Тонкослойная нанесение проб

В тонкослойной хроматографии большое значение для получения надежных и воспроизводимых результатов имеет овладение техникой эксперимента (приготовление сорбента, его нанесение, установление толщины слоя, подготовка пластинок, нанесение пробы вещества, подача растворителя, проявление хроматограмм и другие операции). [c.134]

Рис. 3.3. Нанесение пробы на пластинку для тонкослойной хроматографии.

Закрытые (адсорбционные) хроматографические колонки необходимо кондиционировать для стабилизации адсорбционной активности поверхности. Состояние равновесия требуется и для тонкослойной хроматографической системы. Когда течение подвижной жидкой фазы прекращается хотя бы на короткое время, возникает резкое изменение химического состояния слоя сорбента, находящегося в равновесии с окружающей газовой средой. Подвижная фаза состоит из растворителей различной летучести и полярности. Именно поэтому даже в момент нанесения пробы в ТСХ очень важно, чтобы объемная скорость потока элюента была постоянной. В ТСХ это условие необходимо выполнять более строго по сравнению с колоночной жидкостной хроматографией, где поток через кондиционированную колонку может быть приостановлен на несколько минут без существенного влияния на результаты разделения. Соответствующий экспериментальный подход описан ниже. [c.19]

Количественный анализ в ТСХ состоит из нескольких этапов подготовка и нанесение пробы на тонкослойную пластинку, разделение (хроматографирование) и проявление компонентов смеси на тонком слое сорбента, качественная и количественная оценка результатов анализа. Количественное определение вещества в пятне может быть одностадийным (по величине пятен с помощью оптических, электрохимических или ядерно-физических методов) и двухстадийным (вещества сначала отделяют от слоя сорбента извлечением растворителями или переводят в газовую фазу, а затем определяют инструментальными методами). [c.33]

Предположим, что для случая тонкослойных и бумажных хроматограмм при условии точечного нанесения пробы и эллиптической формы пятна [80] [c.125]

Оборудование для нанесения проб на хроматографические пластины (рис. 4). Нанесение пробы на тонкослойные пластины может осуществляться шприцевым дозатором 1, сильфонным дозирующим устройством 2 или автоматическим дозатором 3. Шприцевым дозатором можно одновременно нанести на пластину от одного до пяти анализируемых веществ. При необходимости нанесения на хроматографическую пластину ядовитых или радиоактивных жидкостей используют сильфонное дозирующее устройство, которое состо- [c.18]

Методы тонкослойной и бумажной хроматографии рассматриваются совместно оба метода широко используются в рядовой и исследовательской работе и очень важны для аналитика. В своей основе каждый из методов прост, но для получения хороших результатов методическим тонкостям следует уделять должное внимание. Полная автоматизация хроматографических процессов от нанесения пробы до обработки полученной хроматограммы с точки зрения изготовителей приборов не является экономически выгодной. В литературе проблемы автоматизации тонкослойной и бумажной хроматографии отражены недостаточно. Обычно рассматриваемые процессы хроматографирования можно разделить на три отдельные стадии а) нанесение пробы, б) разделение пробы 4 проявление хроматограммы и в) количественная обработка результатов. Для каждой из этих стадий описан ряд автоматических и механических средств, обсуждаемых в соответствующих разделах главы. В конце главы рассматриваются полностью автоматические системы, предназначенные в первую очередь для препаративных целей. [c.272]

Рис. 16. Конец иглы микрошприца для нанесения проб на тонкослойные пластинки

Качественная идентификация и количественное определение бромофоса методом тонкослойной хроматографии. Пластинку с нанесенными пробой и стандартом помещат в хроматографическую камеру, содержащую подвижный растворитель [1, 2]. Условия хроматографирования приведены в таблице 20. [c.67]

Нанесение проб испытуемых веществ на пластинку. Количество наносимого вещества или смеси веществ на пластинку играет существенную роль при разделении веществ с помощью тонкослойной хроматографии. Если нанести очень много вещества, то получатся чересчур большие и плохой формы пятна, которые [c.74]

Оборудование для тонкослойной хроматографии КТХ-01 отечественного производства предназначено для качественного анализа многокомпонентных смесей органических и неорганических веществ, а также для препаративного получения веществ, составляющих эти смеси. Оборудование поставляется в трех вариантах в виде полного (КТХ-01-1), среднего (КТХ-01-2) или малого (КТХ-01-3) комплектов, различающихся наличием тех или иных устройств. В комплект КТХ-01 входит оборудование для приготовления хроматографических пластин, для нанесения пробы, для проведения тонкослойной хроматографии, для детектирования пятен химическими методами и для обнаружения их в ультрафиолетовом свете. [c.326]

В устройстве, разработанном Радином [2], также используется стеклянная пипетка, вертикально закрепленная в держателе. Пипетка может находиться в двух положениях либо непосредственно над тонкослойной пластиной (или бумагой) и в контакте с ней, либо под углом 90° к этому положению - над сосудом с анализируемым раствором. Для нанесения пробы пипетка заполняется раствором, поворачивается на 90° и опускается к соответствующему положению на пластине. С помощью соединенного с пипеткой сильфона жидкость под давлением выводится из пипетки и наносится на пластину со скорос тью, пропорциональной испарению растворителя. Затем пипетка удаляется промывается и заполняется другим или тем же самым раствором. После передвижения тонкослойной пластинки вручную можно наносить следующую пробу. Описанное устройство является относительно простым механическим средством, которое значительно улучшает воспроизводимость анализов и увеличивает точность и скорость нанесения проб. Объединение этого устройства с вращающимся столиком с анализируемыми растворами и механизмом для перемещения пластинки могло бы послужить основой автоматического устройства для нанесения пятен. [c.273]

Рис. 1У.20. Тонкослойная хроматограмма (а), подтверждающая потерю вещества в колонке, и хроматограмма смеси на выходе из колонки (б). Колонка дает два вещества, которые также обнаружены и при помощи ТСХ. Проба, нанесенная непосредственно на пластинку (пятно А), дает пять веществ (I — направление движения пластинки II — растворителя)

Ошибки, связанные с неточностью отмеривания объема анализируемого раствора при нанесении проб на тонкослойную пластинку, лежат в интервале 6—20% [53, стр. 9]. Источником таких ошибок является растекание наносимого раствора по внешней поверхности кончика иглы при нанесении капель способом свободного падения. Второй источник ошибок связан с тем, что капля не всегда свободно капает с конца иглы из-за трудности преодоления силы поверхностного натяжения, и поэтому экспериментатор прикасается кап лей к поверхности сорбента. При этой операции в результате действия капиллярных сил вытекает дополнительное количество раствора, различное в зависимости от диаметра иглы, времени контакта, впитывающей способности сорбента. [c.40]

В случае разделения и Еи " в тонком слое силикагеля было использовано свойство европия восстанавливаться цинком и образовывать малорастворимый сульфат Еи " [8]. В качестве подвижной фазы применяли воду, в точку нанесения пробы добавляли раствор сульфата магния, задерживая тем самым Ей в виде малорастворимого сульфата магния на старте. Трехвалентный европий продвигается к линии фронта растворителя. Использование радиоактивного препарата 1б4-152 цЗ+ показало, что при проведении опыта на воздухе удалось восстановить и выделить на тонкослойной хроматограмме только 40% европия от исходного (10 мкг). [c.84]

Перед нанесением веществ пластинки размечают по трафарету на линии старта отмечают точки нанесения проб и проводят линию финиша. Для выравнивания фронта движения растворителя рекомендуют снятие полосы адсорбента шириной в 3—5 мм вдоль вертикальных сторон пластинки. В наборы аппаратуры для тонкослойной хроматографии включают специальные шаблоны для быстрого нанесения проб. [c.256]

При исследовании продуктов окисления кадиона ИРЕА, при помощи тонкослойной хроматографии на слое АЬОз (активность 2) обнаружены два продукта, слабо адсорбирующие пары йода и видимые в ультрафиолетовом свете. Образуется также белое пятно, прилегающее к точке нанесения пробы. Оно, очевидно, состоит из осколков, имеющих сульфогруппы. [c.130]

Б. При хроматографии, высушивании, нанесении пробы, проявлении, оценке разделения, документации и т. д. можно применять ранее разработанные хорошо известные способы тонкослойной хроматографии. Например, для разделения основных аминокислот в аминокислотном анализаторе применяют буфер, имеющий концентрацию Ыа" 0,35 М и pH 5,23 этот же буфер пригоден для разделения основных аминокислот на пластинке Фиксион 50 х 8 . При этом, кроме основных, хорошо разделяются и идентифицируются ароматические аминокислоты Тир и Фен. [c.245]

Рис. 10. Количественное нанесение пробы па тонкослойную пластинку при создании инертной атмосферьГ и защите от УФ-излу-чения.

