результатов, получаемых при помоши электронной микроскопии. [c.206]

Если считать, что какие-либо фундаментальные методические усовершенствования не требуются, то ценную информацию можно также получить, используя метод электронной микроскопии для структурного изучения вирусных нуклеиновых кислот, например ДНК ф Х174 и РНК TMV. [c.207]

Другой опыт, иллюстрирующий роль ДНК, заключается в следующем. Фаги, как уже упомянуто, это вирусы бактерий. Под электронным микроскопом можно наблюдать, как эти маленькие организмоподобные частицы, прилипнув к стенке большой клетки — бактерии, прокалывают острым выступом (точнее, растворяют с помощью выделяемого им фермента) участок стенки бактерии и выпускают внутрь клетки содержимое своего белкового мешка — дезоксирибонуклеиновую кислоту. Сам белковый мешок легко отделяется от бактерии и в дальнейшем участия не принимает. Был выращен бактериофаг (типа Tg), помеченный радиоактивным фосфором по нуклеиновой кислоте и радиоактивной серой по белку (Херши и Чейг). В результате радиохимического анализа было выяснено, что в клетку бактерии проникает только радиоактивный фосфор (т. е. ДНК), а радиоактивная сера практически вся остается в отпавших оболочках фага. В дальнейшем идет обычное размножение фага в клетке бактерии, распад последней и выпадение взрослых частиц фага в среду. Таким об- [c.726]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология