Разделение эфиров стеринов

Разделение эфиров стеринов [c.292]

Возможность разделения стеринов на окиси алюминия зависит от числа двойных связей в молекуле, но не от положения и строения боковой цепи. Эфиры стеринов адсорбируются на окиси алюминия в том же порядке, что и сами стерины. [c.173]

Для выделения холекальциферола (Од) из жира печени тунца или палтуса применяют следующие операции [20] омыление и отделение неомыляемой фракции жира, частичное отделение витамина В от витамина А путем разделения между углеводородом и спиртом (на основании их различной растворимости), хроматографическую адсорбцию на окиси алюминия, удаление стеринов кристаллизацией из метанола и осаждение дигитонином, этерифи-кацию хлорангидридом 3,5-динитробензойной кислоты, хроматографическую очистку сырого эфира, гидролиз очищенного эфира и кристаллизацию свободного витамина. [c.109]

Одним из богатых по содержанию источников витамина А является жир печени морских животных и рыб, например палтуса [109]. В технике концентраты витамина А получаются методом молекулярной дистилляции [110]. Для выделения витамина А применяется метод омыления жиров раствором едкого кали при 60° С в отсутствие воздуха, извлечение эфиром, удаление растворителя, отделение стеринов от неомыляемого остатка из раствора метилового спирта при большом охлаждении, затем или хроматографическое разделение на окиси алюминия по методу Цвета [1111, или кристаллизация из 10%-ного этилформиата при —35 С [20], а также многократная молекулярная дистилляция. Природный витамин А получен с [c.156]

Неомыляемые вещества можно определять с применением в качестве экстрагента диэтилового эфира. Этот метод дает более высокие значения по сравнению с петролейно-эфирным. Это объясняется тем, что неомыляемые вещества, содержащиеся в талловом масле, на 30—40 /о состоят из стеринов, которые очень хорошо растворяются в диэтиловом эфире и плохо — в петролейном. Однако препятствием к использованию диэтилового эфира при определении содержания неомыляемых веществ в талловом масле является образование эмульсии, затрудняющей разделение слоев. В связи с этим чаще используют метод с петролейным эфиром. [c.188]

К рекомендуемому для разделения жирных кислот силиконовому маслу часто добавляют фосфорную кислоту для того, чтобы убрать хвосты на хроматограммах, однако эта кислота может отщеплять воду от содержащихся в смеси спиртов, в результате чего на хроматограмме появляются пики новых соединений, не входящих в исходную смесь [74]. Полиэтиленгликоль, если он не обработан заранее [110], при повышенных температурах отщепляет наряду с формальдегидом также муравьиную кислоту [111], которые могут реагировать со спиртами и эфирами [112]. На полиэфирных фазах возможна пере-этерификация метиловыми эфирами жирных кислот, что также меняет количественный состав смеси в процессе хроматографирования [113] и, согласно данным работы [114], приводит к структурному изменению стеринов. [c.213]

Разделение неомыляемых на отдельные компоненты достигается лучше всего методами хроматографии эти вещества адсорбируются селективно, например окисью алюминия (приготовленной по Брокману) [8]. Если в неомыляемых присутствует большое количество стеринов, то их удается предварительно выделить из раствора в петролейном эфире кристаллизацией, после чего фильтрат хроматографируют. [c.362]

Обращенно-фазовую распределительную хроматографию применяют для разделения как свободных стеринов [48, 53], так и их сложных эфиров [54]. Обычно смеси хроматографируют на колонках с г-бондапаком is, причем наилучшие результаты дает элюирование безводными органическими растворителями [55, 56]. На рис. 6.2 приведена хроматограмма смеси стеринов одного гомологического ряда, показывающая, что время их удерживания на обращенной фазе возрастает с уменьшением числа углеродных атомов в молекуле, а при одинаковом числе этих атомов — с увеличением степени ненасыщенности. [c.293]

Кауфман и Висманатан [11] использовали смесь петролейного эфира (35—45°С) и бензола (4 7) и силикагель С. При этом фосфатиды оставались в исходном положении, а за ними в порядке возрастания величин Rf следовали свободные кислоты, холестерин, триглицериды и эфиры холестерина. Мен-голд [12] элюировал пробы липидов смесью петролейного эфира (60—70°С) и диэтилового эфира (92 8) и получил хорошее разрешение. Николс [13], исследуя экстракты липидов из салата и капусты, провел предварительное разделение в колонке с кремневой кислотой, элюируя пробу диэтиловым эфиром. Этот растворитель элюирует нейтральные липиды, к которым относятся углеводороды, сложные эфиры стеринов, триглицериды, свободные жирные кислоты, диглицериды и стерины, тогда как полярные липиды (гликолиниды, фосфолипиды и гликозиды) стеринов остаются вверху колонки. Полярные липиды Николс элюировал смесью эфира с метанолом (1 1) и метанолом, после чего разделял нейтральные липиды на кремневой кислоте, применив смесь гексан—диэтиловый эфир—уксусная кислота (70 30 1) в качестве элюирующего растворителя. Фо- [c.52]

Винтьенс и др. [12] анализировали стерины в условиях программирования состава газовой фазы. Картниг и Микула [13] использовали для разделения свободных стеринов слон оксида магния пробу они элюировали на 15 см смесью циклогексан—диэтиловый эфир—уксусная кислота (20 79,5 0,5). [c.286]

Увеличивая длину пути элюирования до 25 см, можно разделить критические пары из кампестерина, холестерина и р-си-тостерина. Для разделения эфиров пальмитиновой, стеариновой и уксусной кислот использовали смесь петролейного эфира (40—60°С) и ацетона (98 2). Николаидес [14] нашел, что при разделении эфиров воска и стеринов адсорбентом может служить оксид магния, разделение совершалось соответственно степени плоскостности молекул. В качестве элюента Николаидес использовал 1 %-ный раствор ацетона в гексане. [c.288]

Для облегчения разделения хроматограммы было предложено стерины этерифицировать окрашенным соединением, например хлорангидридом азобензол-4-карбоновой кислоты. Получаются окрашенные зоны, содержащие эфиры стеринов. Были разделены смеси эфиров холестерина и стигмостерина, стигмостерина и эргостерина, холестерина и эргостерина, холестерина, стигмостерина и эргостерина. [c.173]

Жидкостную хроматографию на кремневой кислоте успешно применили для разделения липидов на классы и выделения отдельных липидов. Например, Лоэр и Кукар [90] с помощью ЖХ выделили 8 основных классов липидов из проб сточных вод и илов. В их число входят насыщенные и ненасыщенные углеводороды, эфиры стеринов, метиловые эфиры жирных кислот, три-, ди- и моноглицериды и сложные липиды. Для разделения липидов на классы применили также гель-хроматографию. Примеры определения примесей липидов в различных пробах приведены в табл. 12.8. Некоторые образцы липидов, выделенные с помощью жидкостной хроматографии, содержат нелетучие жирные кислоты. [c.410]

Мертал и Банч [33] использовали ТСХ в качестве препаративного метода при газо-жидкостном хроматографическом определении холестерина и 5 -кoпpo тaн-3 -oлa в бытовых сточных водах. К двухлитровой, пробе воды добавляли 5 мл концентрированной НС1 и 10 мл 20%-ного раствора хлористого натрия. Затем проводили экстрагирование гексаном в количестве 100 мл. Слой растворителя отмывали "50 мл 70%-ного этанола и упаривали досуха. Эфиры стеринов кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч с 7,5%-ным раствором КОН в 70%-ном этаноле и разбавляли равным объемом воды. Стерины экстрагировали двумя порциями гексана, который в свою очередь отмывали 5 мл 50%-ного этанола и после этого упаривали досуха в 5-миллилитровой пробирке. ТСХ-пластинки размерами 20X20 см, покрытые слоем (0,25 мм) силикагеля G, отмытого спиртом, активировали в течение 1 ч при 110°С. Стерины, полученные в результате гидролиза, растворяли в 20—50 мкл ацетона и наносили на пластинку вместе со стандартными растворами. Разделение проводили смесью хлороформа и эфира (9 1). Пластинки опрыскивали 10%-ным раствором фосфорномолибденовой кислоты в 95%-ном этаноле. После выдерживания пластинок при 100 °С в течение 5 мин стерины проявлялись в виде темных пятен на желтом фоне. Значения i / копростанола и холестерина равнялись 0,65 и 0,50 соответственно. Зоны неизвестных веществ, соответствующие расположению стандартов, извлекали и подготовляли для ГХ-анализа. Предел определения копростанола равен 20 нг/л, количественные измерения становились возможными при концентрациях выше 100 нг/л. [c.498]

Обычно для газохроматографического анализа предпочтительнее использовать не свободные стерины, а их триметилси-лиловые эфиры или другие производные, поскольку в модифицированных стеринах ярче проявляются их стереохимические различия и отвечаюш,ие им хроматографические пики более симметричны. В табл. 6.1 представлены значения отношений времени удерживания триметилсилиловых эфиров к времени удерживания триметилсилилхолестерина. Обычно производные стеринов одного гомологического ряда хорошо разделяются, причем относительное время их удерживания возрастает с увеличением молекулярной массы. Наличие двойных связей, особенно при С-7 и С-24, как правило, приводит к увеличению относительного времени удерживания, однако этот эффект, как и при разделении свободных стеринов, зависит от локализации этих связей в молекуле и от природы неподвижной фазы. В частности, насыщенные стерины и их Д -аналоги близки по своим хроматографическим свойствам, поэтому их разделение представляет собой трудную задачу, а введение двойной связи при С-22 всегда приводит к уменьшению относительного времени удерживания. [c.290]

Сначала пользовались нейтральной и активированной окисью. члюминия [2], Этот ядсорбент оказался очень активным и для элюирования стеринов к смеси растворителей эфир — гексан необходимо было добавлять метанол в количестве нескольких процентов. Для разделения продуктов смесь прищлось хроматографировать повторно на менее активной окиси алюминия (примечание 3). [c.437]

В промышленной и лабораторной практике Д. м. применяется для разделения и очистки В1>[сокомолеку-лярных и термически нестойких оргаиич. веществ. Так, напр., этот процесс находит применение для очистки эфиров фталевой, себациновой, стеариновой, олеиновой и других к-т, для выделения витаминов из рыбьего жира и различных растительных масел, для произ-ва медицинских препаратов, стеро.лов и стеринов, в произ-ве пластификатов, вакуумных масел, смазок и др. [c.581]

Когда состав подвижной и неподвижной фазы одинаков, пористый носитель иммобилизированной жидкости часто называют неподвижной фазой . Порат и Флодин [74] успешно использовали для разделения сшитые декстраны в качестве молекулярных сит, и этот материал оказался необыкновенно эффективным. Его применяют в виде геля под названием сефадекс [75] — это сшитый сополимер эпихлоргидрина [СНгСН (О) H2 I] и декстрана, полисахарида, состоящего из глюкозы с преимущественно а,1,6-глико-зидными связями. Степень набухания полимера зависит от растворителя, степени сшивки, степени и вида замещения гидроксильных групп. В обычных водных растворах сефадекс был применен для разделения глобулярных протеинов с молекулярными массами от 100 до 500 000 полисахаридов (100—200 000), а также низкомолекулярных липидов, стеринов, стероидов и триметилси-лильных эфиров сахаров [76]. [c.549]

Для разделения нейтральных липидов на колонке с кремневой кислотой в качестве основного неполярного растворителя применяют гек-сан. Фракционирование происходит следующим образом гексан элк -ирует пигменты и углеводороды, 15% бензола в гексанестериды, 5% эфира в гексане — триглицериды + свободные жирные кислоты, 15—20% эфира в гексане — свободные стерины, 30% эфира в гексане — диглицериды, от 90 до 100% эфира в гексане — моноглицериды. [c.77]

Для разделения бесцветных соединений методом хроматографии можно использовать превращение их в азокрасители. Амины можно подвергать диазотированию и сочетанию. Для открытия соединений, способных сочетаться с солями диазония, эта реакция может быть использована при хроматографировании с таким же успехом, как при колориметрировании. Этим способом можно качественно и количественно определять примесь а-нафтола к р-нафтолу, G-кнслоты к R-кислоте и изомерных и побочных продуктов ко многим другим промежуточным продуктам для красителей. Эстрон, эстрадиол и эстриол были разделены после сочетания с солью диазония. Для разделения сахаров (и стеринов) была использована хроматография эфиров п-фенилазобензойной кислоты. Метиловые эфиры аминокислот были разделены методом хроматографической адсорбции N-азобензол-п-сульфонильных производных на окиси алюминия, обработанной 10%-ным раствором уксусной кислоты в метиловом спирте. Холевая и дезоксихолевая кислоты были разделены после этерификации с помощью обром-я-метилазобензола. Этиловые эфиры аминокислот дают с азобензол- -изоцианатом окрашенные производные, разделяющиеся на окиси алюминия. [c.1505]

Карджилл [11] применял для разделения стеринов как адсорбционную, так и распределительную ТСХ на силикагеле. Для адсорбционной хроматографии он использовал смеси бензол— этилацетат (2 1 и 19 1), для распределительной хроматографии— гептан в сочетании с 2-фенокси- или 2-метоксиэтанолом (неподвижная фаза, применяемая в виде 15 %-ного раствора в ацетоне), метанол и такие неподвижные фазы, как жидкий, парафин (0,5 %-ный раствор в эфире) или ундекан (15 %-ный раствор в петролейном эфире, 40—60°С). С ундеканом в качестве неподвижной фазы применялась также смесь метанол— эфир (49 1). Бромирование для отделения холестерина от холестанола проводилось посредством добавления растворенного в хлороформе брома непосредственно к нанесенной пробе. [c.286]

Для количественного определения стеринов и нх эфиров в пятнах на тонкослойных пластинках применяли также газовую хроматографию. Брандт и Бенвиста [83] пользовались этим методом для определения содержания стеринов в листьях бобов. Пароди [84], выявляя примесь растительного масла в сливочном масле, определял газохроматографически содержание стеринов после их разделения на тонких слоях. [c.298]

Липиды представляют собой неоднородную группу различных соединений, присутствующих в биологических системах липиды растворимы в органических растворителях и нерастворимы в воде. Прежде чем подвергнуть хроматографическому анализу при помощи вспомогательных методов, их разделяют на фракции составных компонентов. Липиды являются относительно высокомолекулярными соединениями, обладающими низкими упругостями паров. Поэтому перед хроматографическим разделением их часто превращают в более летучие производные. Перед вводом в колонку структурно модифицируют следующие липиды глицериды, фосфолипиды, стери-новые эфиры, высшие жирные кислоты, 0-алкилглицерины и высшие альдегиды жирного ряда. Стерины и высшие спирты жирного ряда можно хроматографически разделять и как таковые и в виде их производных. Углеводороды хроматографически разделяют, не подвергая каким-либо вспомогательным превращениям. Амины и высшие нитрилы жирного ряда в природе не встречаются, однако члены обоих указанных гомологических рядов готовят из природных липидов. [c.447]

Высшие жирные спирты были обнаружены в неомыляемой фракции растительных и животных жиров вместе с углеводородами и стеринами. Они также являются основными компонентами растительных твердых парафинов кутина и суберина и твердых парафинов насекомых. Как правило, в состав растительных твердых парафинов наряду со свободными кислотами, углеводородами и спиртами входят эфиры высших жирных кислот и высших спиртов жирного ряда. Некоторые растительные парафины могут также содержать эфиры жирных кислот и каротинов, а также свободные и связанные стерины. Перед хроматографическим разделением необходимо выделить связанные спирты омылением и отделить их от других компонентов липидной фракции. [c.461]

Наиболее перспективным из предложенных методов разделения стероидов является метод, в котором используют метилзамещенную силиконовую смолу SE-30 фирмы General Ele tri o. . Можно достигнуть хорошего разделения многих углеводородов, стеринов, простых эфиров и сложных ацетиловых эфиров. Температуры колонки и удерживаемые объемы поддерживаются низкими, чтобы иметь возможность работать с небольшими количествами жидкости на твердом носителе. При низких отношениях жидкость— твердое вещество получают хроматограммы при температурах примерно на 250° ниже температур кипения анализируемых веществ, поскольку даже при таких температурах многие соединения обладают уже достаточно высокой упругостью паров и элюируются с колонки достаточно быстро. [c.475]

Перевод анализируемых компонентов в их производные может быть целесообразен по трем причинам. Во-первых, эти компоненты могут плохо разделяться газохроматографически в их исходной форме, тогда как их производные могут разделяться хорошо. Например, высокомолекулярные жирные кислоты являются соединениями с высокой полярностью и малой летучестью, а их метиловые эфиры, напротив, обладают малой полярностью и высокой летучестью. Поскольку газохроматографическое разделение связано с испарением разделяемых веществ в колонке, преимущество использования более летучих веществ очевидно. Метиловые эфиры жирных кислот можно получить сравнительно легко с помощью диазометана или раствора ВРз в метаноле. По этой причине жирные кислоты обычно (хотя и не всегда) хроматографируют в виде их метиловых эфиров. Другим методом, применяемым для уменьшения полярности и увеличения летучести разделяемых соединений, является силилирование. Этот метод может быть использован при работе с соединениями, содержащими активный водород — спиртами, кислотами, стеринами и аминами. Основной недостаток этого метода заключается в том, что растворитель и реактивы не должны содержать воды. Одна1 о при соответствующих мерах предосторожности силилирование обычно выполняется просто и быстро. Во-вторых, причиной перевода анализируемого вещества в его производное может быть необходимость получения соединения, к которому используемый детектор более чувствителен. Обычно с этим приходится встречаться при использовании детектора по захвату электронов. В этом случае часто применяют галогенсодержащие силилирующие реагенты [1]. Иногда синтезируют и другие [c.372]

Этот раздел посвящен собственно стеринам, т. е. соединениям, в состав молекул которых входит лишь один атом кислорода. Секостерины рассмотрены в разд. 5.3, а более полярные гормоны линьки насекомых — в разд. 5.11. Стерины и особенно их эфиры с трудом поддаются разделению, поскольку этот класс стероидов включает гомологи (от Сге до Сзо) и стереоизомеры, различающиеся конфигурацией при С-3, С-5 и С-24, а также конфигурацией А -двойной связи (двойная связь при С-22 обычно имеет г/ анс-конфигурацию). [c.287]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология