Тирозин см желатине

Реакция обусловлена присутствием в белке циклической аминокислоты тирозина, которая при взаимодействии с реактивом Миллона дает ртутную соль своего нитропроизводного, окрашенную в красный цвет. Белки, не содержащие тирозина (желатина, клупеин, сальмин и др.), не дают реакции Миллона. Если реакцию Миллона производят с раствором тирозина или с растворами полипептидов, содержащих тирозин, то осадок не образуется, но жидкость равномерно окрашивается в красный цвет. Эту реакцию широко используют для количественного определения тирозина в гидро-лизатах белка и для определения некоторых производных тирозина, дающих эту реакцию. Реакция может быть изображена в следующем виде [c.14]

Она характеризует способность антигенов при их введении в организм животного вызывать образование антител. Иммуногенность очень неодинакова у разных белков. Похоже, что крупные размеры молекул благоприятствуют иммуногенности [108]. Слабая иммуногенность некоторых белков, как, например, желатины, может быть связана с отсутствием ригидности (прочности) структуры молекул. Если повысить ригидность этой структуры присоединением поли-Е-тирозина, то иммуногенность белка возрастает [101]. [c.90]

Ход работы. В четыре пробирки наливают по 5 капель в первую — раствора яичного белка, во вторую — раствора желатина, в третью — раствора миозина, в четвертую — раствора тирозина. Во все четыре пробирки добавляют по 2—3 капли реактива Миллона и осторожно нагревают. Наблюдают и записывают изменение окраски растворов в таблицу (см, с. 11). [c.13]

С растворами яичного белка и желатины проделывают реакции Миллона, ксантопротеиновую, диазореакцию и реакцию на триптофан. Сопоставив результаты, записывают вывод о наличии или отсутствии в исследованных белках тирозина, триптофана и гистидина. [c.219]

Приборы и реактивы капельницы с раствором яичного белка (см. приложение, п. 58), с 0,5%-ными растворами тирозина и желатина, реактивом Миллона (см. приложение, п. 59), маленькие пробирки. [c.237]

Как протекает реакция Миллона с тирозином Содержится ли тирозин в яичном белке и желатине [c.237]

Сравните интенсивность окраски, полученной с яичным белком и с желатиной. Реакция эта не является специфичной для тирозина. Ее дает также и обычный фенол (карболовая кислота). Что бы убедиться в этом, в отдельную микрохимическую пробирку вводят 2 капли 5,0%-ного водного раствора фенола, 1 каплю реактива Миллона, встряхивают и нагревают. При этом наблюдается кирпично-красное окрашивание раствора, сгущающееся при стоянии. [c.146]

Таким образом, стабильная конформация является одной из важнейших особенностей строения антигенной детерминанты. Стабильность конформации определяется прежде всего включением жестких циклических структур ароматических аминокислот. Так, например, введение в желатину, не имеющую стабильной конформации, жесткого кольца тирозина приводило к превращению ее в хороший иммуноген. При этом если количество тирозина составляло 2% аминокислотного состава, то антитела были направлены к желатине, если же его количество достигало 10%, то животные продуцировали антитела со [c.31]

Желатина, которую получают при нагревании коллагена, не обладает антигенными свойствами. Этот факт первоначально пытались объяснить отсутствием в этом белке тирозина. Однако желатина не приобретает антигенных свойств и после присоединения к ней тирозина [17], диазосоединений [18] или иода [19]. В настоящее время отсутствие антигенных свойств у желатины приписывают нескольким причинам 1) желатина представляет собой денатурированный в результате нагревания белок и вследствие этого не обладает определенной внутренней структурой [20] 2) при введении в организм она не отлагается в местах образования антител, но быстро выводится из организма [18, 19] 3) желатина содержит большое количество глицина. Поскольку глицин не содержит в а-положении боковых цепей, пептидные цепи, в состав которых входит глицин, могут свободно вращаться вокруг своей длинной оси, что влечет за собой нарушение их пространственной конфигурации [21]. В связи с этим пептидные цепи желатины не обладают жесткой структурой, которая является одним из необходимых условий иммунологической специфичности белков. [c.333]

Желатина представляет собой не натуральный белок, а измененный коллаген, переходящий в раствор при кипячении с водой, лучше в присутствии кислот. Желатина отличается способностью набухать в холодной воде, а также легко растворяться в горячей воде и застывать при охлаждении в студенистую массу. Она довольно хорошо раси епляется протеолитическими ферментами. Состав продуктов гидролиза желатины почти не отличается от продуктов гидролиза коллагена. Для нее характерно большое содержание гликоколла, а также пролина и оксипролина триптофан отсутствует тирозина—незначительные следы. Желатина—один из наиболее изученных белков. [c.328]

При низкой температуре (77" К) такое свечение в белковых системах встречается значительно чаще. Альбумин бычьей сыворотки, яичный альбумин, у -глобулин, желатина, кератин, цеин, фибриноген и шелковый фиброин обладают характерной голубой фосфоресценцией. Дебай и Эдвардс [58] установили, что из 18 исследованных ими аминокислот заметное послесвечение, которое авторы связывают с триплетно-синглетными переходами, наблюдается только у кислот, молекулы которых содержат ароматическое кольцо (тирозин, триптофан и фенилаланин). [c.133]

Реактив Миллона - это раствор ртути(П) в азотной кислоте, содержащей примесь азотистой кислоты. Аминокислота тирозин содержит фенильную группу, реакция которой с реактивом Миллона приводит к образованию красного комплекса рту-ти(П). Это неспецифическая реакция, характерная для всех фенолов. Белок при нагревании обычно коагулирует, т. е. дает плотный осадок. Из всех белков, используемых для такого анализа, не содержит тирозина один только желатин [c.149]

Возможности спектроскопии флуоресценции как средства исследования макромолекул в растворе впервые были продемонстрированы при изучении растворов белков [548, 549]. Три из присутствующих в белках аминокислоты флуоресцируют максимум спектра испускания для фенилаланина наблюдается при 282 мц, для тирозина — при 303 м л и для триптофана — при 348 м х, [550]. Спектры испускания простых пептидов весьма напоминают спектры свободных аминокислот, однако в белках они резко изменяются за счет безызлучательного перехода энергии возбуждения между аминокислотными остатками. Известно, что такие процессы чрезвычайно эффективны на расстояниях до 40 А [551]. Вследствие этого перехода энергии флуоресценция фенилаланина может наблюдаться лишь в отсутствие тирозина и триптофана (т. е. в желатине), а флуоресценция тирозина обнаруживается только в отсутствие триптофана (т. е. в инсулине), в то время как большинство белков имеет спектры испускания, приписываемые остаткам триптофана. Эти спектры испускания значительно изменяются для нативных белков, однако они становятся идентичными при денатурации белков в 8 Ai растворе мочевины [549] этот факт указывает на то, что характер спектра и квантовый выход флуоресценции подвержены изменениям, обусловленным как природой среды, окружающей остаток триптофана, так и конформационными превращениями полипептидного хребта, к которому присоединена флуоресцирующая боковая цепь. [c.188]

Оксиаминокислоты, в которых гидроксильные группы находятся не в р-ноложении, относительно устойчивы в условиях кислотного гидролиза. Содержание тирозина в гидролизатах карбоксипептидазы [35], желатина [37] и кератина [38] не уменьшается при продолжительном гидролизе. Однако для инсулина наблюдается уменьшение на 1,8% при нагревании в интервале между 24 и 48 час и дальнейшее уменьшение на 8,2% между 48 и 96 час [34]. Пиц и сотр. [46] обнаружили значительные потери тирозина при гидролизе коллагена. Некоторое разложение тирозина в горячем раство- [c.128]

Белки, не содержащие тирозина — желатин, протамины и др., — не дают миллоновой реакции. [c.14]

Состояние белкового обмена целостного организма зависит не только от количества принимаемого с пищей белка, но и от качественного состава его. В опытах на животных было показано, что получение одинакового количества разных пищевьгх белков сопровождается в ряде случаев развитием отрицательного азотистого баланса. Так, скармливание равного количества казеина и желатина крысам приводило к положительному азотистому балансу в первом случае и к отрицательному—во втором . Имел значение различный аминокислотный состав белков, что послужило основанием для предположения о существовании в природе якобы неполноценных белков. Оказалось, что из 20 аминокислот в желатине почти отсутствуют (или содержатся в малых количествах) валин, тирозин, метионин и цистеин кроме того, желатин характеризуется другим, отличным от казеина процентным содержанием отдельных аминокислот. Этим можно объяснить тот факт, что замена в питании крыс казеина на желатин приводит к развитию отрицательного азотистого баланса. Приведенные данные свидетельствуют о том, что различные белки обладают неодинаковой пищевой ценностью. Поэтому для удовлетворения пластических потребностей организма требуются достаточные количества разных белков пищи. По-видимому, справедливо положение, что, чем ближе аминокислотный состав принимаемого пищевого белка к аминокислотному составу белков тела, тем выше его биологическая ценность. Следует, однако, отметить, что степень усвоения пищевого белка зависит также от эффективности его распада под влиянием ферментов желудочно-кишечного тракта. Ряд белковых веществ (например, белки шерсти, волос, перьев и др.), несмотря на их близкий аминокислотный состав к белкам тела человека, почти не используются в качестве пищевого белка, поскольку они не гидролизуются протеиназами кишечника человека и большинства животных. [c.413]

Желатина. Желатина содержит, повидимому, определенное, хотя и небольшое количество тирозина. Пользуясь специфической цветной реакцией, Гернгросс [256] устанавливает, что содержание тирозина в желатине колеблется от 0,0 до 1,0 /г. Истинное содержание его зависит от метода приготовления желатины из коллагена. Если применяются сильные белящие средства, как например, гипохлориты, то весь триптофан и значительная часть тирозина, содержащиеся в природном коллагене, разрушаются. [c.139]

Ход работы. 1. В 2 пробирки наливают по 3 капли 1% раствора сульфаниловой кислоты в 2 /о соляной кислоте по 3 капли 5% раствора азотистокислого натрия и перемешивают. К полученному диазореактиву добавляют в одну пробирку 5 капель 1% раствора яичного белка, в другую — 5 капель пшеничного (или соевого) белка и в каждую — по 3—5 капель 10% раствора углекислого натрия. Жидкость в обеих пробирках окрашивается в красный цвет. Если реакцию производить с раствором желатины, то окраска получается меньшей интенсивности, так как в желатине нет тирозина и мало гистидина. [c.17]

Ход работы. I. Измельченные сухожилия настаивать несколько часов с водой для удаления растворимых в воде белков. Затем извлечь в течение суток полунасыщенным раствором гидрата окиси кальция глюкопротеид —тендомукоид. После этого осадок тщательно промыть в проточной воде до исчезновения щелочной реакции в промывных водах. Затем остаток подвергнуть нагреванию в воде в фарфоровой чашке в течение нескольких часов при постоянном кипении жидкости. Время от времени доливать воду взамен испарившейся. При извлечении горячей водой нерастворимый коллаген, подвергаясь очень неглубокому гидролизу, превращается в желатину (глутин), которая переходит в раствор. Слить раствор, несколько разбавить его водой и проделать реакции осаждения и цветные реакции на белки (этот раствор при охлаждении желатинирует). В противоположность альбуминам и глобулинам желатина не дает реакций на триптофан и тирозин и дает лишь слабую реакцию — на цистин. [c.179]

Проделывают аналогичным образом миллонову реакцию с раствором желатина. Если желатин достаточно чист, реакция не получается, так как в молекуле желатина остаток тирозина отсутствует. [c.15]

Доказательством того, что приведенные цветные реакции являются реакциями не на всю белковую молекулу в целом, а па отдельные аминокислоты, является то, что белки, не содержащие циклических аминокислот, не дают перечисленных реакций. Белок, не содержащий тирозина, не дает реакции Миллона, белок, не содержащий триптофана, не дает реакции Адамкевича. Желатина, содержащая ничтожное количество тирозина и триптофана, не дает реакций Миллона и Адамкевича. [c.32]

Аминокислоты можно получить из природных материалов или приготовить путем химического синтеза. В первом случае обычно получают Ь-изомеры аминокислот аминокислоты, полученные методами химического синтеза (за исключением глицина, р-аланина и т. п.), представляют собой рацематы. Способы выделения аминокислот многообразны, и этому вопросу посвящена весьма обширная литература. Некоторые белки служат хорошим сырьем для получения определенных аминокислот клейковина (глютен) пшеницы служит основным сырьевым материалом для производства Ь-глутаминовой кислоты глютен кукурузы — хороший источник для выделения Ь-лейцина и Ь-тирозина Ь-ар-гинин можно получить из желатины и из крови. Продажные препараты Ь-аспарагина получают из побегов спаржи (ср. [14]). [c.91]

При действии азотнортутного реактива белки сначала образуют осадок белого ртутного соединения (см. опыт 280) этот осадок окрашивается в розовый или красный цвет лишь в том случае, если исходный белок имеет в составе молекулы остатки тирозина или триптофана. Тирозин, или /г-оксифениланилин, содержит фенольный гидроксил триптофан, или Р-индолилалаиин, является гетероциклическим соединением. Некоторые белки, например чистый желатин, почти не содержат ни тирозина, ни триптофана и не дают при азотнортутной реакции характерного окрашивания в то же время многие фенолы сами дают эту реакцию в отсутствие белков. В присутствии некоторых неорганических соединений — перекиси водорода, хлоридов и других солей — четкость реакции резко снижается. [c.321]

Джойнер [99] также изучал действие различных веществ как ингибиторов. Он показал, что желатина, клей и пептон, взятые в равных концентрациях, вызывают одинаковый эффект. Было найдено, что крахмал, декстрин и сахароза также могут служить в качестве ингибиторов при условии, если их использовать в количествах, превышающих количество желатины в 100—300 раз. Оловянная кислота в коллоидном состоянии вполне эффективна, хотя и не в такой степени, как желатина. Было показано, что даже пептизированная кремневая кислота является ингибитором. Такие вещества, как животный уголь, древесный уголь, асбестовый порошок и порошкообразная пемза, оказывают полезное действие, если они присутствуют в относительно больших количествах. Мочевина, сахарин, азид натрия, олеиновокислый и пальмитиновокислый натрий, хлористый литий и другие подобные вещества не оказывают какого-либо действия. Джойнер исс.ледовал также поведение натриевой соли глутаминовой кислоты, тирозина, триптофана и мочевой кислоты, причем, хотя эти вещества и образуют комплексное соединение с ионами меди и других металлов, их действие в качестве ингибиторов реакции (3) оказалось незначительным [99]. Джойнер показал, что молекулярно-диспергированные вещества не являются ингибиторами, однако он предложил патентную заявку на процесс [102], в котором продукт гидролиза клея применяется в качестве катализатора для устранения нежелательного вспенивания, наблюдаемого при использовании соответствующих ингибиторов в больших количествах (см. также [103]). [c.34]

И. Е. Плотникова (1949) провела систематическое исследование аминокислотного состава проколлагенов, выделенных из кожи человека и кожи животных различных классов позвоночных. Полученные двухмерные бумажные хроматограммы дали возможность установить, что проколлагепы, выделенные из кожи человека и позвоночных животных, содержат следующие аминокислоты аспарагиновую кислоту, глютаминовую кислоту, серии, гликокол, лизин, аргинин, аланин, гистидин, оксипролин, пролин, валин, лейцин, фенилаланин. По составу аминокислот, проявляющихся на хроматограммах, проколлагены оказались близкими к желатине, отличаясь от нее отсутствием тирозина. [c.157]

Данные Фишера получили подтверждение в работах других исследователей. Так П. Левен среди продуктов гидролиза желатина обнаружил глицил-пролин дикетониперазин, ранее синтезированный Фишером. Особого внимания заслуживают работы возглавляемой Т. Б. Осборном коннектикутской школы биохимиков, сыгравшие значительную роль в деле окончательного доказательства аминокислотной природы белков. Т. Осборн и С. Клапп в 1901 г. обнаружили среди продуктов гидролиза глиадина пшеницы пептиды, содержавшие остатки фенилаланина и пролина, который Фишер идентифицировал с синтезированным им 1-пролил-1-фенилаланином [349]. Наконец Фишер и Абдергальден среди продуктов гидролиза фиброина шелка нашли тетрапептид, содержавший остатки двух молекул лейцина и по одному остатку аланина и тирозина [183]. [c.88]

Эта реакция с белками зависит от присутствия в тирозине моноокси-бензольных ядер и обычно ограничивается цельными белками, такими, как казеин и соя. Деструктированные белки, желатина и животные клеи обычно не образуют характерной розовой или красной окраски. Ванилин и салициловая кислота, так же как фенолы, дают положительную реакцию. [c.225]

Фенилизоцианат легко реагирует со многими белками при pH 8 и температуре 0°. Долгое время считали, что это вещество селективно взаимодействует с аминогруппами белков. Это мнение было основано главным образом на работах Вормелла с сотр. [176, 177], которые исследовали взаимодействие сывороточных глобулинов, казеина, желатины и инсулина с фенилизоцианатом и м-бромфенилизоцианатом. При определении в полученных производных количеств брома и остаточного аминного азота и сравнении этих результатов с известными данными по содержанию аминного азота в исходных белках оказалось, что число вошедших в состав продуктов реакции атомов брома соответствует уменьшению содержания аминного азота, хотя вызывает сомнения строгость проведения количественного анализа. Последующие опыты с уреазой [178], белком вируса табачной мозаики [179] и яичным альбумином [180] показали, однако, что сульфгидрильные группы и, возможно, гидроксильные группы тирозина также реагируют в аналогичных условиях с фенилизоцианатом. [c.368]

Анализируя действие ультрафиолетового света на белки, приводящее к их химическим изменениям, необходимо отметить наблюдение Либена [412, 413], показавшего, что облучение аминокислот и белков типа глобулинов, желатины и казеина ультрафиолетовым светом ртутной лампы при температуре ниже 35° приводит к выделению аммиака в некоторых других случаях полностью разрушается триптофан и снижаются количества гистидина и тирозина [414—416]. [c.438]

Онределение тирозина стандартным ионообменным методом обычно не вызывает больших затруднений, не считая возможности разложения тирозина в процессе гидролиза, особенно в присутстви углеводов (см. стр. 128). Было показано, что для белков с очень низким содержанием тирозина, таких, как коллаген и желатин, нужны специальные методы количественного определения, так как наблюдается недостаточное разделение тирозина и фенилаланина [371. Кобетт и сотр. [1121 сравнили величины, полученные нри ионообменной хроматографии, с данными двух других методов — специально модифицированного колориметрического метода, включающего реакцию с а-нитрозо-р-нафтолом, и метода прямого поглощения в ультрафиолетовой области. Последний метод был осуществлен так, как описано для триптофана, причем белок растворяли в щелочи и измеряли оптическую плотность раствора при двух длинах волн. В случае желатина, не содержащего триптофана, оптимальными длинами волн для определения тирозина служат 292 и 304 ммк. Вводится поправка на мутность раствора. [c.149]

Химические особенности. Чужеродность и значительный молекулярный вес не являются достаточным условием для проявления иммуногенности антигена. Синтетический поли-Ь-лизин с высоким молекулярным весом не является иммуногеном. В то же время сополимеры, построенные из двух и более аминокислот, приобретают способность индуцировать иммунный ответ. Иммуногенность значительно усиливается, если в структуру сополимера включены ароматические аминокислоты. Так, например, сополимер аминокислот лизина и глутаминовой кислоты приобретает иммуногенность при минимальной мол. массе 30-40 кД. Добавление в сополимер тирозина снижает минимальную молекулярную массу, достаточную для проявления иммуногенности, до 10-20 кД. При включении еще одной ароматической аминокислоты — фенилаланина — иммуногенность сополимера проявляется при мол. массе всего 4 кД. К этой же категории явлений относится увеличение иммуногенности очень слабого антигена — желатина — добавлением небольшого количества тирозина. [c.38]

В середине XIX века было установлено, что для питания человека и животного достаточно следуютих веществ белков, жиров, углеводов, минеральных солей и воды. Далее, в ряде опытов было показано, что из этих групп пищевых веществ безусловно необходимы для питания лишь белки и минеральные вещества, поскольку жиры и углеводы могут образоваться за счет белков. Детализируя проблему искусственного питания и изучая различные синтетические пищевые смеси, ученые занялись энергетической и термодинамической стороной этого вопроса. В результате ряда весьма обстоятельных исследований было установлено, что количество необходимых для организма пищевых веществ должно определяться количеством калорий тепла, которые эти вещества способны выделять при сжигании, и что взрослому человеку при обычных условиях существования необходимо около 2500—3000 калорий в день, получаемых из 70—100 г белка, 40—50 г жира и 400—500 г углеводов. На основании этих данных нередко сравнивали организм с паровой машиной, в которой потенциальная энергия пищевых веществ путем сжигания превращается в кинетическую. Эта прими тивная концепция, разумеется, сильно тормозила развитие исследовательской. мысли. Однако вскоре было доказано (2), что наряду с количеством белков решающее значение для правильного питания имеет их аминокислотный состав (качество белков). В этом отношении уже тогда животные и растительные белки были разделены на полноценные (например яичный белок), содержащие все необходимые для организма аминокислоты, и неполноценные (например желатина), не содержащие многих необходимых для питания <<незаменимых аминокислот (тирозин, триптофан, цистин). [c.6]

Присоединение других гаптенов к желатине можно проводить с помощью методических приемов, описанных в гл. 8. Как известно, желатина содержит мало остатков тирозина, но, несмотря на это, можно работать также с диазогаптенами, поскольку высокая степень замещения чаще всего нежелательна. [c.282]

Антигенность связывают с жесткой поверхностной сфуктурой детерминант, расположением аминокислот, составляющих поли-пептидные цепи, особенно их концевые части. Например, желатин многие годы не считался антигеном из-за отсутствия жестких структур на поверхности молекулы, хотя представляет собой белок с большой молекулярной массой. Молекула желатина может приобрести свойства антигена, если ввести в ее структуру тирозин или другое химическое вещество, придающее жесткость поверхностным структурам. Антигенная детерминанта полисахаридов состоит из нескольких гексозных остатков. [c.146]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология