Стерины разделение методом ТСХ

Хотя при разделении методом тонкослойной хроматографии используется преимущественно адсорбционный принцип, встречается все большее количество работ по разделению в тонком слое на основе распределительной хроматографии. Этот способ пригоден, например, для разделения гомологов одного ряда. Большую область применения этот метод имеет в химии липидов, а также используется с успехом для разделения жирных кислот, стеринов и т. д. [c.108]

Применение хроматографии в химии стеринов очень многообразно и многообещающе. Разделение и очистка растительных и животных стеринов хроматографическим методом дают гораздо лучшие результаты по сравнению с получаемыми при помощи других методов. [c.99]

С помощью обращенной хроматографии (т. е. распределительной хроматографии с неподвижной гидрофобной фазой) разделяют вещества, растворимые преимущественно в гидрофобных растворителях, например стерины, высшие жирные кислоты, различные ароматические соединения т. д. Такие вещества хорошо разделяются и при использовании адсорбционной хроматографии. Но поскольку разделение при адсорбционной и при распределительной хроматографиях основано на использовании совершенно разных свойств хроматографируемых веществ, эти методы взаимно дополняют друг друга. Летучие вещества или вещества, дающие летучие производные, целесообразнее всего делить методом газо-жидкостной хроматографии. [c.481]

Хроматографическое отделение целевого радиоактивного производного от других компонентов реакционной смеси проводили как с добавлением нерадиоактивного производного (носителя), так и без него. При использовании носителя его количество следует выбирать с учетом возможностей применяемого способа выделения продукта реакции. Если метка индикаторным изотопом не используется, то все операции по удалению из обработанной пробы избытка реагента должны осуществляться количественно. Аликвотную часть конечного раствора подвергают хроматографическому разделению для получения ацетата и определяют его радиоактивность с помощью жидкостного сцинтилляционного счетчика. Для стандартизации этого метода можно провести количественное ацетилирование известной навески анализируемого субстрата тем же самым количеством ангидрида, после чего выделить и проанализировать определенную часть полученного продукта. Количество стероида или стерина М. (в миллимолях) в анализируемой пробе жидкости или экстракта выражается формулой [c.73]

Одним из богатых по содержанию источников витамина А является жир печени морских животных и рыб, например палтуса [109]. В технике концентраты витамина А получаются методом молекулярной дистилляции [110]. Для выделения витамина А применяется метод омыления жиров раствором едкого кали при 60° С в отсутствие воздуха, извлечение эфиром, удаление растворителя, отделение стеринов от неомыляемого остатка из раствора метилового спирта при большом охлаждении, затем или хроматографическое разделение на окиси алюминия по методу Цвета [1111, или кристаллизация из 10%-ного этилформиата при —35 С [20], а также многократная молекулярная дистилляция. Природный витамин А получен с [c.156]

Неомыляемые вещества можно определять с применением в качестве экстрагента диэтилового эфира. Этот метод дает более высокие значения по сравнению с петролейно-эфирным. Это объясняется тем, что неомыляемые вещества, содержащиеся в талловом масле, на 30—40 /о состоят из стеринов, которые очень хорошо растворяются в диэтиловом эфире и плохо — в петролейном. Однако препятствием к использованию диэтилового эфира при определении содержания неомыляемых веществ в талловом масле является образование эмульсии, затрудняющей разделение слоев. В связи с этим чаще используют метод с петролейным эфиром. [c.188]

Опыты по хроматографическому разделению на молекулярных ситах показали, что стерины способны образовывать ассоциаты с растворенными в реке природными органическими веществами и что это приводит к уменьшению адсорбции стеринов. Однако эти эксперименты не смогли выявить той роли, которую играют эти ассоциаты в природных водах. К сожалению, чувствительность методов анализа стеринов. недостаточна для определения немеченых стеринов при работе с молекулярными ситами. Чтобы достаточно точно выявить роль и значение взаимодействия между стерином и органическими веществами, необходимо, очевидно, использовать другой подход. [c.213]

