ДНК флуоресценция оснований

Прямая количественная флуорометрия на пластинках. Непосредственное количественное определение на пластинках пятен флуоресцирующих соединений может проводиться как методом измерения флуоресценции, так и методом гашения флуоресценции, основанным на гашении флуоресценции вещества, предварительно нанесенного на сорбционный слой. Ошибки первого метода находятся приблизительно в пределах 3—5%, второго — 5-8%. [c.43]

За последние годы достигнуты хорошие результаты в применении рентгеновской флуоресценции, основанной на регистрации вторичного рентгеновского излучения при возбуждении более жесткими рентгенов- [c.156]

В настоящей главе мы представляем общий вывод выражения для яркости флуоресценции, основанный на простых кинетических рассмотрениях. Для простоты атомная система рассматривается как множество атомов, имеющих только два энергетических уровня 1 и 2 без мультиплетного расщепления, с равными статистическими весами с энергетическим [c.202]

Теперь обсудим некоторые экспериментальные методы индуцированной лазерным излучением флуоресценции, основанные на оптическом возбуждении молекул. [c.289]

Сафранин образует порошок краснобурого цвета, который легко растворяется в кипящей воде. Спиртовый раствор показывает желтую флуоресценцию. Основание обильно растворяется в воде и не выделяется едкими щелочами. Оно может быть получено действием окиси серебра на солянокислую соль или едкого барита на сернокислую соль. [c.437]

Стадии процесса образования водородной связи при охлаждении и перехода протона под облучением от салициловой кислоты и 2-нафтола к 3,6-диаминоакридину удалось проследить в неполярных растворителях (рис. 2). В таких замороженных растворах сдвиг максимума спектра флуоресценции основания в результате протонирования меньше, чем в твердом состоянии (ср. рис. 1). [c.133]

Интенсивность флуоресценции обычных оснований нуклеиновых кислот очень мала, хотя некоторые минорные основания (например, основание V) флуоресцируют достаточно сильно, что позволяет проводить рутинные измерения. Слабость собственной флуоресценции оснований поначалу обескураживала, но во многих случаях она обернулась благом. Один из подходов к решению подобной проблемы состоит в присоединении к системе флуоресцентной метки — интенсивно флуоресцирующего хромофора, который специфически связывается с исследуемым объектом или ковалентно присоединяется к нему. [c.93]

Наряду с обменом колебательной, вращательной в поступательной эпергии при столкновениях молекул, находящихся в основном электронном состоянии, значительный интерес представляет обмен энергии электронновозбужденных молекул. Практически единственным экспериментальным методом определения вероятности или констант скорости этих процессов является оптический метод, основанный на измерениях интенсивности электронных спектров испускания (флуоресценции). [c.100]

Весьма интересным является метод молекулярного зонда, основанный на зависимости спектра флуоресценции люминофора ог химической и физической природы изучаемой среды [90]. Это позволяет, принимая во внимание большую чувствительность метода, исследовать плотность очень тонких слоев на твердых подложках. [c.76]

На практике люминесцентный анализ основан, как правило, на наблюдениях флуоресценции растворов. [c.483]

Возможен также перенос заряда ионизированной молекулой к другой молекуле с более низким потенциалом-ионизации. Таким образом, для смесей может быть характерна определенная избира-. тельность реакций. Кроме многих предложенных механизмов реакции, есть процессы, при которых возбужденные молекулы беч распада теряют свою избыточную энергию. Хорошо известна флуоресценция — превращение молекулярной энергии в видимое излучение Известен также процесс гашения — постепенное рассеивание энергии путем ее передачи ближайшим молекулам при столкновениях, происходящих в результате теплового движения или каким-либо другим путем. На этих процессах переноса энергии основан механизм защиты от излучения, благодаря которой влияние излучения на чувствительные материалы может быть уменьшено. Другой метод, усиливающий такую защиту, основан на изучении реакций радикалов, часть которых может проходить через многие стадии цепного механизма, например, реакции (2) и (4), Если имеются компоненты, склонные вступать в реакцию со свободными радикалами, то интенсивность излучения может быть уменьшена. К таким акцепторам радикалов относятся иод, ненасыщенные соединения, окиси азота, амины и кислород. [c.159]

Для выяснения тонкой структуры спектров флуоресценции их исследуют при низких температурах (например, при температуре жидкого азота 77 К), при этом подбирают растворители, в которых наиболее отчетливо проявляется структура спектров. Этот метод измерения квазилинейчатых спектров в твердой матрице при низких температурах был предложен Э. В. Шпольским. Особенно успешно он был применен к исследованию полициклических ароматических углеводородов. Получаемые квазилинейчатые спектры флуоресценции ароматических углеводородов в растворах алифатических углеводородов являются очень характерными и позволяют получать информацию о колебательной структуре основного электронного состояния ароматических углеводородов. Квазилинейчатые спектры флуоресценции обладают рядом важнейших свойств. Прежде всего квазилинейчатые спектры в каждом случае носят ярко выраженный индивидуальный характер (специфичность). В отличие от обычных размытых спектров поглощения и флуоресценции они существенно различаются даже у близких по строению молекул. Это отличие оказывается значительным и для изомерных молекул. Другая важная особенность квазилинейчатых спектров заключается в очень высокой селективности таких измерений. Благодаря малой ширине и высокой интенсивности линий квазилинейчатые спектры позволяют определять индивидуальные соединения в сложной смеси даже тогда, когда они входят в многокомпонентную смесь в ничтожно малых концентрациях. Третьей характерной особенностью квазилинейчатых спектров флуоресценции является чрезвычайно высокая чувствительность методов, основанных на их применении. Измерение квазилинейчатых спектров позволяет при прочих равных условиях увеличить чувствительность люминесцентных измерений примерно в 100 раз. [c.72]

В связи со все более широким проникновением микроэлектроники в аналитическую практику и использованием в лабораториях все более сложных и эффективно действующих аналитических приборов и систем иногда недооценивают значение точных химических методов анализа. Студент-химик должен как можно раньше понять, что во всех современных физических методах серийных анализов, например основанных на использовании явлений атомной абсорбции, УФ-эмиссии или рентгено-флуоресценции, необходимо применять градуировку, которую [c.100]

Если атом, находящийся в парообразном состоянии, излучает после поглощения резонансного излучения, то возникает атомная флуоресценция. На использовании этого явления основан метод атомно-флуоресцентной спектрофотометрии. [c.381]

В атомной спектроскопии различают методы, основанные на использовании явлений эмиссии, абсорбции и флуоресценции. Источниками возбуждения эмиссии могут быть дуга, искра, пламя (существует также хемилюминесценция, основанная на использовании энергии химической реакции горения веществ). Все большее значение приобретают методы, основанные на возбуждении эмиссии высокочастотной плазмой и прежде всего индуктивно связанной плазмой (ИСП). Сравнение показывает, что возбуждение эмиссии с использованием дуги и искры не может составить конкуренцию современным методам (табл. [c.416]

Количественный люминесцентный анализ основан на использовании соотношения, связывающего интенсивность флуоресценции /л с концентрацией флуоресцирующего вещества с [c.213]

Люминесцентный, или флуоресцентный, метод анализа основан на измерении интенсивности излучаемого веществами видимого света (флуоресценции) при облучении их ультрафиолетовыми лучами. [c.28]

Физико-химические (или инструментальные) методы анализа— это условное название большого числа количественных методов, основанных на измерении различных физических и химических свойств соединений и простых веществ (поглощение лучистой энергии, дисперсия, флуоресценция, потенциал разложения, поверхностное натяжение и т. д.) с использованием соответствующих приборов. Применение их позволяет намного полнее охарактеризовать состав и количество исследуемых материалов, сократить по сравнению с химическими методами продолжительность определений и повысить точность. [c.60]

Тушение флуоресценции тяжелыми атомами приводит к образованию молекул в триплетном состоянии. На этом основан метод определения квантового выхода триплет — триплетного поглощения Фг. В присутствии соединений с тяжелыми атомами в системе могут протекать следующие процессы [c.164]

Флуорометрический анализ основан на измерении интенсивности флуоресценции /ф света, испускаемого частицами флуоресцирующего вещества в растворе. Растворитель сам не должен флуоресцировать в тех же условиях. [c.483]

Горячие водные растворы этого основания при охлаждении остаются пересыщенными и становятся чрезвычайно вязкими, вследствие чего даже разбавленные растворы по своему внешнему виду похожи на глицерин. При добавлении затравки основание закристаллизовывается почти нацело и жидкость утрачивает свою аномальную вязкость. Бензольные растворы этого основания обладают фиолетовой флуоресценцией. Вещество является сильным основанием и на воздухе образует углекислую соль. Растворы основания в водных кислотах имеют бледно-зеленую флуоресценцию, а в кислых спиртовых растворах и в ледяной уксусной кислоте обладают более сильной зеленовато-голубой флуоресценцией. Основание образует кристаллический сульфометилат, который в растворе этилового спирта имеет исключительно яркую голубовато-зеленую флуоресценцию. [c.223]

Заключение о большой вероятности обмена колебательной энергии возбужденных молекул в основном подтверждается также данными, полученными при помощи так называемого метода стабилизированной флуоресценции, основанного на открытом Непорентом [252] явлении усиления флуоресценции ароматических соединений в результате колебательной дезактивации при столкновениях возбужденных молекул с другими молекулами. Непорент нашел, что интенсивность флуоресценции р-нафтиламина joH NHa при возбуждении различными длинами волн увеличивается в присутствии Не, Нз, ]Мз, СОз, NH3, H I3 и H- jHia- Позднее аналогичный эффект был обнаружен также в присутствии дейтерия и SFg Бударом и Дюбуа [5331. См. также [35, 253, 254, 1547]. [c.206]

Метод гашения флуоресценции, основанный на том, что анализируемые вещества препятствуют в местах их локализации возникновению флуоресценции индикатора, введенного в слой сорбепта, в ряде случаев дает неудовлетворительные результаты детектирования. Флуоресцирующий слой сорбепта создает дополнительные оптические помехи, что и обусловливает увеличение предела определения и уменьшение точности анализа. В этом методе интенсивность флуоресценции может сильно изменяться во времени, что требует дополнительной калибровки, которую в этом методе сложно провести. В большинстве случаев сигнал детектора, получаемый при гашении флуоресценции, является нелинейной функцией от количества вещества в зоне. Двухлучевое сканирование практически неприменимо в этом методе. [c.96]

Хотя поведение атома, находящегося в возбужденном состоянии, не завлсит от способа возбуждения, свечение плазмы при фотовозбуждении принято (в отличие, например, от теплового) называть флуоресценцией. Это, как будет показано ниже, вполне оправданно, так как спектры флуоресценции имеют свои характерные особенности. На использовании явления флуоресценции основан атомно-флуоресцентный спектральный анализ. [c.20]

Метод деполяризации флуоресценции основан на измерении поляризации флуоресценции антигена, меченного красителем, до взаимодействия с антителами и после комплексообразования. Поляризация флуоресценции определяется молекулярным объемом частицы и степенью ее асимметрии. Комплексообразование антигена с антителом сопровождается резким изменением поляризации флуоресценции красителя (например, дансила), который играт роль метки антигена или антитела. Предел обнаружения антигена этими методами достаточно мал (10 —10 ° М). [c.43]

Обыкновенно зеленая флуоресценция свойственна маслам, полученным из нефтей парафинового основания. Эти масла считаются лл-чшими и поэтоАу иногда (за границей) маслам из нефтей асфаль- товою или нафтенового основания ис сствекно сообщают зеленую флуоресценцию. Имеется много патентов для приготовления флуо-ре(щируюнщх (веществ, вводимых в такие масла. Никаких методов анализа до сих пор не опубликовано на эту тему. [c.229]

Объяснить эти результаты можно на основании того, что моле кула олефина при поглощении световой энергии переходит в воз бужденное, синглетное состояние. Последующий процесс може быть связан либо с высвечиванием— флуоресценцией, либо с пере ходом в менее возбужденное, триплетное состояние и далее в соот ветствующий стереоизомер (подробнее см. ниже). Для второй направления требуется небольшая энергия активации, следствиел чего и является зависимость результатов изомеризации от темпе ратуры в узкой области. Следует отметить, что именно зависи мость, приведенная на рис. 3, характерна для инициированно изомеризации. Понятно, что исследования в узкой области темпе ратур или при высоких температурах не выявят влияния темпера туры на квантовый выход стереоизомера [18, 19]. [c.60]

После сборки вакуумной установки необходимо испытать ее на герметичность. Сначала проверяют вакуум, создаваемый насосом, путем присоединения его к буферной ёмкости на 5—10 л. Затем проверяют герметичность кранов, шлифовых соединений и мест спаев. Целесообразно размещать краны или клапаны на установке таким образом, чтобы можно было отдельно испытать на герметичность различные ее части. Для проверки герметичности применяют высокочастотный течеискатель типа Тесла с электродом в виде щетки (рис. 191). Принцип работы прибора основан на возникновении искры от электрода в месте пропускания воздуха. Можно также проверить герметичность аппарата с помощью стетоскопа или смазать предполагаемые места пропусков мыльным раствором и создать в установке избыточное давление около 0,5 кгс/см . Изящный метод проверки герметичности состоит в том, что на поверхность вакуумированной установки наносят кисточкой слабощелочной раствор флоуресцина или эозина в метаноле, затем ее облучают в темноте ультрафиолетовым светом, при этом в герметичных местах будет отчетливо наблюдаться флуоресценция. Специальные методы испытаний установок, работающих в условиях высокого вакуума, описаны Лаппорте [119] и Мён-хом [126]. [c.268]

Сциптилляционный метод основан на явлениях, происходящих в некоторых кристаллах (нафталин, антрацен, подпетый натрий, активированный талий), служащих детектором. Свободные электроны, появляющиеся при облучении, вызывают в кристалле характерную флуоресценцию. При воздействии флуоресцентного облучения на катод фотоумножителя сила [c.59]

Все нефтяные смазочные масла обладагот свойством флуоресценции. В зависимости от происхождения масла показывают синюю или зеленую флуоресценцию, в проходящем свете они имеют красноватую, в отраженном свете — синюю окраску. В торговле без всяких оснований связывают цвет флуоресценции с качеством смазочного масла. Масла с синей флуоресценцией считают плохого качества, а с зеленой — хорошего. [c.632]

Определение ПАУ в объектах окружающей среды, основанное на применении эффекта Шпольского, включает в себя их концентрирование путем экстракции н-гексаном, а затем идентификацию и количественное определение. В частности, количественное определение бенз(а)пирена проводят по линейчатым спектрам флуоресценции экстрактов [18]. Предел обнаружения с использованием внутренних стандартов составляет 10 7-10 8 о/д а д случае метода добавок - до 3 10 %. Как правило, спектры люминесценции регистрируют при 77 К (жидкий азот). Снижение температуры позволяет улучшить отношение сигнал/шум, однако сложность требуемого оборудования (гелиевые криостаты) гфепятствует внедрению сверхнизких температур. Обычно экстракт замораживают быстрым по-фужением тонкостенной кварцевой пробирки в жидкий азот. Иногда наносят каплю раствора на охлаждаемую площадку криогенератора. Для возбуждения люминесценции гфименяют источники с непрерывным спектром (ксеноновые лампы), из которого с помощью монохроматора или интерференционного фильтра вьщеляют полосы в 1-3 нм. Длины волн, рекомендуемые для возбувдения каждого ПАУ, приведены в [c.250]

Норриш, как и ряд авторов до него, подчеркивает то обстоятельство, что феноменология холоднопламенного окисления одинакова для углеводородов, алифатических эфиров, альдегидов, кетонов, спиртов. Это дает основание предположить обш,ую причину возникновения холодных пламен у всех этих классов соединений. Такое заключение получает серьезное подтверждение в том, что ддя холодных пламен всех названных соединений характерен один и тот же спектр флуоресценции формальдегида. Тот же факт, что, с одной стороны, холодные пламена возникают при окислении альдегидов, а с другой стороны, альдегиды являются обш,ими промежуточными продуктами, возникаюш ими при окислении всех соединений, дающих холодные пламена,— заставляет искать причину холоднопламенного явления в реакциях, связанных с альдегидами. При этом, хотя холоднопламенное свечение обусловлено возбужденным формальдегидом, сам формальдегид при своем окислении не дает холодного пламени. Таким образом, не он и не его превращения, а реакции, связанные с высшими альдегидами, ответственны за возникновение холодных пламен. А так как эти пламена характерны для нижнетемпературного окисления, то, следовательно, высшие альдегиды, а не формальдегид являются активными промежуточными продуктами окисления в этой температурной области. [c.256]

Авторы сделали попытку снять спектр холодного пламени этилбензола. Спектрограмма оказалась не внолне отчетливой. Можно было лишь установить, что излучение происходит в области длин волн, которые отвечают флуоресценции формальдегида. Микрофотограмма показала, что качественно структура спектра холодного пламенп этилеибензола совпадает со структурой спектра флуоресценции форма.пьдегида. На этом основании авторы приходят к выводу, что холоднонламенное свечение у ароматических углеводородов, так же как и у алифатических, связано с формаль- [c.435]

В соответствии с существующей в настоящее время теоретической концепцией получение абсолютно чистых веществ т. е. совершенно не содержащих примесей) принципиально возможно, но только в очень небольшой области концентраций для достаточно большой пробы чистого вещества и за более или менее ограниченный промежуток времени. Для контроля чистоты необходимы особо чувствительные методы анализа. Применение методов ультрамикроанализа позволяет осуществить мечту аналитиков — обнаружение отдельных атомов в матрице вещества. Одним из таких методов является лазерная спектроскопия. Вещество испаряют и атомы селективно возбуждают действием лазерного излучения в узкой области частот. Возбужденный атом затем ионизируется вторичными фотонами. Число испускаемых при этом свободных электронов фиксируют пропорциональным счетчиком. С помощью эффективно действующей лазерной установки можно ионизировать все атомы определяемого вещества. Метод, основанный на использовании этого явления, называют резонансной ионизационной опектро-скопией (РИС). Например, можно определять отдельные атомы цезия. В другом варианте метода — оптически насыщенной нерезонансной эмиссионной спектроскопии (ОНРЭС) — измеряют интенсивность флуоресцентного излучения возбужденных атомов. Чтобы отличить излучение определяемых элементов от излучения других компонентов пробы, длины волн флуоресценции сдвигают воздействием других атомов или молекул. Этим методом также можно определять отдельные атомы вещества, например натрия. [c.414]

Метод основан на взаимодействии бромидного комплекса индия с родамином 6Ж. Образующееся соединение экстрагируют бензолом из 15 н. серной кислоты и определяют концентрацию индия по интенснвно-сти флуоресценции экстракта. Мешающие ионы железа (III), меди (II), олова (IV), сурь.мы (III), таллия (III), золота (III), ртути (II) удаляют при экстракции индия бутилацетатом с последующей реэкстракцнеи хлористоводородной кислотой. Возможен ускоренный вариант отделения мешающих элементов с применением двукратного осаждения аммиаком и цементации на металлическом железе. [c.388]

Эксперименты на пикосекундной временной шкале и более короткой требуют других подходов. Световая вспышка, вызывающая возбуждение или фотолиз молекул исследуемого вещества, генерируется лазером с пассивной синхронизацией мод, оснащенным системой выделения одиночного импульса из цуга. Хотя пикосекундная импульсная спектроскопия опирается на методику двух вспышек — возбуждающей и зондирую -щей,— импульс зондирующего света обычно получается за счет преобразования части света возбуждающей вспышки, а необходимая короткая временная задержка легко достигается благодаря конечной скорости света. Зондирующий световой пучок направляется по варьируемому более длинному оптическому пути. Для абсорбционных экспериментов спектр этого излучения может быть уширен (например, ССЬ преобразует малую часть излучения лазера на неодимовом стекле с длиной волны 1060 нм в излучение в широком спектральном диапазоне). Для других диагностических методик, например КАСКР, это излучение может быть преобразовано в излучение другой частоты. Существует также ряд специализированных методик для изучения испускания света в пикосекундном диапазоне. Одна из них связана с электронным вариантом стрик-камеры. Для регистрации временной зависимости интенсивности сфокусированного пучка или светового пятна в механическом варианте стрик-камеры используется быстро движущаяся фотопленка. В электронном варианте изображение вначале попадает на фотокатод специального фотоумножителя типа передающей телевизионной трубки. Под действием линейно изменяющегося напряжения, прилагаемого к пластинам внутри трубки, образующиеся фотоэлектроны отклоняются тем сильнее, чем позже они вылетели из фотокатода. Для регистрации мест попадания отклоненных электронов может использоваться фосфоресцирующий экран с относительно длинным послесвечением, изображение на котором фотографируется или преобразуется с помощью электроники для последующего анализа. Этот метод носит название электронно-оптической хроноскопии. В альтернативном методе для изучения флуоресценции с пикосекундным временным разрешением Используется затвор, основанный на эффекте Керра (вращение плоскости поляризации света в электрическом поле), индуцируемом открывающим лазерным импульсом. В еще одном методе (флуоресцентная корреляционная спектроскопия) часть света возбуждающего импульса проходит через оптическую линию задержки и смешивается с испускаемой флуоресценцией в нелинейном кристалле (см. конец разд. 7.2.3), давая на выходе [c.203]