Подготовка пластинок для ХТС (20 X 20 см) осуществляется так же, как в случае С-камер. Затем нарезают обезжиренную фильтровальную бумагу (например, ватман 1) по размеру, показанному на рис. 24, а, складывают один раз по линии d и кладут поверхностью abed на переднюю часть покровного стекла (рис. 24, б). Полоса бумаги не должна касаться боковых краев покровной пластинки, и расстояние аЬ от переднего края пластинки должно составлять только 1—3 мм (точка старта 15 мм от края). Предварительно фиксируют это положение. Затем пластинку для ХТС (с нанесенной пробой) прикладывают к покровной пластинке. Тонкослойная и покровная пластинки прижимаются друг к другу сильными зажимами. После этого удаляют зажим, служивший для фиксации бумажной полосы, и сгибают бумажную полосу по линии ef (рис. 24, б). Все устройство, согласно рис. 24, в, прочно соединяют с лотком двумя другими зажимами. Через полиэтиленовую трубочку лоток заполняют растворителем (15 5 мл). Легким покачиванием достигают равномерного смачивания полосы бумаги. Затем БН-камеру помеш ают на пробковое кольцо (рис. 24, б). [c.32]

Тонкослойная гель-проникаюп ая X. (ТСГПХ) основана на молекулярно-ситовом эффекте, к-рый может наблюдаться при двух условиях подавлении адсорбционной активности адсорбента и заполнении его пор растворителем. Заполнение пор м. б. достигнуто с помощью так наз. иреэлюции — пропускания растворителя по пластинке перед нанесением пробы либо капиллярной конденсации при предварительном насыщении пластинки парами растворителя. [c.422]

В бумажной (или тонкослойной) х ромато рафии (комплексные соединения металлов распределяются между полярной неподвижной фазой и менее полярной подвижной фазой. Чем выше растворимость данного комплексного соединения в неполярной фазе, тем выше окорость перемещения соответствующего пятна от точки нанесения пробы (старта). Подвижная фаза обладает максимальной скоростью перемещения и формирует фронт растворителя . Скорость перемещения растворенного вещества по сравнению со скоростью растворителя характеризуется коэффициентом удерживания Rf, выражающим отношение расстояния, пройденного данным пятном, к тому расстоянию, на которое переместился фронт растворителя. Значение Rf представляет собой ту долю от общего времени эксперимента, которую растворенное вещество проводит в подвижной фазе. При разделении окрашенных веществ положения пятен на хроматограмме видны и могут быть идентифицированы. В (Случае бесцветных к0(Мплекс0в хроматограмму можно либо наблюдать в ультрафиолетовом свете и тем самым идентифицировать флуоресцирующие пятна, либо нанести на них распылением раствор подходящего реагента, который дает окрашенный продукт. Значение Rf определяется отнвшением [c.235]

Тонкослойную пластинку с нанесенной пробой фосфолипидов можно ставить в камеру фирмы Дезага (рис. 19) или в четырехугольный сосуд с пришлифованной крышкой с предварительно налитым на дно камеры растворителем. Для разделения веществ на тонкослойных пластинках можно использовать также камеры из стеклянного кирпича (рис. 20), хотя разделение ве- [c.27]

Качественная идентификация и количественное определение деспироля методом тонкослойной хроматографии [1, 2]. После выполнения газо-хроматографического анализа раствор в колбе упаривают до объема 0,2—0,3 мл и остаток количественно наносят на пластинку на расстоянии 1,5 см от края. Диаметр пятна должен быть не более 1 см. С двух сторон от пробы наносят стандартные растворы препаратов группы ДДТ и деспироля в количестве 5 и 10 мкг. Пластинку после нанесения проб помещают в хроматографическую камеру, содержащую смесь гексана и ацетона (4 1). После того как фронт растворителя поднимется на 10 см, пластинку вынимают и высушивают на воздухе, затем обрабатывают проявляющим реактивом АеМОз и облучают ультрафиолетовым светом в течение 30 мин. [c.23]

Определение тонкослойной хроматографией. Полученный пос.пе выпаривания остаток растворяют в 0,5 мл ацетона и полностью наносят на пластинку микропипеткой или пипеткой Пастера. Одновременно готовят стандарты, внося в фарфоровую чашку 5—10 мкг вещества, что соответствует 0,5—1,0 мл рабочего раствора зоокумарина. Образцы наносят на пластинки в следующей последовательности стандарт (5 мкг), образец (I повторность), образец (II повторность), стандарт (10 мкг). Размер пятна не должен превышать 0,5 см. Места нанесения проб располагают на расстоянии 1,5—2,0 см друг от друга и от нижнего и боковых краев пластинки пятна не должны по гружаться в растворитель. [c.229]

ТСХ, составляет от 0,5 до 1 мм. Обычный размер пластинок 20X20 см, иногда 20X40 или даже 20X100 см. Условия успешного препаративного разделения на тонкослойных пластинках однородность слоя, правильное (т. е. очень равномерное) нанесение пробы на стартовую линию, полное насыщение атмосферы хроматографической камеры. [c.122]

Нанесение пробы является одной из наиболее критических стадий в тонкослойной или бумажной хроматографии. При проведении анализа проба обычно наносится в виде маленького пятна правильной формы, в препаративной хроматографии на стартовую линию пластинки или бумаги наносится тонкая полоска. Важно, чтобы поверхность абсорбирующей среды не имела повреждений и чтобы размеры пятна или полоски были не слишком велики. При использовании разбавленных растворов предпочтительно наносить пробу несколькими небольшими порциями, а не одной большой дозой, дающей бoJ Iьшoe пятно неправильной формы. Нанесение пробы требует довольно высокого мастерства и для получения надежных результатов должно проводиться с предельной тщатачьностью. [c.272]

В случае чувствительных к те, пюратуре и радиоактивных растворов наиболее подходящим является устройство для непрерывного нанесения проб, примененное Метцнером и Волчиком [ 5] для одновременного получения 6 бумажных хроматограмм. Аналогичную систему, в которой пробы на тонкослойную пластинку наносятся (одновременно) рядом микрошприцев, описал Самуэльс [6] (рис. 8.1). Чтобы обеспечить точную дозировку проб, иглы для подкожных инъекций, используемые в этой системе, модифицируют. На кончике иглы делают обратный скос, симметричный исходному скосу (рис. 8.1а). При этом сокращается поверхность иглы, контактирующая со слоем абсорбента, и уменьшается трение иглы о пластинку (нередко приводящее к прокалыванию хроматографического слоя и забиванию отверстия иглы абсорбентом). При наличии двойного скоса жидкость не задерживается на стенках иглы, а поверхностный слой пол, чает минимальные повреждения. Использование небольшой тефлоновой втулки на кончике иглы [7] дает гораздо худшие результаты. При подготовке этой системы к работе шприцы наполняют, закрепляют в [c.274]

Устройство для нанесения пятен, которое предложили Музил и Фос-слейн [8], создано на базе перистальтического насоса, подающего пробы из восьми оксфордских пипеток. Выход каждой пипетки непосредственно соединен с иглой для подкожных инъекций, смонтированной на регулируемом тефлоновом блоке. Последний устанавливается таким образом, чтобы можно было легко подводить и отводить тонкослойную пластинку и тем самым предотвратить повреждение пластинки иглой. Устройство помещается на термостатируемую горячую плиту, которая поддерживает температуру предварительно нагретой пластинки на заданном уровне и ускоряет испарение растворителя. Испарение можно дополнительно ускорить, направив в точки нанесения проб поток горячего воздуха. В данной системе нельзя использовать органические растворители, так как следы органических веществ, экстрагируемых из трубки насоса, могут повлиять на результаты анализа. [c.275]

Для полной автоматизации тонкослойной и бумажной хроматографии без особых усилий можно было бы использовать устройство для нанесения проб на основе насоса фирмы "Te hni on". Эта система имела бы простую конструкцию 14 могла бы получить широкое распространение в данной области. В препаративной системе, разработанной Солм-сом [24], в качестве хроматографической среды используется цилиндр из бумаги, вращающийся в горизонтальной плоскости под углом 90° к направлению движения фронта элюента. Разделяемая смесь непрерывно подается из капиллярной трубки в определенную точку на верху бумаги, а компоненты смеси движутся по спирали. Отдельные фракции собираются в приемники у основания цилиндра и направляются на анализ. Солмс использовал данную систему для разделения смесей хлоридов лития и калия, ксилозы и галактозы, метиленового голубого и фуксина. [c.283]

Нанесение проб анализируемого веш есгва на пластинку с тонким слоем сорбента. Нанесение проб является одной из самых ответственных операций тонкослойной хроматографии, особенность которой состоит в том, что исследуемый раствор наносят непосредственно на слой сорбента. Неточное нанесение заданного объема и размывание пятна в точке нанесения являются причиной ошибок анализа. [c.118]

Проточный метод тонкослойного хроматографического анализа наиболее перспективен для непрерывного разделения и детектирования веществ. В этом методе растворитель непрерывно подают к тонкому слою сорбента с пред-варптельно нанесенной пробой, по которому равномерно движется элюат. После разделения растворитель и анализируемые вещества непрерывно отводят из хроматографической системы. Одновременно с этим в проточном методе непрерывно производят детектирование. Описываемый способ анализа во многом близок КЖХ. [c.165]

Другой автоматический прибор для ТСХ был выпущен фирмой Ligtner Instrument o. В этом приборе пробы наносятся на отдельные тонкослойные хроматографические пластинки с помощью капилляра. Пробы помещаются в кассету, содержащую 100 ячеек. После нанесения пробы капилляр промывается водой. Hi ту же пластинку могут наноситься и стандартные растворы. Пластинки с пробами перемещаются в камеры для разделения, которые в количестве 10 штук размещены на поворотном столике. Там пластинки проявляются в течение заданного времени, затем извлекаются из камер и высушиваются. После этого пластинки сканируются оптическим детектором 12 [c.179]

Кевелл и др. [206] разделили методом тонкослойной хроматографии 17 гиббереллинов, используя в качестве растворителя смесь этилацетат—хлороформ—уксусная кислота, а в качестве адсорбента — силикагель. Масгрейв [207] разделял смесь гиббереллинов А1—Ад и гиббереллин А13 системой растворителей бензол—уксусная кислота—пропионовая кислота— вода (8 2 1 5) на двойной полоске из кизельгура О (5,5 см) и силикагеля О (10,5 см). Пластинку с нанесенными пробами выдерживали в течение ночи в необлицованной камере в парах нилсней фазы, а затем хроматографировали верхней фазой смеси. [c.462]

Нанесение проб на тонкослойные пластинки. На стартовую линию пластинки (15 мм от края пластинки) с помощью калиброванной микропипетки наносят 2 мкл раствора 0,05 М по отношению СаСЬ и Mg b. Два стартовых пятна наносят на расстоянии не менее 10—15 мм друг от друга. При нанесении пятен необходимо следить за тем, чтобы порции раствора были точными, пятна должны быть кругообразными. Раствор необходимо наносить аккуратно так, чтобы не повредить концом пипетки слой сорбента. На дно цилиндрического стеклянного сосуда (90 X 40) с притертой крышкой наливают элюент, состоящий из ацетона (х. ч.) и 4 н. раствора хлористоводородной кислоты (93 7). Объем элюента составляет 10 мл. В камеру помещают стеклянные пластинки с нанесенными пробами. Продолжительность разделения кальция и магния от 15 мин до 2 ч. Хроматографированные пластинки сушат, опрыскивают насыщенным раствором ализарина в этаноле и помещают в камеру, насыщенную аммиаком. На фиолетовом фоне появляются пятна соединений кальция и магния соответственно интенсивной синей и пурпурной окраски. [c.336]

Впервые описан метод хроматографии в тонком слог сорбента (тонкослойная хроматография), который рекомендуется в двух модификациях а) с закрепленным слоем сорбента и б) с незакрепленным слоем сорбента. В качестве сорбентов применяют окись алюминия для хроматографии , силикагель марки КСК и другие сорбенты. Приводится описание приготовления пластинки с тонким слоем 1С0р бента. Нанесение проб и оценку хроматограмм производят так же, как и в случае распределительной хроматографии на бумаге. [c.41]

Проведены широкие исследования силикагелевых покрытий для высокоэффективных тонкослойных пластинок, отличающихся друг от друга размером частиц и толщиной сорбирующего слоя, причем тип силикагеля, связующего, добавки индикаторов, а также способ суспензи-рования сорбента и нанесения его на подложку во всех экспериментах были одинаковы. Разделение проводили в одних и тех же камерах при постоянных предваритель ном насыщении слоя и температуре. В ходе экспериментов изменяли также длину пути разделения и объем пробы, вводимой в хроматографическую систему, проводя по 10 параллельных определений. В целом было проведено 3 240 отдельных опытов. Интенсивность отраженного света измеряли на спектрофотометре PMQ II фирмы Ор1оп , аналоговый вывод которого был связан с управляющей ЭВМ 1ВМ 1800. [c.115]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология