Треонин разложение

Производные аминокислот обычно циклизуются труднее, особенно в случае глицина, чем те же аминокислоты, входящие в состав пептидов. Для синтеза производных фенил-тиогидантоина (ФТГ) [86, 91] или количественного определения N-концевых остатков ФТК-производные часто циклизуют в 1 н. растворе НС1 в течение 1 час при 100°. Однако в этих условиях ФТГ-производные серина, треонина и цистина нестабильны, поэтому их не удается выделить и количественно определить. Кроме того, все ФТГ-производные в кислой среде разлагаются, причем степень разложения возрастает с увеличением кислотности и повышением температуры [114, 317]. В водной среде максимальный выход ФТГ-производных достигается при действии сильной кислоты при сравнительно низких температурах и по возможности меньшей продолжительности реакции. При низкой температуре реакционной смеси и применении концентрированных кислот (1—5 н.) удалось синтезировать ФТГ-производные серина, треонина и цистина в водной среде [159, 195]. Кроме того, эти соединения легко получаются в среде уксусная кислота — HG1 [289]. [c.240]

Сильные щелочи эффективно гидролизуют белки, но их ценность ограничивается сопутствующим быстрым разрушением некоторых аминокислот. В щелочном растворе интенсивно протекает также рацемизация оптически активных аминокислот. Аргинин быстро расщепляется при действии щелочи с образованием орнитина и аммиака. Этот процесс, вероятно, идет даже при 25°, а при 70° в 5 н. едком натре аргинин полностью разрушается с высокой скоростью [10]. Серии, треонин, цистин, цистеин и метионин также разлагаются при нагревании в щелочном растворе с образованием аммиака. Они особенно лабильны, когда входят в состав пептидов [11—13]. Максимальные количества аминокислот, освобождающиеся из белков под действием 5 н. едкого натра, значительно ниже, чем под действием 6 н. соляной кислоты, что объясняется разложением [10]. Щелочной гидролиз нельзя поэтому приме- [c.122]

Вследствие относительной стабильности некоторых пептидных связей для осуществления полного гидролиза белков или пептидов до индивидуальных аминокислот требуются жесткие условия, такие, как нагревание в течение 70 ч с 6 н. НС1 в эвакуированной запаянной ампуле. В этих условиях триптофан почти полностью разлагается, причем скорость его распада увеличивается в присутствии углеводов и других карбонилсодержащих соединений [43]. В аналогичных условиях наблюдается некоторое разложение лейцина, аспарагиновой кислоты, пролииа, но этого можно избежать при добавлении фенилгидроксиламина [59]. Для полного гидролиза более стабильных пептидов, содержапщх, например, валин и изолейцин, необходимо увеличение времени гидролиза. При этом наблюдается значительная потеря других аминокислот, в частности цистина, серина и треонина [66, 132]. В тех случаях, когдалеобходимо измерить степень разложения отдельных аминокислот, постепенно увеличивают продолжительность гидролиза. Если время гидролиза химотринсиногена (5 и. HG1, 110° С, запаянная эвакуированная ампула) увеличивают с 24 до 72 ч, то количество определяемого пролина увеличивается на [c.391]

Белки синтезируются на рибосомах из отдельных аминокислот, образуемых самими микроорганизмами. Исключение составляют некоторые ауксотрофные мутанты, для которых необходимо присутствие в среде определенных аминокислот. Биосинтез аминокислот в клетке идет ферментативно из неорганического азота и различных соединений углерода, например продуктов аэробного или анаэробного разложения углеводов. Многие аминокислоты образуются из промежуточных продуктов цикла Кребса из а-кетоглутаровой кислоты — глутаминовая кислота, орнитин, аргинин, пролин из щавелевоуксусной кислоты — Ь-ас-парагиновая кислота, гомосерин, метионин, треонин, диаминопимелиновая кислота, лизин, изолейцин из пировиноградной кислоты — аланин, валин, лейцин, серии, глицин, цистеин (рис. 17). [c.41]

В сочетании с некоторыми соединениями пролин, Ь-фенилаланин, Ь-цистеин, Ь-треонин и их производные препятствуют разложению хлорофила, способствуют увеличению размеров листьев, ускорению роста растений и т.д. [c.115]

При гидролизе белков кислотами рацемизации аминокислот не происходит, т. е. аминокислоты получаются в виде /-аминокислот. В этом состоит преимущество кислотного гидролиза перед щелочным. Большинство аминокислот устойчиво к действию кипящих минеральных кислот. Исключение составляют триптофан, который при таком гидролизе полностью разрушается, и окси-аминокислоты — серии и треонин, разрушающиеся частично. Продукты разложения триптофана превращаются в темнокоричневые вещества, называемые гуминами гумины образуются, вероятно, в результате конденсации индольного ядра триптофана с небольшими количествами образующихся во время гидролиза альдегидов [1]. Образование гуминов можно предотвратить прибавлением [c.23]

В сочетании с некоторыми соединениями пролин, -фенилаланин, -цистеин, -треонин, а также их производные являются препаратами, препятствующими разложению хлорофилла, способствующими увеличению размеров листьев, ускорению роста растения и т.д. [c.361]

В течение 2 час. кипятят с обратным холодильником 25 г (0,16 моля) формил- //-0-метилтреонина вместе с 360 мл бромистоводо-родной кислоты с постоянной температурой кипения. Раствор упаривают в вакууме (примечание 13) и к остатку прибавляют достаточное для его растворения количество воды, после чего раствор вновь упаривают в вакууме. Смолистый остаток растворяют в 450 мл абсолютного спирта и к раствору прибавляют концентрированный водный аммиак до тех пор, пока запах последнего не сохранится даже после сильного взбалтывания. Раствор о.хлаждают в течение ночи в холодильном шкафу, после чего выделившиеся кристаллы отфильтровывают и растворяют в трехкратном по объему количестве горячей воды (лколо 5 мл воды на 1 г неочищенного вещества). Затем к раствору прибавляют семикратное по объему количество абсолютного спирта и охлаждают его до комнатной температуры, причем, для того чтобы вызвать кристаллизацию, стенки колбы потирают стеклянной палочкой. После этого смесь охлаждают в течение ночи в холодильном шкафу, кристаллы отфильтровывают и дважды промьшают абсолютным спиртом порциями по 90 мл и один раз эфиром. Выход чистого /-треонина с т. пл. 234—235° (с разложением примечание 14) составляет 18—20г (85—90% теоретич., считая на формил-<У/-0-метилтреоиин). [c.419]

Другой метод, основанный на использовании безводной трифторуксусной кислоты [100], которая очень хорошо растворяет белки [173], успешно применялся для циклизации (5 мин при 0°) ФТК-производных при последовательном расщеплении в пепсине участка Н.Илей.Глу.Асп.Глу— [90]. Этот метод можно применять также для обработки ФТК-производных других белков. Вследствие быстрого образования промежуточного реакционноспособного тиазолинона (см. схему на стр. 239), по-видимому, это соединение лучше экстрагировать после кратковременного проведения реакции и завершить циклизацию в Зн. НС1, которая не разрушает ФТГ-производных серина и треонина. Представляет интерес тот факт, что очень низкие выходы, полученные Шефердом и сотр. [284] при тщательном изучении расщепления пептидов из кортикотропина, обусловлены потерями (50—70%) на стадии циклизаций в среде ледяная уксусная кислота — НС1 при 75—80° в течение 15 мин. Поскольку тиазолинон образуется быстро и имеет высокую реакционную способность, подобные условия циклизации являются, по-видимому, рлишком жесткими. На основании экспериментальных результатов этих авторов можно предположить, что критическая фаза разложения наблюдается во время расщепления и циклизации или одного из этих процессов, так как в более мягких условиях выход аминокислот при регенерации из ФТК-пептидов оказался ниже, чем выход аминокислоты из ФТГ-производного аланина в аналогичных условиях. Этим можно объяснить, почему некоторые исследователи [108, 151, 242] предпочитают пользоваться методом вычитания, согласно которому N-концевая аминокислота обнаруживается по ее исчезновению. Несмотря на низкие выходы и случайное расщепление связей, Шеферду и сотр. [284] удалось обнаружить N-концевой остаток, так как его количество обычно в 5—10 раз превышает содержание других аминокислот а реакционной смеси. Однако в случае неустойчивой, неэкстрагируемой или встречающейся в пеп [c.244]

Обработка белков 6 М НС1 при 110°С в вакууме приводит к гидролизу пептидных связей, но одновременно с этим происходит разложение триптофана, гидролиз аспарагина и глутамина соответственно до аспарагиновой и глутаминовой кислот, а также частичное разложение серина, треонина, цист(е)ина. Пептидные связи между аминокислотами с объемистыми боковыми группами, такими как Пе и Val, более устойчивы к гидролизу. Хорошо известно, что гидролизуя образцы белков в течение 1, 2 и 3 дней, необходимо экстраполировать количество таких аминокислот, как Ser и Thr к нулевому времени, а Пе и Val — к бесконечному. В случае цист(е)ина целесообразно перед гидролизом либо окислить его в цистеиновую кислоту, либо превратить в 5-карбоксиметилци-стеин или 4-пиридилэтилцистеин (см. разд. 23.3.3), так как все эти соединения стабильны. Обычно, в особенности если белок содержит углеводы, образуются продукты осмоления. После гидролиза соляную кислоту лучше удалить, так как она мешает при после дующем разделении аминокислот. [c.259]

Склонность к деацилированию у ацилзамещенных 0-, S-, дополнительных NHj, имидазольной и гуанидиновой групп намного выше, чем у сс-КНг-групп, причем ТФА-производные в этом отношении намного чувствительнее соответствующих ацетильных соединений. Эти свойства имеют решающее значение при выборе жидкой фазы и носителя для ГХ. Было показано, что в водной среде ди-ТФА-серин быстро превращается в moho (Ы)-ацильное производное [144]. При достаточно длительном воздействии N-ТФА-серин в конце концов снова превращается в нативную аминокислоту, что, как полагают, связано с N—>0 ацильной миграцией. Дй-ТФА-производные оксипролина, серина, треонина, тирозина и цистеина тоже быстро разлагаются до. N-ТФА-соединенип в метаноле, воде и даже в некоторых тщательно высушенных растворителях (бензол, хлористый этилен и н-амилтрифторацетат) [28, 84, 99]. При этом наиболее лабильны производные тирозина, а наиболее устойчивы -0-ТФА-группировка треонина и производное по индольному атому азота триптофана. Наблюдаемые в ГХ метанольных растворов метиловых эфиров ТФА-аминокислот большие времена удерживания для серина и тирозина согласуются с их разложением до свободных ОН -форм. Еще одним доказательством лабильности О- и S-ТФА-тирозина и цистеина служит их способность к ацилированию н-амилового эфира изолейцина. Треонин, серин и оксипролин в этом отношении были неактивны [28]. н-Бутиловый эфир ди-ТФА-гистидина оказалось целесообразным хроматографировать, полностью разлагая его бутано лом на газохроматографической колонке до моно-ТФА-произ-водного [43] (см. также разд. 2.7.3). [c.114]

В безводных условиях эфиры ТФА- и ацетиламинокйслот имеют хорошую термическую устойчивость (-j-200° ) [28, 144], тем не менее металлические инжекторы, по-видимому, вызывают разложение 0-ТФА-производных, в особенности производных тирозина и треонина [41, 78]. Соответствующие ацетильные [c.114]

Метиловые эфиры М-ТФА-пептидов с гидроксил содержащими аминокислотами (такими, как серин, треонин или оксипролин) лучше всего превращаются в триметилсилильные (ТМС) производные при кипячении с гексаметилдисилазаном в течение приблизительно 20 мин [17]. Без силилирования наблюдались многочисленные пики, обусловленные разложением. Метиловые эфиры Ы-ТФА-пептидов, содержащих тирозин, дают асимметричные пики [17], возможно, из-за сильных водородных связей фенольной оксигруппы. Несмотря на то, что эта проблема может быть решена метилированием диазометаном, силилирование и в этом случае является предпочтительным. Серин- и треонинсодержащие пептиды нужно силилировать в любом случае, а тирозин в соответствующих пептидах силилируется в тех же условиях. [c.148]

Свободные трет-бутиловые эфиры большинства аминокислот представляют собой устойчивые жидкости, перегоняющиеся без разложения. Они не претерпевают самоконденсации [48] даже при хранении при комнатной температуре (о самоконденсации грет-алкиловых эфиров глицина см. [2395]) это является еще одним достоинством грег-бутиловых эфиров в дополнение к их способности легко расщепляться под действием кислот. Они весьма устойчивы к гидразинолизу и аминолизу [48] и значительно труднее омыляются щелочью, чем соответствующие метиловые и этиловые эфиры. Благодаря этим ценным свойствам грег-бутиловых эфиров их введение в химию пептидов значительно расширило возможности синтеза пептидов, содержащих, в частности, остатки аминодикарбоновых кислот. В то же время не следует считать, что р-трег-бутиловые эфиры аспарагиновой кислоты всегда устойчивы к действию гидразина и щелочи [2017а]. и-трет-Бутиловые эфиры аминодикарбоновых кислот являются весьма удобными производными для синтеза соответствующих а-пептидов [1173, 1974, 1975, 2007, 2019, 2598, 2598а], и, наоборот, а-грет-бутиловые эфиры можно с успехом использовать для получения со-пептидов аминодикарбоновых кислот [2274, 2281, 2283]. трег-Бутиловые эфиры настолько устойчивы к действию щелочей, что в их присутствии можно проводить гидролиз нитрильной группы до соответствующего амида [1419]. Синтезы трет-бутиловых эфиров аргинина, N -зaмeщeннoгo аргинина, гистидина и триптофана до настоящего времени не описаны. Этерификация серина и треонина с помощью изобутилена сопровождается алкилированием гидроксильных групп с образованием 0-эфира [228] правда, это не приводит к каким-либо осложнениям, поскольку простые трет-бутиловые эфиры расщепляются с такой же легкостью, как и соответствующие сложные эфиры. Напротив, при синтезе пептидов, содержащих остатки оксиаминокислот, простые трет-бутиловые эфиры иногда целесообразно использовать в качестве 0-защитной группы [230, 457, 1962 [c.95]

Надмуравьиная кислота является сильным окислителем, и ее влияние на белок не ограничивается тем действием, которое она оказывает на остатки цистина. Триптофан под ее влиянием превращается в кинуренин и другие продукты разложения, метионин почти количественно превращается в метиоиинсульфон, тирозин также может изменяться. История использования этого реактива в работах, посвященных выяснению последовательности аминокислот, показывает, как по мере повышения размеров и сложности молекул исследуемых белков возникают новые трудности. Инсулин не содержит ни метионина, ни триптофана, но при действии надмуравьиной кислоты в присутствии хлорид-ионов образуется какое-то производное тирозина (возможно, хлорированный тирозин) [9]. Рибонуклеаза содержит еще одну аминокислоту — метионин однако, как показали работы лаборатории Рокфеллеровского института, в частичных гидролизатах рибонуклеазы легко обнаруживается метиоиинсульфон. Более того, оказалось, что удобнее иметь дело с полностью окисленным производным, чем с сульфоксидом или неизмененным метионином. Выход цистеиновой кислоты, образующейся при окислении белка, возможно не вполне количественный (см. величины, приведенные на стр. 84). Нельзя исключить участие остатков серина и треонина в реакции миграции ацила или формилирования под влиянием надмуравьиной кислоты (см. стр. 130). При наличии в белках триптофана возникает ряд затруднений этим объясняется то обстоятельство, что в последние годы исследователи постепенно отходят [c.97]

Вырезанные пятна ФТГ-аминокислот и контрольные участки бумаги экстрагируют 2 мл 95%-ного этанола в течение 1 час при 40 в пробирках с притертыми пробками. Величины экстинкции ФТГ-аминокислот определяют при 269 ммк. ФТГ-производные серина и треонина при высушивании бумаги претерпевают дегидратацию, и элюированные продукты разложения имеют дополнительную полосу поглощения при 320 ммк. Поэтому ФТГ-треонин определяют при 320 ммк. Однако в случае ФТГ-серина необходимо знать величину поглощения при 269 ммк для того, чтобы затем, вычитая ее из суммы величин поглощения (при 269 ммк) ФТГ-серина и ФТГ-аспарагиновой кислоты, определить количество ФТГ-аспа-рагиновой кислоты. Для перехода от поглощения ФТГ-серина при 320 ммк к поглощению при 269 ммк (для рассматриваемых условий) пользуются отношением Еабд/Ез., = 0,43. [c.166]

Актиноцин синтезирован окислительной конденсацией двух молекул 2-амино-3-окси-4-метилбензойной кислоты [391]. Выделение из продуктов гидролиза актиномицина дезаминоактиноци-нил-быс-ь-треонина и синтез этого соединения [394] показали, что связь хромофора с пептидной частью молекулы осуществляется с участием карбоксильных групп при атомах С-4 и С-5 актиноцина. Позднее из продуктов разложения актиномицина концентрированной соляной кислотой удалось выделить и неизменный хромофор в виде кристаллического диметилового эфира актиноцил-бис-ь-треонина (21) [368]. [c.500]

Разложение комплекса Си(И) аммиаком или НаЗ приводит к выделению треонина. Подобные маскирующие эффекты наблюдали в реакциях аминокислот с соединениями фтординитробензола [6], 0-метилмочевины [7], ацетила [8], бензоила [86]. [c.65]

Следует рассмотреть также разложение, которому подвергаются серии, треонин и щистин. Степень разложения первых двух аминокислот, если они находятся в свободном состоянии, составляет соответственно 11 и 5% [428], но в пептидах их лабильность, вероятно, несколько выше [215]. Цистин подвергается столь значительному распаду, что для его предотвращения были предложены специальные меры предосторожности [388, 429]. [c.172]

Доказано, что при гидролизе серной и соляной кислотами полностью разрушается триптофан, частично — серин, треонин, цистин. Чтобы сохранить эти аминокислоты, предложены другие гидролизуюш ие агенты. Например, при расш еплении белка иодистоводородной кислотой не подвергается разложению цистин разрушение триптофана удается предотвратить или по крайней мере сильно уменьшить нри проведении гидролиза белков жидким сернистым ангидридом или щавелевой кислотой. Сообщается также об использовании сухого хлористого водорода и трифторуксусной кислоты. [c.67]

З-Оксиаминокислоты серии и треонин при гидролизе 6 н. соляной кислотой постепенно разлагаются. Ход разложения свободных оксиаминокис-лот тщательно изучен Рисом [401, который показал, что оно линейно увеличивается со временем. Аминокислоты определяли с помощью окисления перйодатом, который превращает серии в формальдегид, а треонин — в ацетальдегид с освобождением в каждом случае 1 же аммиака. Рис нашел, что за 24 час при 110 в 6 и. соляной кислоте разлагается 10,5% первоначального количества серина и 5,3% треонина. При 100° потери составляют [c.129]

Рис [401 определил избыточный аммиак , образующийся при обработке различных белков кипящей 6 н. соляной кислотой в течение 24 час, вычитая количество амидного азота из общего количества аммиака, выделяющегося в отих условиях. Для эдестина и глобина лошади этот избыточный аммиак лишь немного больше величины, ожидаемой в результате раз-лон еиия серина и треонина, причем неучитываемый избыток составляет всего 0,04% общего белкового азота. Этот факт еще раз подтверждает устойчивость основных аминокислот к кислотному гидролизу. В случае инсулина неучитываемый избыток составил 0,5% общего азота, что, возможно, вызвано разложением тирозина, которого много в инсулине. Некоторые другие белки дают избыточный аммиак порядка 0,3%, и это позволяет предположить, что некоторые типы аминокислотных остатков, в том числе серии и треонин, могут быть более склонны к разложению, находясь в пептидно цепи, чем в свободном состоянии. Далее, некоторые виды связей могут делать остаток аминокислоты более уязвимым, чем другие так, например, остатки серина, несущие фосфоэфирные группы, могут быть особенно склонны к разложению [49]. Избыточный аммиак , освобождающийся при гидролизе горячей соляной кислотой, является в некоторой степени меро 1 деструкции аминокислот за счет взаимодействия с углеводами и продуктами их разложения. Следует принимать во внимание также аммиак, образующийся при разложении сиаловых кислот и гексозаминов (см. гл. 6 и 7). [c.129]

Нужно особенно подчеркнуть, что поправки на разложенйе серина и треонина, основанные на экспериментах со свободными аминокислотами, строго говоря, не могут применяться к белкам, поскольку аминокислотные остатки, связанные в пептиды, могут быть более [40] или менее [43] склонны 1 разложению, чем свободные аминокислоты. Тем не менее тот факт, что в гидролизатах некоторых белков общий аммиак можно точно представить суммой амидных групп и продуктов разложения изморенных количеств [c.129]

Средние величины, полученные всеми лабораториями, отклонялись в пределах +2% от истинных значений для девяти аминокислот (глицина, валина, фенилаланина, лизина, аспарагиновой кислоты, глутаминовой кислоты, серина, треонина и тирозина). Отклонения для пролина и изолейцина составили 4%, а для лейцина 6%. Результаты для аланина и аргинина дали ошибку 8%, главным образом за счет плохих значений, полученных в каждом случае двумя лабораториями. Определение гистидина вызвало затруднения у большинства исследователей, так что был получен очень широкий набор величин. Эта аминокислота дала наибольшее среднее абсолютное (14,8%) и алгебраическое (—8,2%) отклонение от истинного значения. Определение содержания метионина осложнялось введением нонра-вочных факторов, а цистина — его разложением в растворе. Различнтле группы исследователей получили результаты, сильно отличающиеся по точности четыре группы добились среднего абсолютного отклонения для всех аминокислот (кроме цистина), не превышающего 5%, тогда как в трех лабораториях эта величина оказалась больше 10%. [c.141]

Эти различия объясняются не только сортовыми, видовыми или технологическими различиями, а главным образом условием проведения гидролиза пищевого продукта. При стандартном кислотном гидролизе (6н. НС1, ПО—120°С, 22—24 ч) происходит частичное разрушение некоторых аминокислот, в том числе треонина, серина (на 5—10%) и особенно метионина (30—60%) и цистина 56—60% (см., например, работу [14]), а также практически полное разрушение триптофана [16]. Этот процесс усиливается в присутствии больших ( лее 50% на сухую массу) количеств углеводов в продукте. Несколько уменьшить это разложение можно за счет более сильного разбавления образца серной кислотой (например, вместо 100 мг белка берут 2—5 мг), но границы этого разбавления определяются чувствительностью прибора и в большинстве случаев они не могут быть очень большими. Для количественного определения метионина и цистина рекомендуется проводить предварительное окисление их надмуравьиной кислотой [14, 24]. При этом цистин превращается в цистеиновую кислоту (цветовой выход 1,75), а метионин — в метионин-сульфон (цветовой индекс — 0,8), которые весьма устойчивы при последующем кислотном гидролизе. Окисление проводится по методике, описанной в работах [12, 14], при температуре 4° С в темноте в течение 1 — 10 ч из расчета 1 мл надмуравьиной кислоты на 2—5 мг белка. Немедленное и тщательное удаление надмуравьиной кислоты после окончания гидролиза (например, в роторе или вакуум-эксикаторе над NaOH) предотвращает потери. [c.282]

Растворитель 1 вода — уксусная кислота (2 1) растворитель 2 толуол — -гексан — уксусная кислота (2 1 1). ДАБТГ-производные обозначения однобуквенным кодом для соответствующих аминокислот. Темные пятна —пятна производных, окрашенные в красный цвет обведенные точками пятна — в голубой, заштрихованные — в оранжевый, е — ДАБТК-производное диэтиламина и — побочные продукты разложения избытка реагента. Подробно о ДАБТГ-производных серина, треонина, лизина см. работу [3], [c.422]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология