Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Нингидрин на амины

    Следовые количества первичных аминов алифатического ряда-от l до Сб могут улавливаться разбавленной серной кислотой. За тем амины экстрагируют амилацетатом с помощью нингидринной реакции фотометрически определяют содержание аминов [334]. [c.101]

    Аминокислоты открывают цветной реакцией с нингидрином. Две капли 0,1%-ного раствора нингидрина в нитратном буфере наносят на фильтровальную бумагу. Высушивают в шкафу при 100— 105" С. На сухое пятно наносят две капли исследуемого раствора. Бумагу вновь сушат при той же температуре 5—10 мин. В присутствии аминокислот или аминов возникает синее, фиолетовое или красное пятно либо кольцо. Реакцию дают все а-аминокислоты (кроме пролина и оксипролина). [c.126]


    Для разделения веществ с помощью бумажной хроматографии нарезают полоски бумаги длиной 15— 30 см и шириной несколько сантиметров. На расстоянии 2—3 см одного из концов полоски бумаги наносят каплю исследуемого раствора и место старта отмечают простым карандашом. После испарения растворителя конец бумаги, на который нанесена проба, приводят в соприкосновение с растворителем (ПФ). Затем бумагу и растворитель помещают в закрытый сосуд (обычно цилиндр или стеклянный колпак), чтобы предотвратить потери при испарении. После прохождения растворителя через полоски бумаги ее вынимают, сушат и определяют положение различных компонентов, С этой целью опрыскивают бумагу соответствующими реагентами, которые с компонентами разделенной смеси образуют окрашенные соединения. Для обнаружения аминов или аминокислот, например, действуют раствором нингидрина, который с этими веществами образует соединение голубого или пурпурного цвета. [c.616]

    При кислотном гидролизе витамина В з (при 100° в запаянной трубке), помимо отщепления синильной кислоты, выделены 1 мол. фосфорной кислоты, 6 мол. аммиака и вещество, обнаруженное в виде пятна на бумажной хроматограмме, дающее положительную реакцию с нингидрином. Последнее оказалось й -1-аминопропанолом-2, что доказано синтезом и структурным анализом. Строение свободного амина доказано также расщеплением его йодной кислотой до ацетальдегида и формальдегида. [c.681]

    Нингидрин специфичен к алифатическим или алициклическим первичным аминогруппам. Вторичные, третичные и четвертичные амины, амиды и аминозамещенные ароматические соединения дают слабую реакцию или не дают вовсе. Исключение-пролин дает желтое пятно (по-видимому, благодаря раскрытию цикла). Аминокетоны первоначально дают желтую окраску, которая переходит в пурпурную. [c.382]

    Для установления строения 2-амино-2-дезоксисахаров с первичной аминогруппой обычно применяют окисление нингидрином. При этом происходит укорочение углеродной цепи моносахарида на один атом углерода, сопровождающееся дезаминированием, а полученный при этом нейтральный моносахарид идентифицируют подходящим методом. Так, например, при окислении нингидрином неизвестного гексозамина, выделенного из гидролизата хряща трахеи, была получена Л-ликсоза [c.282]

    Для обнаружения аминов используют нингидрин (реактив № 108), прочную голубую соль (реактив № 61), нитропруссид натрия (реактив № 112), азотную кислоту (реактив № 132) и ванилин (реактив № 147). 3,5-Динитро-бензамиды можно сделать видимыми, используя раствор иода в хлороформе (реактив № 73) или а-нафтиламин (реактив № 98). Они появляются также в виде фиолетовых пятен после 15-минутного облучения ртутной лампой без фильтра. [c.304]


    Нингидрин + коллидин Нингидрин + циклогексил-амин или дициклогексиламин Нингидрин + фенол Изатин [c.405]

    Нингидрин для аминокислот и аминов. [c.487]

    Для определения моноэтаноламина была также использована-цветная реакция первичных аминов с нингидрином, сопровождающаяся образованием продуктов, окрашенных в синий или синефиолетовый цвет. [c.166]

    При окислении альфа-аминокислот нингидрином при pH 1 образуется аммиак, двуокись углерода, восстановленный нингидрин и другие продукты. При pH выше 3 аммиак, восстановленный нингидрин и невосстановленный нингидрин образуют окрашенное в синий цвет соединение. Оно гидролизуется при pH 11 с выделением азота в виде аммиака, который затем, после аэрации, определяют реактивом Несслера. Метод применяют для определения альфа-аминного азота, хотя он дает некоторую ошибку вследствие того, что оксипролин, пролин и триптофан взаимодействуют с нингидрином при pH 1 не количественно. Из 23 исследованных альфа-аминосоединений для 14 точность результатов количественных определений находилась в пределах 5%, а для 16 соединений — в пределах +10%. [c.115]

    Амберлит С0-50 типа 2 можно рекомендовать для разделения смесей алифатических полиаминов с ароматическими аминами, так как соединения этих типов элюируются с ионообменной смолы при одном и том же значении pH. Рекомендуемый метод описан в работе [1]. Для очистки смол рекомендован способ Хирса. Перед загрузкой в колонку смолу суспендируют в буферном растворе ацетата пиридина с pH 6,32 (0,1 и.) и перед применением несколько раз промывают для удаления примесей. Большинство разделяемых аминов определяли при помощи реакции с нингидрином. Однако некоторые амины не дают положительной реакции с нингидрином, поэтому их приходилось определять другим подходящим методом после того, как элюат разделяют на два отдельных потока, один из которых направляют в линию нингидрина, другой — в коллектор для сбора фракций (табл. 30.7). [c.282]

    Не приведены удерживаемые объемы некоторых аминов, которые не дают даже слабую цветную реакцию с нингидрином. [c.283]

    Гистидинсодержащие дипептиды определяют в безбелковом экстракте мышц после разделения их методами хроматографии на бумаге, в тонком слое силикагеля или ионообменной хроматографии на колонке (в автоматическом анализаторе аминокислот). Как и все первичные амины, дипептиды можно обнаружить по реакции с нингидрином, флуорескамином и с о-фталевым диальдегидом. Карнозин, кроме того, может быть определен по цветной реакции Паули с диазотиро-ванной сульфаниловой кислотой. [c.191]

    Реакцию с нингидрином дают не только а-, но и р- и у-аминокислоты, и т. д. пептиды, белки, амины и аммиак. Пролин дает с нингидрино.м Желтую окраску, которая при продолжительном нагревании переходит в красно-фиолетовую. Реакцию нингидрина с пролином изображают следующей гипотетической схемой  [c.468]

    Определение концевых М-аминных групп разработано достаточно детально. Самым простым, хотя и не совершенным, является метод дезаминирования пептида азотистой кислотой, хлористым нитрознлом, или же окисления бромноватистой кислотой или нингидрином. В результате аминогруппа заменяется гидроксильной или карбонильной и после гидролиза пептида и разделения аминокислот на хроматограмме одна аминокислота исчезает. [c.510]

    Промежуточный амин может гидролизоваться до свободного аммиака. Для обеспечения максимального развития окраски в растворы нингидрина, предназначенные для количественного анализа, обычно добавляют гидриндантин (восста- [c.213]

    В работе Халленгера [9] описано получение /-2-амино-4-(ме-тилтио-С )-масляной кислоты по этому методу с изотопным выходом 48%. При проявлении бумажной хроматограммы 80%-ным фенолом или смесью бутиловый спирт — уксусная кислота — вода получаются два пятна, окрашиваемых нингидрином. Они соответствуют метионину и его сульфоокиси, которая получается в результате реакции окисления в процессе хроматографирования. Как d-, так и /-формы получаются из соответствующих оптически активных исходных веществ в 1 % -ном водном растворе [а]о +7,75° и —7,6°. Полученные вещества анализировались в виде пикратов. [c.211]

    Нингидрин-реагирующее вещество оказалось Dg.-l-aминoпpoпaнoлoм-2 (XVII), что было установлено структурным анализом и синтезом (схема 129) [90]. Из кислотного гидролизата цианокобаламина D -1-аминопропа-нол-2 (XVII) [90, 91] был выделен в виде дибензоата с т. пл. 73—74° С и [а]д —72 Г. Строение свободного амина доказано реакцией его расщепления йодной кислотой до ацетальдегида и формальдегида. Установлено [88], что в цианокобаламине присутствует только одна молекула D -l-аминопропанола-2. [c.585]

    Нингидринный 1 мл Т + 1—2 капли 0,03%-ного нингидрина нагреть до кипения От желтой или пурпурной до синей 246,269м Цветные реакции для индивидуальных аминокислот см. Шмидт [272] Мартин и Синдж [273] см. также Файгль [198], стр. 281—284 Полож. аминокислоты со своб. КНг и СООН-грунпами белки, пептиды, перв. амины, аммиак [c.59]

    Для обнаружения N-мeтилaминoки лoт (которые обычно дают очень слабую окраску с нингидрином) в присутствии свободных аминокислот используют специальный реагент. Смешивают равные объемы 0,33%-ного раствора нингидрина в трет-бутиноле и смеси ледяная уксусная кислота - вода - пиридин (1 5 5). Опрыскивают и нагревают 10-15 мин при 100-110°С. Первичные амины и Н-метиламинокислоты дают пурпурные пятна сравнимой интенсивности. При опрыскивании водным раствором нингидрина, приготовленным путем растворения нингидрина в н-бутаноле, насыщенном водой и содержащем 2% уксусной кислоты, N-мeтилaминoки лoты дают пятна слабой интенсивности. [c.390]


    Было обнаружено, что нингидрин может образовывать сильно флуоресцирующие продукты с соединениями, содержащими аминогруппу [70, 71]. Чувствительность метода, основанного на измерении флуоресценции, выше в 10—100 раз. Фенилаланин в реакции с нингидрином образует фенилацетальдегид, который реагирует с избыточным нингидрином и первичным амином, образуя сильно флуоресцирующий продукт. Было установлено строение этого продукта [72] и на основе этого исследования был синтезирован новый реагент [73]. Это 4-фенилспиро [фуран-2(ЗН), Г-фталан]ДИОН-3,3, получивший название флуорескамина, зеагирует с первичными аминами непосредственно, образуя такие же флуоресцирующие соединения (возбуждение при 390 нм, излучение при 475 нм), как и при реакции нингидрина с фенилаце- [c.486]

    Способность аминокислот вступать в химические реакции зависит от ре-акционноспособности соответствующих группировок. Моноаминомонокар-боновые аминокислоты вступают в реакции, характерные для их аминных и карбоксильных групп. Другие аминокислоты, например цистеин, кроме того, вступают в реакции, характерные для сульфгидрильньк групп (—8Н), тирозин — в реакции фенольной группы и т. д. Одной из наиболее характерных реакций аминогруппы является ее взаимодействие с нингидрином  [c.20]

    Анализ. Методы анализа белковых макромолекул селективны и осуществляются в зависимости от того, какая структура является объектом исследования, и начинаются с определения аминокислотного состава. Для этого необходимо провести полный гидролиз пептидных связей и получить смесь, состоящую из отдельных аминокислот. Гидролиз проводят при помощи 6 М соляной кислоты при кипячении в течение 24 ч. Так как для гидролиза пептидных связей изолейцина и валина этого может быть недостаточно, проводят контрольный 48- и 72-часовой гидролиз. Некоторые аминокислоты, например триптофан, при кислотном гидролизе разрушаются, поэтому для их идентификации используют гидролиз при помощи метансульфоновой кислоты в присутствии триптамина. Для определения цистеина белок окисляют надмуравьиной кислотой, при этом цистеин превращается в цистеиновую кислоту, которую затем анализируют. Вьщеление и идентификацию аминокислот проводят при помощи аминокислотных анализаторов, принцип действия которых основан на хроматографическом разделении белкового гидролизата на сульфополистирольных катионитах, В основе количественного определения той или иной аминокислоты лежит цветная реакция с нингидрином, однако более перспективным следует считать метод, при котором аминокислоты модифицируют в производные, поглощающие свет в видимом диапазоне. Разделение смеси аминокислот проводят при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии, а само определение — спектрофотометрически. Следующим этапом является определение концевых аминных и карбоксильных [c.40]

    Для обнаружения пептидов целесообразно использовать методы, проверенные в области хроматографии на бумаге. Часто применяемый реактив нингидрина не всегда достаточно чувствителен, особенно для высших пептидов в особенности он непригоден в случае циклических пептидов, поскольку они содержат в боковой цепи свободные амино-группы. Гораздо более широко применимым и более чувствительным (минимально определяемое-количество 0,1 цг) является N-галогенирование по методу Райнделя и Гоппе [73] со следуюш,ими изменениями прописи [149, 8]  [c.412]

    Помимо кислотно-основного взаимодействия между деполяризатором и буферными компонентами, возможны и другие реакции, приводящие к-изменению полярограмм. Так, карбонилсодержащие соединения в растворах аммиака или первичных аминов взаимодействуютспоследними, в результате чего на полярограммах возникает более положительная волна [205— 209]. Подобно этому, борная кислота, являющаяся составной частью многих буферных растворов, дает комплексы с соединениями, имеющими расположенные у соседних атомов углерода гидроксильные группы, и на полярограммах также появляется новая, более положительная волна. Это явление наблюдалось в растворах колхицеина [210], туяплицина [211], производных трополона [212]. Иногда при таком комплексообразовании наблюдается уменьшение высоты волны (например, в случае нингидрина [213], дибензоила [214] или 2,2-дипиридоила). [c.231]

    Если исследуемое вещество амфотерно и доказано присутствие в нем аминной и карбоксильной групп, как правило, встает лишь вопрос об их взаимном расположении. Для наиболее важных природных и синтетических а-аминокислот разработаны методы бумажной хроматографии, позволяющие с большой степенью надежности идентифицировать исследуемую аминокислоту. а-Аминокислоты дают характерное окрашивание с нингидрином и красное окрашивание с водным раствором РеС1з, исчезающее при подкислении соляной кислотой. [c.499]

    Избирательными реагентами для определения первичных алифатических аминов являются нингидрин, 1,2-нафтохинон-4-сульфо-нат калия и л-нитрофенилдиазоний. [c.88]

    Аналогичные наблюдения были сделаны в отношении а-амино-кислот. При восходяш,ем линейном хроматографировании с помощью смеси фенола с водой (80 20) и окрашивании пятен раствором 400 мг нингидрина и 1,5 мл коллидина или пиридина в 100 мл 95%-ного этанола были получены величины Яр приведенные в табл. 98. [c.305]

    Опубликованы данные [107] по хроматографическому качественному анализу найлонов 66, 6 и 11. Образец гидролизовали серной кислотой с образованием твердой фракции, состоявшей из адипиновой кислоты и сульфата аминоундекановой кислоты, и жидкой фракции, состоявшей из сульфатов гексаметилендиамина и аминокапроновой кислоты. Твердую фракцию растворяли в 98%-ной муравьиной кислоте и хроматографировали на бумаге ватман № 1. Жидкую фракцию пропускали через анионообменную смолу и проявляли смесью пропилового спирта, концентрированного водного раствора аммиака и воды (6 3 1). Бумажные хроматограммы сушили на воздухе, прогревали 15 мин при 105° и обрызгивали нингидрином для проявления аминов и смесью анилина и ксилола для определения кислых продуктов. [c.336]

    Метод аэрации можно применять для выделения аммиака из мочи [176], для выделения аммиака, образую-шегося при действии уреазы на кровь, фильтрат крови или мочу [58], для выделения аммиака из растворов после обычной кьельдализации [58] и для выделения аммиака после взаимодействия нингидрина с а-аминным азотом [157]. В двух первых случаях аэрация проводится после добавления насыщенного раствора карбоната калия. В третьем и четвертом случаях перед аэрацией прибавляют насыщенный раствор гидроокиси натрия. [c.78]

    ВОДЫ, не содержащей аммиака) и добавляют 1 мл раствора нингидрина (15жг/ж/г). При помощи пипетки вносят в пробирку анализируемый раствор, содержащий 50—150 мкг альфа-аминного азота. Встряхивают и закрывают пробирку резиновой пробкой, в которую вставлена стеклянная капиллярная трубка примерно 15 см длиной. Нагревают смесь 1 час на кипящей водяной бане, охлаждают и присоединяют пробирку к аэрационной установке. Добавляют 5—10 мл дистиллированной воды, не содержащей аммиака, [c.116]

    Как уже указывалось, степень гидролиза или деструкции белков может контролироваться несколькими методами [41]. Вероятно, наиболее общей является реакция, основанная на взаимодействии а-аминокислоты с нингидрином с выделением аммиака, углекислого газа и альдегида и конечным образованием соединения, известного под названием фиолетовая Руэмана , и гидриндантина. Механизм этого превращения одинаков для аминов и иминокислот. При реакции с аминокислотами сначала ибра уется компглекс, характерный для первой ступени расщепления по Штреккеру. Последующий электронный сдвиг делает возможным протекание реакции декарбоксилирования и дегидратации с образованием цвиттернона. Гидролиз цвиттериона и реакция с избытком нингидрина приводят к образованию фиолетовой Руэмана П  [c.400]

    В последнее время наряду с детектированием по реакции с нингидрином широкое распространение получило детектирование по флуоресценции продуктов реакции с флуорескамином [93]. Реакция идет при комнатной температуре, а в остальном анализ напоминает обычную схему с использованием нингидрина [94]. Анализируемые вещества разделяются по колонке с ионообменной смолой, затем проходят через реакционную спираль (реактор), а флуоресценция регистрируется с помощью флуориметра. Показано, что эту систему можно использовать для анализа белковых гидролизатов [95, 96]. Схема модифицированного анализатора аминокислот приведена на рис. 32.11. Для работы на одной колонке необходимо три микронасоса первый — для подачи буферного раствора на колонку второй — чтобы довести величину pH элюата до значения 9 и третий предназначен для смешивания элюата с реагентом, представляющим собой раствор флуорескамина в ацетоне. Скорость реакции достаточно высока, что позволяет использовать короткую реакционную спираль. Далее смесь проходит через проточную кювету флуориметра, и интенсивность флуоресценции регистрируется самописцем. Одновременно много внимания было уделено выделению продуктов реакции аминов с флуорескамином, обладающих низкой полярностью, для анализа которых могла оказаться пригодной высокоскоростная хроматография. Более того, в этом случае можно было бы обойтись без реакционной спирали. Такой путь оказался приемлемым для анализа первичных аминов [97—99]. Что касается аминокислот, то большинство из них, вопреки ожиданиям, давали с флуорескамином два продукта реакции, соотношение которых определялось природой аминокислоты. [c.340]


Смотреть страницы где упоминается термин Нингидрин на амины: [c.72]    [c.72]    [c.72]    [c.248]    [c.295]    [c.390]    [c.203]    [c.468]    [c.480]    [c.213]    [c.554]    [c.382]    [c.281]    [c.335]    [c.401]    [c.269]   
Лабораторное руководство по хроматографическим и смежным методам Часть 2 (1982) -- [ c.133 ]




ПОИСК





Смотрите так же термины и статьи:

Нингидрин



© 2024 chem21.info Реклама на сайте