Противоточное распределение применение

На практике используют автоматические приборы для распределения с несколькими сотнями распределительных ячеек (ступеней). Особенно широкое применение метод противоточного распределения получил в химии природных соединений и в биохимии . [c.39]

Структура амина, Лмин, который подвергают ацилированию, может быть взят в виде или соли, или эфира аминокислоты или пептида. Если применяют эфир, то получается нейтральный продукт реакции, от которого исходные кислотный и основной компоненты легко можно отделить экстрагированием раствором бикарбоната натрия и разбавленной соляной кислотой. Применение солн щелочного металла приводит к образованию кислотного продукта, для выделения которого в чистом виде и для освобождения от исходной ациламинокислоты или пептида часто требуется применение противоточного распределения. [c.178]

Как правило, последовательное экстрагирование целесообразно использовать лишь в препаративных целях. При аналитической работе в настоящее время этот метод не находит применения. Метод фракционного экстрагирования исторически сложился как промежуточное звено между обычной экстракцией и гораздо более совершенным современным методом — противоточным распределением. [c.405]

Область применения противоточного распределения [c.411]

По методическим соображениям обзор по применению противоточной экстракции к решению конкретных проблем органической химии будет дан позже. Однако уже здесь следует подчеркнуть, что противоточное распределение является одним из наиболее эффективных методов современной органической химии. Каждый химик-органик должен овладеть этим методом с таким же совершенством, как перегонкой или кристаллизацией. [c.411]

В своей современной форме противоточное распределение является одним из наиболее эффективных методов разделения веществ в органической лаборатории. Автор настоящей главы не ставил перед собой задачи дать исчерпывающий обзор по его применению, однако уже из данных табл. 35 видно, какое широкое распространение получило противоточное распределение в настоящее время. Как видно из табл. 35, наибольшее при- [c.433]

Подобные смеси могут быть разделены современными методами (например, с применением противоточного распределения), однако препаративно это не всегда удобно. [c.225]

Перекристаллизация до достижения постоянной температуры плавления — вероятно, самая простая методика очистки и характеристики чистоты твердых кристаллических веществ. Обычно этого бывает вполне достаточно, но в ряде случаев применение этой или какой-нибудь другой характеристики гомогенности вещества но одному единственному критерию может привести к серьезным ошибкам. Так, например, образование смешанных кристаллов может сильно затруднить разделение двух веществ, в то же время четкая температура плавления, не меняющаяся при перекристаллизации, будет создавать видимость чистоты вещества. Необходимо использовать, по крайней мере, два метода очистки, например хроматографию и кристаллизацию, при этом в первом случае можно менять адсорбенты, а во втором — растворители для перекристаллизации. Чтобы выявить скрытые смеси, проводят операции до тех пор, пока не перестанут изменяться все физические свойства, которые могут быть определены. Практически обычно добиваются постоянства температуры плавления и оптического вращения (для жидкостей — температуры кипения и показателя преломления), а также прекращения изменений тонкой структуры ИК-спектра. Если это возможно, то дополнительно проводят хроматографирование на бумаге (до получения одного пятна в разных системах растворителей) и сравнение экспериментальных и расчетных данных при противоточном распределении. [c.29]

Для анализа сложных смесей используют также другие методы, иногда более эффективные, чем описанный выше метод противоточного распределения Крэга, Применяют, в частности, метод экстракции по схеме, подобной приведенной на рис. 205, но с однократным вводом испытуемой смеси в начале процесса (метод поочередного вывода фаз из процесса). Метод двойного вывода фаз проводят по аналогичной схеме, но при этом справа и слева от трубки, в которую вводится исходный раствор, располагается одинаковое количество трубок. Можно также использовать преимущества, связанные с применением флегмы. Разработан аппарат для распределения веществ между тремя жидкими фазами Все эти методы дают возможность разделять очень сложные природные и синтетические смеси. Такими методами удается выделить различные гормоны, антибиотики, стерины и алкалоиды, т. е. такие соединения, для выделения которых трудно применить какие-либо другие способы. [c.431]

Применение противоточного разделения. Способ противоточного распределения особенно ценен при детальном исследовании хода разделения. Так, при разделении сложных смесей начальную экстракцию можно провести на относительно малом числе трубок большого размера. Для последующего разделения полученных при этом фракций необходимо использование большого числа переносов. Хорошим примером является работа Белла который для выделения больших пептидных фрагментов из продуктов разложения АКТГ осуществил 10 000 переносов в 200-ячеечном аппарате. [c.533]

Для глубокой очистки газов и жидкостей в лабораторной практике в последнее время, наряду с такими известными физико-химическими методами, как четкая ректификация, противоточное распределение и экстракция, с успехом начинает применяться и так называемая препаративная хроматография [1—3], в основном ее проявительный вариант, существенным недостатком которого, как известно, является малая производительность и разбавление конечных продуктов инертным газом-носителем. Применение проявляющего газа при разделении выдвигает также весьма сложную проблему глубокой очистки больших количеств этого газа для предотвращения попадания посторонних примесей в конечные выделенные фракции чистого мономера. [c.198]

Широкое применение приобрел метод многократного фракционного экстрагирования по Крейгу, называемый также противоточным распределением. [c.15]

Оценка чистоты. — Шведские химики Сведберг и Тизелиус внесли большой вклад в развитие химии белка разработкой аналитических методов, чрезвычайно удобных для характеристики этих, высокомолекулярных соединений. Метод ультрацентрифугирования Сведберга служит для определения молекулярного веса. При вращении с очень большой скоростью ячейки, содержащей раствор белка, молекулы белка под действием центробежных сил движутся от центра со-скоростью, зависящей от величины молекулярного веса. Специальная оптическая система дает возможность наблюдать и фотографировать ячейку во время центрифугирования. Молекулярный вес может быть, найден либо из определения седиментационного равновесия, либо по-скорости седиментации- Хотя теоретически первый метод точнее, для достижения равновесия требуется длительное время, и поэтому более точные значения получают, исходя из определения скорости седиментации. При применении ультрацентрифуги можно установить также гомогенность молекул (по величине и форме). Тизелиус предложил (1937) электрофоретический метод разделения молекул белка в электрическом поле молекула белка движется со скоростью, определяющейся величиной молекулы, ее формой, количеством и типом ионизированных групп. Материал, кажущийся гомогенным по растворимости, может содержать компоненты, отличающиеся по электрофоретической подвижности. Жестким критерием чистоты является профиль кривой распределения, получаемой при противоточном распределении молекул (Крейг, см. 31.29). [c.674]

Сравнительно несложно определение пенициллина X, основанное на том, что, в отличие от остальных пенициллинов, он не способен экстрагироваться хлороформом из водного раствора, имеющего значения pH =2,0—2,5. После удаления этим растворителем остальных пенициллинов, пенициллин X может быть извлечен другим, более эффективным растворителем Описано также разделение всех четырех пенициллинов при помощи очень сложного способа так называемого противоточного распределения 5 . Этот прием может быть применен и для аналитических целей, хотя он и очень сложен. [c.124]

Том 2 (1954 г.). Посвящен определению карбоксильной, сложноэфирной, нитро-, нитрозо- и нитратной группам применению алюмогидрида лития в органическом анализе кинетическим методам анализа методам анализа, основанным на разной растворимости в несмешивающихся жидкостях и на противоточном распределении. [c.230]

В пределах одной главы, естественно, нельзя рассмотреть метод противоточного распределения в полном объеме. Мы ограничимся обсуждением целесообразности более широкого era применения в обычных лабораториях, т. е. лабораториях, финансовые возможности которых ограниченны, и лишь упомянем большие дорогие аппараты и сложные методы, которые часто [c.252]

Общие правила работы. Нагренапис и охлаждение, кристаллизация, сушка и упаривание, фильтрование, экстракция и противоточное распределение, перегонка, работа с вакуумом и под давлением, возгонка, методы работы с полумикроколиче-ствами. Основы хроматографического разделения веществ, хроматографические методы. Идентификация органических веществ определение температуры плавления, тепературы кипения, плотности. Качественный элементный и функциональный анализ. Применение ИК- и УФ-спектроскопии и спектроскопии ПМР для идентификации органических соединений. Понятие о применении газовой хроматографии и масс-спектрометрии для идентификации веществ. Номенклатура ЮПАК. [c.247]

Пептидный гормон окситоцин. — Задняя доля гипофиза выра- батывает ряд гормонов, два из которых были выделены в чистом виде. Один из них, окситоцин, стимулирует гладкую мускулатуру матки др угой, вазопрессин — антидиуретовый гормон, обладающий прессорной активностью. Эти два гормона настолько близки по физическим свойствам, что долгое время их считали одним веществом, обладающим широким спектром активности. Однако применением фракционного осаждения, хроматографии и электрофореза удалось их частично разделить (1928—1944). Применив противоточное распределение для продажного экстракта, имеющего окситоциновую активность 20 ед мг, Дю Виньо (1949) получил значительно более чистый [c.693]

Интересным примером может служить методика, примененная 30 лет назад Ореховым [111] при выделении алкалоидов из Anabasis арhylla. Смесь оснований была превращена в гидрохлориды и затем небольшими порциями к смеси добавляли раствор щелочи. После добавления каждой порции щелочи смесь экстрагировали эфиром. Эфирные вытяжки обрабатывали раздельно. Эту методику, которая по своему принципу очень напоминает современное противоточное распределение. Орехов назвал фракционной алкализацией. [c.405]

В последующих разделах будут рассмотрены области применения и значение противоточного распределения, далее будет изложена теоретическая основа метода, описано его практическое осуществление в лаборатории и приведены конкретные примеры его применения. Для более подробного изучения противоточного распределения можно рекомендовать классические работы основателя этого метода Крейга [37—46] и Голум-бека [58—64]. [c.410]

Для полноты укажем, что процессы распределения веществ между двумя жидкими фазами при многократном повторении лежат в основе еще одного важного метода хроматографии— распределительной хроматографии. В распределительной колоночной хроматографии, внешне не отличающейся от адсорбционной, один из растворителей пропитывает материал (силикагель, крахмал, целлюлозу), наполняющий колонку, причем этот материал является лишь носителем одного растворителя. Исследуемая смесь наносится вверху колонки. Второй растворитель протекает через колонку и в процессе течения происходит многократное распределение разделяемой смеси вещества между двумя растворителями и, в результате — полное разделение компонентов. В качестве носителя неподвижной фазы может быть взята фильтровальная бумага. Развитая на этой основе хроматография на бумаге (Мартин, Синг) получила исключительное значение для целей анализа. Наконец, многократрюе использование (до 250—1000 раз) распределения между двумя жидкими фазами, без применения носителя, также широко распространено в виде метода противоточного распределения (Крэйг). [c.129]

Основные задачи выделение в индивидуальном состоя -нии изучаемых соединений с помощью кристаллизации, перегонки, различных видов хроматографии, электрофореза, ультрафильтра-цни, ультрацентрнфугирования, противоточного распределения и т. п. установление структуры, включая пространственное строение, на основе подходов органической и физико-органической химии с применением масс-спектрометрии, различных видов оптической спектроскопии (ИК, УФ, лазерной и др.), рентгеноструктурного анализа, ядерного магнитного резонанса, электронного парамагнитного резонанса, дисперсии оптического вращения и кругового дихроизма, методов быстрой кинетики и т. п. в сочетании с расчетами на ЭВМ химический синтез и химическая модификация изучаемых соединений, включая полный синтез, синтез аналогов и производных,— с целью подтверждения структуры, выяснения связи строения и биологической функции, получения практически ценных препаратов биологическое тестирование полученных соединений in vilro и in vivo. [c.11]

Полученные таким обраэом липиды Содержат часто также свободные аминокислоты и пептиды, сахар и другие гидрофильные природные вещества, которые попадают в экстракт при добавлении веществ, способствующих растворению, например лецитинов. Отделение этих примесей затруднительно. Для отделения липидов от нелипидов пригодна хроматография на колонках с целлюлозой по Леа и Родесу [70] и препаративная хроматография на бумаге с применением растворителей, описанных Вестлеем, Вреном и Митчеллом [139]. Рекомендуется противоточное распределение [9, 53, 105]. [c.146]

Другой специальной областью применения противоточного распределения является выделение микрокомпонентов из больших количеств исходного материала. Так, например, Паттерсон с сотр. 44 использовали 40-ячеечный аппарат, содержащий на каждой ступени по 1 л каждой фазы, для выделения нротогена из 4 г смешанной говяжьей и свиной печени. [c.533]

Ранее использовались экстракции порфиринов из нефти и других геоорганических объектов этиловым спиртом [44], ацетоном [36, 91], ацетонитрилом [79], метанолом [80], водным пиридином [78], а также метод противоточного распределения с применением следующих пар растворителей анилин — керосин, оксидипропионитрилпетролейный эфир [99], диметилформамид (ДМФА) —декалин [83]. Однако все исследования осуществлялись на разрозненных объектах, как правило, с высокой концентрацией порфиринов. Сопоставительный анализ эффективности различных растворителей в процессах экстракции отсутствовал. Объемы экстрагентов были, как правило, необоснованно высокими, во много раз превышающими объем экстрагируемой нeфтиJ что затрудняло выработку необходимого для всесторонних исследований количества порфиринового концентрата. [c.329]

Метод противоточного распределения, разработанный Крейгом [36], был применен для разделения смесей аминокислот и очистки белков [187]. Так как полярные группы, определяющие растворимость аминокислот, одинаковы для различных аминокислот, коэффициенты распределения аминокислот различаются незначительно, и, следовательно, их разделение становится трудной задачей. При ацетилировании [172] или образовании нипсиль-ных производных (/г-иодфенилсульфонилпроизводные) [94] фракционирование облегчается за счет уменьшения влияния полярных групп. Хроматографические методы значительно более эффективны по разрешающей способности, но они ограничены возможностью выделений сравнительно небольших количеств веществ. Успешное применение метода противоточного распределения зависит в значительной степени от подходящего выбора двухфазной системы растворителей. Кроме того, применение этого метода ограничивается возможностью разделения веществ низкого молекулярного веса 10 ООО), за исключением тех случаев, когда пептиды обладают большой устойчивостью к денатураций. В присутствии большинства двухфазных систем растворителей, как правило, легко происходит денатурация белков. Однако при нахождении благоприятных условий противоточное распределение-имеет преимущество по сравнению с другими методами, так как при этом возможно рассчитать коэффициенты распределения компонентов, которые могут быть установлены с большой точностью. Профиль кривой распределения дает хороший критерий чистоты вещества. [c.397]

Как уже упоминалось, вследствие большого разнообразия стероидов невозможно привести общую методику приготовления образца. Тем не менее можно сделать несколько полезных замечаний. Поскольку большая часть стероидов является веществами нейтральными, можно рекомендовать использование распределения экстракта из природного объекта между органическим растворителем (как правило, толуолом, бензолом, хлороформом, хлористым метиленом, диэтиловым эфиром и этилацетатом) и водным раствором щелочи с целью удаления органических кислот и других кислотных продуктов, в тех случаях, когда органический экстракт содержит алкалоиды или другие примеси основного характера, полезна обработка экстракта разбавленной соляной кислотой. Однако при разделении между неполярным растворителем, например толуолом или хлороформом, и водным раствором сильной щелочи некоторые высокополярные нейтральные стероиды проявляют кислотные свойства [3]. К ним относятся экстрогены, имеющие слабокислый характер вследствие присутствия в них фенольного гидроксила, или желчные кислоты. В этом случае фильтрация образца через колонку, заиол-ненную ионообменной смолой, приводит к его обогащению [4, 5]. За исключением сложных эфиров стеролов и некоторых практически неполярных стероидов, сырые органические экстракты, содержащие стероиды растительного и в особенности животного происхождения, могут быть предварительно очищены перед вводом в колонку распределением экстракта между петролейным эфиром (или м-гексаном, -гептаном, а также другими углеводородами) и 90—95%-ным метанолом. Обычные стероиды остаются в полярной фазе, в то время как парафины, жиры и вышеупомянутые исключения — в углеводородном растворителе. В случае применения техники противоточного распределения обогащение более эффективно. [c.213]

Применение для разделения ДНК распределительной хроматографии — вариант мало используемого в настоящее время метода противоточного распределения [22, 23] —носит ограниченный характер известны данные по использованию для этих целей сефадекса LH-20 [131]. На колонке, в которой в качестве неподвижной фазы используют многокомпонентную смесь органических растворителей (включающую амиловый спирт, 2-метокси-и 2-бутоксиэтанолы, триамиламин, уксусную кислоту и цитрат, литйя), а в качестве подвижной фазы —линейный градиент цитрата в воде, можно разделять нативную и денатурированную ДНК. Механизм разделения основан на взаимодействии фосфатных групп денатурированной ДНК с амином, с одновременным вытеснением иона Li+, причем более сильное взаимодействие наблюдается для денатурированной ДНК. Метод был с успехом использован для изучения структуры ДНК Е. oli вблизи точки репликации [132]. [c.82]

Разделение нативной и денатурированной ДНК осуществляется также при помощи метода противоточного распределения [8, 17] и при помощи нитроцеллюдозных мембран [18, 31]. Очистка и выделение ДНК с применением градиентного центрифугирования описаны ниже (стр. 6-5). [c.64]

Было высказано предположение, что в тех случаях, когда выход не является важным фактором, пептиды ацилглутамино-вых кислот можно получать при применении одного эквивалента этилового эфира хлоругольной кислоты и триэтиламина. Смесь а- и у-пептидов, которая образуется в результате этой реакции, можно разделить или с помощью противоточного распределения, или фракционным экстрагированием, или осаждением. [c.190]

Хлорангидриды [269, 270], ангидриды серной кислоты [38], смешанные карбонаты [269], хлорокись фосфора [37], эфиры тногликолевой кислоты [271] и дицикл огексилкарбодиимид [272, 273] применялись для конденсации а-ациламинокислот с фенолом. Однако попытки конденсировать а-ациламинокислоту с амидом салициловой кислоты с применением дициклогексилкарбодиимида успехом не увенчались [274]. Применение эфиров фенолов для образования пептидных связей имеет несколько преимуществ 1) эфиры фенолов, особенно п-нитрофениловые эфиры, представляют собой стойкие кристаллические соединения, которые можно сохранять до тех пор, пока они не потребуются 2) фениловые эфиры позволяют применять свободную аминокислоту, а не ее эфир, и таким образом отпадает необходимость в очистке продукта реакции с использованием противоточного распределения 3) группу, защищающую а-аминофунк-цию, можно отщепить от пептида, не затрагивая эфира фенола. Последнее преимущество является особенно ценным при синтезе циклических пептидов. Превращение а-ациламинокислот в эфиры фенолов с помощью карбодиимидов позволяет избежать загрязнения конечного пептида М-ацилмочевиной, которая может образоваться, если карбодиимид применять непосредственно для синтеза пептида [272]. [c.240]

В большинстве случаев, когда для синтеза пептидов применялись смешанные ангидриды на основе серной кислоты, реакция конденсации протекала между а-ациламинокислотой или ацилпептидом и натриевой солью аминокислоты, так что для очистки продукта приходилось прибегать к противоточному распределению. Было показано, что удовлетворительные результаты дают 11—22 перераспределения с применением этилацетата и 1 М фосфатного буфера [183, 369, 372, 373]. [c.280]

Однзко в 1948 г. появилась работа в которой было доказано, что обычные препараты грамицидина являются смесью нескольких веществ. Путем применения метода противоточного распределения из этих препаратов были выделены две фракции, названные грамицидином А и грамицидином В. Кроме того, изучение кривых распределения показало, что имеется по меньщей мере еще две фракции, из которых пока не удалось выделить кристаллических веществ. [c.367]

ПО анализу и температуре плавления смешанной пробы была идентифицирована как метилэтилсульфон H3SO2 H2 H3. Аналогичный результат был получен при введении диэтилдисульфида морским свинкам. Затем были проведены опыты с применением S-этильных соединений, меченных Радиоактивный сульфон сравнивался с радиоактивными концентратами мочи, полученными при помощи хроматографии на бумаге и противоточного распределения. В трех различных системах растворителей препараты давали пятна, почти одинаковые по положению. Этот результат, был подтвержден методом противоточного распределения. [c.237]

Метод противоточного распределения развивался так быстро, что уже спустя всего лищь два десятилетия с момента открытия он уже получил щирокое распространение. Однако в настоящее время он используется лищь в тех случаях, когда его не удается заменить каким-либо другим. За последние несколько лет в литературе не появилось новых работ по методике противоточного распределения, опубликовано лишь несколько статей, посвященных Практическому применению этого метода. Его лишь изредка используют в аналитических или препаративных целях, главным образом при изучении антибиотиков, пептидов и т. п. Для более детального и глубокого ознакомления с рассматриваемым методом читателю рекомендуется обратиться к подробной монографии Геккера [6]. Дополнительную информацию можно найти также в обзорах ([7, 19, 20] и в других монографиях [3, 8, 11, 21]. Наша цель состоит в том, чтобы показать, что данный метод можно с успехом применять и в том случае, когда дорогое оборудование недоступно. [c.253]

В этой главе приведен список монографий по хроматографии, электрофорезу и противоточному распределению, опубликованных с 1962 по середину 1978 г., и периодических изданий по хроматографии. Более двухсот монографий, посвященных этим вопросам, можно найти в hemi al Abstra ts с 1962 по 1972 г. Вначале приводятся только те книги, в которых рассматривается лабораторное применение методов, а затем приводятся монографии, в которых обсуждается более широкий круг вопросов. В список не включены узкоспециализированные монографии, посвященные анализу какой-либо одной группы соединений, например аминокислот, антибиотиков, белков, стероидов и т. п., сборники хроматографических данных, а также некоторые руководства, написанные в учебных целях. Среди монографий по ионному обмену указаны только книги, посвященные методам разделения. [c.356]