Широкое распространение при исследовании и разделении белков, нуклеиновых кислот, аминокислот, жирных кислот, стеринов и других биохимически важных соединений получил метод электро( реза на бумаге (рис. 48). Исследуемая смесь (0,01 — 0,04 мл раствора в буфере) на- [c.97]

Разделение неомыляемых на отдельные компоненты достигается лучше всего методами хроматографии эти вещества адсорбируются селективно, например окисью алюминия (приготовленной по Брокману) [8]. Если в неомыляемых присутствует большое количество стеринов, то их удается предварительно выделить из раствора в петролейном эфире кристаллизацией, после чего фильтрат хроматографируют. [c.362]

Трудность разделения гибридных структур высокомолекулярных углеводородов и отсутствие достаточно специфических реакций предельных (парафино-циклопарафиновых) углеводородов гибридного строения являются причиной слабой изученности химической природы этой группы высокомолекулярных углеводородов нефти. До сих пор почти отсутствуют данные о соотношении пента- и гексаметиленовых колец в составе предельной высокомолекулярпой углеводородной части сырых нефтей и нефтепродуктов. В бензино-керосиновых фракциях нефтей для решения этой задачи успешно была использована открытая Зелинским [74] реакция избирательной дегидрогенизации гексаметиленов в присутствии платинового катализатора. За последнее время появились сообщения об использовании этой реакции и при изучении строения таких сложных органических соединений, как политерпены, стерины, желчные кислоты, витамины, гормоны и др. [75]. Однако в литературе не встречалось указаний об использовании метода избирательной каталитической дегидрогенизации нри изучении строения предельных высокомолекулярных углеводородов нефти. Нам представлялась весьма заманчивой и перспективной возможность использования этого метода в комбинации с хроматографией и спектроскопией (инфракрасной и ультрафиолетовой) для более глубокого познания химического строения предельной части высокомолекулярных углеводородов нефти гибридного характера. Но прежде чем воспользоваться этим методом, нада было доказать его применимость для решения указанной выше задачи и проверить экспериментально надежность и воспроизводимость получаемых при этом результатов, показать пределы точности метода. [c.213]

Как радиоактивный реагент (радиореагент) для определения первичных и вторичных гидроксильных групп уксусный ангидрид имеет много преимуществ. В пиридине реакция ангидрида (в избытке) с этими группами протекает быстро и часто количественно при комнатной температуре при повып1енных темперагурах мож-1Ю обеспечить по существу полную этерификацию. Избыток ангидрида можно удалить путем гидролиза и последующей экстракции водным раствором щелочи или с помощью хроматографического разделения. Полученное соединение можно метить как изотопом так и тритием, что особенно ценно при использова[ши метода с двумя изотопами. При этом для реагентов, меченных тритием и изотопом можно получить удельные активности более 2 Ки/мМ (кюри на миллимоль) и до ОД Ки/мМ соответсгвеино, что обеспечивает высокую чувствительность метода. Помимо этого с помощью перегонки полученное соединение можно легко отделить от нелетучих примесей. Меченый уксусный ангидрид является ценным реагентом для определения стероидов и стеринов в микро- и макроколичествах, а гакже макроколичеств многих других соединений с гидроксильны ш группами. [c.71]

Программирование температуры колонки и описанный выше метод улавливания применяли в препаративном разделении для получения р-ситостерина высокой чистоты, который можно было бы использовать в качестве внутреннего стандарта для количественного определения 17-кетостероидов, выделенных из мочи [64, 72]. Удовлетворительное разделение р-ситостерина от другого стерина растительного происхождения в стериновой фракции, выделенной из соевых бобов, получили с помощью колонки из нержавеющей стали [64] . Согласно неполным данным, полученным с помощью ГЖХ, представляется правдоподобным, что этот другой стерин является кампестерином (см. работу [122]). Увеличение чистоты р-ситостерина в результате одного цикла препаративного разделения видно из рис. 9.5. [c.304]

Ван Лир и Смит [114] описали выделение кристаллических стеринов из веществ, разделенных при помощи препаративной ГЖХ. Для полученных стеринов определяли точки плавления, а также проводили их анализ методом инфракрасной и ультрафиолетовой спектрометрии, ТСХ и аналитической ГЖХ с целью их идентификации и проверки их чистоты. Авторы сообщают, что выделенные стерины имели высокую степень чистоты. В работе [115] описано применение тех же методов для идентификации 26-гидроксихоле-стерина — компонента, присутствующего в небольших количествах в веществах, выделенных из здоровых и больных аорт человека. [c.310]

Различные Л. имеют широкое практич. применение в качестве продуктов питания, в медицине и в различных отраслях пром-сти. Более подробно вопросы о биологич. роли различных Л., о методах разделения Л. на отдельные групны и индивидуальные соединения, а также об их практич. применении изложены в специальных статьях, посвященных этим Л. (см. ст. Воски, Жиры, Инозитфосфатиды, Коламинфосфатиды, Лецитины, Серинфосфатиды, Стерины, Стероиды, Сульфолипиды, Сфингофосфатиды, Фосфолипиды, Цереброзиды, Витамины). [c.487]

Оксид магния чаще всего применяется для разделения соединений типа каротиноидов и порфиринов. Хроматографические свойства оксида алюминия наиболее подробно исследовал Снайдер [68] . Этот автор нашел, что активность дезактивированного водой оксида магния можно быстро повысить, элюируя его сухими органическими растворителями. Однако после такой обработки возможна необратимая адсорбция некоторых органических, главным образом ароматических, соединений. Этого нежелательного явления можно избежать, используя растворители, содержащие воду. По своим свойствам оксид магния в известной степени похож на оксид алюминия. Основное различие заключается в его большем сродстве к двойным углерод-углерод-ным связям, а следовательно, и к ароматическим соединениям. Для хроматографическо1 о анализа можно использовать собственно оксид магния и различные его комбинации с другими адсорбентами. В колоночной хроматографии обычно применяют оксид магния в сочетании с диатомовой землей, чтобы облегчить элюирование. Николаидес [51] определил условия тонкослойного и колоночного хроматографирования таких смесей восков и стеринов, которые трудно разделить другими методами. Он показал, что разделение веществ на оксиде магния происходит в соответствии с плоскостными размерами их молекул. [c.170]

Для разделения бесцветных соединений методом хроматографии можно использовать превращение их в азокрасители. Амины можно подвергать диазотированию и сочетанию. Для открытия соединений, способных сочетаться с солями диазония, эта реакция может быть использована при хроматографировании с таким же успехом, как при колориметрировании. Этим способом можно качественно и количественно определять примесь а-нафтола к р-нафтолу, G-кнслоты к R-кислоте и изомерных и побочных продуктов ко многим другим промежуточным продуктам для красителей. Эстрон, эстрадиол и эстриол были разделены после сочетания с солью диазония. Для разделения сахаров (и стеринов) была использована хроматография эфиров п-фенилазобензойной кислоты. Метиловые эфиры аминокислот были разделены методом хроматографической адсорбции N-азобензол-п-сульфонильных производных на окиси алюминия, обработанной 10%-ным раствором уксусной кислоты в метиловом спирте. Холевая и дезоксихолевая кислоты были разделены после этерификации с помощью обром-я-метилазобензола. Этиловые эфиры аминокислот дают с азобензол- -изоцианатом окрашенные производные, разделяющиеся на окиси алюминия. [c.1505]

Разделенные вещества обнаруживали опрыскиванием фосфомолибденовой кислотой. В этой системе нельзя отделить холестерин от фитостеринов, и- для этой цели используют хроматографирование с обращенными фазами на кизельгуре, пропитанном 10 % ундекана. Удовлетворительные результаты дает смесь уксусная кислота—вода (9 1), насыщенная ундеканом. Ацетаты стеринов разделяли с применением тех же элюирующих растворителей, но взятых в соотношении 92 8. Поскольку в системе с обращенными фазами нельзя разделить критическую пару холестерин—брассикастерин, в этом случае применялся метод бромирования, предложенный Кауфманом и др. [5—7]. Если к растворителю добавляли 0,5% брома, ацетат брассикастерина бромировался в процессе элюирования и для него относительная, величина Rst составляла 1,19 (по отношению к ацетату холестерина). [c.286]

Для количественного определения стеринов и нх эфиров в пятнах на тонкослойных пластинках применяли также газовую хроматографию. Брандт и Бенвиста [83] пользовались этим методом для определения содержания стеринов в листьях бобов. Пароди [84], выявляя примесь растительного масла в сливочном масле, определял газохроматографически содержание стеринов после их разделения на тонких слоях. [c.298]

Методы адсорбции находят широкое применение для очистки половых гормонов, родственных стеринам и физиологически очень активных . Например, методом адсорбции из мочи жеребых кобыл были выделены гормоны фолликулин (эстрон), эквиленин и др. . Эквиленин адсорбируется сильнее, так как содержит пять двойных связей, а фоликулин—слабее, так как содержит только три двойные связи. Разделению хроматограмдш способствует сопутствующий гормонам пигмент индирубин. [c.174]

Липиды представляют собой неоднородную группу различных соединений, присутствующих в биологических системах липиды растворимы в органических растворителях и нерастворимы в воде. Прежде чем подвергнуть хроматографическому анализу при помощи вспомогательных методов, их разделяют на фракции составных компонентов. Липиды являются относительно высокомолекулярными соединениями, обладающими низкими упругостями паров. Поэтому перед хроматографическим разделением их часто превращают в более летучие производные. Перед вводом в колонку структурно модифицируют следующие липиды глицериды, фосфолипиды, стери-новые эфиры, высшие жирные кислоты, 0-алкилглицерины и высшие альдегиды жирного ряда. Стерины и высшие спирты жирного ряда можно хроматографически разделять и как таковые и в виде их производных. Углеводороды хроматографически разделяют, не подвергая каким-либо вспомогательным превращениям. Амины и высшие нитрилы жирного ряда в природе не встречаются, однако члены обоих указанных гомологических рядов готовят из природных липидов. [c.447]

Экстракт, содержащий фракцию общих липидов, омыляют, разрывая эфирные связи. Выделившиеся таким образом свободные жирные кислоты затем отделяют от неомыляемых липидов, например углеводородов, высших жирных спиртов и стеринов. Липиды неомыляемой части можно фракционировать далее методом жидкостно-адсорбционной хроматографиии или путем образования клатратов мочевины с последующим хроматографическим разделением. [c.450]

Стероиды обнаружены в неомыляемой фракции тканевых липидов. Их отделяют от других неомыляемых липидов, например углеводородов и высших спиртов, жидкостно-адсорбционной хроматографией на окиси алюминия. Стероиды, элюируемые с колонки, заполненной окисью алюминия, подвергают газохроматографическому разделению только после дальнейшей очистки путем осаждения в виде дигитонидов стеринов [9]. Их можно также выделить из общей фракции липидов методом жидкостной адсорбционной хроматографии на силикагеле (см. раздел А,П,а,1). [c.474]

Наиболее перспективным из предложенных методов разделения стероидов является метод, в котором используют метилзамещенную силиконовую смолу SE-30 фирмы General Ele tri o. . Можно достигнуть хорошего разделения многих углеводородов, стеринов, простых эфиров и сложных ацетиловых эфиров. Температуры колонки и удерживаемые объемы поддерживаются низкими, чтобы иметь возможность работать с небольшими количествами жидкости на твердом носителе. При низких отношениях жидкость— твердое вещество получают хроматограммы при температурах примерно на 250° ниже температур кипения анализируемых веществ, поскольку даже при таких температурах многие соединения обладают уже достаточно высокой упругостью паров и элюируются с колонки достаточно быстро. [c.475]

Разделение и идентификация стеринов, замещенных в кольцах Л и В, методами хромато графии в тонком слое н в газовой фазе, (Анализ 18 стеринов МФ ХЕ-60 на газхроме Z SE-52 на хромосорбе W.) [c.114]

Matareae L. - S е ТА, I97I,I,J(2,13-15 (итал. рез.англ.) РЖХим,1973,IIP60. Разделение и определение жирных кислот, этерифицированных стеринами, в липидах пшеницы методом тонкослойной и газо-жидкостной хроматографии. Сообщ. [c.184]

Перевод анализируемых компонентов в их производные может быть целесообразен по трем причинам. Во-первых, эти компоненты могут плохо разделяться газохроматографически в их исходной форме, тогда как их производные могут разделяться хорошо. Например, высокомолекулярные жирные кислоты являются соединениями с высокой полярностью и малой летучестью, а их метиловые эфиры, напротив, обладают малой полярностью и высокой летучестью. Поскольку газохроматографическое разделение связано с испарением разделяемых веществ в колонке, преимущество использования более летучих веществ очевидно. Метиловые эфиры жирных кислот можно получить сравнительно легко с помощью диазометана или раствора ВРз в метаноле. По этой причине жирные кислоты обычно (хотя и не всегда) хроматографируют в виде их метиловых эфиров. Другим методом, применяемым для уменьшения полярности и увеличения летучести разделяемых соединений, является силилирование. Этот метод может быть использован при работе с соединениями, содержащими активный водород — спиртами, кислотами, стеринами и аминами. Основной недостаток этого метода заключается в том, что растворитель и реактивы не должны содержать воды. Одна1 о при соответствующих мерах предосторожности силилирование обычно выполняется просто и быстро. Во-вторых, причиной перевода анализируемого вещества в его производное может быть необходимость получения соединения, к которому используемый детектор более чувствителен. Обычно с этим приходится встречаться при использовании детектора по захвату электронов. В этом случае часто применяют галогенсодержащие силилирующие реагенты [1]. Иногда синтезируют и другие [c.372]

Глицериды и соли жирных кислот составляют основную часть относительно нерастворимых органических веществ в сточных водах. Основными компонентами жирнокислотной фракции являются насыщенные и ненасыщенные жирные кислоты с длинной цепью — лауриновая, миристиновая, пальмитиновая, стеариновая, олеиновая и линолевая [88, 89]. Значительную часть нерастворимых органических загрязнений составляют липидоподобные вещества, в том числе стерины и углеводороды. Липиды и липидоподобные вещества нерастворимы в воде и труднее разлагаются при обработке сточных вод, чем углеводы и белки. Поэтому значительные количества липидов минуют водоочистные сооружения и вносят заметный вклад в состав органических загрязнений поверхностных вод. Имеются весьма скудные сведения о превращениях относительно малорастворимых органических веществ (таких как липиды и липидоподобные вещества или жиры ), которые попадают в поверхностные воды частично из городских и промышленных стоков. Для лучшего понимания процессов разложения липидов и путей их удаления в установках для обработки сточных вод и природной воды нужно иметь аналитические методы для разделения липидов на классы и идентификации отдельных соединений в загрязненной воде. Такой подход отличается от обычного взгляда на липиды как на один широкий класс, включающий жиры, воска, масла и любые другие нелетучие вещества, экстрагируемые гексаном из подкисленной пробы канализационных или промышленных сточных вод [74]. [c.410]

Мертал и Банч [33] использовали ТСХ в качестве препаративного метода при газо-жидкостном хроматографическом определении холестерина и 5 -кoпpo тaн-3 -oлa в бытовых сточных водах. К двухлитровой, пробе воды добавляли 5 мл концентрированной НС1 и 10 мл 20%-ного раствора хлористого натрия. Затем проводили экстрагирование гексаном в количестве 100 мл. Слой растворителя отмывали "50 мл 70%-ного этанола и упаривали досуха. Эфиры стеринов кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч с 7,5%-ным раствором КОН в 70%-ном этаноле и разбавляли равным объемом воды. Стерины экстрагировали двумя порциями гексана, который в свою очередь отмывали 5 мл 50%-ного этанола и после этого упаривали досуха в 5-миллилитровой пробирке. ТСХ-пластинки размерами 20X20 см, покрытые слоем (0,25 мм) силикагеля G, отмытого спиртом, активировали в течение 1 ч при 110°С. Стерины, полученные в результате гидролиза, растворяли в 20—50 мкл ацетона и наносили на пластинку вместе со стандартными растворами. Разделение проводили смесью хлороформа и эфира (9 1). Пластинки опрыскивали 10%-ным раствором фосфорномолибденовой кислоты в 95%-ном этаноле. После выдерживания пластинок при 100 °С в течение 5 мин стерины проявлялись в виде темных пятен на желтом фоне. Значения i / копростанола и холестерина равнялись 0,65 и 0,50 соответственно. Зоны неизвестных веществ, соответствующие расположению стандартов, извлекали и подготовляли для ГХ-анализа. Предел определения копростанола равен 20 нг/л, количественные измерения становились возможными при концентрациях выше 100 нг/л. [c.498]

Методы хроматографии стеринов рассмотрены в обзоре [16], а их депситометрический анализ — в обзоре [17]. Опубликованы также статьи обзорного характера, посвященные газовой хроматографии холестерина и его предшественников [18] и растительных стеринов [19]. Статьи, в которых рассматривается жидкостная хроматография липидов, содержат также информацию о разделении этим методом стеринов [20, 21]. [c.287]

Полезным методом модификации гидроксилсодержащих стероидов является их превращение в кетопроизводные под действием холестериноксидазы [31], в результате которого многие стерины приобретают свойства, необходимые для их разделения с помощью газовой хроматографии [32]. 4-Метил- и 4,4-диме-тилстерины можно анализировать на колонках с 0У-17 или ОР-1 как в свободной форме [33], так и в виде их ацетатов [34]. Значения Д7 ас, т. е. отношения времен удержания стерил-ацетатов и соответствующих незащищенных стеринов на колонке. содержащей 1,5% ОУ-17, уменьшаются в ряду 4-деметил- [c.290]

Для разделения смесей стеринов были использованы различные приемы ВЭЖХ. Высокой разрешающей способностью обладает адсорбционная хроматография на силикагеле, которую проводят в режиме изократического [46—48], градиентного [49] или рециклического элюирования [50]. С помощью этого метода были разделены изомерные 3-оксостерины [46], эпоксипроизводные [49], ацетаты стеринов [47, 48] и эпимеры 26-окси-холестерина [50]. На рис. 6.1 показан пример простейшего подхода к разделению стеринов, т. е. хроматографии в изократи-ческом режиме. Как следует из приведенной на рисунке хроматограммы, холестан-З-он с ис-сочленением колец А и В элюируется раньше транс-изомера, а наличие в молекуле двойной [c.292]

Предложен ускоренный метод определения количества диспергированного каучука в латексе гвайюлы микроскопическим исследованием одной капли [230]. Следовало бы данные этого метода сопоставить с данными, полученными по общепринятым методам. Дисперсность латекса гевеи изучалась микрофотографически и с помощью седиментационного анализа [97] последний, повидимому, больше подходит для разделения латекса на фракции. Предложена подробная схема анализа органических соединений, присутствующих в латексе гевеи [4—6], согласно которой удается выделить и определить следующие группы веществ белки, лецитины, аминокислоты, алкалоиды и стерины. [c.86]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология